規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體監(jiān)測(cè)與免疫程序的確定

邱美珍，杜麗飛，王慧，周望平，楊俊，王紅兵

（湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長(zhǎng)沙410131）

規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體監(jiān)測(cè)與免疫程序的確定

邱美珍，杜麗飛，王慧，周望平，楊俊，王紅兵

（湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長(zhǎng)沙410131）

為了解某規(guī)?；i場(chǎng)母源抗體及疫苗免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)其群體免疫狀況，探討疫苗合理的免疫程序，以期為其他規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病的防控實(shí)踐提供依據(jù)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)了該規(guī)模豬場(chǎng)10個(gè)階段184份血清4種疫病5種抗體水平。結(jié)果顯示，該豬場(chǎng)為藍(lán)耳病抗體、偽狂犬病-gE抗體陰性場(chǎng)。豬瘟、偽狂犬病-gB抗體、O型口蹄疫抗體總體陽(yáng)性率分別為57%、87%、71%；每個(gè)階段的抗體合格率和保護(hù)率不同，根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果調(diào)整了豬瘟、偽狂犬病、口蹄疫的免疫程序。

規(guī)模豬場(chǎng)；疫??；抗體監(jiān)測(cè)；免疫程序

近幾年來(lái)，隨著生豬養(yǎng)殖規(guī)?；?、集約化、商品化程度的提高，豬病日益復(fù)雜，臨床上典型病例很難找到，繼發(fā)感染、混合感染現(xiàn)象普遍發(fā)生，加之母豬隱性感染帶毒垂直傳播給仔豬、部分免疫抑制病對(duì)免疫的干擾、先天性免疫耐受、母源抗體干擾等問(wèn)題，造成豬病免疫種類多，次數(shù)多，但豬病照樣發(fā)生[1-2]。為此筆者從監(jiān)測(cè)規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體水平入手，監(jiān)測(cè)豬群不同階段抗體水平，當(dāng)抗體平均效價(jià)降至群體陽(yáng)性率為50%時(shí)，再進(jìn)行首免和二免，確定合適的免疫時(shí)機(jī)和制定最佳的免疫程序?，F(xiàn)將監(jiān)測(cè)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血清與組織樣品

于2014年10月采集某規(guī)模豬場(chǎng)血液樣品，共計(jì)采集10個(gè)階段樣品184份，該豬場(chǎng)基礎(chǔ)母豬500頭，記錄豬場(chǎng)主要疫病的免疫程序，以便于分析結(jié)果。

1.2 采樣方法

樣品采用隨機(jī)采樣方法，分別采集母豬和各周齡仔豬，分離血清，于湖南省畜牧獸醫(yī)研究所獸醫(yī)獸藥實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)試劑盒

豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病-gE抗體測(cè)定采用IDEXX生產(chǎn)的ELISA試劑盒，批號(hào)分別為：99-43220 C945，99-40959 D121，99-09836 DK067。O型口蹄疫抗體為韓國(guó)金諾ELISA試劑盒，批號(hào)為107HS536。偽狂犬病-gB抗體為荷蘭百測(cè)ELISA試劑盒，批號(hào)為FS5763。

1.4 ELISA操作方法

ELISA操作方法以及結(jié)果判定參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室溫度控制在20～25℃。

1.5 免疫程序

豬瘟：普萊柯高端苗，公、母豬每年免疫3次，每次3頭份，仔豬28～30日齡，60～65日齡免疫，初免1頭份，二免2頭份，后備豬126日齡（55～60 kg）再免疫1次，2頭份；偽狂犬?。好防飦嗀i偽狂犬?。╣E）基因缺失苗，公、母豬每年免疫3次，每次2頭份，仔豬70日齡免疫1次，每次1頭份，后備豬133日齡（60～65 kg）再免疫1次，每次2頭份；口蹄疫：中農(nóng)威特高端苗，公、母豬每年免疫4次，每次4 mL/頭，仔豬35日齡，65日齡，110日齡免疫，每次2 mL/頭，后備豬180日齡（95～100 kg）再免疫1次，3 mL/頭。

2 結(jié)果與分析

2.1 規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

由表1可知，豬場(chǎng)豬瘟病毒（CSFV）、藍(lán)耳病病毒（PRRSV）、偽狂犬病病毒（PRV）-gE、PRV-gB和O型口蹄疫病毒（FMDV）的抗體總陽(yáng)性率分別為57%、0、0、87%、71%；CSFV、PRV-gB和FMDV的抗體總保護(hù)率分別為44%、47%、29%。從總的情況來(lái)看，該豬場(chǎng)藍(lán)耳病和偽狂犬病野毒沒(méi)有抗體，說(shuō)明該豬場(chǎng)是藍(lán)耳病、偽狂犬病陰性場(chǎng)。PRV-gB和O型FMDV的總抗體水平較好，而豬瘟的抗體水平不是太理想。

表1 規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體監(jiān)測(cè)匯總

2.2 豬藍(lán)耳病抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

由表2可知，該豬場(chǎng)為藍(lán)耳病抗體陰性場(chǎng)，每個(gè)階段的藍(lán)耳病抗體均為陰性，該豬場(chǎng)也沒(méi)有使用藍(lán)耳病疫苗。免疫程序設(shè)計(jì)免打藍(lán)耳病疫苗。從目前國(guó)內(nèi)藍(lán)耳病的控制情況來(lái)看，能做到藍(lán)耳病陰性場(chǎng)是難能可貴的，該場(chǎng)的經(jīng)驗(yàn)是主要從環(huán)境和生物安全角度控制藍(lán)耳病的發(fā)生，尤其是轉(zhuǎn)群、并群環(huán)節(jié)，人員出入，進(jìn)豬、轉(zhuǎn)豬和出豬都按照嚴(yán)格的隔離措施進(jìn)行。

表2 藍(lán)耳病抗體水平分析（檢測(cè)試劑盒：美國(guó)IDEXX）

2.3 豬偽狂犬病野毒（gE）抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

由表3可知，該豬場(chǎng)為偽狂犬病gE抗體陰性場(chǎng)，每個(gè)階段的抗體均為陰性，該豬場(chǎng)使用偽狂犬病gE基因缺失疫苗，而且是70日齡免疫1次，每次1頭份，定期監(jiān)測(cè)各個(gè)階段豬的野毒抗體，做好偽狂犬病的控制和凈化工作。除了疫苗以外，還從環(huán)境消毒、積極滅鼠和狗、貓等生物安全角度控制該病的發(fā)生，定期監(jiān)測(cè)gE抗體，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性立即淘汰。

表3 偽狂犬病野毒（gE）抗體水平分析（檢測(cè)試劑盒：美國(guó)IDEXX）

2.4 豬瘟抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

表4的結(jié)果顯示母豬豬瘟抗體水平比較高，整齊度比較理想，說(shuō)明該豬群的種豬給后代提供足夠抗體抵御病毒的攻擊，但從表1的結(jié)果可看出，豬瘟總抗體水平不高，僅為57%，這可能與仔豬的數(shù)量多有關(guān)。從監(jiān)測(cè)結(jié)果可看出仔豬母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，21日齡仔豬的母源抗體陽(yáng)性率為47%，此時(shí)是做疫苗免疫的最佳時(shí)機(jī)。本場(chǎng)的免疫程序是在28日齡左右做豬瘟的第1次免疫，但免疫后抗體水平還在持續(xù)下降，一直到60日齡抗體水平才有所上升，這可能與母源抗體的中和作用有關(guān)，那么21～60日齡是本豬場(chǎng)豬瘟抗體的空白期，這段時(shí)間是病原攻擊的最佳點(diǎn)。該時(shí)間段注意最好不要轉(zhuǎn)群、混群和隨意調(diào)動(dòng)豬群。母豬最好做跟胎免疫，這樣仔豬的母源抗體水平會(huì)比較一致。

表4 豬瘟抗體水平分析（檢測(cè)試劑盒：美國(guó)IDEXX）

2.5 豬偽狂犬病-gB抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

表5的結(jié)果顯示母豬PRV-gB抗體水平比較高，整齊度比較理想，說(shuō)明該豬群的種豬給后代提供足夠抗體抵御病毒的攻擊。從監(jiān)測(cè)結(jié)果可看出，49日齡前仔豬的母源抗體陽(yáng)性率都比較高，但保護(hù)率不夠，到60日齡陽(yáng)性率有所增加。本場(chǎng)的免疫程序是70日齡初免，可能考慮到母源抗體的干擾，到90日齡抗體水平較好。那么49～90日齡是本豬場(chǎng)偽狂犬病抗體的空白期，這段時(shí)間是病原攻擊的最佳點(diǎn)。這段時(shí)間注意最好不要轉(zhuǎn)群、混群和隨意調(diào)動(dòng)豬群。有學(xué)者認(rèn)為豬偽狂犬病抗病毒的機(jī)制除了抗體中和病毒以外，還包括細(xì)胞免疫，盡管抗體水平低，只要生物安全措施好也可能抵抗野毒的攻擊[1]。

表5 偽狂犬病免疫（GB）抗體水平分析（檢測(cè)試劑盒：荷蘭百測(cè)）

2.6 豬0型口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

表6的結(jié)果顯示，母豬O型口蹄疫免疫抗體水平較高，整齊度較理想，說(shuō)明該豬群的種豬給后代提供足夠抗體抵御病毒的攻擊。從監(jiān)測(cè)結(jié)果可看出，42日齡前仔豬的母源抗體陽(yáng)性率都在50%以上，一般免疫程序選擇在陽(yáng)性率為50%時(shí)初免，本場(chǎng)的免疫程序是35日齡、65日齡免疫，因?yàn)榭谔阋咭呙缡菧缁蠲?，二免后的抗體水平到90日齡也不是很理想，保護(hù)率僅為11%，所以最好在110日齡再次免疫。42～90日齡都是該病的抗體空白期，注意不要轉(zhuǎn)群、混群和隨意調(diào)動(dòng)豬群。

表6 O型口蹄疫免疫抗體水平分析（檢測(cè)試劑盒：韓國(guó)金諾）

3 討論

病毒生存的方式?jīng)Q定了病毒藥物治療的局限性[1]，到目前為止，病毒性疾病的藥物治療研究相當(dāng)有限，該類疾病的防控主要依靠疫苗和生物安全措施。疫苗接種時(shí)間、種類和程序需要以抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果作為基礎(chǔ)。

（1）通過(guò)檢測(cè)仔豬的母源抗體水平，可以根據(jù)抗體消長(zhǎng)規(guī)律確定仔豬首免日齡。從表3—表6可以知道，豬瘟、口蹄疫的母源抗體下降到50%分別在21日齡、42日齡左右，偽狂犬病母源抗體下降到最低點(diǎn)為49日齡，本場(chǎng)的免疫程序豬瘟、口蹄疫、偽狂犬病首免時(shí)間分別為28、35、70日齡。根據(jù)監(jiān)測(cè)的結(jié)果，豬瘟免疫時(shí)間以21日齡為佳，28日齡免疫會(huì)導(dǎo)致免疫空白期延長(zhǎng)，從而有感染病毒的危險(xiǎn)，使這部分仔豬在二免之前抗體處于較低水平；或者從提高母源抗體考慮，可以增加免疫劑量，母豬到4頭份，小豬2頭份?？谔阋叩拿庖邥r(shí)間以42日齡為好，免疫程序中首免是35日齡，這時(shí)免疫疫苗時(shí)難免受到母源抗體的干擾；同樣偽狂犬病的母源抗體水平在49日齡時(shí)較低，這可能與疫苗和免疫劑量有關(guān)，但首免選擇是70日齡，致使免疫空白期延長(zhǎng)，盡管有些學(xué)者認(rèn)為偽狂犬病的防疫機(jī)制還有黏膜免疫（出生3日滴鼻）和細(xì)胞免疫，但抗體的作用還是占據(jù)很重要的地位，這一點(diǎn)提示該豬場(chǎng)免疫程序可能還要做適當(dāng)調(diào)整[3]。豬瘟最好在21日齡或者斷奶時(shí)首免，口蹄疫最好是在42日齡免疫比較好，偽狂犬病還是選擇70日齡首免。條件許可最好是跟胎免疫，這樣可以獲得更好更整齊的母源抗體。

（2）適時(shí)免疫接種，一方面要避開母源抗體的干擾，一方面又要維持抗體效價(jià)的群體保護(hù)率，只有依據(jù)免疫抗體監(jiān)測(cè)，才能指導(dǎo)豬場(chǎng)科學(xué)免疫?？贵w檢測(cè)是預(yù)防和控制病毒性傳染病發(fā)生的重要手段，對(duì)于豬場(chǎng)尤其是規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)應(yīng)增強(qiáng)預(yù)防意識(shí)，建立免疫監(jiān)測(cè)，制定合理的免疫程序。不要盲目套用某場(chǎng)免疫程序，應(yīng)根據(jù)本場(chǎng)疫病情況和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)制定免疫程序。

（3）結(jié)合該豬場(chǎng)的監(jiān)測(cè)結(jié)果，建議規(guī)模養(yǎng)殖戶重視抗體監(jiān)測(cè)，抗體監(jiān)測(cè)的目的不僅僅是診斷，更主要的是評(píng)價(jià)豬群整體的免疫狀況，并且根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果對(duì)免疫方案進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整或提供一些預(yù)警機(jī)制。豬場(chǎng)根據(jù)自身實(shí)際，嚴(yán)格做到全進(jìn)全出，對(duì)于生產(chǎn)母豬，生產(chǎn)流程相當(dāng)規(guī)范的豬場(chǎng)，可以跟胎次免疫，但每年需合理地進(jìn)行2～3次免疫抗體監(jiān)測(cè)，對(duì)于仔豬建議在首免之前檢測(cè)仔豬的母源抗體水平，以確定最佳首免日齡。免疫過(guò)早，母源抗體影響太大，容易造成免疫失敗或群體抗體不均衡。免疫過(guò)遲，免疫空白期加長(zhǎng)，染病風(fēng)險(xiǎn)增加[3-5]。同時(shí)最好在正常二免前也檢測(cè)抗體水平，以確定合理的免疫程序。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].第5版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：209-223.

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[5]劉增再，王輝，周瑩，等.規(guī)模化豬場(chǎng)主要疫病抗體水平監(jiān)測(cè)與免疫效果分析[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2010（4）：67-69.

（編輯：郭玉翠）

S858.28

A

1002-1957(2016)02-0121-03

2015-11-17

湖南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目[湘農(nóng)業(yè)聯(lián)（2010）125號(hào)]

邱美珍（1974-），女，湖南婁底人，副研究員，碩士，主要從事獸醫(yī)診斷和病原微生物研究.E-mail：156278198@qq.com