IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鑒別良惡性胸腔積液的應(yīng)用價(jià)值研究*

賴 馨，李小峰，陳麗芳，胡 琴，萬(wàn)彥彬，林建華

(1.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 518172；2.中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣州 510000)

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·論 著·

IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鑒別良惡性胸腔積液的應(yīng)用價(jià)值研究*

賴 馨1，李小峰1，陳麗芳1，胡 琴1，萬(wàn)彥彬1，林建華2

(1.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 518172；2.中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣州 510000)

目的 探討白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-27、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、組織因子(TF)及組織因子途徑抑制物(TFPI)鑒別良惡性胸腔積液的應(yīng)用價(jià)值。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)67例良性胸腔積液及73例惡性胸腔積液的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5種分子標(biāo)志物的水平。結(jié)果 惡性胸腔積液組的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平均顯著高于良性胸腔積液組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。多因素Logistic回歸分析顯示，只有VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨(dú)立影響因素。結(jié)論 胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的檢測(cè)有助于臨床診治良惡性胸腔積液患者，其中VEGF可做為胸腔積液良惡性鑒別的獨(dú)立影響因素。

良惡性胸腔積液； 白細(xì)胞介素-22； 白細(xì)胞介素-27； 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子； 組織因子

胸腔積液按病因不同可分為良性與惡性胸腔積液。通常惡性積液患者占所有胸腔積液患者的25%～30%，是惡性腫瘤的典型特征。肺癌、乳腺癌和惡性淋巴癌是導(dǎo)致惡性胸腔積液的前3位病因[1]，惡性胸腔積液患者的平均生存期不到6個(gè)月。因此，準(zhǔn)確鑒別2種不同性質(zhì)積液，特別是及早診斷出惡性胸腔積液，對(duì)于確定治療原則和判斷患者的預(yù)后具有重要臨床價(jià)值。本研究旨在檢測(cè)良惡性胸腔積液中白細(xì)胞介素(IL)-22、IL-27、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、組織因子(TF)及組織因子途徑抑制物(TFPI)水平，分析其在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2015年住院并經(jīng)影像學(xué)及病理學(xué)確診為惡性胸腔積液患者73例；其中男41例，女32例；平均年齡(56.1±11.6)歲。選取同期廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院住院良性胸腔積液患者67例；男49例，女18例；平均年齡(55.6±13.1)歲。2組患者的性別、年齡、病史等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑 所用酶標(biāo)儀為安圖PHOMO全自動(dòng)酶標(biāo)儀(精度變異系數(shù)≤2%)。IL-22、IL-27、VEGF、TF和TFPI檢測(cè)試劑盒均由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供(在有效期內(nèi)使用，試劑相關(guān)性0.999 2、批間差8.8%、批內(nèi)差6.9%),采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法，操作按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 方法 常規(guī)胸穿留取胸腔積液10 mL，以3 000 r/min離心10 min，取上清液-80 ℃保存待測(cè)。按標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序(SOP)標(biāo)準(zhǔn)操作程序，采用ELISA法，于PHOMO全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI。

2 結(jié) 果

2.1 5種分子標(biāo)志物的檢測(cè)結(jié)果 2組患者胸腔積液中IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平的檢測(cè)結(jié)果,見表1。在惡性胸腔積液中，IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均顯著高于良性胸腔積液組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 良惡性胸腔積液5種分子標(biāo)志物測(cè)定值的比較

2.2 5種分子標(biāo)志物多因素Logistic回歸分析 采用Logistic多因素回歸分析，結(jié)果顯示VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨(dú)立影響因素。見表2。

表2 5種分子標(biāo)志物多因素Logistic回歸分析

3 討 論

良惡性胸腔積液的有效鑒別診斷一直是臨床和實(shí)驗(yàn)室探討的問(wèn)題。目前，國(guó)內(nèi)外常用檢測(cè)手段為常規(guī)細(xì)胞病理學(xué)檢查，其優(yōu)點(diǎn)是能維持細(xì)胞的原有形態(tài)和生理狀態(tài)，操作簡(jiǎn)便，可快速得到結(jié)果；而缺點(diǎn)是準(zhǔn)確性和敏感性不高[2]，對(duì)惡性胸腔積液的診斷敏感性只有50%～78%。因此，國(guó)內(nèi)外學(xué)者提出鑒別診斷良惡性胸腔積液的分子標(biāo)志物IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI等，臨床應(yīng)用取得了一定效果。

IL-22屬于IL-10家族[3-4]。IL-10 R1b和IL-22R1a的異源復(fù)合體可激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)信號(hào)通路。STAT3信號(hào)參與腫瘤發(fā)生與細(xì)胞凋亡。有報(bào)道稱IL-22能調(diào)節(jié)炎性疾病的發(fā)病過(guò)程，參與協(xié)助宿主抵抗微生物感染，如在結(jié)核患者體內(nèi)，自然殺傷細(xì)胞分泌IL-22，使吞噬溶酶體的融合作用加強(qiáng)，減少胞內(nèi)結(jié)核桿菌的增殖，從而提高對(duì)結(jié)核桿菌的免疫應(yīng)答[5-6]。

IL-27是一種異源二聚體細(xì)胞因子，屬于IL-12家族，每1個(gè)都由1條α鏈和β鏈組成，通過(guò)T細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞上高表達(dá)的受體傳遞信號(hào)。IL-27由激活的抗原呈遞細(xì)胞所分泌，具有促炎性和抗炎性作用。

VEGF是血管內(nèi)的特異性肝素結(jié)合因子，能促進(jìn)新生血管的生成，是腫瘤發(fā)生的必要條件。VEGF是高度保守的同源二聚體糖蛋白，由于mRNA剪切方式的不同，VEGF至少有5種蛋白形式，其中有3種是分泌性的可溶性蛋白，能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增值，增加血管的通透性。研究表明，腫瘤浸潤(rùn)或轉(zhuǎn)移至胸腹膜后，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF水平的升高、腫瘤新生血管的生成以及血管通透性的增加是漿膜腔內(nèi)積液的重要形成機(jī)制[7-8]。

TF是一種47×103的跨膜單鏈糖蛋白，是凝血因子Ⅶ(FⅦ)和活化凝血因子Ⅶ(FⅦa)的受體，與FⅦ或FⅦa結(jié)合形成TF-Ⅶa復(fù)合體，啟動(dòng)血液凝固級(jí)聯(lián)反應(yīng)。最近研究發(fā)現(xiàn)，TF在腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移、血管生成上具有重要作用[9-10]。

TFPI是一類蛋白酶抑制劑，其靶蛋白為FⅦa和凝血因子Ⅹa(FⅩa)。TFPI通過(guò)分別與FⅦa和FⅩa結(jié)合而實(shí)現(xiàn)。TFPI直接抑制FⅩa，而對(duì)FⅦa的抑制則需要FⅩa同時(shí)存在。TFPI通過(guò)對(duì)TF誘導(dǎo)凝血的抑制作用，在腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移、血管生成上同樣具有重要作用[11]。

為了提高良惡性胸腔積液鑒別診斷的準(zhǔn)確度，筆者檢測(cè)分析了2種積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5種分子標(biāo)志物的水平。相對(duì)于良性胸腔積液，惡性胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均顯著升高，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步分析以上分子標(biāo)志物在胸腔積液良惡性鑒別診斷中的獨(dú)立影響因素，僅VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨(dú)立影響因素。雖然可能與研究標(biāo)本量及標(biāo)本間的交互效應(yīng)有關(guān)，但也提示胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的檢測(cè)有助于臨床診治良惡性胸腔積液患者，且VEGF可作為胸腔積液良惡性鑒別的獨(dú)立影響因素。

[1]鞠燁,劉愛連,汪禾青,等.能譜曲線鑒別診斷良惡性漿膜腔積液[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù),2012,28(12):2239-2242.

[2]Kuralay F,Tokgoz Z,Comlekci A.Diagnostic usefulness of tumour marker levels in pleural effusions of malignant and benign origin[J].Clin Chim Acta,2000,300(1/2):43-55.

[3]孫奇.IL-22——炎癥性疾病關(guān)鍵因子[J].免疫學(xué)雜志,2011,27(9):821-825.

[4]Pociask DA,Scheller EV,Mandalapu S,et al.IL-22 is essential for lung epithelial repair following influenza infection[J].Am J Pathol,2013,182(4):1286-1296.

[5]Dhiman R,Indramohan M,Barnes PF,et al.IL-22 produced by human NK cells inhibits growth of Mycobacterium tuberculosis by enhancing phagolysosomal fusion[J].J Immunol,2009,183(10):6639-6645.

[6]Yao S,Huang D,Chen CY,et al.Differentiation,distribution and gammadelta T cell-driven regulation of IL-22-producing T cells in tuberculosis[J].PLoS Pathog,2010,6(2):e1000789.

[7]Hirayama N,Tabata C,Tabata R,et al.Pleural effusion VEGF levels as a prognostic factor of malignant pleural mesothelioma[J].Respir Med,2011,105(1):137-142.

[8]Fiorelli A,Vicidomini G,Domenico M,et al.Vascular endothelial growth factor in pleural fluid for differential diagnosis of benign and malignant origin and its clinical applications[J].Interact Cardiovasc Thorac Surg,2011,12(3):420-424.

[9]吳曉燕,任江華,曹茂銀.維生素E對(duì)組織因子及其抑制物在冠心病中的干預(yù)作用[J].臨床心血管病雜志,2004,20(10):616-618.

[10]易正山,孫竟,孟凡義,等.血友病甲患者血漿中修飾型組織因子途徑抑制物的研究[J].血栓與止血學(xué),2002,8(4):160-161.

[11]徐兆軍,別華容,田敏,等.組織因子及組織因子途徑抑制物在急性腦血管意外并發(fā)神經(jīng)源性肺水腫中的變化研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,8(32):39-40.

Study on application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in identification of benign and malignant pleural effusion*

LAIXin1,LIXiaofeng1,CHENLifang1,HUQin1,WANYanbin1,LINJianhua2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofLonggangDistrict,Shenzhen,Guangdong518172,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedTumorHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou,Guangdong510000,China)

Objective To explore the application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the identification of benign and malignant pleural effusion.Methods The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was adopted to detected the five molecular markers levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI levels in 67 cases of benign pleural effusion and 73 cases of malignant pleural effusion.Results The levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the malignant pleural effusion group was significantly higher than those in the benign pleural effusion group,and the differences were statistically significant(P<0.05).The multi-factor Logistic aggression analysis results showed that only VEGF was an independent influencing factor for identifying benign and malignant pleural effusion.Conclusion The detection of pleural effusion IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI is helpful for clinical diagnosis and treatment of the patients with benign and malignant pleural effusion,in which VEGF can be regarded as an independent factor influencing the identification of benign and malignant pleural effusion.

benign and malignant pleural effusion; IL-22; IL-27; VEGF; TF

廣東省深圳市龍崗區(qū)科技發(fā)展資金醫(yī)療衛(wèi)生(扶持類)項(xiàng)目(YLWS20150513173417559)。

賴馨，女，主管技師，主要從事臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.007

A

1673-4130(2016)22-3111-02

2016-04-09

2016-06-15)