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    不同抗氧化活性蔬菜汁對(duì)大鼠血清代謝組的影響

    2016-11-12 06:21:10高蔚娜陳玉霞蒲玲玲韋京豫吳健全郭長(zhǎng)江軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所天津00050徐州空軍學(xué)院江蘇徐州22000天津市健康教育所天津000
    食品科學(xué) 2016年11期
    關(guān)鍵詞:蔬菜汁代謝物灌胃

    高蔚娜,陳玉霞*,蒲玲玲,韋京豫,吳健全,郭長(zhǎng)江,*(.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所,天津 00050;2.徐州空軍學(xué)院,江蘇 徐州 22000;.天津市健康教育所,天津 000)

    不同抗氧化活性蔬菜汁對(duì)大鼠血清代謝組的影響

    高蔚娜1,陳玉霞2,*,蒲玲玲1,韋京豫1,吳健全3,郭長(zhǎng)江1,*
    (1.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所,天津 300050;2.徐州空軍學(xué)院,江蘇 徐州 221000;3.天津市健康教育所,天津 300011)

    目的:研究不同抗氧化活性蔬菜汁對(duì)大鼠血清代謝組的影響。方法:40只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組、藕汁組、油菜汁組和黃瓜汁組,每組10 只,單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組灌胃蒸餾水,蔬菜汁組灌胃相應(yīng)的蔬菜汁。每只大鼠每天灌胃1 次,劑量為5 mL,實(shí)驗(yàn)周期為4 周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,大鼠禁食過(guò)夜,球后靜脈叢采血,離心分離血清,-20 ℃保存?zhèn)溆?。運(yùn)用基于核磁共振技術(shù)和模式識(shí)別技術(shù)的代謝組學(xué)方法,分析比較不同蔬菜汁灌胃后,大鼠血清代謝變化情況和相關(guān)代謝物的差異。結(jié)果:得分圖顯示對(duì)照組與各蔬菜汁組之間可以很好地分開(kāi),但各蔬菜汁組之間沒(méi)有明顯的界限,說(shuō)明蔬菜汁改變了大鼠血清的代謝模式。其中,含量升高的物質(zhì)包括乳酸(δ1.34、δ4.14)、膽堿(δ3.22)、β-羥丁酸(β-hydroxybutyrate,β-HB,δ1.22)和內(nèi)消旋肌醇(δ3.54)。與對(duì)照組比較,灌胃藕汁后,血清中含量升高的物質(zhì)主要有脯氨酸(δ3.38)、糖區(qū)物質(zhì)(δ3.4、δ4.1),降低的物質(zhì)主要有脂類(lèi)(δ0.9、δ1.26、δ1.3);灌胃油菜汁后,血清中升高的物質(zhì)主要有乙酰乙酸(δ2.14)、脯氨酸(δ3.38)、蘇氨酸(δ3.58),降低的物質(zhì)主要有脂蛋白(δ0.9、δ1.26、δ1.3);灌胃黃瓜汁后,含量升高的物質(zhì)有蘇氨酸(δ3.58),降低的物質(zhì)主要有脂蛋白(δ0.9、δ1.26、δ1.3)。結(jié)論:具有不同抗氧化活性的蔬菜汁,如藕汁、油菜汁和黃瓜汁均可改變大鼠血清的代謝模式,這種作用是通過(guò)影響大鼠血清中糖類(lèi)、脂類(lèi)和蛋白質(zhì)的代謝來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

    代謝組學(xué);蔬菜;抗氧化性

    蔬菜除了含有人體所需的維生素、礦物質(zhì)、纖維素等營(yíng)養(yǎng)素,還含有豐富的抗氧化物質(zhì),如VC、VE、類(lèi)胡蘿卜素和多酚類(lèi)物質(zhì)等,這些物質(zhì)與蔬菜的抗氧化活性顯著相關(guān)。實(shí)驗(yàn)前期以血漿鐵還原能力(ferric reducing ability of plasma,F(xiàn)RAP)法檢測(cè)了多種蔬菜的抗氧化能力,結(jié)果發(fā)現(xiàn),體外抗氧化活性最強(qiáng)的蔬菜是藕,油菜次之,黃瓜最弱,其中多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)蔬菜的抗氧化能力有顯著的貢獻(xiàn)[1-2]。

    代謝組學(xué)是繼基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)之后發(fā)展起來(lái)的一門(mén)學(xué)科,主要以各種代謝途徑中的底物或產(chǎn)物中的低分子質(zhì)量代謝物為研究對(duì)象,特別適合于食品、傳統(tǒng)中藥等復(fù)雜體系的研究與分析[3]。Guertin等[4]曾經(jīng)用代謝組學(xué)的方法發(fā)現(xiàn)了多種蔬菜在人體內(nèi)代謝生成的生物標(biāo)志物;Aiso等[5]報(bào)道,短期服用含有小松菜的果蔬汁可增強(qiáng)中年男性的膽固醇代謝。由于具有不同抗氧化活性的蔬菜對(duì)血清代謝組影響的報(bào)道很少,本實(shí)驗(yàn)選擇藕、油菜和黃瓜榨汁,給予大鼠灌胃4 周后,采用基于核磁共振技術(shù)的代謝組學(xué)方法,觀察這3 種蔬菜汁對(duì)大鼠血清代謝模式的影響。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物、材料與試劑

    40 只健康成年雄性2~3月齡Wistar大鼠(動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(軍)2014-0001;動(dòng)物使用許可證號(hào):SYXK(軍)2014-0004) 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

    新鮮的藕、油菜、黃瓜 天津市河西區(qū)三義莊菜市場(chǎng)。

    重水(deuterium oxide,D2O) 美國(guó)CIA公司;2,2’,3,3’-三甲基甲硅烷基丙酸(3-(trimethysilyl) [2,2’,3,3’-2H4] propionate,TSP) 加拿大默克公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    UNITYINOVA 600MHz超導(dǎo)傅里葉變換1H核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)波譜儀 美國(guó)瓦里安公司;Eppendorf 5418小型高速離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司。

    1.3 方法

    1.3.1 動(dòng)物處理

    將大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分成4 組,每組10 只,單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組灌胃蒸餾水,實(shí)驗(yàn)組分別灌胃藕汁、油菜汁和黃瓜汁。實(shí)驗(yàn)期間,每天購(gòu)買(mǎi)新鮮蔬菜,分別用自來(lái)水、蒸餾水反復(fù)沖洗干凈,晾干。將日常食用部分切成小片或段、塊,混合均勻后稱(chēng)取一定質(zhì)量,采用榨汁機(jī)榨汁后,取上層蔬菜汁備用。每天下午灌胃一次,每只大鼠灌胃劑量為5 mL,持續(xù)4 周。5 mL蔬菜汁相當(dāng)于各蔬菜鮮質(zhì)量分別為:藕汁11.4 g、油菜汁7.5 g、黃瓜汁7.0 g。實(shí)驗(yàn)期間大鼠自由攝食、飲水,每周稱(chēng)量體質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),大鼠禁食過(guò)夜,球后靜脈叢采血,離心分離血清,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3.2 NMR數(shù)據(jù)的采集

    按照吳健全等[6]所述方法,從-20 ℃冰箱中取出血清,解凍后置于離心機(jī)中,14 000 r/min離心10 min;取上清300 μL,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%100 μL TSP重水溶液、200 μL D2O,混勻后于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    測(cè)量時(shí),在UNITYINOVA 600 MHz超導(dǎo)傅里葉變換1H 核磁共振波譜儀上調(diào)用T2-弛豫時(shí)間編輯和擴(kuò)散編輯相關(guān)脈沖序列,采用預(yù)飽和2 s的方式抑制水峰,混合時(shí)間為0.15 s,選擇的譜寬為8 000 Hz,采樣點(diǎn)數(shù)32 k,累加次數(shù)64 次,預(yù)飽和頻率和中心頻率都在水峰位置。自由感應(yīng)衰減信號(hào)經(jīng)過(guò)32 k傅里葉變換轉(zhuǎn)為一維NMR譜圖。譜圖以TSP為化學(xué)位移參考,設(shè)為δ0。調(diào)用VNMR軟件中的程序,分別將δ0.5~4.5(CPMG)以及δ6.0~9.0(LED)(去除δ4.7~5.1)范圍內(nèi)的波峰,以δ0.04 為積分段進(jìn)行分段積分。將積分?jǐn)?shù)據(jù)歸一化后,以Excel文件存儲(chǔ),用于模式識(shí)別分析。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    將NMR積分結(jié)果輸入SIMCA P 10.0軟件,采用正交信號(hào)矯正(orthogonal signal correction,OSC)或偏最小二乘-辨別分析(partial least-squares discriminant analysis,PLS-DA)指導(dǎo)性模式識(shí)別技術(shù),得到得分圖和因子載荷圖,再結(jié)合NMR譜圖對(duì)樣品中代謝組變化進(jìn)行分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 血清代謝模式總體變化分析

    由弛豫編輯譜(圖1)可知,各組乳酸(δ1.34、δ4.14)含量均很高。采用PLS-DA方法對(duì)1H-NMR譜圖積分值進(jìn)行分析,得分圖顯示對(duì)照組與各蔬菜汁組之間區(qū)分明顯,但各蔬菜汁組之間沒(méi)有明顯區(qū)分(圖2A)。與對(duì)照組比較可知,藕汁、油菜汁和黃瓜汁均能改變大鼠血清的代謝模式,但各蔬菜汁之間血清的代謝模式?jīng)]有明顯區(qū)別。

    因子載荷圖表明,引起高場(chǎng)區(qū)(δ0.5~4.5)譜圖各組之間差異的主要物質(zhì)是β-羥丁酸、乳酸、膽堿、內(nèi)消旋肌醇等,因?yàn)榕c對(duì)照組比較,這些物質(zhì)的含量發(fā)生了明顯的變化(圖2B)。各組間芳香族區(qū)域(δ6~9)物質(zhì)差異不大;與對(duì)照組比較,灌胃黃瓜汁后,甲酸鹽含量降低;灌胃油菜汁后,組氨酸含量升高,其他3 組未知峰(δ6.05、δ6.07和δ6.26)變化明顯。

    圖1 攝入不同蔬菜汁后大鼠血清600 MHzz1H NMR弛豫編輯譜圖Fig. 1 600 MHz1H NMR relaxation editing spectra of rat serum after consumption of different vegetable juices

    圖2 攝入不同蔬菜汁后血清代謝物PLS-DA分析得分圖(A)和因子載荷圖(BB)Fig. 2 PLS-DA Scores plot of rat serum spectra after consumption of different vegetable juices (A) and PLS-DA loadings plot for metabolites (B)

    圖3 攝入不同蔬菜汁后大鼠血清600 MHz H NMR擴(kuò)散編輯譜圖Fig. 3 600 MHz 1H NMR diffusion editing spectra of rat serum after consumption of different vegetable juices

    圖4 攝入不同蔬菜汁后血清代謝物OSC分析得分圖(A)和因子載荷圖(BB)Fig. 4 OSC Scores plot of rat serum spectra after consumption of different vegetable juices (A) and OSC loadings plot for metabolites (B)

    擴(kuò)散編輯譜(圖3)中的信號(hào)主要為長(zhǎng)鏈脂肪酸及脂蛋白信號(hào)。相對(duì)于對(duì)照組,黃瓜汁組和藕汁組脂質(zhì)2含量升高,油菜汁組和藕汁組中N-乙酰糖蛋白含量升高,除了核磁共振圖中確定的物質(zhì)外,還發(fā)現(xiàn)1 種未知物質(zhì)(δ1.23)含量升高。其余物質(zhì)含量變化不明顯,對(duì)積分值作OSC分析,得分圖顯示對(duì)照組與各蔬菜組之間可以很好地區(qū)分,但各蔬菜組之間沒(méi)有明顯的區(qū)分(圖4)。說(shuō)明3 種蔬菜汁對(duì)機(jī)體代謝存在相似的調(diào)節(jié)作用,可以引起相同代謝物的變化。

    2.2 血清代謝模式分組變化分析

    2.2.1 藕汁組與對(duì)照組之間的比較

    進(jìn)一步采用PLS-DA方法對(duì)各組1H NMR圖進(jìn)行對(duì)比。灌胃藕汁后,血清中升高的物質(zhì)主要有乳酸(δ1.34、δ4.14)、—OCH2CH3(δ1.18)、膽堿(δ3.22)、β-羥丁酸(β-hydroxybutyrate,β-HB,δ1.22)、脯氨酸(δ3.38)、內(nèi)消旋肌醇(δ3.54)、糖區(qū)物質(zhì)(δ3.4~4.1);降低的物質(zhì)主要有脂類(lèi)(δ0.9、δ1.26、δ1.3)(圖5)。

    圖5 攝入藕汁后血清代謝物PLS-DA分析得分圖(A)和因子載荷圖(B)Fig. 5 PLS-DA Scores plot of rat serum spectra after consumption of lotus root juice (A) and PLS-DA loadings plot for metabolites (B)

    2.2.2 油菜汁組與對(duì)照組之間的比較

    灌胃油菜汁后,血清中含量升高的物質(zhì)主要有乳酸(δ1.34、δ4.14)、—OCH2CH3(δ1.18)、乙酰乙酸(δ2.14)、β-HB(δ1.22)、膽堿(δ3.22)、脯氨酸(δ3.38)、內(nèi)消旋肌醇(δ3.54)、蘇氨酸(δ3.58),含量降低的物質(zhì)主要有脂蛋白(δ0.9、δ1.26、δ1.3)(圖6)。

    圖6 攝入油菜汁后血清代謝物PLS-DA分析得分圖(A)和因子載荷圖(BB)Fig. 6 PLS-DA Scores plot of rat serum spectra after consumption of rape juice (A) and PLS-DA loadings plot for metabolites (B)

    2.2.3 黃瓜汁組與對(duì)照組之間的比較

    灌胃黃瓜汁后,血清中含量升高的物質(zhì)有—OCH2CH3(δ1.18)、β-HB(δ1.22)、乳酸(δ1.34)、膽堿(δ3.22)、內(nèi)消旋肌醇(δ3.54)、蘇氨酸(δ3.58);含量降低的物質(zhì)主要有脂蛋白(δ0.9、δ1.26、δ1.3)(圖7)。

    圖7 攝入黃瓜汁后血清代謝物PLS-DA分析得分圖(A)和因子載荷圖(BB)Fig. 7 PLS-DA Scores plot of rat serum spectra after consumption of cucumber juice (A) and PLS-DA loadings plot for metabolites (B)

    3 討 論

    代謝組學(xué)是對(duì)某一生物或細(xì)胞中所有低分子質(zhì)量代謝產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析的科學(xué),它通過(guò)檢測(cè)活體系統(tǒng)對(duì)病理生理刺激或基因改變作出的動(dòng)力學(xué)多參數(shù)代謝反應(yīng),評(píng)價(jià)體液、組織液及組織,如尿液、血液、血漿、唾液、腦脊髓液及組織中代謝物等的變化,從而推論出機(jī)體所處的狀態(tài)[7-8]。代謝組學(xué)研究主要包括代謝物分析和數(shù)據(jù)分析兩部分。數(shù)據(jù)采集技術(shù)包括核磁共振波譜分析技術(shù)(nuclear magnetic resonance,NMR)、質(zhì)譜分析技術(shù)(mass spectrometry,MS)、色譜分析技術(shù)和光譜分析技術(shù)等;數(shù)據(jù)分析主要包括數(shù)據(jù)采集、原始數(shù)據(jù)前處理、以及借助生物信息學(xué)軟件對(duì)獲得的大量多維復(fù)雜數(shù)據(jù)進(jìn)行降維處理并獲取相關(guān)信息,找出反映樣品內(nèi)在機(jī)理的、整體性差異的生物標(biāo)記物。數(shù)據(jù)分析主要分為兩類(lèi),即監(jiān)督分析法和非監(jiān)督分析法[9]。本實(shí)驗(yàn)使用的PLS-DA分析法屬于監(jiān)督分析法。目前代謝組學(xué)已在微生物和植物研究、藥物毒性和機(jī)理研究、疾病診斷、中藥活性成分分析、藥物代謝的組學(xué)分析、毒性基因組學(xué)、藥理代謝組學(xué)、中藥毒理學(xué)、臨床和營(yíng)養(yǎng)學(xué)[10-14]等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。在營(yíng)養(yǎng)學(xué)方面,Mata-Espinosa等[15]利用高效液相色譜-電霧式檢測(cè)器分析后發(fā)現(xiàn),三油酸甘油酯、1,2-油酸-3-棕櫚酸和1,2-油酸-3-甘油三亞油酸酯可作為區(qū)分橄欖油和植物油的鑒別性代謝物;Zhang Qi等[16]采用GC-MS結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析對(duì)飲食誘導(dǎo)的高脂血癥大鼠代謝物進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)β-羥基丁酸、酪氨酸和肌酸酐是潛在的生物標(biāo)記物。

    本研究結(jié)果表明,利用基于NMR的代謝組學(xué)技術(shù),不同抗氧化活性的蔬菜汁作用于大鼠后,大鼠的血清代謝模式發(fā)生了改變,各蔬菜汁組都能與對(duì)照組很好地區(qū)別開(kāi)來(lái);各蔬菜汁組發(fā)生變化的內(nèi)源性代謝物有很大的相似性,且與抗氧化性關(guān)系不明顯。與對(duì)照組比較,蔬菜汁影響了大鼠血清中的糖類(lèi)、脂類(lèi)和蛋白質(zhì)的代謝模式。灌胃蔬菜汁后,大鼠血清中β-羥丁酸、乙酰乙酸和膽堿水平升高,表明蔬菜中的某些物質(zhì)促進(jìn)了體內(nèi)酮體的生成和脂肪酸氧化。膽堿、乙酰乙酸是甲胺途徑的代謝物質(zhì),這2 種物質(zhì)含量的改變表明蔬菜汁可影響脂質(zhì)和膽固醇的代謝及轉(zhuǎn)運(yùn)[17];脯氨酸、蘇氨酸等氨基酸水平的改變,提示蔬菜對(duì)蛋白質(zhì)代謝具有調(diào)節(jié)作用;大鼠血清中的乳酸水平升高,表明灌胃蔬菜汁影響了大鼠體內(nèi)的糖代謝過(guò)程。乳酸是葡萄糖酵解的產(chǎn)物,血清中乳酸含量升高說(shuō)明大鼠體內(nèi)的糖酵解作用增強(qiáng),而有氧氧化可能受到一定程度的抑制研究顯示,如果代謝過(guò)程中氧的消耗量增加,活性氧的生成就會(huì)增多,這可能會(huì)導(dǎo)致組織或細(xì)胞的氧化損傷[18]。

    蔬菜中的胡蘿卜、萵苣、菠菜、洋蔥、甜椒、藕中都是多酚類(lèi)化合物的良好來(lái)源[19-20]。研究表明,酚類(lèi)物質(zhì)可以被機(jī)體吸收利用[21],但對(duì)其吸收進(jìn)入體內(nèi)后對(duì)內(nèi)源性代謝影響的報(bào)道并不多見(jiàn)。沒(méi)食子酸(gallic acid,GA)是蔬菜中含量豐富的一種酚類(lèi)化合物。研究結(jié)果顯示,GA可影響非酒精性脂肪肝模型小鼠的脂代謝、糖代謝(糖酵解和糖異生)、氨基酸代謝和膽堿代謝,通過(guò)這些作用發(fā)揮GA的代謝保護(hù)作用[22]。表兒茶素(epicatechin,EC)是蔬菜中含有的另外一種酚類(lèi)化合物。Solanky等[23]運(yùn)用基于NMR的代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)EC可以使SD(Sprague Dawley)大鼠內(nèi)源代謝物,如肌酐、?;撬?、檸檬酸鹽和α-酮戊二酸等水平發(fā)生明顯變化,提示EC進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)可影響內(nèi)源性物質(zhì)的代謝途徑,表現(xiàn)為代謝能力降低、碳水化合物代謝水平下降。Kim等[24]用正常飼料、高脂飼料、高脂飼料+30%煮熟的大豆粉、高脂飼料+30% 72 h發(fā)酵的大豆粉處理后,各組小鼠的血清代謝模式能夠很好地區(qū)分。PLS-DA分析結(jié)果顯示,每組可以分開(kāi)的主要原因是血清中的脂質(zhì)代謝物,如可溶性卵磷脂和卵磷脂。因此含有大豆的食物,其中所富含的異黃酮可能有助于控制高脂飲食狀態(tài)下的脂質(zhì)代謝。番茄紅素是多種蔬菜中含有的一種類(lèi)胡蘿卜素。Bernal等[25]的結(jié)果表明,高脂模型對(duì)照組與番茄汁干預(yù)組的抗氧化生物標(biāo)記物和代謝模式顯著不同,番茄汁中所含的番茄紅素可能起到了關(guān)鍵性的作用。上述研究與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有類(lèi)似之處,機(jī)體攝入多酚類(lèi)物質(zhì)、類(lèi)胡蘿卜素等物質(zhì)后,機(jī)體的代謝模式發(fā)生了明顯的變化,提示蔬菜中含有的這些物質(zhì)可能是調(diào)節(jié)內(nèi)源性代謝的重要物質(zhì)。

    綜上所述,灌胃蔬菜汁能明顯改變大鼠血清乳酸、β-羥丁酸、乙酰乙酸、膽堿、脯氨酸、蘇氨酸等物質(zhì)的含量水平,能改變外周血的代謝模式,糖類(lèi)、脂類(lèi)和蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝有所改變,提示蔬菜中的某些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的物質(zhì)代謝途徑有調(diào)節(jié)作用,蔬菜中的多酚類(lèi)物質(zhì)、番茄紅素等可能發(fā)揮了重要的作用,但各蔬菜汁之間的作用差別不明顯;各蔬菜干預(yù)組大鼠內(nèi)源性代謝的變化與相應(yīng)蔬菜的抗氧化性關(guān)系不甚密切,這一點(diǎn)值得研究者深入探討。

    [1] 陳玉霞, 郭長(zhǎng)江, 楊繼軍, 等. 不同抗氧化活性蔬菜汁對(duì)大鼠抗氧化功能的影響[J]. 中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2010,11(7): 689-691.

    [2] JI Linlin, WU Jianquan, GAO Weina, et al. Antioxidant capacity of different fractions of vegetables and correlation with the contents of ascorbic acid, phenolics and fl avonoids[J]. Journal of Food Science, 2011, 76(9): 1257-1261. DOI:10.1111/j.1750-3841.2011.02402.x.

    [3] 朱超, 胡坪, 梁瓊麟, 等. 代謝組學(xué)技術(shù)的整合運(yùn)用及其在中藥現(xiàn)代化中的應(yīng)用展望[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 43(7): 683-689. DOI:10.3321/ j.issn:0513-4870.2008.07.003.

    [4] GUERTIN K A, MOORE S C, SAMPSON J N, et al. Metabolomics in nutritional epidemiology: identifying metabolites associated with diet and quantifying theirpotential to uncover diet-disease relations in populations[J]. American Journal of Clinical Nutrition, 2014, 100(1): 208-217. DOI:10.3945/ajcn.113.078758.

    [5] AISO I, INOUE H, SEIYAMA Y, et al. Compared with the intake of commercial vegetable juice, the intake of fresh fruit and komatsuna (Brassica rapa L.var. perviridis) juice mixture reduces serum cholesterol in middle-aged men: a randomized controlled pilot study[J]. Lipids in Health and Disease,2014,13:102. DOI:10.1186/1476-511X-13-102.

    [6] 吳健全, 郭長(zhǎng)江, 高蔚娜, 等. 小鼠負(fù)重游泳后血清代謝模式變化分析[J]. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志, 2011, 27(1): 42-45.

    [7] NICHOLSON J K, LINDON J C, HOLMES E. ‘Metabonomics’: understanding the metabolic responses of living systems to pathophysiological stimuli via multivariate statistical analysis of biological NMR spectroscopic data[J]. Xenobiotica, 1999, 29(11): 1181-1189. DOI:10.1080/004982599238047.

    [8] MENNI C, ZHAI G, MACGREGOR A, et al. Targeted metabolomics profi les are strongly correlated with nutritional patterns in women[J]. Metabolomics, 2013, 9(2): 506-514. DOI:10.1007/s11306-012-0469-6.

    [9] 阿基業(yè). 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)處理方法: 主成分分析[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué), 2010, 15(5): 481-489.

    [10] DUARTE I F, ROCHA C M, GIL A M. Metabolic profiling of biofl uids: potential in lung cancer screening and diagnosis[J]. Expert Review of Molecular Diagnostics, 2013, 13(7): 737-748. DOI:10.1586 /14737159.2013.835570.

    [11] LI Zhenyu, ZHI Haijuan, ZHANG Fusheng, et al. Metabolomic profi ling of the antitussive and expectorant plant Tussilago farfara L. by nuclear magnetic resonance spectroscopy and multivariate data analysis[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2013, 75: 158-164. DOI:10.1016/j.jpba.2012.11.023.

    [12] CLAYTON T A, LINDON J C, CLOAREC O, et al. Pharmacometabonomic phenotyping and personalized drug treatment[J]. Nature, 2006, 440: 1073-1077. DOI:10.1038/nature04648.

    [13] 黃群, 楊改紅, 袁金斌, 等. 代謝組學(xué)在中藥毒理學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2014 , 25(3): 383-388. DOI:10.3969/ j.issn.1003-9783.2014.03.036.

    [14] ASTARITA G, LANGRIDGE J. An emerging role for metabolomics in nutrition science[J]. Journal of Nutrigenetics and Nutrigenomics, 2013, 6(4/5): 181-200. DOI:10.1159/000354403.

    [15] de la MATA-ESPINOSA P, BOSQUE-SENDRA J M, BRO R, et al. Discriminating olive and non-olive oils using HPLC-CAD and chemometrics[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2011, 399(6): 2083-2092. DOI:10.1007/s00216-010-4366-4.

    [16] ZHANG Qi, WANG Guangji, MA Bo, et al. Metabonomic profi ling of diet-induced hyperlipidaemia in a rat model[J]. Biomarkers, 2010, 15(3): 205-216. DOI:10.3109/13547500903419049.

    [17] LOWIS S, EASTWOOD M A, BRYDON W G. The influence of creatinine, lecithin and choline feeding on aliphatic amine production and excretion in the rat[J]. British Journal of Nutrition, 1985, 54(1): 43-51. DOI:10.1079/BJN19850091.

    [18] SOMANI S M, FRANK S, RYBAK L P. Responses of antioxidant system to acute and trained exercise in rat heart subcellular fractions[J]. Pharmacology Biochemistry Behavior, 1995, 51(4): 627-634. DOI:10.1016/0091-3057(94)00427-K.

    [19] NACZK M, SHAHIDI F. Phenolics in cereals, fruits and vegetables: occurrence, extraction and analysis[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2006, 41(5): 1523-1542. DOI:10.1016/ j.jpba.2006.04.002.

    [20] 嚴(yán)守雷, 王清章, 彭光華. 蓮藕多酚抗氧化作用研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2005, 20(4): 77-81. DOI:10.3321/j.issn:1003-0174.2005.04.018.

    [21] BARNES S, PRASAIN J, D'ALESSANDRO T, et al. The metabolism and analysis of isoflavones and other dietary polyphenols in foods and biological systems[J]. Food &Function, 2011, 2(5): 235-244. DOI:10.1039/c1fo10025d.

    [22] CHAO J, HUO T L, CHENG H Y, et al. Gallic acid ameliorated impaired glucose and lipid homeostasis in high fat diet-induced NAFLD mice[J]. PLoS ONE, 2014, 9(2): e96969. DOI:10.1371/ journal.pone.0096969.

    [23] SOLANKY K S, BAILEY N J C, ELAINE H, et al. NMR-Based metabonomic studies on the biochemical effects of epicatechin in the rat[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2003, 51(14): 4139-4145. DOI:10.1021/jf025677f.

    [24] KIM J, CHOI J N, CHOI J H, et al. Effect of fermented soybean product (Cheonggukjang) intake on metabolic parameters in mice fed a high-fat diet[J]. Molecular Nutrition & Food Research, 2013, 57(10): 1886-1891. DOI:10.1002/mnfr.201200700.

    [25] BERNAL C, MARTíN-POZUELO G, LOZANO A B, et al. Lipid biomarkers and metabolic effects of lycopene from tomato juice on liver of rats with induced hepatic steatosis[J]. Journal of Nutritional Biochemistry, 2013, 24(11): 1870-1881. DOI:10.1016/ j.jnutbio.2013.05.003.

    Effects of Vegetable Juices with Different Antioxidant Capacities on Serum Metabolome in Rats

    GAO Weina1, CHEN Yuxia2,*, PU Lingling1, WEI Jingyu1, WU Jianquan3, GUO Changjiang1,*
    (1. Institute of Health and Environment Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Tianjin 300050, China; 2. Xuzhou Air College, Xuzhou 221000, China; 3. Tianjin Institute of Health Education, Tianjin 300011, China)

    Objective: To observe the effects of vegetable juices with different antioxidant capacities on rat serum metabolome. Methods: Forty male rats were divided randomly into four groups consisting of 10 animals each, including control, lotus root juice (LRJ), rape juice (RJ), and cucumber juice (CJ) groups. The rats from the control and experimental groups were respectively administered with distilled water and vegetable juices intragastrically at a dose of 5 mL/rat once daily for 4 weeks. At the end of the experime nt, all the rats were fasted overnight and blood samples were collected from the orbital plexus. The serum was separated and stored at -20 ℃ until analysis. A metabolomic approach based on nuclear magnetic resonance analysis was used to investigate the effects of different vegetable juices on the serum metabolome in rats. Results: Scores Plot demonstrated that the control and vegetable juices groups were separated successfully, while there were no distinctive lines among three vegetable juices groups. After being treated by vegetable juices, the serum metabonome in rats changed significantly. In the vegetable juices groups, lactate (δ1.34, δ4.14), choline (δ3.22), β-hydroxybutyrate (β-HB, δ1.22) and internal compensation inositol increased in comparison to control. After being gavaged with lotus root juice, serum proline (δ3.38) and metabolites of sugar area (δ3.4, δ4.1) rose, while lipids declined (δ0.9, δ1.26, δ1.3). After being intragastrically given rape juices, acetoacetic acid (δ2.14), proline (δ3.38) and threonine (δ3.58) was increased, while lipoprotein (δ0.9, δ1.26, δ1.3) was decreased. In the cucumber juice group, threonine (δ3.58) was increased (δ3.58), while lipoproteins (δ0.9, δ1.26, δ1.3) were decreased. Conclusion: Vegetable juices with different antioxidant capacities such as lotus root juice, rape juice and cucumber juice could lead to changes in the metabolic patterns of serum sugar, lipids and protein in rats.

    metabolomics; vegetable; antioxidant capacity

    10.7506/spkx1002-6630-201611042

    R151.3

    A

    1002-6630(2016)11-0236-06

    高蔚娜, 陳玉霞, 蒲玲玲, 等. 不同抗氧化活性蔬菜汁對(duì)大鼠血清代謝組的影響[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(11): 236-241. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611042. http://www.spkx.net.cn

    GAO Weina, CHEN Yuxia, PU Lingling, et al. Effects of vegetable juices with different antioxidant capacities on serum metabolome in rats[J]. Food Science, 2016, 37(11): 236-241. (in Chinese with English abstract)DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611042. http://www.spkx.net.cn

    2015-08-19

    達(dá)能膳食營(yíng)養(yǎng)研究與宣教基金項(xiàng)目(DIC2009-09)

    高蔚娜(1977—),女,副研究員,博士,研究方向?yàn)轭?lèi)黃酮物質(zhì)的生物學(xué)活性。E-mail:gwn2004bo@126.com

    *通信作者:陳玉霞(1976—),女,講師,博士,研究方向?yàn)槭卟怂目寡趸约肮δ?。E-mail:cyx760010@163.com

    郭長(zhǎng)江(1963—),男,研究員,博士,研究方向?yàn)槭卟怂?lèi)黃酮含量及生物學(xué)活性。E-mail:guocjtj@126.com

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