河池地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布的相關(guān)性研究

唐毓凡韋桂寧

·論著·

河池地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布的相關(guān)性研究

唐毓凡1★韋桂寧2

目的分析河池地區(qū)乙型肝炎病毒基因分型分布情況及與乙型肝炎病毒DNA定量、乙型肝炎E抗原定量檢測的各項(xiàng)指標(biāo)間的相關(guān)性。方法對臨床154例乙型肝炎病毒DNA陽性患者，采用PCR-反向點(diǎn)雜交法檢測乙型肝炎病毒基因分型；采用實(shí)時熒光定量PCR法定量檢測乙型肝炎病毒DNA載量；采用時間分辨法進(jìn)行乙型肝炎E抗原定量檢測；分析彼此間的相關(guān)性。結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)，B型83例，占53.9％；C型68例，占44.16％；非B非C型共3例，占6.2％；男女性患者基因分型的構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C型乙型肝炎病毒DNA水平、C型乙型肝炎肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型。結(jié)論河池地區(qū)乙型肝炎病毒基因型以B型為主，C型次之；C型乙型肝炎病毒DNA含量、乙型肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型。

乙型肝炎；基因分型；DNA；乙型肝炎E抗原

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一種嗜肝DNA病毒，可引起人類急、慢性肝炎，是導(dǎo)致肝硬化和肝癌的主要原因之一，嚴(yán)重危害人類健康。根據(jù)HBV的S區(qū)基因序列差異或者全基因核苷酸序列的異質(zhì)性，HBV可區(qū)分為A～H 8種基因型［1-3］。研究發(fā)現(xiàn)，HBV基因型具有地域分布的特點(diǎn)，且與臨床疾病譜、預(yù)后判斷、疫苗預(yù)防及抗病毒治療效果均有密切相關(guān)性［4-5］。本研究通過對河池地區(qū)154例HBV感染患者的標(biāo)本進(jìn)行基因分型檢測、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎兩對半定量，分析河池地區(qū)HBV基因型的分布與各項(xiàng)檢測指標(biāo)之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

選擇2014年1至12月到都安縣人民醫(yī)院就診的154例HBV感染患者，其中男性患者96例，女性患者58例，年齡15～65歲，平均（32.5±1.2）歲，均為河池地區(qū)居民，臨床診斷參照《慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，入選病例均排除合并甲、丙、丁、戊等其他肝炎病毒感染，且進(jìn)行HBV DNA定量、乙型肝炎E抗原定量檢測。

1.2 試劑與儀器

乙型肝炎病毒基因分型及DNA定量檢測試劑購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司；乙型肝炎E抗原定量檢測試劑購自廣州市達(dá)瑞生物技術(shù)股份有限公司；所使用的儀器包括美國ABI 7500型全自動實(shí)時熒光定量PCR儀、達(dá)安基因全自動核酸分子雜交儀、廣州市達(dá)瑞生物技術(shù)股份有限公司DR6608儀。

1.3 觀察指標(biāo)

分析HBV基因亞型分布與HBV DNA定量、乙型肝炎表面抗原以及乙型肝炎E抗原等檢測指標(biāo)之間的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基因分型檢測結(jié)果

154例河池地區(qū)的乙型肝炎感染患者的樣本中，B基因型83例，占53.9％，C基因型68例，占44.16％，非B或C基因型3例，占1.94％?；颊逪BV基因分型構(gòu)成比差異與性別無相關(guān)性（P＞0.05），見表1。

2.2 基因分型與HBV DNA定量檢測分析

對B型和C型HBV DNA定量檢測的結(jié)果表明，B型HBV DNA在（1.09×103～1.00×107）IU/m L之間，均值為3.12×105IU/m L，C型HBV DNA在（1.95×103～8.98×107）IU/m L之間，均值為1.51×106IU/m L，HBV DNA定量與HBV基因分型存在一定的相關(guān)性。與B型HBV感染患者相比，河池地區(qū)的C型HBV感染的患者，HBV DNA定量檢測結(jié)果均值更高。

表1 河池地區(qū)乙型肝炎感染患者基因亞型分布情況Table 1 The genotype distributions of HBV patients in Hechiarea

2.3 基因分型與乙型肝炎E原定量檢測分析

對B型和C型乙型肝炎E抗原定量檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明，與B型HBV感染患者相比，C型HBV感染患者的乙型肝炎E抗原檢測值≥0.1 PEIU/m L為主（根據(jù)測試試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 B型和C型HBV感染患者乙肝炎E抗原定量結(jié)果Table 2 The effectof genotypes B and CHBV in quantitative detection of E antigen

3 討論

乙型病毒性肝炎是由HBV引起的，以肝臟炎性病變?yōu)橹鳌V泛流行于世界各國，部分患者可轉(zhuǎn)化為肝硬化或肝癌。因此，它已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種疾病。在不同的地區(qū)，乙型肝炎病毒基因亞型的分布也不同，在不同人種中的流行及傳播方式同樣存在很大差異，除了和生活習(xí)慣、人體免疫遺傳特征等因素明顯相關(guān)外，與乙型肝炎病毒本身的生物學(xué)基因型和基因變異等也呈一定程度的相關(guān)性［7］。我國乙型肝炎病毒以A、B、C、D 4種HBV基因亞型為主，不同地區(qū)的基因亞型存在較大的差異。北方地區(qū)以C型為主，約占86.6％［8］；南方地區(qū)則以B型為主，C型則占很小一部分［9-10］。本次統(tǒng)計(jì)結(jié)果中，B型HBV感染占53.9％，C基因型68例，占44.16％。

不同基因型的乙型肝炎病毒具有不同的致病性及流行特征，故了解患者乙型肝炎病毒基因分型具有重要的臨床意義。本研究結(jié)果表明，河池地區(qū)C型乙型肝炎病毒DNA定量測定值較B型高，表明該地區(qū)C型HBV DNA復(fù)制更加活躍。目前，乙型肝炎發(fā)病機(jī)制中乙型肝炎病毒的復(fù)制狀態(tài)與其基因型之間的關(guān)系尚無定論，但乙型肝炎病毒誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)及血清中高拷貝的乙型肝炎病毒是其發(fā)病危險(xiǎn)因素之一［11］。文獻(xiàn)報(bào)道，B型乙型肝炎病毒較C型乙型肝炎病毒更容易通過前C區(qū)變異誘導(dǎo)E抗原的轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)歸及預(yù)后較C型好［12］。在本研究中，通過對154例患者乙型肝炎E抗原定量檢測顯示，C型乙型肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型，C型乙型肝炎病毒復(fù)制較活躍，易形成持續(xù)的病毒血癥，但不易發(fā)生E抗原的轉(zhuǎn)化。研究表明，抗乙型肝炎病毒的藥物治療，尤其是干擾素治療的臨床療效與HBV DNA的載量水平直接相關(guān)［13-16］。HBV DNA載量低，則干擾素治療療效好；HBV DNA載量高，則干擾素治療療效差。

本研究統(tǒng)計(jì)分析2014年河池地區(qū)乙型肝炎病毒基因型的分布情況及與乙型肝炎病毒DNA定量、表面抗原各項(xiàng)指標(biāo)的關(guān)系，對本地區(qū)乙型肝炎病毒各基因型的特點(diǎn)做了初步的研究，對進(jìn)一步明確乙型肝炎病毒的分子流行病學(xué)特點(diǎn)、闡明發(fā)病機(jī)制和臨床治療的療效等都具有重要意義。

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Distribution and correlation research of hepatitis B virus genotypes in Hechi area

TANG Yufan1★，WEIGuining2
（1.Department of Clinical Laboratory，the People’s Hospital of Du’an，Hechi，Guangxi，China，530700；2.Guangxi Institute of Chinese Medicine＆amp;Pharmaceutical Science，Nanning，Guangxi，China，530022）

Objective To investigate the distribution of hepatitis B virus（HBV）genotypes in patients with HBV in Hechiarea，and explore the relationship of HBV genotype and HBV quantitative analysis. Methods HBV genotypes from 154 patients in Hechiarea were detected by polymerase chain reaction-reverse dot blot，the level of HBV-DNA by fluorescent quantitative PCR，and the level of HBV E-antigen by time resolved fluoro-immunoassay.Results Of all patients with HBV，53.9％（83/154）were type B，44.2％（68/ 154）were type C and 1.6％（3/154）were type B/C.There were no significant differences in the constituent ratio of HBV in gender.The level of DNA，the content of E antigen in genotype C were significantly higher than those in genotype B.Conclusion Genotype B，C and B/C of HBV existed in Hechi area.The genotype C was the major genotype，followed by genotype C.The level of DNA in genotype Cwas significantly higher than that in genotype B.

Hepatitis B virus；Genotypes；DNA；HBV E-antigen

廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科技專項(xiàng)（GZZJ13-15）

1.都安縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西，河池530700 2.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西，南寧530022

★通訊作者：唐毓凡，E-mail：1933730679@QQ.com