EBV-DNA在傳染性單核細(xì)胞增多癥中的應(yīng)用

陳云娥

（廈門市婦幼保健院兒科，福建361000）

EBV-DNA在傳染性單核細(xì)胞增多癥中的應(yīng)用

陳云娥

（廈門市婦幼保健院兒科，福建361000）

目的通過測(cè)定傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒鼻咽分泌物中EBV-DNA定量值，探討其在傳染性單核細(xì)胞增多癥中的應(yīng)用價(jià)值。方法回顧性分析2013年1月至2015年10月入住該科確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥的患兒97例，測(cè)定鼻咽分泌物EBV-DNA水平，分析EBV-DNA定量值與患兒性別、年齡、發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、異常淋巴細(xì)胞值、臟器功能損害、更昔洛韋治療的關(guān)系。結(jié)果EBV-DNA定量值在男女性別組、有無肝和（或）脾腫大組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)（P＞0.05），與年齡、發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、異常淋巴細(xì)胞值無相關(guān)性，但與白細(xì)胞計(jì)數(shù)有相關(guān)性。肝功能異常組EBV-DNA定量值高于肝功能正常組，更昔洛韋治療組EBV-DNA定量值高于非更昔洛韋治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論EBV-DNA定量值與肝功能異常及更昔洛韋治療有關(guān)；EBV-DNA定量值越高，傳染性單核細(xì)胞增多癥伴肝功能損害可能性越大，需要更昔洛韋抗病毒治療。

DNA/分析；傳染性單核細(xì)胞增多癥；更昔洛韋/治療應(yīng)用；EB病毒

傳染性單核細(xì)胞增多癥是由EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染所致的急性傳染病。臨床上以發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)及肝脾大、外周血中淋巴細(xì)胞增加并出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞等為特征。該病多呈自限性，預(yù)后良好，大多不需特殊治療，主要是對(duì)癥治療。但部分患兒病情嚴(yán)重、反復(fù)，預(yù)后差。本研究測(cè)定傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒鼻咽分泌物中EBV-DNA定量值，分析其與患兒相應(yīng)臨床指標(biāo)的關(guān)系。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2013年1月至2015年10月入住本科住院診斷為傳染性單核細(xì)胞增多癥、且進(jìn)行鼻咽分泌物EBV-DNA拷貝數(shù)檢測(cè)的患兒97例。傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷標(biāo)準(zhǔn)按文獻(xiàn)［1］方法執(zhí)行。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）慢性EBV感染；（2）合并肺炎支原體等病原感染。

1.2方法EBV-DNA拷貝數(shù)檢測(cè)：使用咽拭子管采集患兒鼻咽分泌物，密閉保存，送本院檢驗(yàn)科。用羅氏lightcycler儀器檢測(cè)EBV-DNA拷貝數(shù)，試劑盒由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，先進(jìn)行各變量的正態(tài)性檢驗(yàn)，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1所選患兒住院資料分析97例患兒中男68例，女29例，平均年齡（3.06±1.85）歲。其中發(fā)熱88例（90.7%）；扁桃體炎87例（89.6%）；頸部淋巴結(jié)腫大90例（92.7%）；皮疹20例（20.6%）；眼瞼水腫20例（20.6%）；肝脾腫大59例（60.8%）；肝功能異常46例（47.4%）。入院時(shí)發(fā)熱時(shí)間（3.57±2.40）d。EBV-DNA定量值為3×107±9×107，其中更昔洛韋治療組62例，EBV-DNA定值為4×107±1× 108；非更昔洛韋對(duì)癥治療組35例，EBV-DNA定量值為5×106±1×107。

2.2EBV-DNA定量值相關(guān)因素分析男女性別組、有無肝和（或）脾腫大組間EBV-DNA定量值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。年齡、發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、異常淋巴細(xì)胞值與EBV-DNA定量值也未見相關(guān)性。但有無肝功能異常組、是否進(jìn)行更昔洛韋治療組間EBV-DNA定量值比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.411、2.443，P=0.018、0.018），白細(xì)胞計(jì)數(shù)與EBV-DNA定量值呈正相關(guān)（R2= 0.184，P=0.001）。見表1。

表1　EBV-DNA定量值相關(guān)因素分析

3　討論

EBV是一種嗜淋巴細(xì)胞的DNA病毒，屬于皰疹病毒，小兒感染后可無癥狀或出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。6歲以下兒童多呈隱性或輕型感染，15歲以上兒童或成人感染后多出現(xiàn)典型癥狀，表現(xiàn)為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)及肝脾大、外周血中淋巴細(xì)胞增加并出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞等特征。部分患兒合并有血小板減少、粒細(xì)胞減少和貧血，少數(shù)患兒在疾病中后期臨床表現(xiàn)惡化或反復(fù)，發(fā)展為慢性EBV感染。其臨床癥狀及體征變化多樣，不典型表現(xiàn)給臨床診治帶來困難。國內(nèi)外學(xué)者均在不斷尋求新的檢測(cè)項(xiàng)目，以早期診斷，合理治療。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)EBV-DNA具有較高的敏感度和特異度，可以在早期明確病因，并準(zhǔn)確及時(shí)地反映其在體內(nèi)的消長情況，因此，其已成為檢測(cè)EBV感染的常用方法［2-3］。陳越等［4］研究顯示，鼻咽分泌物EBV的檢出率遠(yuǎn)高于靜脈血，且鼻咽分泌物標(biāo)本采集方便，更易于收集，患兒家屬也較容易接受。為此，本研究選取患兒鼻咽分泌物測(cè)定其EBV-DNA定量值，來探討EBV-DNA在傳染性單核細(xì)胞增多癥中的應(yīng)用價(jià)值。

傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒并發(fā)癥較多，以合并肝功能損害最多見［5］。本組病例肝功能損害發(fā)生率為47.4%（46/68），較相關(guān)文獻(xiàn)研究的數(shù)據(jù)低［6］。本研究結(jié)果顯示，EBV-DNA水平與肝功能損害呈正相關(guān)。目前認(rèn)為其病理機(jī)制是EBV經(jīng)繁殖復(fù)制，激活細(xì)胞免疫，影響全身淋巴組織及具有淋巴細(xì)胞的組織與器官，增生的異常淋巴細(xì)胞等浸潤至中央靜脈周圍及肝小葉，尤以臨近中央靜脈周圍肝小葉更密集，從而引起肝細(xì)胞損害［7］。

傳染性單核細(xì)胞增多癥呈自限性，預(yù)后多良好，部分病例病情嚴(yán)重，持續(xù)發(fā)熱或伴并發(fā)癥，需予抗病毒治療，臨床上予更昔洛韋抗病毒治療。本研究結(jié)果顯示，更昔洛韋治療組EBV-DNA定量值較非更昔洛韋對(duì)癥治療組高，說明更昔洛韋治療可以減少EBV的體內(nèi)拷貝數(shù)，使傳染性單核細(xì)胞增多癥的臨床癥狀得到緩解。這與文獻(xiàn)［8］研究結(jié)果是一致的。但也有文獻(xiàn)顯示EBVDNA載量與疾病嚴(yán)重程度無明顯相關(guān)性［9］。

綜上所述，在傳染性單核細(xì)胞增多癥中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)EBV-DNA可以早期明確診斷，特別是對(duì)于血EBV免疫球蛋白M（IgM）或IgG陰性的病例［10］。EBV-DNA定量值與肝功能異常、更昔洛韋治療有關(guān)。E BV-DNA定量值越高，傳染性單核細(xì)胞增多癥伴肝功能損害可能性越大，需要更昔洛韋抗病毒治療。

［1］謝正德.兒童EB病毒傳染性單核細(xì)胞增多癥臨床特征及診斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，2007，22（22）：1759-1760.

［2］黎慶梅，陳輝，莊碧英.實(shí)時(shí)熒光定量PCR在EB病毒DNA檢測(cè)中的應(yīng)用［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（13）：1423-1424.

［3］Hübner M，Bozic M，Konrad PM，et al.Analytical and clinical performance of a new molecular assay for Epstein-Barr virus DNA quantitation［J］.J Virol Methods，2015（212）：39-43.

［4］陳越，王建國，孫午.靜脈血和鼻咽分泌物EB病毒DNA檢測(cè)結(jié)果的比較［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30（5）：498-499.

［5］Nourse JP，Jones K，Dua U，et al.Fulminant infectious mononucleosis and recurrent Epstein-Barr virus reactivation in an adolescent［J］.Clin Infect Dis，2010，50（6）：e34-37.

［6］朱生東，楊紅平，晁榮，等.兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥并發(fā)肝損害相關(guān)因素分析［J］.中國婦幼健康研究，2015，26（2）：274-276.

［7］張東蘭，王淑香，張志剛，等.傳染性單核細(xì)胞增多癥并發(fā)肝損害的相關(guān)因素分析［J］.中國醫(yī)師進(jìn)修雜志，2012，35（31）：32-34.

［8］Balfour HH Jr，Hokanson KM，Schacherer RM，et al.A virologic pilot study of valacyclovir in infectious mononucleosis［J］.J Clin Virol，2007，39（1）：16-21.

［9］Odame J，Robinson J，Khodai-Booran N，et al.Correlates of illness severity in infectious mononucleosis［J］.Can J Infect Dis Med Microbiol，2014，25（5）：277-280.

［10］Vouloumanou EK，Rafailidis PI，F(xiàn)alagas ME.Current diagnosis and management of infectious mononucleosis［J］.Curr Opin Hematol，2012，19（1）：14-20.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.09.039

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1009-5519（2016）09-1382-02

（2015-12-15）