長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物各極性成分的抗氧化活性研究

郄佩娟,段旭昌,王　敏,李秀中

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,陜西楊凌 712100)

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長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物各極性成分的抗氧化活性研究

郄佩娟,段旭昌*,王敏*,李秀中

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,陜西楊凌 712100)

目的:為探明長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑提取物活性功能成分及體外抗氧化性。方法:利用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水為溶劑依次萃取長(zhǎng)裂苦苣菜全草甲醇提取物,測(cè)定不同溶劑萃取物的總酚、總黃酮及單體酚含量,采用DPPH法、ABTS法及總還原力法評(píng)價(jià)其抗氧化活性,分析其酚類(lèi)物質(zhì)含量與抗氧化活性間的相關(guān)性。結(jié)果:HPLC分析檢測(cè)到長(zhǎng)裂苦苣菜中至少含有9種單體酚成分,其含量在不同溶劑萃取物中存在顯著差異。乙酸乙酯萃取物的總酚、總黃酮含量最高,分別達(dá)到170.74 mg GA Eq./g和6.01 mg RU Eq./g,且其抗氧化活性最強(qiáng)。不同溶劑萃取物的抗氧化能力與萃取物的黃酮含量之間極顯著相關(guān)(p<0.01)。結(jié)論:長(zhǎng)裂苦苣菜中含豐富的酚類(lèi)、黃酮類(lèi)抗氧化活性成分,乙酸乙酯可作為長(zhǎng)裂苦苣菜抗氧化活性物質(zhì)富集溶劑,富集長(zhǎng)裂苦苣菜中的咖啡酸、蘆丁、葒草素、木犀草素等抗氧化活性功能成分。

長(zhǎng)裂苦苣菜,酚類(lèi)物質(zhì),高效液相色譜,抗氧化

長(zhǎng)裂苦苣菜(SonchusbrachyotusDC.)系菊科(Compositae)苦苣菜屬(Sonchus)草本植物,該屬植物全世界大約50多種,分布于歐洲、非洲與亞洲,我國(guó)有8種,分別為苣菜(SonchusoleraceusL.)、苣荬菜(SonchusarvensisL.)、花葉滇苦菜(Sonchusasper(L.)Hill)、長(zhǎng)裂苦苣菜(SonchusbrachyotusDC.)、南苦苣菜(SonchuslingianusShih)、沼生苦苣菜(SonchuspalustrisL.)、全葉苦苣菜(SonchustranscaspicusNevski)、短裂苦苣菜(SonchusuliginosusM.B.)[1]。苦苣菜在中國(guó)分布廣泛,資源豐富,因其生長(zhǎng)在山林田野間,污染少,含豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及獨(dú)特功能成分,深受人們喜愛(ài)。據(jù)《神農(nóng)本草經(jīng)》和《本草綱目》記載,其味苦性寒,有清熱解毒,消腫排膿,涼血化瘀,消食和胃,益肝利尿之功效,長(zhǎng)期被作為我國(guó)民間傳統(tǒng)中藥[2]。現(xiàn)代藥理研究表明,苦苣菜屬的化學(xué)成分復(fù)雜,至今為止從中分離得到黃酮類(lèi)、烷烴類(lèi)、萜類(lèi)、甾體類(lèi)、香豆素類(lèi)等多種活性物質(zhì),藥理活性的研究主要集中在抗腫瘤和抗氧化方面[3]。

目前,對(duì)苣荬菜、花葉滇苦菜、苦苣菜的成分和體外抗氧化活性研究表明,這些植物含有多種酚類(lèi)物質(zhì),包括兒茶酸、對(duì)香豆酸、咖啡酸、綠原酸、單寧酸等酚酸類(lèi)成分及葒草素、蘆丁、楊梅酮、木犀草素、槲皮素、山奈酚、芹菜素等黃酮類(lèi)成分,不同溶劑的萃取物均具有顯著的自由基清除活性[4-7],但對(duì)長(zhǎng)裂苦苣菜中的功能成分和活性研究報(bào)道尚少。為探索長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑提取物的功能成分和抗氧化性,本文以干燥的長(zhǎng)裂苦苣菜全草為原料,經(jīng)甲醇提取獲得甲醇提取物,然后依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水四種不同溶劑萃取長(zhǎng)裂苦苣菜全草的甲醇提取物,分析不同溶劑萃取物的功能成分及抗氧化活性,為探索長(zhǎng)裂苦苣菜的功能成分、抗氧化性及進(jìn)一步分離純化其活性成分提供一定理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

長(zhǎng)裂苦苣菜采自陜西省延安市志丹縣,經(jīng)西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院吳振海教授鑒定,將全株除敗葉清洗后于40 ℃熱風(fēng)干燥粉碎,過(guò)50目篩備用；DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)、ABTS[2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽]、Trolox(6-羥基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸)、福林酚試劑Sigma公司;蘆丁、槲皮素、兒茶素、p-羥基苯甲酸、原兒茶酸、p-香豆酸、沒(méi)食子酸、咖啡酸、葒草素HPLC≥98%，上海源葉生物科技有限公司;甲醇色譜級(jí)，安徽天地高純?nèi)軇┯邢薰?其他試劑均為市售分析純。

UV-1800型外可見(jiàn)分光光度計(jì)上海美譜達(dá)儀器有限公司;RE52-86A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上海亞榮生化儀器廠;水浴恒溫振蕩器常州國(guó)華電器有限公司;高速萬(wàn)能粉碎機(jī)天津市泰斯特儀器有限公司;HC-2516型高速離心機(jī)、KDC-40型低速離心機(jī)科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司;KQ-700DE型數(shù)控超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司;JD400-3電子分析天平沈陽(yáng)龍騰電子有限公司;LC20A型高效液相色譜儀日本島津公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1長(zhǎng)裂苦苣菜不同極性溶劑萃取物的制備稱取苦苣菜粉 270.00 g,按料液比1∶10(m/V)與甲醇溶液混勻,于30 ℃超聲波輔助提取30 min,振蕩器上振蕩提取24 h,抽濾后,將濾渣采用同樣方法重復(fù)提取2次。合并3次提取濾液,于45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去甲醇,冷凍干燥得長(zhǎng)裂苦苣菜的甲醇提取物。

稱取44.30 g甲醇提取物,用30倍質(zhì)量比的蒸餾水懸浮,混勻后轉(zhuǎn)入分液漏斗中,加入等體積的石油醚,混勻萃取30 min后靜置,待其完全分層后放出下層水溶液,水溶液用以上方法再萃取2次,將3次石油醚萃取液合并得石油醚萃取液。按同樣方法,將下層水溶液依次用乙酸乙酯、正丁醇分別萃取3次,得乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液。以上石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液及水溶液于45 ℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,將濃縮物冷凍干燥,即得長(zhǎng)裂苦苣菜的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物,稱取各萃取物質(zhì)量,并按下式計(jì)算不同溶劑萃取物得率[8]。

1.2.2總酚含量測(cè)定準(zhǔn)確稱取0.2000 g各溶劑萃取物,用甲醇溶解定容至100 mL作為樣品溶液。參照Adom[9]等人的方法,取125 μL樣品溶液及系列濃度沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(0～200 μg/mL),分別加入500 μL蒸餾水和125 μL福林酚試劑,在室溫下反應(yīng)6 min,加入1.25 mL Na2CO3溶液(7%(m/V))與1 mL蒸餾水混勻,置于暗處反應(yīng)90 min。在760 nm處測(cè)定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),沒(méi)食子酸濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:y=0.0032x+0.0058,R2=0.9992,利用回歸方程計(jì)算樣品中總酚含量,以μg GA Eq./g DW表示。

1.2.3總黃酮含量測(cè)定準(zhǔn)確稱取0.2000 g各溶劑萃取物,用甲醇溶解定容至10 mL作為樣品溶液。參照Inglett G E[10]的方法,取150 μL樣品溶液及系列濃度蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液(0～84 μg/mL),分別加入200 μL NaNO2溶液(5%，m/V),混勻反應(yīng)6 min,再加入200 μL Al(NO3)3溶液(10%，m/V),混勻靜置6 min,最后加入2 mL NaOH溶液(4%，m/V)與2.45 mL蒸餾水混勻,反應(yīng)15 min后,于510 nm處測(cè)定吸光值。以吸光值為縱坐標(biāo),蘆丁濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:y=0.0109x+0.0033,R2=0.9996,利用回歸方程計(jì)算樣品的總黃酮含量,以μg RU Eq./g DW表示。

1.2.4酚類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)方法準(zhǔn)確稱取0.2000 g各溶劑萃取物,用甲醇溶解定容至100 mL作為樣品溶液,采用HPLC法測(cè)定各溶劑萃取物中的酚類(lèi)物質(zhì)。

測(cè)定條件:色譜柱為Waters Symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱溫30 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm;流動(dòng)相A為H2O/冰醋酸(99.5:0.5,V/V),流動(dòng)相B為甲醇;洗脫條件為0～10 min 10%流動(dòng)相B,10～30 min 20%流動(dòng)相B,30～40 min 40%流動(dòng)相B,40～60 min 60%流動(dòng)相B,60～70 min 10%流動(dòng)相B,流速為1 mL/min。根據(jù)樣品與標(biāo)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性,采用峰面積外標(biāo)單點(diǎn)法定量,物質(zhì)含量以mg/100 g DW表示。

1.2.5抗氧化活性測(cè)定準(zhǔn)確稱取各溶劑萃取物和VC各0.0500 g,用甲醇溶解定容至25 mL得2 mg/mL儲(chǔ)備液,將儲(chǔ)備液再用甲醇依次稀釋到濃度為25、50、100、150、200、250 μg/mL,進(jìn)行抗氧化性能測(cè)定。

1.2.5.1DPPH·清除能力測(cè)定參照Gao[11]方法,略有改動(dòng)。準(zhǔn)確稱取0.0050 g DPPH,用甲醇溶解定容至100 mL配置成DPPH工作液。取濃度25、50、100、150、200、250 μg/mL的各溶劑萃取物和VC溶液1 mL,分別加入1 mL DPPH溶液,混勻,室溫避光條件下反應(yīng)30 min,在517 nm處測(cè)定吸光值(A樣品)。用1 mL甲醇和1 mL DPPH工作液的混合液做對(duì)照,測(cè)定吸光值為A對(duì)照。按下式計(jì)算各溶劑萃取物及Vc對(duì)DPPH·的清除率,并計(jì)算EC50值(EC50值表示使自由基濃度降低為50%時(shí)抗氧化劑的濃度)。

1.2.5.2ABTS+·清除能力測(cè)定參照Khan R A[5]的方法,略有改動(dòng)。配制7.0 mmol/L的ABTS溶液和2.45 mmol/L的過(guò)硫酸鉀溶液,將兩種溶液等體積混勻,在黑暗室溫條件下反應(yīng)12 h后,取一定體積的溶液用甲醇稀釋至吸光值在734 nm處為0.7±0.02。取濃度25、50、100、150、200、250 μg/mL的各溶劑萃取物和VC溶液300 μL,加入3 mL ABTS+·溶液混勻,反應(yīng)6 min后在734 nm處測(cè)定吸光值(A樣品)。300 μL甲醇溶液和3 mL ABTS+·溶液做對(duì)照,測(cè)定吸光值(A對(duì)照)。按下式計(jì)算各溶劑萃取物及VC對(duì)ABTS+·的清除率,并計(jì)算EC50值。

1.2.5.3總還原力的測(cè)定參照國(guó)旭丹[8]等人所述方法,取濃度25、50、100、150、200、250 μg/mL的各溶劑萃取物和Vc溶液500 μL,依次加入0.2 mol/L磷酸緩沖液(pH=6.6)和鐵氰化鉀溶液(1%，m/V)各1 mL,于50 ℃保溫反應(yīng)20 min,快速冷卻后立即加入1 mL三氯乙酸溶液(10%，m/V)終止反應(yīng)。再依次加入0.7 mL FeCl3溶液(0.1%，m/V)和3.5 mL蒸餾水,暗處反應(yīng)30 min后于700 nm下測(cè)定吸光值(A樣品),將樣品溶液換做甲醇做實(shí)驗(yàn)對(duì)照,測(cè)定吸光值(A對(duì)照)。各溶劑萃取物VC的總還原力按照以下公式計(jì)算:

1.3數(shù)據(jù)處理

采用Excel及SPSS 18.0軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。

2　結(jié)果與分析

2.1各萃取物得率

長(zhǎng)裂苦苣菜的甲醇提取物得率為16.61%。其甲醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物得率分別為32.25%、5.08%、5.61%、50.41%,其中水的萃取率最高,其次是石油醚、正丁醇,乙酸乙酯萃取率最低。依據(jù)相似相溶原理推測(cè),長(zhǎng)裂苦苣菜中極性物質(zhì)含量最多,非極性物質(zhì)含量次之,中等級(jí)性物質(zhì)含量較低。

2.2不同溶劑萃取物中總酚和總黃酮含量

不同溶劑萃取物中總酚和黃酮含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1。從圖1可知,總酚和總黃酮在不同溶劑的萃取物中的含量差異明顯,其中以乙酸乙酯萃取物的總酚和總黃酮含量最高,分別為170.74 mg GA Eq./g和6.01 mg RU Eq./g;其次是正丁醇萃取物,分別為116.01 mg GA Eq./g和3.63 mg RU Eq./g;甲醇提取物總酚和總黃酮含量高于水和石油醚萃取物,而顯著低于乙酸乙酯和正丁醇萃取物,石油醚萃取物中的總酚和總黃酮含量最低。由此可知,乙酸乙酯從甲醇提取物中富集的酚類(lèi)活性成分最多,可見(jiàn)四種溶劑對(duì)甲醇提取物的粗分是有效的。

2.3不同溶劑萃取物中酚類(lèi)組成

圖1　長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物總酚和總黃酮含量Fig.1　Content of total phenolic and flavonoidin different solvent extracts of S.brachyous DC注:同系列不同字母代表差異顯著(p<0.05)。

長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物中單體酚含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖2、圖3和表1。由于標(biāo)準(zhǔn)品有限,未能對(duì)所有峰作出鑒定。從表1可知,長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物中均含有原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、對(duì)香豆酸、葒草素、蘆丁、楊梅酮、槲皮素、木犀草素9種酚類(lèi)物質(zhì),石油醚萃取物中不含槲皮素,水萃取物中不含對(duì)香豆酸、木犀草素?？Х人帷⑻J丁、葒草素、木犀草素、楊梅酮、對(duì)香豆酸主要分布在乙酸乙酯萃取物中,其中咖啡酸含量最高,達(dá)18.24 mg/g DW,分別約為甲醇提取物、正丁醇、石油醚、水萃取物含量的26、61、114、608倍;其次是蘆丁(11.91 mg/g DW),其含量約為甲醇提取物、正丁醇、水、石油醚萃取物含量的9、2、10、80倍;此外,葒草素、木犀草素、楊梅酮、對(duì)香豆酸在乙酸乙酯萃取物中的含量也都遠(yuǎn)大于其它溶劑萃取物。綠原酸和槲皮素主要分布在正丁醇萃取物中,綠原酸含量最高(8.23 mg/g DW),分別約為甲醇提取物、乙酸乙酯、石油醚、水萃取物含量的5、4、820、3倍;槲皮素含量為3.00 mg/g DW,分別約為甲醇提取物、乙酸乙酯、水萃取物含量的7、10、21倍。原兒茶酸主要分布于水萃取物中,其含量分別為甲醇提取物、水、石油醚萃取物含量的2、8、43倍。

表1　長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物中單體酚含量比較

圖2　多酚混合標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖Fig.2　HPLC chromatograms of phenoliccomponents of standard mixture 注:1.原兒茶酸,2.兒茶酸,3.對(duì)羥基苯甲酸,4.綠原酸,5.香草酸,6.咖啡酸,7.丁香酸,8.對(duì)香豆酸,9.葒草素,10.蘆丁,11.楊梅酮,12.肉桂酸,13.槲皮素,14.木犀草素。

圖3　乙酸乙酯萃取物的高效液相色譜圖Fig.3　HPLC chromatograms of ethylacetate extracts of S. brachyous DC注:1.原兒茶酸,2.綠原酸,3.咖啡酸,4.對(duì)香豆酸,5.葒草素,6.蘆丁,7.楊梅酮,8.槲皮素,9.木犀草素。

注:同行不同字母代表差異顯著(p<0.05),nd代表未檢出。

由此可知,長(zhǎng)裂苦苣菜中含有咖啡酸、綠原酸、葒草素、蘆丁、對(duì)香豆酸等至少9種酚類(lèi)物質(zhì),可采用乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行富集,獲得長(zhǎng)裂苦苣菜的不同功能組分,其中以乙酸乙酯主要富集長(zhǎng)裂苦苣菜中的咖啡酸、蘆丁、葒草素、木犀草素等成分,正丁醇主要富集綠原酸和槲皮素。

2.4不同溶劑萃取物抗氧化活性

長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物的抗氧化特性測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖4～圖6。由圖4可知,不同溶劑萃取物均表現(xiàn)出對(duì)DPPH·的清除能力,清除能力隨質(zhì)量濃度的增大而增強(qiáng),二者成明顯的量效關(guān)系,但均弱于對(duì)照VC。不同溶劑萃取物清除DPPH·的能力差異顯著,其清除能力強(qiáng)弱次序?yàn)橐宜嵋阴ポ腿∥?正丁醇萃取物>水萃取物>甲醇提取物>石油醚萃取物,乙酸乙酯萃取物清除DPPH·的EC50為81.629 μg/mL,大于抗壞血酸清除DPPH·的EC50值(32.473 μg/mL)。說(shuō)明長(zhǎng)裂苦苣菜的抗氧化活性成分主要集中于乙酸乙酯,且清除DPPH·的能力約為VC清除能力的1/3。

圖4　長(zhǎng)裂苦苣菜不同萃取物質(zhì)量濃度對(duì)DPPH·清除能力的影響Fig.4　Effect of the concentration of different solvent extractsfrom S. brachyotus DC. on scavenging rate for DPPH free radicals

由圖5分析知,長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物都表現(xiàn)出對(duì)ABTS+·的清除能力,其清除能力隨萃取物濃度的增大而增強(qiáng),二者在25～250 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(R2=0.9588～0.9988)。不同溶劑萃取物清除ABTS+·的能力差異顯著,其強(qiáng)弱次序?yàn)橐宜嵋阴ポ腿∥?正丁醇萃取物>甲醇提取物>水萃取物>石油醚萃取物,其中乙酸乙酯萃取物對(duì)ABTS+·的清除能力的EC50值為117.161 μg/mL,約為抗壞血酸清除能力的1/6(19.598 μg/mL),這再次表明長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物中的抗氧化物質(zhì)集中在乙酸乙酯相中。

圖5　長(zhǎng)裂苦苣菜不同萃取物質(zhì)量濃度對(duì)ABTS+·清除能力的影響Fig.5　Effect of the concentration of different solvent extractsfrom S. brachyotus DC. on scavenging rate for ABTS free radicals

由圖6知,長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物的Fe3+還原能力與萃取物質(zhì)量濃度在25～250 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的量效關(guān)系(R2=0.9168～0.9976),萃取物濃度越大,還原能力越強(qiáng),抗氧化活性越強(qiáng)。不同溶劑萃取物的Fe3+還原能力為乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>甲醇提取物>水萃取物>石油醚萃取物。由此也說(shuō)明長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物中的抗氧化物質(zhì)集中在乙酸乙酯相中。

圖6　長(zhǎng)裂苦苣菜不同萃取物質(zhì)量濃度對(duì)總還原力的影響Fig.6　Effect of the concentration of different solvent extractsfrom S.brachyotus DC. on total reducing power

綜上可知,長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物均具有抗氧化活性,但差異顯著,尤以乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性最強(qiáng),總酚、總黃酮含量也最高,說(shuō)明4種不同極性溶劑對(duì)甲醇提取物的粗分是有效的,乙酸乙酯能萃取其中的主要抗氧化活性成分。另外,本文以VC做對(duì)照,在抗氧化實(shí)驗(yàn)中VC表現(xiàn)出高效、快速的特點(diǎn),而長(zhǎng)裂苦苣菜提取物作用比較緩慢,但最終亦能達(dá)到很好的抗氧化效果,且安全無(wú)副作用。

2.5不同溶劑萃取物抗氧化能力與總酚、總黃酮含量的相關(guān)性

植物的抗氧化活性不是單獨(dú)某種化合物的作用,而是由廣泛分布在植物中多種物質(zhì)共同作用的結(jié)果,其主要依賴于多酚類(lèi)物質(zhì)的種類(lèi)和相對(duì)含量[12]。長(zhǎng)裂苦苣菜不同溶劑萃取物的抗氧化能力與總酚、總黃酮含量的相關(guān)性分析見(jiàn)表2。由表2可得出,總黃酮含量與DPPH·清除活性的EC50值達(dá)到顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.913),總酚、總黃酮含量與ABTS+·清除活性的EC50值呈極顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.957,-0.967),說(shuō)明酚類(lèi)物質(zhì)中尤其是總黃酮含量越高,其對(duì)DPPH·和ABTS+·清除能力越強(qiáng),萃取物的抗氧化活性越強(qiáng)。結(jié)果提示長(zhǎng)裂苦苣菜中黃酮類(lèi)物質(zhì)是抗氧化活性的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。

表2　長(zhǎng)裂苦苣菜不同萃取物的總酚

注:**表示在0.01水平上顯著(雙邊檢驗(yàn));*表示在0.05水平上顯著(雙邊檢驗(yàn))。

3　結(jié)論

長(zhǎng)裂苦苣菜甲醇提取物和4種不同溶劑萃取物中乙酸乙酯萃取物的總酚、總黃酮含量最高,抗氧化活性最強(qiáng)。HPLC檢測(cè)到長(zhǎng)裂苦苣菜中含有9種酚類(lèi)物質(zhì),可采用乙酸乙酯、正丁醇對(duì)長(zhǎng)裂苦苣菜中酚類(lèi)和黃酮類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行富集,獲得長(zhǎng)裂苦苣菜的不同功能組分,其中乙酸乙酯主要富集其中的咖啡酸、蘆丁等成分,正丁醇主要富集綠原酸、槲皮素。經(jīng)相關(guān)性分析,不同溶劑萃取物中總黃酮含量與抗氧化活性顯著相關(guān),可見(jiàn)黃酮類(lèi)成分是長(zhǎng)裂苦苣菜中的主要抗氧化物質(zhì)。

本文為進(jìn)一步分離純化長(zhǎng)裂苦苣菜中有效活性成分奠定基礎(chǔ),為長(zhǎng)裂苦苣菜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定及深度開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。另外,本研究認(rèn)為將長(zhǎng)裂苦苣菜開(kāi)發(fā)為一種預(yù)防和治療自由基引起的各種疾病的保健品及天然食品抗氧化劑方面具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。

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Antioxidant activity of each polar composition from methanol extracts ofSonchusbrachyotusDC.

QIE Pei-juan,DUAN Xu-chang*,WANG Min*,LI Xiu-zhong

(College of Food Science and Engineering,Northwest A&F University,Yangling 712100,China)

Objective:In order to research the active components and antioxidant activities of different solvent extracts ofSonchusbrachyotus. Result:different solvents such as petroleum ethyl,ethyl acetate,n-butanol and distilled water were used to extractS.brachyotusextracts obtained by methanol. The contents of total phenolics and flavonoids in different solvent extracts were analyzed and nine kinds of phenolics were detected by HPLC. Meanwhile,DPPH·,ABTS+· scavenging capacity and total reducing power were determined to compare antioxidant activity of different solvent extracts. The correlation between phenolics content of different solvent extracts and its antioxidant activities was analyzed. Result:There were nine kinds of phenolic components at least inSonchusbrachyotusdetected by HPLC and the contents of them were different in different solvent extracts. Ethyl acetate extracts had the highest content of total phenolics(170.74 mg GA Eq./g)and flavonoids(6.01 mg RU Eq./g)and the strongest antioxidant activity. There was significant correlation between antioxidant activities of different solvent extracts and flavonoids content. Conculsion:The datum suggested thatSonchusbrachyotuswas rich in phenolics and flavonoids which had potent antioxidant activity. Ethyl acetate could be used as solvent-extraction to obtain the antioxidant inSonchusbrachyotussuch as caffeic acid,rutin,orientin,luteolin et al.

SonchusbrachyotusDC.;phenolics;HPLC;antioxidant avtivity

2016-02-17

郄佩娟(1989-)，女，碩士，研究方向：食品營(yíng)養(yǎng)與化學(xué)，E-mail：qiepeijuan@163.com。

段旭昌(1965-)，男，副教授，研究方向：食品加工新技術(shù)與天然產(chǎn)物提取，E-mail：duanxc1965@163.com。

王敏(1967-),女,教授,研究方向:食品營(yíng)養(yǎng)與化學(xué),E-mail:wangmin20050606@163.com。

野苦菜綜合深加工橫向項(xiàng)目(A304021316);陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃項(xiàng)目(2013KTZB02-03-04)。

TS255.1

A

1002-0306(2016)16-0146-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.16.021