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    芪珀生脈顆粒對(duì)心氣虛小鼠心功能的影響*

    2016-11-28 13:11:50陳雯胡元會(huì)師帥石晶晶王彥云
    天津中醫(yī)藥 2016年11期
    關(guān)鍵詞:雄鼠心氣氣虛

    陳雯,胡元會(huì),師帥,石晶晶,王彥云

    (中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院,北京100053)

    芪珀生脈顆粒對(duì)心氣虛小鼠心功能的影響*

    陳雯,胡元會(huì),師帥,石晶晶,王彥云

    (中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院,北京100053)

    [目的]應(yīng)用高頻超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)芪珀生脈顆粒對(duì)心氣虛小鼠心功能的影響。[方法]采用控食、強(qiáng)迫游泳和大劑量心得安復(fù)合因素造模法建立小鼠心氣虛模型,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥對(duì)照組、芪珀生脈大、中、小劑量組,給藥14 d后,測(cè)定舒張末期和收縮末期左室內(nèi)徑(LVIDd、LVIDs);舒張末期和收縮末期左室后壁厚度(LVPWd、LVPWs);舒張末期和收縮末期室間隔厚度(IVSd、IVSs);舒張末期和收縮末期左室容積(LVEDV、LVESV);左室射血分?jǐn)?shù)(EF)、左室短軸縮短率(FS)等指標(biāo),評(píng)價(jià)各組心功能變化。[結(jié)果]與正常對(duì)照組比,模型組小鼠的心功能明顯下降,陽(yáng)性藥對(duì)照組、芪珀生脈大、中劑量組的心功能相關(guān)指標(biāo)與模型組相比有明顯改善(P<0.05或P<0.01)。[結(jié)論]芪珀生脈顆粒能降低心氣虛小鼠LVIDs和LVESV,增加LVPWs和IVSs,抑制心氣虛小鼠左心室結(jié)構(gòu)改變,同時(shí)升高EF,F(xiàn)S和每搏輸出量(SV),改善小鼠心功能。

    芪珀生脈顆粒;心氣虛;心功能

    心氣虛證為心血管疾病的常見證型之一,臨床可見心悸、氣短、神疲、活動(dòng)后加重、面色淡白、自汗、舌質(zhì)淡和脈虛或弱等癥狀,是許多心血管疾病的基本病理改變基礎(chǔ)。芪珀生脈顆粒處方來(lái)源于臨床經(jīng)驗(yàn)方,用于心氣虛證的治療,療效顯著。為驗(yàn)證、探討其作用機(jī)制,課題組復(fù)制了小鼠心氣虛證模型,應(yīng)用超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)芪珀生脈顆粒對(duì)心氣虛小鼠心功能的干預(yù)作用,為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料

    1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠,SPF級(jí),雌雄各半,體質(zhì)量20-22 g,購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司,合格證號(hào):(SCXK京2012-0001)。

    1.2實(shí)驗(yàn)藥品及儀器芪珀生脈棕褐色浸膏由本院制劑中心提供;鹽酸普萘洛爾片即心得安片(批號(hào):B150801)山西云鵬制藥有限公司生產(chǎn);補(bǔ)心氣口服液(批號(hào):150603)湖北福人金身藥業(yè)有限公司;高分辨小動(dòng)物超聲成像系統(tǒng)(Vevo 770,加拿大Visual Sonics生產(chǎn))。

    2 方法

    2.1小鼠心氣虛證模型的建立參照文獻(xiàn)[1-2]心氣虛證造模方法。實(shí)驗(yàn)全程造模小鼠連續(xù)控食,按基礎(chǔ)進(jìn)食量(即成齡小鼠靜息狀態(tài)下日采食量,每只小鼠每日喂精飼料75 g/kg)進(jìn)食24 d。每日在30℃水溫的游泳缸中強(qiáng)迫負(fù)重(小鼠自身體質(zhì)量的5%)游泳至力竭。實(shí)驗(yàn)20 d后,小鼠每日灌服心得安溶液5 mL/kg(即24 mg/kg體質(zhì)量),連續(xù)4 d,造模結(jié)束。

    2.2分組與給藥昆明種小鼠96只,雌、雄各半。雌、雄鼠分別采用隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行分組,雌、雄鼠各分為6組,每組8只。模型對(duì)照組(模型組),補(bǔ)心氣口服液陽(yáng)性藥對(duì)照組(陽(yáng)性對(duì)照組),芪珀生脈小劑量組,芪珀生脈中劑量組,芪珀生脈大劑量組和正常對(duì)照組(正常組)。

    芪珀生脈濃縮浸膏成人用量每天20 g浸膏。根據(jù)成人臨床劑量實(shí)驗(yàn)小鼠各組給藥劑量如下:小劑量組(5倍)1.67g(/kg·d);中劑量組(10倍)3.33g(/kg·d);大劑量組(20倍)6.67 g(/kg·d);補(bǔ)心氣組(10倍)0.05 mL(/kg·d),各組小鼠于造模第11天,負(fù)重游泳前1 h灌胃給藥,連續(xù)給藥14 d,模型組、正常組灌服等劑量生理鹽水。正常組小鼠實(shí)驗(yàn)全過(guò)程自由飲食,不負(fù)重游泳,不灌服心得安。

    2.3心功能測(cè)定根據(jù)高分辨小動(dòng)物超聲成像系統(tǒng)的操作要求,異氟烷與氧氣混合氣對(duì)小鼠進(jìn)行氣體吸入麻醉,將4個(gè)電極與小鼠四肢末端相連并用膠布固定,運(yùn)用RMV707B型高頻超聲探頭對(duì)小鼠進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查,在取得滿意的胸骨旁左心室長(zhǎng)軸二維圖像后,測(cè)量乳頭肌水平左心室流出道寬度和心率;在短軸水平取得二維圖像后,在乳頭肌水平將M型取樣線垂直于室間隔與左心室后壁獲得M型超聲心動(dòng)圖,測(cè)定:1)舒張末期和收縮末期左室內(nèi)徑(LVIDd、LVIDs)。2)舒張末期和收縮末期左室后壁厚度(LVPWd、LVPWs)。3)舒張末期和收縮末期室間隔厚度(IVSd、IVSs)。4)舒張末期和收縮末期左室容積(LVEDV、LVESV)。5)左室射血分?jǐn)?shù)(EF)、左室短軸縮短率(FS)、每搏排血量(SV)、心率(HR)等由軟件自動(dòng)計(jì)算得出,每組原始數(shù)據(jù)取連續(xù)3個(gè)心動(dòng)周期的平均值[3-4]。

    2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件統(tǒng)計(jì)分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用單因素方差分析,以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由于雌、雄鼠生理指標(biāo)差異較大,分別統(tǒng)計(jì)。

    3 結(jié)果

    結(jié)果表明,與正常對(duì)照組相比,心氣虛模型組小鼠LVIDs、LVESV明顯增加(P<0.01),LVPWs、IVSs減?。≒<0.01),EF、FS、SV、HR明顯降低(P<0.01),提示心氣虛造模使小鼠心率下降,左心室收縮末期的結(jié)構(gòu)明顯變化,左室收縮功能減退,心臟泵血機(jī)能明顯下降,符合臨床心氣虛證心功能改變特征[5],與文獻(xiàn)報(bào)道心氣虛證動(dòng)物模型結(jié)果一致[6-7]。

    與模型組相比,雌、雄性小鼠芪珀生脈大劑量組超聲心動(dòng)圖各指標(biāo)均有顯著改善,結(jié)構(gòu)方面,可對(duì)抗心氣虛小鼠LVIDs和LVESV的擴(kuò)張(P<0.05),可抑制IVSs變薄(P<0.01),其中雄性小鼠大劑量組還可抑制LVPWs變薄(P<0.01);收縮功能方面,雌、雄性小鼠芪珀生脈大劑量組可升高心氣虛小鼠EF、FS、SV(P<0.05,P<0.01),改善左心泵血功能。雌、雄性小鼠芪珀生脈中劑量組也可明顯提高心氣虛小鼠EF、FS(P<0.05),但對(duì)心氣虛小鼠左心室結(jié)構(gòu)方面影響較小。同時(shí),陽(yáng)性對(duì)照藥補(bǔ)心氣口服液組也可從左心室結(jié)構(gòu)和功能方面提高心氣虛小鼠心功能,與模型組比較差異顯著(P<0.05,P<0.01)。結(jié)果見表1、表2。

    4 討論

    心血管疾病是全球范圍內(nèi)造成死亡的最主要原因,患病率持續(xù)上升,中國(guó)心血管病患者已達(dá)2.9億,成為中國(guó)所有疾病發(fā)病率和病死率的第一位。在心系疾病中,心氣虛證為常見證型[8-9],因此,對(duì)心氣虛證研究是中醫(yī)防治心血管疾病的關(guān)鍵。近年研究認(rèn)為心功能不全與心氣虛證密切相關(guān)[10-12],王碩仁[13]將103例冠心病患者分為心氣虛血瘀證與非心氣虛血瘀證兩組,多普勒超聲心動(dòng)圖檢測(cè)發(fā)現(xiàn)心氣虛證表現(xiàn)出左室舒張和收縮功能的減弱,研究結(jié)果表明,左室收縮功能評(píng)價(jià)對(duì)心氣虛診斷有高特異性(88%),因此心功能異??勺鳛樵\斷心氣虛證的重要依據(jù)。

    表1 雄鼠各組心臟超聲相關(guān)指標(biāo)比較(±s)Tab.1 Echocardiographic indexes of male rats in each group(±s)

    表1 雄鼠各組心臟超聲相關(guān)指標(biāo)比較(±s)Tab.1 Echocardiographic indexes of male rats in each group(±s)

    注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

    組別動(dòng)物數(shù)IVSs(mm)LVPWs(mm)LVIDs(mm)LVESV(μL)EF(%)FS(%)SV(μL)HR(次/分)正常組81.48±0.19**1.55±0.23**2.04±0.37**14.12±6.02**78.25±5.22**46.51±5.06**48.72±10.55**430±33.81**模型組80.86±0.070.82±0.103.15±0.4941.77±15.1142.14±6.9221.70±4.2431.21±6.08162±11.63陽(yáng)性對(duì)照組81.08±0.09**0.99±0.17*3.07±0.2635.63±6.4749.12±2.57**25.95±3.01*35.34±3.45181±39.32芪珀生脈大劑量組81.02±0.11**1.02±0.20**2.79±0.37*30.17±9.31*54.50±7.16**30.11±4.57**38.08±4.49*185±35.66芪珀生脈中劑量組80.93±0.090.88±0.133.01±0.1935.49±5.7148.20±3.17*25.81±4.25*33.18±5.53154±37.75芪珀生脈小劑量組80.90±0.090.85±0.082.97±0.2938.73±6.8045.75±3.8823.36±2.2533.62±6.16177±23.54

    表2 雌鼠各組心臟超聲相關(guān)指標(biāo)比較(±s)Tab.2 Echocardiographic indexes of female rats in each group(±s)

    表2 雌鼠各組心臟超聲相關(guān)指標(biāo)比較(±s)Tab.2 Echocardiographic indexes of female rats in each group(±s)

    注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

    組別動(dòng)物數(shù)IVSs(mm)LVPWs(mm)LVIDs(mm)LVESV(μL)EF(%)FS(%)SV(μL)HR(次/分)正常組81.17±0.11**1.31±0.35**2.01±0.36**13.56±6.21**72.16±7.94**40.76±6.35**33.66±6.50**449±60.37*模型組80.73±0.070.73±0.053.04±0.5535.08±12.7641.15±9.6519.88±5.4815.87±4.84182±60.26陽(yáng)性對(duì)照組80.84±0.07*0.87±0.112.57±0.34*25.57±7.14*50.43±1.80*25.62±1.94*25.57±7.80*216±36.36芪珀生脈大劑量組80.86±0.08**0.90±0.182.54±0.49*25.48±10.40*54.19±9.60**27.15±7.11**25.94±10.72*236±51.89芪珀生脈中劑量組80.91±0.11**0.90±0.082.71±0.3127.86±8.0548.99±8.66*25.22±5.74*23.35±6.06226±63.58芪珀生脈小劑量組80.82±0.090.83±0.102.91±0.5830.37±9.6740.26±5.5219.37±2.9920.74±17.28217±45.44

    從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,經(jīng)過(guò)復(fù)合因素造模24 d,雌雄小鼠體質(zhì)量明顯下降,雄鼠正常組體質(zhì)量(39.96± 3.62)g,模型組(17.65±0.91)g;雌鼠正常組體質(zhì)量(27.30±2.91)g,模型組(14.81±0.78)g,由數(shù)據(jù)可知雌雄小鼠模型組體質(zhì)量與正常組差異非常顯著(P<0.01)。模型組小鼠可見精神萎靡、形體瘦弱、毛發(fā)枯槁、鼻尾顏色淡青等心氣虛癥狀;反映心臟收縮功能的指標(biāo)均呈現(xiàn)明顯降低的趨勢(shì),表明心臟的收縮功能受到抑制,提示復(fù)合因素造模可明顯降低小鼠的心功能,心功能損傷可能是造成心氣虛證的重要機(jī)制。

    芪珀生脈顆粒以黃芪、北沙參、琥珀等藥組方,治療心氣虛之心悸,氣短,乏力臨床療效顯著。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,由于雌、雄鼠體質(zhì)量差異較大,雌性小鼠更加瘦弱,可見心臟超聲中心臟結(jié)構(gòu)相關(guān)指標(biāo)如IVSs、LVPWs、LVIDs和LVESV,雌鼠數(shù)值偏低,心臟SV也較雄鼠偏小,因此實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)雌、雄小鼠分別統(tǒng)計(jì)。結(jié)果表明,不論雌、雄鼠,芪珀生脈大、中劑量組均可升高心氣虛小鼠EF、FS,改善左心泵血功能,大劑量組還可提高心臟SV;心臟結(jié)構(gòu)方面,不論雌、雄鼠,芪珀生脈大劑量組可對(duì)抗心氣虛小鼠LVIDs和LVESV,可抑制IVSs變薄,雄鼠大劑量組還可抑制VPWs變薄,說(shuō)明芪珀生脈顆??梢砸种菩臍馓撟C引起的心室結(jié)構(gòu)的改變,對(duì)心肌有良好的保護(hù)作用。HR方面,實(shí)驗(yàn)各組雌性小鼠心率均高于雄鼠,應(yīng)與體質(zhì)量,心氣虛程度,麻藥吸入量等有關(guān)。此外,本課題組研究發(fā)現(xiàn)芪珀生脈顆粒還可降低心氣虛小鼠心肌超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,降低血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量,研究結(jié)果另文發(fā)表,因此推測(cè)芪珀生脈顆??寡住⒖寡趸饔檬瞧浔Wo(hù)心肌,改善心氣虛證小鼠心功能的可能機(jī)制。

    [1]李紹芝,朱文鋒,李冰星,等.心氣虛證動(dòng)物模型的研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,1998,5(12):21-22.

    [2]程志清,吳玉芙,唐燁霞,等.昆明種小鼠心氣虛證動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià)[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技,2003,10(6):364-366.

    [3]陳書影,司瑞,張榮慶,等.白藜蘆醇預(yù)處理小鼠應(yīng)激性損傷后心功能動(dòng)態(tài)觀察[J].嶺南心血管病雜志,2012,18(2):160-168.

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    [6]金紅姝,林水淼,楊戈.心氣虛證大鼠模型心功能變化的超聲評(píng)價(jià)[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2007,31(1):75-77.

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    (本文編輯:高杉,滕曉東)

    Effect of Qipo Shengmai granules on cardiac function in mice models of heart Qi deficiency syndrome

    CHEN Wen,HU Yuan-hui,SHI Shuai,SHI Jing-jing,WANG Yan-yun
    (Guang’anmen Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100053,China)

    [Objective]Applied with echocardiography to observe the heart function change of heart Qi deficiency mice and evaluate the effect of Qipo Shengmai granules.[Methods]The model of heart Qi deficiency in mice was established by the method of controlling food, forced swimming and given large dose of propranolol.Kunming mice were randomly divided into normal control group,model group, positive control group and Qipo Shengmai granules high/medium/low dose group.After 14 days of administration,the changes of cardiac function refers to LVIDs,LVIDd,LVPWd,LVPWs,IVSd,IVSs,LVEDV,LVESV,EF,FS,in mice were determined.[Results]Compared with the model group and positive control group,the cardiac function of model group was significantly decreased.Compared with the positive control group,Qipo Shengmai granules high/medium dose group heart function improved significantly(P<0.05 or P<0.01). [Conclusion]Qipo Shengmai granules improves cardiac function in heart Qi deficiency mice.

    Qipo Shengmai granule;heart Qi deficiency;heart function

    R541

    A

    1672-1519(2016)11-0686-03

    北京市科委“十病十藥”研發(fā)專項(xiàng)G20工程支撐保障(Z151100003815012)。

    陳雯(1983-),女,碩士,主管藥師,從事中藥藥理研究。

    胡元會(huì),E-mail:gamwendy@163.com。

    (2016-06-05)

    10.11656/j.issn.1672-1519.2016.11.14

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