辛芍組方對(duì)缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激及NF-κB信號(hào)通路的影響

董永喜，王霞，董莉，劉宗炎，王愛(ài)民，蘭燕宇

(1貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴陽(yáng)550004；2貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

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辛芍組方對(duì)缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激及NF-κB信號(hào)通路的影響

董永喜1,2，王霞1,2，董莉1,2，劉宗炎1,2，王愛(ài)民2，蘭燕宇2

(1貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴陽(yáng)550004；2貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

目的 觀察辛芍組方對(duì)缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)及核因子κB(NF-κB)信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響，探討辛芍組方發(fā)揮腦保護(hù)作用的機(jī)制。方法 培養(yǎng)PC12細(xì)胞，分為正常對(duì)照組、模型組及辛芍組方低、中高劑量組。模型組及辛芍組方各劑量組均以氧糖剝奪/復(fù)氧損傷方法建立缺血再灌注損傷模型，造模后辛芍組方低、中、高劑量組分別加入辛芍組方0.31、0.62、1.25 mg/L，均干預(yù)4 h。正常對(duì)照組及模型組不干預(yù)。采用ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)，采用Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、環(huán)氧合酶2(COX-2)及NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白IκBα、p-IκBα、p65蛋白表達(dá)。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞內(nèi)SOD水平降低、MDA水平升高(P均<0.01)。與模型組比較，辛芍組方中、高劑量組細(xì)胞內(nèi)SOD水平均升高(P<0.05或0.01)，辛芍組方各劑量組細(xì)胞內(nèi)MDA水平均降低(P<0.05或0.01)。與正常對(duì)照組比較，模型組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均升高(P均<0.01)；與模型組比較，辛芍組方各劑量組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均降低(P<0.05或0.01)。與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞質(zhì)p-IκBα/IκBα值及細(xì)胞核內(nèi)p65蛋白表達(dá)均增加(P均<0.01)；與模型組比較，辛芍組方各劑量組p-IκBα/IκBα值、p65蛋白表達(dá)均降低(P<0.05或0.01)。結(jié)論 辛芍組方對(duì)缺血再灌注損傷后的PC12細(xì)胞具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與減輕細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制NF-κB通路的活化有關(guān)。

缺血再灌注損傷；神經(jīng)細(xì)胞；辛芍組方；中藥；氧化應(yīng)激；核因子κB；炎癥反應(yīng)；腦缺血

腦血管病是嚴(yán)重威脅人類生命和健康的疾病之一，具有病死率高、致殘率高的特點(diǎn)，給患者家庭及社會(huì)造成沉重負(fù)擔(dān)[1,2]。腦缺血再灌注損傷是指腦血流中斷或大量減少后，在恢復(fù)血液灌流后引起腦組織損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象。腦缺血再灌注損傷涉及多種機(jī)制，包括氧化應(yīng)激、炎性損傷和細(xì)胞凋亡等，其中活性氧所介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)和核因子-κB(NF-κB) 信號(hào)通路激活在腦缺血再灌注損傷中占有重要地位[3]。辛芍組方由燈盞細(xì)辛和赤芍配伍組成，用于治療中風(fēng)、偏癱有較好的臨床效果，但其對(duì)腦缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制尚不明確。PC12細(xì)胞在形態(tài)、生理及生化功能方面都接近于神經(jīng)元，其氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)損傷細(xì)胞模型被廣泛應(yīng)用于模擬體內(nèi)腦缺血再灌注損傷[4]。2014年2～6月，我們觀察了辛芍組方對(duì)缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)及NF-κB信號(hào)通路的影響，探討其防治腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞及試劑 PC12細(xì)胞(高分化)購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所；辛芍組方由貴州省藥物制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。高糖及無(wú)糖DMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Gibco公司)；胎牛血清(德國(guó)Biochrom公司)；超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所)；一氧化氮合酶(iNOS)、環(huán)氧合酶2(COX-2)、NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白(IκBα、p-IκBα、p65)及內(nèi)參β-actin、Lamin B抗體(美國(guó)Santa Cruz公司)；蛋白抽提試劑盒、BCA蛋白定量試劑盒(康為世紀(jì)生物科技有限公司)；ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光試劑(上海七海復(fù)泰生物技術(shù)有限公司)；連二亞硫酸鈉(Na2S2O4,上海晶純?cè)噭┯邢薰?；二甲基亞砜(DMSO，北京索萊寶科技有限公司)。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組 PC12細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清、5%馬血清、96 mg/L青霉素和160 mg/L鏈霉素的DMEM完全培養(yǎng)基中，置37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞融合至80%時(shí)，用0.25%胰酶消化傳代。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，以(3～4)×104/mL細(xì)胞密度接種96孔板，孵育24 h；設(shè)正常對(duì)照組、模型組及辛芍組方低、中、高劑量組，每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔。

1.3 模型制備及干預(yù)方法 模型組及辛芍組方各劑量組均加入含30 mmol/L Na2S2O4的無(wú)糖DMEM培養(yǎng)液100 μL以建立OGD/R損傷細(xì)胞模型，正常對(duì)照組加入DMEM 100 μL，各組均培養(yǎng)4 h。棄去培養(yǎng)液，更換DMEM培養(yǎng)液(即復(fù)氧復(fù)糖，模擬再灌注)后，辛芍組方低、中、高劑量組分別加入辛芍組方0.31、0.62、1.25 mg/L，正常對(duì)照組及模型組不干預(yù)，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。

1.4 細(xì)胞內(nèi)SOD與MDA檢測(cè) 采用ELISA法。取各組細(xì)胞，棄培養(yǎng)液；每孔加入1%的裂解液600 μL裂解細(xì)胞，按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD、MDA。

1.5 細(xì)胞內(nèi)iNOS、COX-2及NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白檢測(cè) 采用Western blot法。各組干預(yù)后，按照蛋白抽提試劑盒說(shuō)明書(shū)分別提取細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核內(nèi)蛋白，采用BCA蛋白定量試劑盒檢測(cè)各待測(cè)蛋白的表達(dá)。20 μg蛋白上樣，聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白；轉(zhuǎn)膜及封閉后，各組分別加入iNOS(1∶500)、COX-2(1∶200)、IκBα(1∶10 000)、p-IκBα(1∶10 000)、p65(1∶1 000)、β-actin(1∶3 000)、Lamin B(1∶1 000)一抗4 ℃孵育過(guò)夜；二抗孵育1.5 h后，ECL發(fā)光試劑顯色；凝膠成像系統(tǒng)掃描圖像，通過(guò)Gene Tools分析軟件進(jìn)行目的蛋白灰度值分析。以iNOS、COX-2與β-actin灰度值比值作為iNOS、COX-2蛋白的相對(duì)表達(dá)量，以p-IκBα與IκBα灰度值比值作為p-IκBα蛋白的相對(duì)表達(dá)量，以p65與Lamin B灰度值比值作為p65蛋白的相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

2 結(jié)果

2.1 各組細(xì)胞內(nèi)SOD與MDA水平比較 與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞內(nèi)SOD水平降低、MDA水平升高(P均<0.01)。與模型組比較，辛芍組方中、高劑量組細(xì)胞內(nèi)SOD水平均升高(P<0.05或0.01)，辛芍組方各劑量組細(xì)胞內(nèi)MDA水平均降低(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表1。

表1 各組細(xì)胞內(nèi)SOD、MDA水平比較

注：與正常對(duì)照組比較，#P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，▲P<0.01。

2.2 各組細(xì)胞內(nèi)iNOS、COX-2蛋白及NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)比較 與正常對(duì)照組比較，模型組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均升高(P均<0.01)；與模型組比較，辛芍組方各劑量組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均降低(P<0.05或0.01)。與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞質(zhì)內(nèi)p-IκBα蛋白表達(dá)增加、IκBα蛋白表達(dá)降低，且p-IκBα/IκBα值升高(P均<0.01)，細(xì)胞核內(nèi)p65蛋白表達(dá)增加(P<0.01)；與模型組比較，辛芍組方各劑量組細(xì)胞質(zhì)內(nèi)p-IκBα/IκBα值、細(xì)胞核內(nèi)p65蛋白表達(dá)均降低(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表2。

表2 各組細(xì)胞內(nèi)iNOS、COX-2、p-IκBα/IκBα及p65蛋白表達(dá)比較

注：與正常對(duì)照組比較，#P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，▲P<0.01。

3 討論

缺血性腦卒中發(fā)生后，缺血后的腦組織恢復(fù)血流發(fā)生再灌注時(shí)，在某些情況下能導(dǎo)致進(jìn)一步的腦組織損傷和功能障礙，加重原有的病變，這種恢復(fù)血流灌注后的損傷情況稱為缺血再灌注損傷。研究表明，腦缺血再灌注損傷是缺血性腦卒中加重?fù)p傷的主要原因，氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)是腦缺血再灌注后腦損傷的主要機(jī)制。目前研究認(rèn)為，抑制缺血再灌注損傷是治療缺血性腦卒中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[5]。

菊科植物燈盞細(xì)辛和毛茛科植物赤芍均為傳統(tǒng)的活血化瘀類中藥。在貴州少數(shù)民族地區(qū)，常用燈盞細(xì)辛和赤芍進(jìn)行組方配制為辛芍組方，具有活血化瘀、通經(jīng)活絡(luò)功能，臨床用于中風(fēng)瘀血阻絡(luò)證的治療，具有較好的臨床應(yīng)用效果[6,7]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，辛芍組方具有抑制大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成[6]、延長(zhǎng)小鼠凝血時(shí)間[6]、抑制H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞脂質(zhì)氧化及活性氧生成[8]等作用，這表明辛芍組方可通過(guò)多種途徑發(fā)揮對(duì)缺血性疾病的防治作用。

氧化應(yīng)激是導(dǎo)致腦缺血再灌注后組織損傷的重要因素之一。腦缺血再灌注損傷后，由于黃嘌呤氧化酶產(chǎn)生增多、中性粒細(xì)胞激活及線粒體內(nèi)單電子還原等原因，產(chǎn)生大量氧自由基，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)的清除能力,造成細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷[9,10]。SOD作為主要的抗氧化酶，對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，能夠清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，因此SOD水平可反映機(jī)體清除氧自由基的能力。MDA是氧自由基損傷細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的最終產(chǎn)物，細(xì)胞內(nèi)MDA水平可反映自由基攻擊細(xì)胞后的細(xì)胞損傷程度。因此，細(xì)胞內(nèi)SOD及MDA水平常作為評(píng)價(jià)細(xì)胞抗氧化能力的指標(biāo)[9～12]。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組細(xì)胞內(nèi)SOD水平低于正常對(duì)照組、MDA水平高于正常對(duì)照組，提示缺血再灌注可使PC12細(xì)胞內(nèi)SOD水平降低、MDA水平增加，表明PC12細(xì)胞受到嚴(yán)重的自由基損傷，發(fā)生缺血再灌注損傷；辛芍組方中、高劑量組細(xì)胞內(nèi)SOD水平均高于模型組，辛芍組方各劑量組細(xì)胞內(nèi)MDA水平均低于模型組，提示給予辛芍組方后，PC12細(xì)胞內(nèi)SOD水平升高、MDA水平降低，表明辛芍組方通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化能力，從而對(duì)缺血再灌注損傷后的細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用。

炎癥反應(yīng)在腦缺血再灌注損傷機(jī)制中具有重要作用。研究表明，腦缺血后的炎癥反應(yīng)是造成腦組織損傷的因素之一，其與其他因素可相互作用，共同加重再灌注損傷[13]。研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血再灌注后可釋放大量炎癥介質(zhì)和炎癥因子，調(diào)控炎癥相關(guān)因子iNOS、COX-2等蛋白表達(dá)，進(jìn)而引起腦組織水腫、破壞血腦屏障等，加重腦組織的損傷[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均高于正常對(duì)照組，提示PC12細(xì)胞在缺血再灌注后出現(xiàn)了炎癥反應(yīng)；辛芍組方各劑量組iNOS、COX-2蛋白表達(dá)均低于模型組，提示不同劑量的辛芍組方均對(duì)缺血再灌注損傷后細(xì)胞內(nèi)的iNOS、COX-2蛋白表達(dá)有明顯的抑制作用，從而抑制缺血再灌注損傷后的炎癥反應(yīng)。

NF-κB是一種常見(jiàn)的核轉(zhuǎn)錄因子，多以異源二聚體p50/p65形式存在于細(xì)胞中，正常條件下以靜息狀態(tài)被IκBα結(jié)合，形成NF-κB-IκBα復(fù)合物存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞受到某些細(xì)胞因子、氧化應(yīng)激等刺激時(shí)，IκBα可發(fā)生磷酸化并與p50/p65解離，活化的NF-κB便從細(xì)胞質(zhì)遷移至細(xì)胞核內(nèi)，磷酸化的NF-κB p65參與調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、炎癥反應(yīng)、黏附分子表達(dá)、免疫反應(yīng)等[15]。本研究發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型組細(xì)胞質(zhì)p-IκBα/IκBα值增加、細(xì)胞核內(nèi)p65蛋白表達(dá)增加，提示缺血再灌注損傷后PC12細(xì)胞發(fā)生IκBα磷酸化及降解，IκBα與NF-κB解離，使NF-κB發(fā)生了核轉(zhuǎn)位，促進(jìn)了NF-κB的表達(dá)；辛芍組方各劑量組p-IκBα、p65蛋白表達(dá)均低于模型組，提示辛芍組方各劑量組均可降低p-IκBα表達(dá)，抑制IκBα發(fā)生磷酸化，表明辛芍組方可能通過(guò)抑制IκBα的降解及細(xì)胞核p65的核轉(zhuǎn)運(yùn)，從而抑制缺血再灌注損傷后PC12細(xì)胞NF-κB蛋白通路的活化，發(fā)揮對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。

綜上所述，辛芍組方可通過(guò)減輕腦缺血再灌注損傷后的氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，從而發(fā)揮腦保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其提高細(xì)胞的SOD活性、降低MDA水平，下調(diào)iNOS和COX-2蛋白表達(dá)，抑制NF-κB通路的激活有關(guān)。

[1] Zhang R, Zhang H, Zhang ZX, et al. Neuroprotective effects of pre-treament with L-carnitine and acetyl-L-carnitine on ischemic injury in vivo and In vitro[J]. Int J Mol Sci, 2012,13(2):2078-2090.

[2] 韓輝,吳麗敏,方芳,等.人參川芎含藥血清對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞ERK信號(hào)通路和增殖、活力的影響[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2013,33(4):510-515.

[3] 余浩佳, 馮向營(yíng), 辛世萌,等.丁苯酞注射液預(yù)處理通過(guò)NF-κB信號(hào)通路對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志, 2015, 32(12):1119-1121.

[4] Zhang R, Zhang H, Zhang Z, et al. Neuroprotective effects of pre-treament with 1-carnitine and acety1-L-carnitine on ischemic injury in vivo and in vitro[J]. Int J Mol Sci, 2012,13(2):2078-2090.

[5] 匡穩(wěn)定, 匡雙玉, 周容容,等.番茄紅素對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及腦組織 Caspase-3表達(dá)的影響[J].山東醫(yī)藥, 2014,54(27):36-38.

[6] 劉麗娜, 蘭燕宇,鄭林,等.燈盞細(xì)辛、赤芍配伍對(duì)血栓形成和凝血時(shí)間的交互作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(21):157-160.

[7] 陸苑,張潔,蘭燕宇,等.燈盞細(xì)辛-赤芍組方配比及給藥途徑的腦保護(hù)作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(21):175-179.

[8] 劉宗炎,董莉,董永喜,等.燈盞細(xì)辛與赤芍配伍組方對(duì)H2O2致PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014,20(5):180-183.

[9] 李艷青,謝荃,張曉云.中風(fēng)醒腦液對(duì)體外培養(yǎng)缺血再灌注PC-12細(xì)胞SOD活性及MDA含量變化的影響[J].中國(guó)中醫(yī)急癥,2013,22(11):1821-1822.

[10] 劉超,劉敬霞,任非非,等.中醫(yī)藥保護(hù)腦缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].中國(guó)老年學(xué)雜志, 2016, 36(2) :481-484.

[11] 張新春,黃燕.芎芪合劑對(duì)大鼠腦缺血再灌注后自由基損傷相關(guān)指標(biāo)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)急癥,2012,21(6):916-917.

[12] 張曼,王桂敏.菟絲子黃酮對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表達(dá)的影響[J].中藥藥理與臨床,2014,30(5):78-81.

[13] 曾靖,黎曉,黃志華.腦缺血再灌注損傷與炎癥反應(yīng)關(guān)系的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(3):698-700.

[14] 顧民華,洪文,唐傳其,等.芒柄花素保護(hù)前腦缺血再灌注損傷中的血腦屏障并抑制神經(jīng)炎癥[J].暨南大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版,2015,36(1):34-39.

[15] Hu B, Zhang H, Meng XL,et al. Aloe-emodin fromrhubarb (rheum rhabarbarum) inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory responses in RAW 264.7 macrophages[J]. J Ethnopharmacol, 2014,153 (3):846-853.

Effects of formula of Herba Erigerontis and Radix Paeoniae Rubra in OGD/R on oxidative stress and NF-κB signaling pathway of nerve cells after ischemia-reperfusion injury

DONGYongxi1,WANGXia,DONGLi,LIUZongyan,WANGAimin,LANYanyu

(1GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,China)

Objective To observe the effect of the formula of Herba Erigerontis and Radix Paeoniae Rubra in oxygen-glucose deprivation/reoxygenation (OGD/R) on oxidative stress and nuclear factor-κB (NF-κB) signaling pathway of nerve cells (PC12 cells) after ischemia-reperfusion injury and to investigate its mechanism of protective effect. Methods The PC12 cells were cultured and divided into the control group, model group and low-dose, medium-dose and high-dose formula groups. The models of ischemia-reperfusion injury in the model group and formula groups were established by OGD/R. Then the rats in the low-dose, medium-dose and high-dose formula groups were treated with 0.31, 0.62, and 1.25 mg/L formula of Herba Erigerontis and Radix Paeoniae Rubra, and all were intervened for 4 h. The control and model groups were treated with DMEM only. The activity of superoxide dismutase (SOD) and the level of malondialdehyde (MDA) in cell supernatant were detected by ELISA. The protein expression of NO synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) and the related proteins (IκBα, p-IκBα and p65) of NF-κB signaling pathway was examined by Western blotting.Results Compared with the control group, the level of SOD was decreased, the level of MDA was increased in the model group (allP<0.01). Compared with the model group, the level of SOD was increased in the medium-dose and high-dose formula groups (P<0.05 orP<0.01). The level of MDA was decreased in all formula groups (P<0.05 orP<0.01). Compared with the control group, the protein expression of iNOS and COX-2 was decreased in the model group (allP<0.01). Compared with the model group, the protein expression of iNOS and COX-2 was decreased in all formula groups (P<0.05 orP<0.01). Compared with the control group, the value of p-IκBα/IκBα in cytoplasm, and p65 in nucleus of the model group was increased (allP<0.01).Compared with the model group, the value of p-IκBα/IκBα in cytoplasm and p65 in nucleus of all formula groups (P<0.05 orP<0.01).Conclusions The formula has protective effect on PC12 cells after ischemia-reperfusion injury. The mechanism may be related to the reduction of intracellular oxidative stress response and inhibition of NF-κB pathway activation.

ischemia-reperfusion injury; neural cells; Herba Erigerontis and Radix Paeoniae Rubra; Chinese medicine; oxidative stress; nuclear factor-κB; inflammatory response; cerebral ischemia

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260636，81060335)；貴州省優(yōu)秀青年科技人才專項(xiàng)(黔科合人字2015-11)；貴州省高等學(xué)校創(chuàng)新能力提升計(jì)劃(黔教合協(xié)同創(chuàng)新字2013-04)；貴州省教育廳基金項(xiàng)目(黔科合KY字2013-122)。

董永喜(1983-)，男，碩士，講師，主要研究方向?yàn)樾难芩幬镌O(shè)計(jì)與合成。E-mail: 108405755@qq.com

簡(jiǎn)介：董莉(1985-)，女，碩士，副教授，主要研究方向?yàn)橹兴幩幮W(xué)、藥理學(xué)研究和安全性評(píng)價(jià)。E-mail: 108405755@qq.com

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.42.002

R741.05

A

1002-266X(2016)42-0005-04

2016-05-23)