流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒

李紅月，肖旭朗，王海洋，張洪賀，徐多多，王明星，高其品，高　陽(yáng)

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林省中藥大分子重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130117)

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流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒

李紅月，肖旭朗，王海洋，張洪賀，徐多多，王明星，高其品，高陽(yáng)*

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林省中藥大分子重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130117)

目的考察并優(yōu)化流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒(ETPP)工藝條件。方法以Eudragit L30-D55水分散體為包衣材料，檸檬酸三乙酯為增塑劑，滑石粉為抗黏劑，同時(shí)考察包衣后微粒的累計(jì)釋放度，制備直徑小于190 μm腸溶微粒。結(jié)果載藥量為40.62%，包封率為79.29%，酸中累計(jì)釋放度小于10%，堿液中累計(jì)釋放度大于75%,制備的微粒其平均粒徑在115～190 μm之間，圓整度、堆密度、總收率均較理想。結(jié)論應(yīng)用流化床包衣法制備ETPP，其工藝簡(jiǎn)便，穩(wěn)定可行，適合小鼠藥物藥理學(xué)和毒理學(xué)研究的需要和大工業(yè)生產(chǎn)。

銀耳多糖；銀耳多糖腸溶微粒；流化床包衣法

銀耳(Tremella fuciform Berk)是真菌類(lèi)植物，其主要化學(xué)成分為多糖類(lèi)化合物，具有提高機(jī)體免疫力等作用。但是該多糖口服不被吸收，基本無(wú)活性;靜脈給藥雖具有良好的作用，但其結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，純化困難，難以進(jìn)行靜脈給藥的新藥研發(fā)[1]。因此，如何提高其生物利用度，是該類(lèi)藥物研發(fā)面臨的瓶頸問(wèn)題。提高糖類(lèi)藥物的生物利用度，首先要克服胃酸對(duì)其水解所造成的破壞。對(duì)藥物以腸溶材料保護(hù)是常用的方法。但是該方法制備的制劑因粒徑大(>40目)[2-6]，難以對(duì)小動(dòng)物口服給藥，造成實(shí)驗(yàn)難以進(jìn)行。因此，研究制備粒徑小的腸溶微粒(球)，為藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)研究提供可行的樣品，是提高糖類(lèi)藥物生物利用度研究面臨的首要問(wèn)題。筆者以銀耳多糖為樣品,采用擠出滾圓制粒機(jī)制備銀耳多糖微粒[7]和流化床包衣機(jī)將微粒包衣，最終制備了粒徑小、分布均勻、包衣效果好、載藥量較高的ETPP。

1　儀器與試藥

Mini流化床制粒包衣機(jī)(深圳信宜特科技)；空氣壓縮機(jī)(上海捷豹壓縮機(jī)制造有限公司)；紫外分光光度計(jì)(上海菁華科技儀器有限公司)；標(biāo)準(zhǔn)分樣篩(北京海地清科技術(shù)服務(wù)儀器責(zé)任有限公司)；電子天平(福州華志科學(xué)儀器有限公司);恒溫磁力攪拌器(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司);檸檬酸三乙酯(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)；恒溫恒濕振蕩器(太倉(cāng)市試驗(yàn)設(shè)備廠)；銀耳多糖微粒(本實(shí)驗(yàn)室自制)；腸溶包衣液(Eudragit L30-D55上海昌為醫(yī)藥輔料科技有限公司),銀耳多糖微粒(平均粒徑115～190 μm之間，本實(shí)驗(yàn)室自制)。

2　方法與結(jié)果

2.1微粒流化床包衣工藝研究

2.1.1銀耳多糖微粒制備對(duì)銀耳多糖微粒處方和工藝進(jìn)行考察，確定其制備工藝為：載藥量為65%，稀釋劑為65%乙醇溶液，MCC為主要輔料，擠出速度為50 r/min，滾圓速度為1 500 r/min，滾圓時(shí)間為10 min，制備的微粒其平均粒徑在115～190 μm之間，以上制備的銀耳微粒進(jìn)行下一步包衣[8]。

2.1.2微粒包衣工藝及處方1)微粒包衣工藝：選用流化床包衣機(jī)進(jìn)行包衣[9-14]，以Eudragit L30D-55水分散體為腸溶包衣材料[15]，包衣厚度以含藥微丸增重計(jì)。取銀耳多糖微粒置于包衣機(jī)內(nèi)包衣。包衣工藝條件為噴液流速為2.5 mL/min，噴氣壓力為0.2 MPa，流化溫度為33 ℃，鼓風(fēng)流量為100 L/min，進(jìn)風(fēng)溫度為50.5 ℃，物料溫度為33.5 ℃。2)微粒包衣處方：依據(jù)銀耳多糖性質(zhì)和查閱相關(guān)文獻(xiàn)[16]，選擇包衣液的基本處方為：Eudragit L30D-55、檸檬酸三乙酯、滑石粉、氫氧化鈉水溶液和蒸餾水。包衣液配制方法如下：Eudragit L30D-55和滑石粉分別過(guò)100目藥篩，然后將Eudragit L30D-55、檸檬酸三乙酯、氫氧化鈉水溶液和蒸餾水混勻，包衣過(guò)程中根據(jù)微粒引起靜電程度，選擇加入定量的滑石粉。制備腸溶微粒置40 ℃烘箱中老化24 h。

2.1.3包衣微粒的體外釋放度實(shí)驗(yàn)1)銀耳多糖檢測(cè)波長(zhǎng)的確定： 稱(chēng)取適量銀耳多糖凍干粉、MCC和L30D-55分別用摸擬腸液溶解，于190～800 nm內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。在波長(zhǎng)276 nm處銀耳多糖有最大吸收，MCC和L30D-55無(wú)干擾，故選擇檢測(cè)波長(zhǎng)為276 nm。2)模擬胃液和模擬腸液釋放試驗(yàn)：按紫外分光光度法《中國(guó)藥典》：1部附錄IVA(2010)，在276 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算出腸溶微粒釋放度。模擬胃液作溶液的為釋放度Ⅰ，模擬腸液作溶液的為釋放度Ⅱ。

2.1.4銀耳多糖腸溶微粒釋放度考察1)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 ：①模擬腸液標(biāo)準(zhǔn)曲線為:Y=7.001 4X+0.003 8 ，r=0.999 6，在0～0.1 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好；②同法，模擬腸液標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=8.248 6X+0.009 6，r=0.996 6，在0～0.1 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好。2)包衣增重考察：基于本實(shí)驗(yàn)室中藥微粒包衣經(jīng)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)分別考察40%、50%和60%包衣增重，依據(jù) 微粒包衣處方分別包衣，以0.1 mol/L鹽酸溶液和0.2 mol/L NaH2PO4溶液為溶劑，考察不同的ETPP酸中累計(jì)釋放度Ⅰ%、緩沖液中累計(jì)釋放度Ⅱ%。結(jié)果顯示，ETPP增重為40%、50%時(shí),酸中累計(jì)釋放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累計(jì)釋放度小于10%，同時(shí)堿中累計(jì)釋放度大于75%，符合藥典對(duì)腸溶制劑要求。故包衣增重為60%。結(jié)果顯示，ETPP增重為40%、50%時(shí),酸中累計(jì)釋放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累計(jì)釋放度小于10%，同時(shí)堿中累計(jì)釋放度大于75%，符合藥典對(duì)腸溶制劑要求。故包衣增重為60%。

2.1.5釋放度驗(yàn)證試驗(yàn)將制備80-120目銀耳多糖微粒，以包衣增重60%的L30D-55包衣材料流化床底噴包衣(包衣液流速3.0 r/min)，3批平行制備ETPP(批號(hào)分別為20141211、20141212、20141213)。制得的3批ETPP進(jìn)行粉體學(xué)性質(zhì)和體外釋放度性能評(píng)價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　ETPP工藝和處方驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

由表1可見(jiàn)，流化床包衣法制備的微粒圓整度適宜，堆密度大，休止角合格，可用于釋放度的測(cè)定。

依據(jù)包衣最佳工藝，制備3批產(chǎn)品，分別測(cè)定其釋放度，酸中釋放度平均值為9.04%，堿中釋放度平均值為77.65%，同時(shí)計(jì)算3批樣品平均包封率，其包封率為79.29%，證明包衣工藝合理。

3　小結(jié)

本課題使用底噴式流化床包衣，制得ETPP質(zhì)量更穩(wěn)定，衣膜更均勻，釋放更均勻。流化床包衣后也可以掩蓋藥物的不良味道和減少藥物刺激性。

流化床包衣法制備ETPP圓整度、粒徑和均勻度均較好，可較好滿足以小動(dòng)物進(jìn)行的藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)研究要求，同時(shí)制備工藝簡(jiǎn)單易行，在將來(lái)的新劑型研究中也有良好的應(yīng)用前景。

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Preparation of enteric soluble microparticles of polysaccharide Tremella fuciform by fluid-bed coating method

LI Hongyue,XIAO Xulang,WANG Haiyang,ZHANG Honghe,XU Duoduo,WANG Mingxing,GAO Qipin,GAO Yang*

(Chinese Medicine Macromolecules Laboratory of Jilin Province,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China

ObjectiveTo review and optimize the process conditions of Enteric soluble microparticles of the polysaccharide from Tremella fuciform Berk(Tremella polysaccharide) by fluid-bed coating method.MethodsWith Eudragit L30 - D55 as coating material,triethyl citrate as plasticizer,talcum powder as the antisticking agent,the release of the inspection after the coating particles respectively in degrees,preparation of diameter of less than 190 μm particles.Results40.62% drug loading.The encapsulation efficiency is 79.29%,and the cumulative release of acid is less than 10%,the cumulative release of lye is greater than 75%.Preparation of particles of the average particle size is between 115 μm to 190 μm,its roundness,bulk density,in vitro release and total yield are ideal.ConclusionThe methods of fluidized bed coating to prepare the enteric soluble microparticles of polysaccharides are simple,stable and feasible,and the methods are suitable for preparing the sample for the functional research of enteric administration with mouse and for industrial production.

Tremella polysaccharide;Tremella polysaccharide enteric particles;fluid-bed coating method

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.05.014

吉林省重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(20140204026YY)。

李紅月(1990-)，女，碩士研究生，主要從事糖類(lèi)化合物構(gòu)效關(guān)系。

高陽(yáng)，電話-13644410003，電子信箱-756287045@qq.com

R284.1

A

2095-6258(2016)05-0919-03

2016-03-07)