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    金水寶膠囊聯(lián)合二甲雙胍對糖尿病勃起功能障礙大鼠糖代謝、AGEs及AngⅡ的實驗研究

    2016-11-09 06:25:38尤傳靜吳強楊曉玉
    中國性科學(xué) 2016年8期
    關(guān)鍵詞:血管緊張素糖化血紅蛋白血糖

    尤傳靜 吳強 楊曉玉

    【摘要】目的:觀察金水寶膠囊對糖尿病勃起功能障礙大鼠血糖、糖化血紅蛋白、晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)及血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的影響。方法:采用SD大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ),造模后第3d、第1周、第2周斷尾取血檢測血糖,當(dāng)血糖大于16.6 mmol/L時同時頸項皮膚松軟處注射阿樸嗎啡無勃起,提示糖尿病勃起功能障礙大鼠模型造模成功。將動物隨即分為金水寶高劑量治療組、金水寶中劑量治療組、金水寶低劑量治療組、陽性對照組、模型組各10只,各組間大鼠體重、血糖無顯著性差異。同時留10只作為空白對照組。給藥8周后測定大鼠血糖濃度、糖化血紅蛋白含量、AGEs及AngⅡ水平。結(jié)果:與模型組相比,金水寶高、中、低劑量治療組均能夠降低血糖、糖化血紅蛋白、AGEs及AngⅡ水平(P<0.01),但以金水寶高劑量組最顯著(P<0.01),其中血糖監(jiān)測中,金水寶中、低劑量組治療組之間無意義,糖化血紅蛋白中,金水寶低劑量治療組與陽性對照組之間無意義。AGEs及AngⅡ水平的金水寶中、低劑量治療組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:金水寶能有效協(xié)助降低血糖、糖化血紅蛋白、AGEs及AngⅡ水平,其中金水寶高劑量治療組療效最顯著,為該制劑臨床用于治療糖尿病勃起功能障礙提供了實驗理論依據(jù)。

    【關(guān)鍵詞】金水寶膠囊;血糖;糖化血紅蛋白;晚期糖基化終產(chǎn)物;血管緊張素

    Effect of Jinshuibao Capsuleand melbine on blood glucose, AGEs and AngII levels in rats with diabetic erectile dysfunctionYOU Chuanjing1, WU Qiang1△, YANG Xiaoyu2. 1. Andrology Department, Shuyang County Traditional Chinese Medicine Hospital, Suqian 235000, Jiangsu, China; 2. Reproductive Medicine Center, Jiangsu Province Peoples Hospital, Nanjing 210029, Jiangsu, China

    【Abstract】Objectives: To observe the influence of Jinshuibao Capsule and melbine on blood glucose, GHb, AGEs and AngII levels in rats with diabetic erectile dysfunction. Methods: Rats were injected with intraperitoneal STZ to establish their DED model and randomly divided into five groups: control group, model group and Jinshuibao capsule high/ medium /low dose group. The fasting blood glucose concentration, glycated hemoglobin levels and advanced glycation end-products and angiotensin of rats were determined in 8 weeks later. Results: Compared with model group, Jinshuibao capsule high, medium and low dose group and melbine can decrease the AngII level (P< 0.01), the most significant in high dose group (P< 0.01). Medium and low dose group had no statistically significant difference in blood glucose, FPG and AGEs and AngII (P>0.05); low dose group and control group had no statistically significant difference in glycosylated hemoglobin (P>0.05). Conclusions: Jinshuibao Capsule can reduce blood glucose and glycated hemoglobin level, AGEs and AngII expression, especially used in high dose, which provides basis for clinical treatment of diabetic neuropathy.

    【Key words】Jinshuibao Capsule; Blood glucose; Glycated hemoglobin; Advanced glycation end-products; Angiotensin

    【中圖分類號】R698+.1;R-33;R96;R587.1【文獻標(biāo)志碼】A

    糖尿?。╠iabetesmellitus, DM)是由遺傳、環(huán)境及其他多方面因素共同影響而引起的一系列以糖代謝紊亂為主要臨床表現(xiàn)的綜合征。目前我國糖尿病患者已有幾千萬,為全球糖尿病患者最多的國家。到目前為止無法根治,僅僅可以通過藥物、飲食、生活習(xí)慣等加以控制。糖尿病本身并不致命,但糖尿病引發(fā)的各種急慢性并發(fā)癥,往往影響了患者的工作及生活,甚至危及生命[1]。糖尿病引起的勃起功能障礙是其常見的并發(fā)癥之一。冬蟲夏草是蟲草菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲綠蝙蝠幼蟲體上的子座及幼蟲尸體。據(jù)相關(guān)研究表明,冬蟲夏草具有降糖、降血脂、抗氧化及提高免疫力等作用[2,3]。本實驗用藥為冬蟲夏草的提取物,用于糖尿病神經(jīng)血管病變,本實驗在鏈脲佐菌素性糖尿病勃起功能障礙大鼠上觀察其對血糖、糖化血紅蛋白、晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)及血管緊張素(AngⅡ)的影響,為進一步應(yīng)用提供實驗理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1主要儀器及試劑

    血糖儀及試紙(強生醫(yī)療有限公司,批號:01387129)、電子天平(北京賽多利斯天平有限公司 B303型,批號:K20080229)、STZ(美國Sigma公司,批號:F20130226)、AGEs試劑盒及AngⅡ試劑盒(上海源葉生物科技有限公司,批號:F09082011)、GHb檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:21751370)、755B紫外分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司,批號:I001023)、枸櫞酸緩沖液(北京中杉實驗公司,批號:F20100809)、金水寶膠囊(江西濟民可信金水寶有限公司,規(guī)格0.33g/粒,批號:150220,國藥準(zhǔn)字:Z1089003)、二甲雙胍片(上海信誼藥業(yè)有限公司,規(guī)格0.25g/粒,批號:1150435,國藥準(zhǔn)字:150220)。

    1.2實驗動物及分組

    選取180~220g健康雄性SD大鼠80只,均購自安徽醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心,許可證號:SCXK(皖)2011-002。分籠飼養(yǎng),標(biāo)準(zhǔn)飼料,自由飲水。動物房適應(yīng)1周后,造模前斷尾測血糖,所有大鼠血糖均在正常范圍內(nèi)(3.9~6.1mmol/L)。參照文獻[4]進行造模。造模前所有大鼠禁食12h,然后給予STZ 60mg/kg,腹腔注射,造模后第3d、第1周、第2周斷尾取血檢測血糖,當(dāng)血糖大于16.6mmol/L時,提示糖尿病模型造模成功。80只SD雄性大鼠,10只作為空白對照組,70只用于糖尿病造模,13只大鼠在造模過程中死亡,57只大鼠糖尿病模型成功。糖尿病模型造模成功后,在黑暗及安靜環(huán)境下,在大鼠頸項皮膚松軟處給予阿樸嗎啡(APO)100μg/kg注射,然后仔細觀察30min,陰莖頭充血及末端陰莖體露出則判斷為陰莖勃起。沒有勃起則提示糖尿病勃起功能障礙大鼠模型造模成功。其中2只大鼠勃起功能障礙造模失敗。再次造模成功的大鼠按隨機數(shù)字表法被隨機分成五組:金水寶高、中、低劑量治療組各10只、陽性對照組10只、模型組15只。各組間大鼠體重、血糖無顯著性差異。5只模型組大鼠在飼養(yǎng)過程中死亡,可能與持續(xù)的高血糖狀態(tài)有關(guān)。金水寶高、中、低治療組劑量分別為金水寶膠囊各1.5g/kg·d、1.0g/kg·d、0.5g/kg·d聯(lián)合二甲雙胍g/kg·d灌胃,陽性對照組僅為二甲雙胍0.2g/kg·d灌胃。模型組大鼠及空白對照組大鼠均喂以普通飼料至實驗結(jié)束。

    1.3檢測指標(biāo)及方法

    檢測血糖使用斷尾取血法,使用血糖儀檢測。實驗結(jié)束禁食12h,戊巴比妥鈉(35mg/kg)腹腔注射麻醉后,腹主動脈取血,離心,留取血清,標(biāo)記后置冰箱保存?zhèn)溆?,以檢測糖化血紅蛋白及AGEs。同時用血管緊張素放射免疫法測定血漿AngⅡ水平。

    1.4統(tǒng)計方法

    采用SPSS17.0 for windows統(tǒng)計軟件,各組計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,符合正態(tài)分布的資料,治療前后比較采用配對t檢驗,組間比較采用兩樣本t檢驗,不符合正態(tài)分布的資料,用秩和檢驗。多樣本間比較用方差檢驗。P<0.01有極顯著差異,P<0.05為有顯著差異。

    2結(jié)果

    2.1血糖的變動情況

    與空白組相比較,模型組大鼠血糖顯著升高(P<0.01),各組均能夠降低血糖,金水寶高、中、低劑量治療組及陽性對照組與模型組相比均有意義,其中金水寶中、低劑量治療組之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。金水寶高劑量治療組在降低糖尿病大鼠的血糖水平協(xié)助作用明顯。見表1。

    2.2糖化血紅蛋白水平的改變

    與空白對照組相比較,模型組大鼠糖化血紅蛋白升高明顯(P<0.01),各組均能夠降低糖化血紅蛋白水平,金水寶高、中、低劑量治療組及陽性對照組與模型組相比均差異顯著,其中金水寶低劑量治療組與陽性對照組之間相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

    2.3AGEs及AngⅡ的改變

    與空白對照組比較,模型組AGEs及AngⅡ顯著上升(P<0.01);與模型組相比,金水寶高、中、低治療組皆可降低AGEs及AngⅡ的水平(P<0.01);陽性對照組亦可降低AGEs及AngⅡ水平,經(jīng)分析有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),但金水寶中劑量治療組與低劑量治療組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

    3討論

    糖尿病勃起功能障礙屬中醫(yī)“消渴”、“陽痿”等范疇。消渴之名,首見于《素問·奇病論》:“此肥美之所發(fā)也,此人必數(shù)食甘美而多肥也,肥者令人內(nèi)熱,甘者令人中滿,故其氣上溢,轉(zhuǎn)為消渴?!?“消渴”往往辨證為腎虛血瘀,最后發(fā)展為陰陽兩虛之癥?!锻馀_秘要·消渴消中》說:“房室過度,致令腎氣虛耗故也,下焦生熱,熱則腎燥,腎燥則渴?!薄杜R證指南醫(yī)案》曰:“心境愁郁,內(nèi)火自燃,乃消證大病?!泵鞔鷱埥橘e在《景岳全書》中也有陽痿的專章論述。指出陽痿的病因“多由命門火衰、精氣虛冷,或以七情勞倦,損傷生陽之氣……亦有因濕熱熾盛,以致宗筋馳縱。”本病的基本病機為心、肝、脾、腎、肺受損,氣血陰陽虧耗,尤其是陽氣不足,以致宗脈失養(yǎng);久病入絡(luò),脈絡(luò)瘀阻,宗筋失用。其中以陽氣虧虛為主,或兼夾氣滯血瘀﹑肝郁脾虛和濕熱痰濁。本病乃為本虛標(biāo)實,虛實夾雜之證,較為復(fù)雜。金水寶膠囊的主要成分為冬蟲夏草的提取物,冬蟲夏草本身具有補益肺腎之氣及滋陰強精之效,和“消渴”之癥候符合。

    血糖的檢測,往往只能反映當(dāng)時的血糖水平,不能作為評價糖尿病控制情況的指標(biāo),而糖化血紅蛋白可以則反映在一定的時間內(nèi)整體血糖的控制情況,它是在血液中可以和葡萄糖結(jié)合的血紅蛋白,血糖的濃度越高,其基化的速度越快,同時造成長壽組織蛋白糖化,加速AGEs及AngⅡ的生成,進一步誘發(fā)糖尿病的神經(jīng)血管病變[5]。糖尿病大血管病變會直接影響到陰莖血流的灌注量,再加上長期微血管病變,起到了協(xié)同作用,導(dǎo)致陰莖海綿體組織缺氧、缺血,進而進一步破壞海綿體的超微結(jié)構(gòu),如平滑肌減少、纖維化增多和白膜損傷等。勃起功能障礙是糖尿病的常見并發(fā)癥,在糖尿病人群中,國內(nèi)外報道的發(fā)病率為19%~86.3%[6,7],是非糖尿病患者的2~5倍[8,9]。Fedel等[10]研究表明,26%(360/1383)的1型糖尿病患者和37%(3098/8373)的2型糖尿病患者存在ED,2型高于1型。孫清元等[11]調(diào)查發(fā)現(xiàn)糖尿病伴有勃起功能障礙的患病率為47.62%,明顯高于正常人群。糖尿病人患ED的發(fā)病率高達75%,尤其是中年男性患者,比非糖尿病患者高出3~5倍,并隨年齡和病程的增長明顯增加[12,13]。AGEs在血管壁的大量堆積能引起膠原纖維間過度的共價交聯(lián),使膠原纖維機械強度增加,血管硬化。因此AGEs可以通過各種途徑引起糖尿病血管病變,從而促進勃起功能障礙的發(fā)生發(fā)展。同時AGEs的形成是糖尿病神經(jīng)病變的重要因素,糖尿病患者不僅僅血清AGEs增加,周圍神經(jīng)組織中的含量也增多,最終損傷神經(jīng)功能和病理改變。其導(dǎo)致病變的機制可能為:改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進而改變其功能、抑制NO的生成、與細胞膜上的ARGE結(jié)合,改變信號傳導(dǎo)途徑,導(dǎo)致氧化應(yīng)激及免疫反應(yīng)[14]。糖尿病患者血液中AngⅡ濃度升高,尤其陰莖組織局部AngⅡ顯著增高,一方面可使得海綿體血管及海綿體平滑肌產(chǎn)生收縮,減少進入陰莖海綿體中的血液流量,同時AngⅡ還可以引起血管壁增厚,損傷血管舒縮功能,造成勃起功能障礙。有關(guān)研究表明,DM動物的血漿和組織中的AngⅡ濃度、ACE的活性顯著高于正常動物[15]。本實驗結(jié)果表明,高劑量治療組能明顯降低大鼠血糖及糖化血紅蛋白的含量,同時降低AGEs及AngⅡ,為臨床用于治療糖尿病引起的勃起功能障礙提供了理論支持。研究表明,金水寶高、中、低治療組之間,區(qū)別較明顯,說明療效與藥物濃度之間可能存在一定的關(guān)系。同時中藥提取物相對傳統(tǒng)中藥有服用簡單方便、易于吸收、副作用小的優(yōu)點,更容易被患者接受,配合原降糖藥,可以達到協(xié)助降糖,同時控制糖尿病相關(guān)神經(jīng)血管病變的作用,值得臨床推廣。

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