右美托咪定對大鼠I/R損傷肺組織TLR4表達(dá)及保護(hù)作用的影響*

何金波， 宋 冬， 羅梓垠， 張聰聰， 應(yīng) 磊， 汪 洋， 王萬鐵△

(1. 溫州醫(yī)科大學(xué)缺血/再灌注損傷研究所， 浙江 溫州 325035； 2. 十堰市太和醫(yī)院麻醉科, 湖北 十堰 442000)

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右美托咪定對大鼠I/R損傷肺組織TLR4表達(dá)及保護(hù)作用的影響*

何金波1,2， 宋 冬1， 羅梓垠1， 張聰聰1， 應(yīng) 磊1， 汪 洋1， 王萬鐵1△

(1. 溫州醫(yī)科大學(xué)缺血/再灌注損傷研究所， 浙江 溫州 325035； 2. 十堰市太和醫(yī)院麻醉科, 湖北 十堰 442000)

目的：探討右美托嘧啶對大鼠再灌注損傷肺組織Toll樣受體素4(TLR4)表達(dá)的調(diào)控，并分析其對肺保護(hù)作用機(jī)制。方法：采用大鼠在體左側(cè)肺缺血/再灌注(I/R)模型，50只健康雄性成年SD大鼠隨機(jī)分為5組(n=10)：對照組(Sham組)、缺血/再灌注組(I/R組)、右美托咪定組(Dex組)、阿替美唑組(Atip組)、右美托咪定+阿替美唑組(Dex+Atip組)，實(shí)驗結(jié)束后處死大鼠，留取左肺，檢測肺濕干重比(W/D)和總肺水含量(TLW)；光鏡下觀察肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；PCR檢測肺組織TLR4 mRNA表達(dá)；Western blot檢測肺組織TLR4的蛋白表達(dá)。結(jié)果：與Sham組相比，其余各組W/D和TLW明顯升高(P<0．05，P<0．01)，TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量上升(P<0．01)，光鏡顯示肺組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯損傷性變化；與I/R組相比，Dex組W/D和TLW下降(P<0．05，P<0．01)，TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量降低(P<0．01)，光鏡下肺組織損傷減輕；與Dex組比較，Dex+Atip組W/D和TLW明顯升高(P<0．05，P<0．01)，TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量上升(P<0．01)，光鏡肺組織結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重；I/R組、Atip組、Dex+Atip組兩兩比較，以上各指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0．05)。結(jié)論：I/R可引起大鼠肺組織TLR4表達(dá)上調(diào)和肺組織損傷；右美托咪啶可減輕肺I/R損傷，抑制TLR4表達(dá)，這種作用與α2-腎上腺素能受體有關(guān)。

右美托咪啶；缺血/再灌注損傷；炎癥反應(yīng)；Toll樣受體素4；大鼠

【DOI】 10.13459/j.cnki.cjap.2016.04.018

研究和臨床中發(fā)現(xiàn)，缺血組織或器官在恢復(fù)血流灌注后，反而產(chǎn)生了損傷加重的現(xiàn)象，即缺血/再灌注損傷 (ischemia/reperfusion injury，I/RI)。隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的迅猛發(fā)展，肺動脈袖狀切除、肺移植、心肺聯(lián)合移植、肺溶栓治療等新的醫(yī)療方法不斷地建立和應(yīng)用，在術(shù)中恢復(fù)血流灌注過程中所出現(xiàn)的肺缺血/再灌注損傷(lung ischemia/reperfusion injury, LI/RI)已經(jīng)成為了導(dǎo)致患者術(shù)后呼吸功能障礙及急性肺損傷發(fā)生，影響患者預(yù)后的主要原因。研究表明，LI/RI的發(fā)生是由多種因素共同作用的結(jié)果，再灌注期間，自由基的大量生成、炎癥反應(yīng)、凋亡都是導(dǎo)致LI/RI的重要原因[1-3]。

TLRs是l類模式識別受體(pattern recognition receptors，PRRs)，是介導(dǎo)內(nèi)毒素/脂多糖應(yīng)答的主要受體，能識別外源性微生物或內(nèi)源性配體，對致病因素的相關(guān)分子肽進(jìn)行識別，從而啟動免疫調(diào)控程序, 介導(dǎo)天然免疫和炎癥反應(yīng)[4]。 在機(jī)體各個器官的缺血/再灌注過程中，Toll樣受體素4(Toll-like receptor 4，TLR4)也發(fā)揮著重要作用，是介導(dǎo)器官再灌注損傷的重要因素之一[5-7]。

右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)是比可樂定特異性更強(qiáng)的一種高選擇性的α2腎上腺素受體激動劑,研究表明，右美托嘧啶有較好的降低應(yīng)激反應(yīng)、維持循環(huán)血流動力學(xué)穩(wěn)定、預(yù)防術(shù)后譫妄的效果，能夠有效改善術(shù)中缺血對器官組織的損傷，對缺血/再灌注器官有很好的保護(hù)作用，能減輕再灌注損傷，但具體的機(jī)制目前尚不清楚[8，9]。阿替美唑(atipamezole，Atip)是一種特異性α2-腎上腺素受體阻滯劑，它可以有效拮抗α2腎上腺素受體激動劑對α2腎上腺素受體的激動作用，快速逆轉(zhuǎn)α2腎上腺素受體激動引起的鎮(zhèn)靜和麻醉。本實(shí)驗選用右美托咪定進(jìn)行干預(yù)，研究其對大鼠再灌注損傷肺組織TLR4表達(dá)的調(diào)控，并通過加用阿替美唑進(jìn)一步研究其可能的肺保護(hù)作用機(jī)制，為臨床手術(shù)中選擇合適的麻醉藥減輕再灌注損傷提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗動物與主要試劑

SPF級健康雄性成年SD大鼠50只，體重(300±30)g，由溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗動物中心提供【SYXK(浙)2010-0150】。RT-PCR試劑盒購自美國Ferments公司，RT-PCR引物購自上海生工生物工程技術(shù)公司，TLR4一抗、二抗購自英國abcam公司。GAPDH一抗購自中國杭州賢至科技有限公司，GAPDH二抗購自中國碧云天生物技術(shù)研究所，BCA蛋白定量試劑盒購自中國碧云天生物技術(shù)研究所，其它試劑均為國產(chǎn)分析純產(chǎn)品。

1.2 大鼠肺缺血/再灌注損傷模型的制備和實(shí)驗分組

采用大鼠在體左側(cè)肺缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)模型，大鼠稱重后，用20%烏拉坦(7 ml/kg)腹腔注射麻醉，頸胸部皮膚消毒，暴露氣管后，行T型切口切開，置人14-gauge氣管插管，接小動物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣,調(diào)節(jié)呼吸機(jī)參數(shù)為：呼吸頻率RR 70次/分，吸呼比為I∶E=3∶4，氧濃度100%，潮氣量30 ml/kg。于大鼠左胸部3-5肋間心臟搏動最明顯處開胸，仔細(xì)游離左側(cè)肺門，肝素50 U/kg大鼠陰莖背靜脈注射5 min后，用無損傷動脈夾阻斷左側(cè)肺門，當(dāng)通氣時肺組織不再膨脹，表明阻斷成功，阻斷左肺門30 min后松開動脈夾，再灌注2 h。灌注結(jié)束后采集血樣，處死SD大鼠，取左肺組織。大鼠50只，體重(300±30)g，隨機(jī)分為5組(n=10)：對照組(Sham組)、缺血/再灌注組(I/R組)、右美托咪定組(Dex組)、阿替美唑(atipamezole，Atip)組(Atip組)、右美托咪定+阿替美唑組(Dex+Atip組)。Sham組：僅行開胸處理，不夾閉肺門，機(jī)械通氣150 min；I/R組：開胸后行左側(cè)肺門阻斷30 min,再灌注2 h；Dex組：肺門阻斷前30 min給予腹腔注射右美托咪啶(20 μg/kg)，其余處理同I/R組；Atip組：肺門阻斷前30 min給予腹腔注射阿替美唑(250 μg/kg)，其余處理同I/R組；Dex+Atip組：肺門阻斷前30 min腹腔同時注射右美托咪定(20 μg/kg)和阿替美唑(250 μg/kg)，其余處理同I/R組。

1.3 肺W/D和TLW檢測

實(shí)驗結(jié)束，取左肺上葉組織， 用生理鹽水漂洗表面殘留血液， 濾紙吸干表面水分，稱重，記為濕重(wet weight，W)； 在恒溫電熱鼓風(fēng)干燥箱70℃ 24 h烘干后稱重，記為干重(dry weight，D)，兩者之比為肺濕干重比 (wet/dry weight ratio，W/D)。肺總肺水含量 (total lung water content，TLW) 的計算公式如下：TLW =(W-D)/D 。

1.4 光鏡下肺組織形態(tài)學(xué)觀察及肺泡損傷定量評估

再灌注結(jié)束后，取左肺下葉約0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm 大小肺組織，經(jīng)4%甲醛固定，常規(guī)進(jìn)行石蠟包埋切片，HE染色，光鏡下觀察各組標(biāo)本組織學(xué)改變。在400倍視野下隨機(jī)連續(xù)觀察50個視野，計數(shù)每個視野下的總肺泡數(shù)及損傷肺泡數(shù)。肺泡內(nèi)含紅細(xì)胞或白細(xì)胞超過2個或肺泡內(nèi)含有水腫滲出液的均視為損傷肺泡，計算損傷肺泡數(shù)與總肺泡數(shù)的

比值，把損傷肺泡數(shù)占總計肺泡數(shù)百分比的值作為肺泡損傷評估指數(shù)(index of quantitative assessment，IQA)。

1.5 RT-PCR方法檢測大鼠肺組織中TLR4 mRNA的表達(dá)

各組分別取-70℃冷藏肺組織100 mg，放入研缽中，Trizol法提取大鼠肺組織總RNA，蛋白核酸儀進(jìn)行RNA濃度檢測。按RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書合成cDNA產(chǎn)物。按RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書準(zhǔn)備25 μl的反應(yīng)體系： 模板cDNA 1 μl(2 μg/μl) ，PCR Mix 12.5 μl，上下游引物各1 μl，加三蒸水至25 μl ，引物序列見表1。TLR4的PCR反應(yīng)條件：94℃ 預(yù)變性3 min，進(jìn)入循環(huán)：94℃ 30 s，58℃ 30 s，72℃ 1 min，29個循環(huán)，再72℃ 5 min。GAPDH的PCR反應(yīng)條件：94℃ 預(yù)變性3 min，進(jìn)入循環(huán)：94℃ 30 s，58℃ 30 s，72℃ 1 min，28個循環(huán)，再72℃ 5 min。PCR產(chǎn)物用1.5%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳，用MUVB-20凝膠圖像分析儀進(jìn)行灰度值掃描，拍照。用Quantity One凝膠軟件分析系統(tǒng)分析灰度值，TLR4 mRNA的表達(dá)量用GAPDH內(nèi)參的灰度值進(jìn)行校正，以TLR4 mRNA灰度值和GAPDH mRNA灰度值之比作為TLR4 mRNA相對表達(dá)量。

Tab. 1 Sequences of the primers

1.6 Western blot方法檢測大鼠肺組織中TLR4蛋白的表達(dá)

各組取肺組織100 mg置于預(yù)冷的研缽中，加液氮研成粉末后，同時加入RIPA裂解液(強(qiáng))1 000 μl和PMSF 10 μl，充分勻漿，將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5 ml EP管，置于冰上30 min，使其充分裂解，然后4℃ 12 000 r/min，離心5 min，吸取上清。BCA法測定蛋白含量，用5×蛋白上樣緩沖液將蛋白樣品調(diào)整至同一濃度，沸水浴煮沸10 min，冷卻后，分裝保存-20℃?zhèn)溆谩?配制10%分離膠和5%濃縮膠，每個樣孔上樣20 μl(2 μg/μl)，行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。電泳結(jié)束后，轉(zhuǎn)膜，漂洗轉(zhuǎn)入封閉液(5%脫脂奶粉)，室溫封閉90 min。封閉結(jié)束后，將PVDF膜取出，轉(zhuǎn)入一抗稀釋液(5%脫脂牛奶配制)中，4℃冰箱孵育過夜(15 h)。一抗孵育結(jié)束后，將PVDF膜用TBST液洗滌10 min×3次，然后將其轉(zhuǎn)入二抗稀釋液中孵育，室溫1.5 h。ECL發(fā)光、顯影及定影。掃描底片，用Quantity One凝膠軟件分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度值分析，以TLR4蛋白的灰度值與GAPDH蛋白的灰度值比值作為TLR4蛋白的相對含量。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠肺 W/D 和T LW的比較

與Sham組相比，其余各組的W/D和TLW的值均明顯升高(P<0.05，P<0.01)，肺組織水腫加重；與I/R組相比，Dex組肺組織水腫有明顯改善，W/D、TLW下降(P<0.01)，提示Dex對再灌注肺組織的保護(hù)作用；Dex+Atip組的W/D和TLW與Dex組相比明顯升高，差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)，與I/R組的W/D和TLW相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。Atip組的W/D和TLW與I/R組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

GroupW/DTLWSham1．98±1．950．98±1．95I/R5．09±0．38??4．09±0．38??Dex2．88±0．39?##1．88±0．39?##Atip5．36±0．39??ΔΔ4．36±0．39??ΔΔDex+Atip5．38±0．39??ΔΔ4．38±0．39??ΔΔ

I/R: Ischemia/reperfusion; Dex: Dexmedetomidine; Atip: Atipamezole; W/D: Wet/dry weight ratio; TLW: Total lung water content

*P<0.05,**P<0.01vssham group;#P<0.05,##P<0.01vsI/R group;ΔΔP<0.01vsDex group

2.2 各組光鏡下肺組織形態(tài)學(xué)變化及肺泡損傷定量評估

Sham組肺間質(zhì)及肺泡完整，未見炎癥細(xì)胞浸潤，肺組織損傷評分較低，肺泡損傷輕微 ；I/R組肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁水腫增厚或破裂，間質(zhì)出現(xiàn)水腫，肺泡內(nèi)見滲出液或紅細(xì)胞漏出，肺泡損傷評分與Sham組相比，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；Dex組較I/R組肺組織損傷減輕，肺泡結(jié)構(gòu)相對較完整，肺泡內(nèi)水腫及炎癥細(xì)胞浸潤均有不同程度減輕，肺泡間質(zhì)滲出減少，IQA的值明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，直觀反映了Dex對再灌注肺組織的保護(hù)作用；Dex+Atip組肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁水腫嚴(yán)重，間質(zhì)內(nèi)嚴(yán)重滲出，肺泡內(nèi)見大量滲出液或紅細(xì)胞，肺泡損傷評分與Dex組相比，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；Atip組與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表3，圖1，圖1見彩圖頁Ⅵ)。

GroupIQASham1．98±1．95I/R5．09±0．38??Dex2．88±0．39??##Atip5．36±0．39??ΔΔDex+Atip5．38±0．39??ΔΔ

I/R: Ischemia/reperfusion; Dex: Dexmedetomidine; Atip: Atipamezole; IQA: Index of quantitative assessment

**P<0.01vssham group;##P<0.01vsI/R group;ΔΔP<0.01vsDex group

2.3 各組肺組織TLR4 mRNA相對表達(dá)量的比較

與Sham組相比，其余各組肺組織TLR4 mRNA相對表達(dá)量顯著升高(P<0.01)；與I/R組相比，Dex組TLR4 mRNA相對表達(dá)量明顯降低(P<0.01)；Dex+Atip組與Dex組比較，TLR4 mRNA相對表達(dá)量顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，Dex+Atip組肺組織TLR4 mRNA相對表達(dá)量與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0．05)，Atip組的TLR4 mRNA相對表達(dá)量與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(圖2)。

Fig. 2 TLR4 mRNA expression in different groups

I/R: Ischemia/reperfusion; Dex: Dexmedetomidine; Atip: Atipamezole; TLR4: Toll like receptor 4

**P<0.01vsSham group;##P<0.01vsI/R group;

ΔΔP<0.01vsDex group

2.4 各組大鼠肺組織TLR4蛋白表達(dá)量的比較

與Sham組相比，其余各組肺組織TLR4 蛋白的表達(dá)量有明顯上升(P<0.01)；與I/R組相比， Dex組TLR4蛋白含量明顯降低(P<0.01)，與Dex組比較，Dex+Atip組TLR4蛋白相對表達(dá)量明顯上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)，與I/R組比較，Dex+Atip組蛋白相對表達(dá)量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；Atip組的TLR4 蛋白含量與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(圖3)。

Fig. 3 TLR protein expression in different groups

I/R: Ischemia/reperfusion; Dex: Dexmedetomidine; Atip: Atipamezole

**P<0.01vssham group;##P<0.01vsI/R group;

ΔΔP<0.01vsDex group

3 討論

炎癥反應(yīng)在機(jī)體各種疾病的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色，在機(jī)體各個器官的缺血/再灌注進(jìn)程中，炎癥反應(yīng)也是引起再灌注損傷的重要因素。在我們之前的研究，離體心肌缺血/再灌注過程中，隨著再灌注時間的延長，心肌中炎癥IL-1β的表達(dá)量上升，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，最終引起心肌再灌注損傷[10]。TLR4是一種主要的天然免疫模式識別受體，可與病原識別模式分子結(jié)合，通過誘導(dǎo)NF-κВ的活化，引發(fā)眾多前炎性因子的表達(dá)，介導(dǎo)機(jī)體的炎癥損傷。有研究表明，心臟、腦、腎臟等其他器官在經(jīng)歷缺血/再灌注后，TLR4/NF-κB通路被激活，炎癥因子的表達(dá)量升高，而在使用藥物干預(yù)后，通過抑制TLR4 所介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，使相應(yīng)組織與血漿中炎癥介質(zhì)的表達(dá)降低，器官的缺血/再灌注損傷也得到有效緩解[11]。TLR4的過度表達(dá)和各種原因所致的肺損傷有密切聯(lián)系，也是引起再灌注肺損傷的重要原因[12]。

作為一種高選擇性α2腎上腺素受體激動劑，右美托咪定于2009年才開始國內(nèi)應(yīng)用，其具有劑量依賴性的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗焦慮和催眠作用[13]。與咪達(dá)唑侖等其他鎮(zhèn)靜藥相比，右美托咪定作為術(shù)前用藥不會產(chǎn)生呼吸抑制作用，且保留了生理睡眠周期，極大地減少了手術(shù)病人在蘇醒后譫妄、躁動的發(fā)生。近些年來，右美托咪定在臨床應(yīng)用時對圍術(shù)期I/R器官的保護(hù)作用也得到了大家的肯定。有實(shí)驗表明，右美托咪定能減輕心臟、腦、腎臟等器官的I/R損傷[14]。

實(shí)驗結(jié)果顯示，與Sham組相比，大鼠肺組織在經(jīng)歷缺血/再灌注之后，出現(xiàn)了嚴(yán)重?fù)p傷，肺W/D和TLW上升，水腫嚴(yán)重，光鏡下肺泡內(nèi)大量炎癥細(xì)胞浸潤，TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量上升。在經(jīng)過右美托咪定預(yù)處理后，與 I/R組相比，大鼠肺W/D和TLW下降，水腫減輕，光鏡下肺泡內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤大大降低。在經(jīng)過右美托咪定預(yù)處理后，TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量下降，TLR4的轉(zhuǎn)錄與翻譯受到抑制，說明右美托咪定對I/R肺的保護(hù)作用與抑制TLR4表達(dá)有關(guān)。Atip組肺組織的W/D和TLW與I/R組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，Atip組TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量與I/R組的差異也無明顯統(tǒng)計學(xué)意義，光鏡下可直觀看到Atip組與I/R組的肺組織損傷相當(dāng)，IQA的值差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義，這些都提示單獨(dú)使用Atip對肺缺血/再灌注進(jìn)程沒有影響，但在Dex+Atip組，當(dāng)在使用右美托咪定和阿替美唑同時腹腔注射后，Dex+Atip組TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)量與Dex組相比，出現(xiàn)了明顯的上升，光鏡下肺組織炎癥浸潤加重，IQA的值升高，并且將Dex+Atip組和I/R組相比，以上指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)意義，說明了阿替美唑完全阻斷了右美托咪定對再灌注損傷肺組織的保護(hù)作用，提示右美托咪定通過激動α2-腎上腺素能受體抑制TLR4表達(dá)、保護(hù)再灌注損傷肺組織。

綜上所述，在肺的缺血/再灌注過程中，TLR4的過度表達(dá)是介導(dǎo)再灌注肺損傷的重要原因。右美托咪定通過抑制TLR4表達(dá)起到對I/R肺的保護(hù)作用，其機(jī)制與激動α2-腎上腺素能受體有關(guān)。

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Dexmedetomidine prevents inflammatory responses in injured rat lung tissues induced by ischemia/reperfusion through inhibition of TLR4 expression

HE Jin-bo1，2, SONG Dong1, LUO Zi-yin1, ZHANG Cong-cong1, YING Lei1, WANG Yang1, WANG Wan-tie1△

(1. Ischemia/Reperfusion Injury Research Institute, Whenzhou Medical University, Whenzhou 325035;2. Department of Anesthesiology, Taihe Hospital， Hubei University of Medicine, Shiyan 442000, China)

Objective: To investigate the effect of Dexmedetomidine (Dex) on Toll-like receptor 4(TLR4) expression in lung during lung ischemia/reperfusion(I/R) in rats and its possible protecting mechanisms. Methods:InvivoI/R model in left lung of SD rats was established． Fifty adult healthy male SD rats were randomly divided into five groups (n=10): control group (Sham group), I/R group, Dex group, atipamezole group (Atip group) and Dex+Atip group. After the I/R experiment，rats were killed and the left lung tissues were harvested to get the lung wet/dry weight(W/D); Ultrastructure of lung tissue were observed under light microscopy; The mRNA expression of TLR4 in lung tissues were determined by RT-PCR; The protein level of TLR4 in lung tissues was detected by Western blot. Results: ①Compared with those in the Sham group, W/D and total lung water content (TLW) in other groups increased significantly (P<0.05), the mRNA and protein expression levels of TLR4 in lung tissues increased too. The structure damages of lung tissues observed under light microscopy in other groups were more than that of Sham group. ②Compared with those in the I/R group, W/D and TLW in the Dex group were lower (P<0.05,P<0.01), the mRNA and protein expression levels of TLR4 in lung tissues decreased (P<0.01), and reduced structure damages of lung tissues were observed under light microscopy in Dex group. ③Compared with those in the Dex group, W/D and TLW in the Dex+Atip group were higher (P<0.01), the mRNA and protein expression levels of TLR4 in lung tissues increased (P<0.01), and the structure damages of lung tissues observed under light microscopy were more serious. There was no significant difference of the above parameters among I/R、Atip、Dex+Atip groups. Conclusion: Lung ischemia/reperfusion caused high expression of TLR4 and finally induced damages of the lung. Dexmedetomidine could inhibit TLR4 expression and alleviate the lung ischemia/reperfusion injury， which was related to activation of α2-adreno receptor.

dexmedetomidine; ischemia/reperfusion injury; inflammatory response; Toll-like receptor 4

溫州市公益性科技計劃項目資助(Y20140652，2014S0045)

2015-05-22

2015-12-21

R363

A

1000-6834(2016)04-356-06

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