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    江蘇省鹽城市亭湖區(qū)豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫效果分析

    2016-12-20 03:28:02許志成
    養(yǎng)豬 2016年5期
    關(guān)鍵詞:亭湖區(qū)免疫抗體O型

    許志成

    (江蘇省鹽城市亭湖區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,江蘇鹽城224002)

    江蘇省鹽城市亭湖區(qū)豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫效果分析

    許志成

    (江蘇省鹽城市亭湖區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,江蘇鹽城224002)

    口蹄疫Aftosa(屬一類傳染病)俗名“口瘡”、“辟癀”,是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。其臨診特征為口腔黏膜、蹄部和乳腺皮膚發(fā)生水皰。國(guó)家對(duì)豬口蹄疫的預(yù)防實(shí)行強(qiáng)制免疫政策。近年來(lái)江蘇省鹽城市亭湖區(qū)使用O型口蹄疫濃縮滅活疫苗進(jìn)行口蹄疫預(yù)防接種工作。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)亭湖區(qū)部分豬場(chǎng)母豬、商品豬的跟蹤免疫和監(jiān)測(cè)來(lái)觀察O型口蹄疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律,分析存在的問(wèn)題和原因,為制定適合亭湖區(qū)生豬養(yǎng)殖的口蹄疫疫苗免疫方案提供依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

    在亭湖區(qū)鹽東鎮(zhèn)、新興鎮(zhèn)、黃尖鎮(zhèn)選擇9戶養(yǎng)豬戶(其中一家為亭湖區(qū)東南種豬場(chǎng),8戶為小型養(yǎng)豬戶)開展試驗(yàn)工作,試驗(yàn)前對(duì)被選場(chǎng)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、臨床檢查,均為健康自繁自養(yǎng)豬群。

    1.2 試驗(yàn)疫苗

    為政府采購(gòu)苗,由某公司生產(chǎn)豬口蹄疫O型滅活疫苗(O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株),批號(hào)1510001。

    1.3 檢測(cè)試劑

    口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒為中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所產(chǎn)品,批號(hào)20150415101-1、2015090101-1。

    1.4 主要器材

    微量移液器、生化培養(yǎng)箱、微量振蕩器、酶標(biāo)分析儀,檢測(cè)環(huán)境20~25℃。

    1.5 方法

    1.5.1 試驗(yàn)時(shí)間2015年6月10日至12月25日。

    1.5.2 試驗(yàn)分組1)在被選的種豬場(chǎng)中,開展免疫效果比較試驗(yàn),隨機(jī)選取60頭經(jīng)產(chǎn)二元母豬,分成A、B兩個(gè)組,每組30頭,分別于孕豬產(chǎn)前第30天接種疫苗,其中:A組為說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量,B組為雙倍劑量。2)在其余被選場(chǎng)中,隨機(jī)選取10頭種豬,分成C、D兩個(gè)組,每組5頭,分別于孕豬產(chǎn)前第30天接種疫苗,其中:C組為說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量,D組為雙倍劑量。4組試驗(yàn)豬所產(chǎn)仔豬35日齡首免、60日齡二免。3)由于按照標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量免疫接種的A組試驗(yàn)豬所產(chǎn)商品豬二免后免疫效果不佳,在該組中選取10頭母豬所產(chǎn)健康商品豬再次分為E、F兩個(gè)組,其中:E組于90日齡進(jìn)行三免,免疫劑量同二免標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量;F組為E組的空白對(duì)照組,只進(jìn)行二免,不進(jìn)行三免。

    1.5.3 觀察反應(yīng)每次疫苗接種后1~3 d,檢測(cè)直腸溫度,觀察飼料攝入情況,記錄應(yīng)激性倒地及嘔吐等疫苗接種后的副反應(yīng)。

    1.5.4 采血日齡對(duì)接種疫苗的所有試驗(yàn)孕豬分別在接種疫苗前和產(chǎn)仔后1 d內(nèi)采血,所產(chǎn)仔豬分別在吮初乳前(0日齡)和產(chǎn)后第1、8、16、24、32日齡采血,商品豬一免后1、7、15、23 d,二免后10、20、30 d,三免后10、20、30 d,分離血清,每窩仔豬隨機(jī)采集半數(shù)仔豬的血清樣本,應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)血清中口蹄疫抗體的滴度。

    1.5.5 免疫抗體效價(jià)測(cè)定用液相阻斷ELISA方法檢測(cè)口蹄疫O型滅活疫苗免疫抗體效價(jià),試驗(yàn)采用的口蹄疫O型檢測(cè)試劑盒購(gòu)自于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,試驗(yàn)步驟按照說(shuō)明書要求進(jìn)行??贵w檢測(cè)在江蘇省鹽城市亭湖區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

    1.5.6 免疫效果判定口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為合格,存欄家畜免疫抗體合格率≥80%判定為合格。

    1.5.7 數(shù)據(jù)分析采用Excel軟件統(tǒng)計(jì)分析,用lg法將OD值轉(zhuǎn)換為以10為底的負(fù)對(duì)數(shù)表示不同組的仔豬口蹄疫抗體水平。

    1.5.8 試驗(yàn)要求1)試驗(yàn)?zāi)肛i接種疫苗前后7 d內(nèi)未使用抗病毒藥物。2)產(chǎn)下的仔豬斷奶前沒有接種豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗(本試驗(yàn)均為30~35日齡斷奶)。

    2 結(jié)果

    2.1 試驗(yàn)?zāi)肛i口蹄疫抗體檢測(cè)情況

    試驗(yàn)組70頭母豬在接種疫苗后,注射4 mL/頭口蹄疫滅活苗的B組,其產(chǎn)生的抗體水平高于注射2 mL/頭的A組,其余各組口蹄疫O型抗體水平生物統(tǒng)計(jì)分析,差異均不顯著。

    2.2 仔豬吃初乳前后口蹄疫母源抗體檢測(cè)結(jié)果

    母豬體內(nèi)口蹄疫O型抗體水平合格的前提下,其仔豬在吃初乳前的平均抗體水平經(jīng)檢測(cè)為0。吃初乳后的24日齡左右仔豬口蹄疫O型母源抗體水平上升到26以上,達(dá)到頂峰,仔豬O型母源抗體水平基本與母豬體內(nèi)抗體水平相當(dāng),隨后開始下降(表1)。

    表1 部分母豬接種疫苗產(chǎn)生的抗體及其仔豬抗體水平的動(dòng)態(tài)變化

    2.3 35日齡閹割仔豬時(shí)注射疫苗和60日齡時(shí)加強(qiáng)免疫注射疫苗后免疫抗體產(chǎn)生情況

    結(jié)果表明各組的抗體水平動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)基本一致,即在首免后2~4周,抗體水平并未呈現(xiàn)迅速上升趨勢(shì),推測(cè)與母源抗體水平影響有關(guān)。從組間不同時(shí)間抗體水平比較看,B組免疫效果最好,其抗體水平上升速度顯著高于其他各組,一免抗體水平上升較緩,23 d時(shí)抗體陽(yáng)性率為44%;二免后抗體合格率進(jìn)一步上升,并在30 d時(shí)達(dá)到88%。A組在首免后23 d僅31.8%抗體合格,二免后30 d只有59%免疫抗體合格。C組免疫效果最差。見表2、表3。

    表2 35日齡首免后仔豬口蹄疫抗體水平的動(dòng)態(tài)變化

    表3 60日齡二免后仔豬口蹄疫抗體水平的動(dòng)態(tài)變化

    2.4 種豬場(chǎng)和小型養(yǎng)豬戶口蹄疫抗體檢測(cè)情況

    免疫保護(hù)率差異較大。通過(guò)抗體檢測(cè)情況表明,被檢血樣中,規(guī)模戶和散戶免疫抗體有效保護(hù)率分別為74.47%和47.06%,口蹄疫有效免疫抗體平均合格率規(guī)模戶比散戶高出27.41個(gè)百分點(diǎn)。

    2.5 90日齡時(shí)商品豬三免注射疫苗后免疫抗體產(chǎn)生情況

    結(jié)果表明,對(duì)照組F組在60~90日齡期間抗體水平基本不變,E組在三免后抗體合格率進(jìn)一步上升,并在接種后30 d時(shí)達(dá)到89.5%,高于F組34個(gè)百分點(diǎn)。見表4。

    表4 90日齡三免后商品豬口蹄疫抗體水平的動(dòng)態(tài)變化

    3 討論

    3.1 種豬場(chǎng)免疫抗體水平高于小型養(yǎng)豬戶

    種豬規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)通??梢宰龅椒忾]式飼養(yǎng),飼養(yǎng)管理?xiàng)l件較好,能夠根據(jù)自身的具體情況制定較為合理的疫苗免疫程序,各類疫苗分期免疫有利于充分激活動(dòng)物機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)。并且疫苗從冷凍狀態(tài)取出到使用不需要再次經(jīng)過(guò)運(yùn)輸環(huán)節(jié),開啟后基本可以一次用完,從而產(chǎn)生較高的抗體水平。

    經(jīng)觀察和分析,飼養(yǎng)管理?xiàng)l件差是散養(yǎng)戶抗體偏低的主要原因。在試驗(yàn)場(chǎng)中有3戶的免疫工作由村級(jí)專職防疫員負(fù)責(zé),由于工作量較大,在免疫過(guò)程中通常采取口蹄疫及豬瘟疫苗同時(shí)注射的方法,其雖然配備有疫苗保溫箱,但開啟后的疫苗經(jīng)過(guò)再次的運(yùn)輸與反復(fù)的取用,在一定程度上影響了免疫效果。

    3.2 不同免疫劑量對(duì)免疫抗體影響顯著

    從抗體檢測(cè)結(jié)果可知,不同劑量免疫組產(chǎn)生的抗體水平差異較大,加倍劑量的B組二免后抗體水平明顯提高,但是因其劑量加大1倍,成本也增加1倍,其免疫副反應(yīng)也明顯加大。目前,在實(shí)際的防疫工作中,O型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果普遍低下,通過(guò)本試驗(yàn)的比對(duì)可以反向推測(cè):1)疫苗產(chǎn)品濃度偏低,按照標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量免疫,免疫效果不佳;2)養(yǎng)殖戶不重視疫苗的2次免疫,由于目前使用的滅活疫苗對(duì)豬刺激性相對(duì)較大,二免劑量達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn),從而導(dǎo)致免疫效果不佳。

    3.3 3次免疫對(duì)免疫合格率提升明顯

    從追加的商品豬三免對(duì)比試驗(yàn)組E組和F組的抗體檢測(cè)結(jié)果可知,進(jìn)行三免的E組商品豬免疫合格率顯著高于對(duì)照組F組??谔阋呷庠谠瓉?lái)的2次免疫基礎(chǔ)上增加了1次免疫注射工作,對(duì)生豬總體免疫程序的時(shí)間安排造成壓力,成本有所增加(介于A組和B組之間),但是由于沒有增加免疫劑量,免疫副反應(yīng)沒有增加,總體效果優(yōu)于雙倍劑量的B組。

    (編輯:郭玉翠)

    S858.285.3

    A

    1002-1957(2016)05-0113-03

    2016-07-26

    許志成(1982-),男,江蘇鹽城人,獸醫(yī)師,主要從事規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物疫病的防控與獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷工作. E-mail:xzc821121@sohu.com

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