葡萄球菌屬中紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥分析

王曉妹，賈雪芝，李 巖

(新疆維吾爾自治區(qū)克拉瑪依市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 834000)

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·個(gè)案與短篇·

葡萄球菌屬中紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥分析

王曉妹，賈雪芝，李 巖

(新疆維吾爾自治區(qū)克拉瑪依市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 834000)

葡萄球菌； 紅霉素； 克林霉素； D-試驗(yàn)

在醫(yī)院感染中，葡萄球菌是常見(jiàn)病原菌之一[1]。葡萄球菌耐藥日益嚴(yán)重，給治療帶來(lái)巨大困難，特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)逐漸增多，對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物表現(xiàn)出多重耐藥[2]。因此，臨床治療中廣泛應(yīng)用林克酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、糖肽類抗菌藥物為首選藥物。克林霉素有較強(qiáng)組織滲透性，常用于皮膚軟組織感染治療，也是青霉素和頭孢類過(guò)敏者的替代藥品。隨著克林霉素被臨床廣泛應(yīng)用，耐藥也隨之增加。實(shí)驗(yàn)室未開(kāi)展D-試驗(yàn)時(shí)，藥敏報(bào)出克林霉素敏感，但臨床反饋其治療無(wú)效。因此，了解本院2年來(lái)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生率，能為臨床指導(dǎo)用藥提供可靠參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014～2015年從本院臨床科室送檢的各種標(biāo)本中分離出凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌199株，凝固酶陰性葡萄球菌447株。

1.2 鑒定及藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌鑒定采用法國(guó)生物梅里埃公司VITEK2 Compact全自動(dòng)分析儀系統(tǒng)進(jìn)行鑒定，鑒定卡選用GP測(cè)定，藥敏卡選用AST-GP67測(cè)定，該卡片采用2個(gè)孔位檢測(cè)紅霉素誘導(dǎo)素克林霉素耐藥，1個(gè)孔位為0.5 g/mL克林霉素，另1個(gè)孔位為0.25 g/mL克林霉素及0.5 g/mL紅霉素。D-試驗(yàn)檢測(cè)采用美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2009年版進(jìn)行操作與判讀結(jié)果。

1.3 培養(yǎng)基及藥敏紙片 M-H瓊脂平板、哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力血瓊脂平板均購(gòu)于鄭州安圖生物工程有限公司；藥敏紙片紅霉素(15克/片)和克林霉素(2克/片)購(gòu)于英國(guó)OXOID公司。

1.4 D-試驗(yàn)檢測(cè) 將2 μg/片克林霉素紙片貼于距紅霉素(15 g/片)20 mm處，進(jìn)行16～18 h的35 ℃孵育。在近紅霉素的克林霉素紙片一側(cè)，出現(xiàn)截平現(xiàn)象或抑菌圈縮小，而呈“D”形提示可誘導(dǎo)的克林霉素耐藥存在，D-試驗(yàn)陽(yáng)性。

1.5 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌 ATCC25922 購(gòu)于新疆維吾爾自治區(qū)臨床檢驗(yàn)中心。

2 結(jié) 果

2014～2015年葡萄球菌、MRSA、MRSE對(duì)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥發(fā)生率，見(jiàn)表1。

表1 葡萄球菌對(duì)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥發(fā)生率

3 討 論

2014～2015年凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌共199株，D-試驗(yàn)陽(yáng)性59株，誘導(dǎo)耐藥率29.6%。凝固酶陰性葡萄球菌共477株，D-試驗(yàn)陽(yáng)性72株，誘導(dǎo)耐藥率17.7%。MRSA共34株，D-試驗(yàn)陽(yáng)性6株，誘導(dǎo)耐藥率17.6%。MRSE共331株，D-試驗(yàn)陽(yáng)性82株，誘導(dǎo)耐藥率24.8%。D-試驗(yàn)結(jié)果顯示MRSA和MRSE的誘導(dǎo)克林霉素耐藥發(fā)生率差異不大，分別為17.6%和24.8%，與楊燕等[3]的報(bào)道相近，但比黎文成等[4]報(bào)道的數(shù)值低，原因可能與不同地區(qū)紅霉素耐藥基因構(gòu)成差異及大環(huán)內(nèi)酯類藥物使用多少有關(guān)。

大環(huán)內(nèi)酯類耐藥機(jī)制主要是msrA基因編碼的泵出機(jī)制和核糖體靶位的改變，erm基因編碼的23srRNA甲基化導(dǎo)致對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素和β型鏈陽(yáng)霉素耐藥(MLS型耐藥)，msrA基因編碼產(chǎn)生1種外排泵，從而對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類耐藥[5]。MLS型耐藥又分為結(jié)構(gòu)型(CMLS)和誘導(dǎo)型(iMLS)2種[6]。CMLS型耐藥表型為對(duì)紅霉素和克林霉素均耐藥，藥敏試驗(yàn)可測(cè)出。iMLS型耐藥表型為對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感，藥敏試驗(yàn)不能測(cè)出，在未進(jìn)行誘導(dǎo)試驗(yàn)的情況下，臨床選用克林霉素治療感染，會(huì)導(dǎo)致治療失敗，給患者帶來(lái)更大痛苦，延長(zhǎng)治療時(shí)間。因此，2004年美國(guó)CLSI規(guī)定，對(duì)紅霉素耐藥、克林霉素敏感的葡萄球菌應(yīng)進(jìn)行D-試驗(yàn)以檢測(cè)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥。D-試驗(yàn)陰性，藥敏報(bào)告克林霉素敏感；D-試驗(yàn)陽(yáng)性，報(bào)告克林霉素耐藥，并向臨床提示通過(guò)誘導(dǎo)克林霉素耐藥試驗(yàn)，克林霉素耐藥，但克林霉素對(duì)某些患者可能有效[7]。

克林霉素抗菌普廣，抗菌活性強(qiáng)，組織滲透性強(qiáng)且易吸收，血藥水平穩(wěn)定，對(duì)常見(jiàn)鏈球菌、葡萄球菌、厭氧菌、衣原體、支原體等致病微生物都有抗菌活性，并可與阿米卡星、喹諾酮類抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用，不良反應(yīng)小，廣泛用于臨床。

對(duì)紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥分析，可準(zhǔn)確指導(dǎo)臨床用藥，減少臨床盲目用藥，對(duì)控制抗菌藥物耐藥發(fā)生具有一定意義。

[1]王愛(ài)霞.抗菌藥物臨床合理應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:229.

[2]肖永.臨床抗生素學(xué)[M].重慶:重慶衛(wèi)生出版社,2004:60-63.

[3]楊燕,孫長(zhǎng)貴,曾賢銘,等.耐紅霉素葡萄球菌對(duì)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的檢測(cè)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,28(3):206-208.

[4]黎文成,李勰璘,付玉梅,等.D-試驗(yàn)在葡萄球菌對(duì)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的檢測(cè)[J].廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,36(1):41-42.

[5]倪語(yǔ)星,尚紅.臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2012:60.

[6]王明貴.細(xì)菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)藥:抗生素分冊(cè),2000,21(1):13-15.

[7]趙江花,楊健英,趙文申,等.259例金黃色葡萄球菌對(duì)紅霉素、克林霉素的誘導(dǎo)耐藥性研究[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(27):37-38.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.062

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1673-4130(2016)21-3091-02

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