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    探討EB病毒抗體對鼻咽癌篩查和療效的臨床價(jià)值

    2016-11-29 06:25:16李仕偉林艷麗王自正
    標(biāo)記免疫分析與臨床 2016年1期
    關(guān)鍵詞:鼻咽鼻咽癌陰性

    李仕偉,林艷麗,瞿 衛(wèi),王自正

    (南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院 南京臨床核醫(yī)學(xué)中心,江蘇 南京210006)

    ·研究報(bào)告·

    探討EB病毒抗體對鼻咽癌篩查和療效的臨床價(jià)值

    李仕偉,林艷麗,瞿 衛(wèi),王自正

    (南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院 南京臨床核醫(yī)學(xué)中心,江蘇 南京210006)

    鼻咽癌; EB病毒; VCA-IgA; EA-IgG; NA1-IgA

    EB病毒(epstein-barr virus,EBV)屬皰疹病毒科,為線形雙鏈DNA病毒,人類是 EBV唯一天然宿主。EBV在口咽部上皮細(xì)胞內(nèi)增殖,然后感染淋巴細(xì)胞。據(jù)報(bào)道,我國95%以上人群在3~5歲時(shí)已感染了EBV[1]。這些被感染的B淋巴細(xì)胞大量進(jìn)入血液循環(huán)而造成全身性感染,并可長期潛伏在人體淋巴組織中,當(dāng)機(jī)體免疫功能低下時(shí),潛伏的 EBV活化形成復(fù)發(fā)感染。鼻咽癌與 EBV感染的關(guān)系十分密切,絕大多數(shù)鼻咽癌患者中均具有較高的抗EBV抗原的抗體[2]。故我們檢測 EBV相關(guān)抗原的抗體(VCA-IgA、EA-IgG和NA1-IgA)對鼻咽癌患者和正常人組進(jìn)行檢測,其結(jié)果如下:

    資料與方法

    1 一般資料

    收集2014年3月至2015年6月對已確診鼻咽癌患者59例,其中(男45例,女19例),年齡37~75歲。采用鼻咽癌2008分期以鼻咽鏡活檢鼻咽組織明確病理檢查結(jié)果為診斷依據(jù),鼻咽癌 EBV攜帶者以抽血血清中的抗體陽性為確診依據(jù),具體標(biāo)準(zhǔn):VCA-IgA、EA-IgG和NA1-IgA稀釋度1∶10。并在治療后進(jìn)行三項(xiàng)抗體復(fù)查。同期體檢健康者 50例為照組,男34例,女16例;年齡22~70歲。

    2 方法

    采用酶聯(lián)免疫法。VCA-IgA、EA-IgG和NA1-IgA的測定實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,放置室內(nèi)溫(18~25℃)平衡30分鐘,取1包洗液用500mL純化水溶解后備用,將恒溫箱或水浴箱設(shè)備溫度調(diào)整37℃,待溫度穩(wěn)定后使用。實(shí)驗(yàn)步驟:取出一定量的包被孔,編號。設(shè)空白對照1孔、陰性和陽性對照各 2孔,用微量加樣器加入陰性對照和陽性對照各 100μL/孔,其余孔加入樣品稀釋液100μL,再分別加入10μL待檢樣本,置37℃溫育30分鐘。洗板6次。最后在吸水紙上拍干。每孔加入酶結(jié)合物100 μL(空白孔不加),貼上板貼。置37℃溫育 20分鐘。再洗板 6次,最后在加入底物液、顯色液各 50μL,輕輕混勻,置 37℃避光反應(yīng) 10分鐘,每孔加入終止液50μL,振蕩混勻后立即測試結(jié)果。用 BIO-RAD MOGEL680酶聯(lián)免疫分析儀450nm單波長檢測或用450/(620~630)nm雙波長測定各孔的吸光值。依據(jù)試劑盒說明書,VCA-IgA、EA-IgG和 NA1-IgA有效判斷:陰性對照 OD值不高于0.12,陽性對照不低于0.400。CUT OFF值 =0.1+陰性對照平均OD值(該值不足0.05時(shí),按0.05計(jì)算)。樣本OD值大于CUT OFF值為陽性,否則為陰性。

    3 統(tǒng)計(jì)分析

    結(jié) 果

    59例鼻咽癌患者 EB病毒抗體三項(xiàng)檢測結(jié)果比較見表1。

    表1 59例鼻咽癌患者 EB病毒抗體三項(xiàng)檢測結(jié)果與正常對照組比較(±s)

    表1 59例鼻咽癌患者 EB病毒抗體三項(xiàng)檢測結(jié)果與正常對照組比較(±s)

    注:治療前與正常人比較,P<0.01;治療前與治療后比較,P>0.05

    項(xiàng)目 正常人 治療前治療后1月 3月 6月VCA-IgA 0.024±0.014 2.141±0.041 1.894±0.06 4 1.07±0.023 1.092±0.014 5 1.784±0.021 1.784±0.021 EA-IgG 0.023±0.017 2.014±0.312 1.845±0.210 1.891±0.121 1.715±0.019 NA1-IgA 0.025±0.019 1.347±0.061 1.121±0.03

    討 論

    WHO腫瘤分類將鼻咽癌分為三種類型:Ⅰ型鱗狀細(xì)胞癌、Ⅱ型為非角化癌、Ⅲ型為未分化癌。后兩者均可歸為未分化癌。其中,臨床上最常見是鱗狀細(xì)胞癌。

    目前認(rèn)為有三個(gè)最主要的因素可能參與鼻咽癌的發(fā)生過程:①遺傳因素,如不正常的人類白細(xì)胞抗原(human leucocyte igen,HLA)基因;②病毒因素,如EB病毒早期感染和長期反復(fù)感染,導(dǎo)致鼻咽部上皮永生化,并使其進(jìn)一步惡化。③環(huán)境因素,吸煙等[3],體外實(shí)驗(yàn)表明[4],香煙煙霧提取物促進(jìn) EBV復(fù)制,吸煙不僅可以增加個(gè)人鼻咽癌患病率而且可以在健康男性的血清中參與 EBV的激活。

    從表1中59例鼻咽癌患者檢測 EBV三項(xiàng)抗體研究表明,鼻咽癌患者同時(shí)伴有一種或多種的抗體存在,我們檢測EBV三項(xiàng)抗體中以VCA-IgA早期抗原免疫球蛋白A抗體(VCA-IgA)陽性率高達(dá)81.6%~93.0%,治療前與正常對照組50例檢測 EBV三項(xiàng)抗體OD值相比較(P<0.01),治療后一月至半年,患者抗體的滴度雖有下降,但治療前與治療后比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明EBV血清學(xué)檢測不能準(zhǔn)確預(yù)測鼻咽癌患者的治療效果和預(yù)后。其原因是鼻咽癌患者雖經(jīng)治療,但有90%以上的人感染EBV病毒并且持續(xù)存在,這是因?yàn)?EBV可以在有免疫的機(jī)體內(nèi)通過相關(guān)免疫逃避作用機(jī)制而長期潛伏[5]。

    綜上所述,EBV抗體三項(xiàng)可作鼻咽癌高危人群的早篩,當(dāng)血清學(xué)檢測呈陽性,觸診頸部淋巴結(jié)腫大由可疑是鼻咽癌,若發(fā)現(xiàn)臨床鼻咽鏡下有可疑變化,應(yīng)送病理科活檢,最好在鼻咽纖維鏡下作細(xì)致觀察,看有無微小病灶;若鼻咽鏡下無異常發(fā)現(xiàn),但EBV血清學(xué)檢查滴度較高或抗體檢測陽性時(shí),則應(yīng)定期隨防觀察,進(jìn)一步請??漆t(yī)生檢查,早診斷、早治療,所以EB病毒的診斷鼻咽癌高危人群進(jìn)行定期篩查具有重要意義。

    [1]蘇梨云.徐錦,孫家娥,等.EB病毒感染實(shí)驗(yàn)室診斷方法棎討.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006,21(4):513-516.

    [2]Henle G,Henle W.Epstein-Barr virus-specific lgA serum antibodies as an outstanding feature of nasopharyngeal carcinoma.lnt J Cancer,1976,17:1.

    [3]Chang E T,Adami H O.The enigmatic epidemiogy of nasophryngeal carcioma.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2006,15(10):1766-1777.

    [4]Xu F H,Xiong D,Xu Y F,et al An epidmiological and molecular study of the relationship between smoking,risk of nasopharyngeal carcinoma,and Epstein-Barr virus activation.J Nat Canc Inst,2012,104(18):1396-1410.

    [5]李群.EB病毒VCA-IgA和EA-IgA抗體與鼻咽癌診斷的關(guān)系.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,13(2):180-183.

    (李 凌編輯)

    10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.01.034

    2015-09-13;

    2015-11-23

    林艷麗

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