纈沙坦對(duì)壓力超負(fù)荷下心肌肥厚中ANF、AngⅡ水平的影響

董海英

【摘要】 目的 探討壓力超負(fù)荷下血管緊張素受體1（AT1）拮抗劑纈沙坦對(duì)心鈉素（ANF）、人血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）水平的影響。方法 24只3月齡健康 SD 雄性大鼠， 采用不完全結(jié)扎腹主動(dòng)脈方法建立大鼠高血壓心肌肥厚模型， 將其隨機(jī)分為手術(shù)組（不完全縮窄腹主動(dòng)脈）、手術(shù)加藥物組[纈沙坦1 mg/（kg·d）]及正常對(duì)照組， 每組8只。鼠尾測(cè)壓儀監(jiān)測(cè)術(shù)前及術(shù)后3、7、14、28 d各組大鼠尾動(dòng)脈血壓；測(cè)定心肌肥厚指數(shù)；應(yīng)用放射免疫分析法測(cè)定肥厚心肌ANF、AngⅡ水平。結(jié)果 術(shù)后3、7、14、28 d正常對(duì)照組和手術(shù)加藥物組收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）顯著低于手術(shù)組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；術(shù)后28 d手術(shù)加藥物組與正常對(duì)照組血壓比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。手術(shù)組心肌肥厚指數(shù)為（32.9±1.38）mg/g， 心肌ANF含量為（347.12±23.25）pg/ml， 心肌AngⅡ含量為（98.36±10.61）pg/ml， 顯著高于手術(shù)加藥物組[（27.66±2.14）mg/g、（161.92±10.69）pg/ml、（48.37±9.41）pg/ml]和正常對(duì)照組[（25.20±1.93）mg/g、（93.58±2.49）pg/ml、（35.33±6.56）pg/ml]， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。手術(shù)加藥物組的心肌ANF和AngⅡ含量高于正常對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 心肌肥厚指數(shù)及ANF、AngⅡ含量可作為間接判斷高血壓心肌肥厚程度的指標(biāo)， 纈沙坦能削弱心肌肥厚的形成， 并能降低心臟局部ANF、AngⅡ水平。

【關(guān)鍵詞】 心肌肥厚 ；心鈉素；人血管緊張素Ⅱ；纈沙坦

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.26.191

有研究表明， 心血管疾病已成我國(guó)第一大危害國(guó)人健康的疾病， 且其發(fā)病率和死亡率呈顯著上升的趨勢(shì)， 而心肌肥厚是心血管疾病獨(dú)立的危險(xiǎn)因素[1]。最近流行病學(xué)研究顯示， 心肌肥厚是缺血性心肌病、心律失常、猝死的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素[2]。對(duì)原發(fā)性高血壓能夠引起的心室肥厚在以往的研究較多， 但在分子機(jī)制水平的研究較少， 其分子機(jī)制也尚不清楚。本次實(shí)驗(yàn)研究通過對(duì)大鼠的腹主動(dòng)脈進(jìn)行不完全結(jié)扎， 引起循環(huán)系統(tǒng)壓力負(fù)荷增加， 建立高血壓心肌肥厚大鼠模型[2]， 用纈沙坦干預(yù)壓力超負(fù)荷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型， 放射免疫分析法測(cè)定肥厚心肌ANF、AngⅡ水平， 從而加深對(duì)心肌肥厚的發(fā)生機(jī)制的認(rèn)識(shí)。具體報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)大鼠為24只3月齡健康 SD 雄性大鼠， 隨機(jī)分為手術(shù)組（不完全縮窄腹主動(dòng)脈）、手術(shù)加藥物組[纈沙坦1 mg/（kg·d）]、正常對(duì)照組， 每組8只。

1. 2 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)

1. 2. 1 一般狀況觀察 在實(shí)驗(yàn)期間每天觀察記錄大鼠的精神狀態(tài)、行為、活動(dòng)度、進(jìn)食量等情況。手術(shù)組6號(hào)術(shù)后第2天， 3號(hào)7 d后死亡。

1. 2. 2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重和血壓的監(jiān)測(cè) 大鼠于實(shí)驗(yàn)第1天至采集標(biāo)本麻醉前， 測(cè)體重分別作為實(shí)驗(yàn)前體重和實(shí)驗(yàn)后體重， 實(shí)驗(yàn)后體重與實(shí)驗(yàn)前體重之差值稱為體重變化值。使用無創(chuàng)血壓測(cè)量分析各組術(shù)前血壓， 手術(shù)組、手術(shù)加藥物組分別術(shù)后3、7、14、28 d的大鼠尾動(dòng)脈血壓， 正常對(duì)照組采集標(biāo)本前血壓。

1. 2. 3 取材與樣本處理 28 d后， 完成三組血壓測(cè)定后， 開胸取出心臟， 用全心重與體重（mg/g） 比定量心肌肥大指數(shù)（HMI）。取約1 mm3室間隔中部組織， 制作4 ?m 切片， HE 染色， 光學(xué)顯微鏡觀察。另外心肌組織放入-80℃冰箱保存， 用于放免測(cè)定。

1. 2. 4 采用放射免疫法測(cè)心肌組織ANF、AngⅡ因子。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化比較 三組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重及體重變化值的平均指標(biāo)組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 三組大鼠不同時(shí)段鼠尾血壓變化比較 術(shù)后3、7、14、28 d正常對(duì)照組和手術(shù)加藥物組SBP、DBP顯著低于手術(shù)組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；術(shù)后28 d手術(shù)加藥物組與正常對(duì)照組血壓比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2. 3 三組大鼠心肌肥厚指數(shù)、心肌ANF和AngⅡ含量的變化比較 手術(shù)組心肌肥厚指數(shù)、心肌ANF和AngⅡ含量顯著高于手術(shù)加藥物組和正常對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；手術(shù)加藥物組心肌ANF和AngⅡ含量高于正常對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 心肌肥厚指數(shù)與正常對(duì)照組比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

2. 4 三組大鼠心臟病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果 手術(shù)組大部分心肌纖維腫脹， 肌內(nèi)可見束灶性纖維組織增生， 心肌細(xì)胞排列紊亂， 骨質(zhì)疏松， 細(xì)胞橫截面積較大， 心肌細(xì)胞明顯肥大。手術(shù)加藥物組：大鼠心肌也有不同程度的病理改變， 與手術(shù)組相比， 心肌損傷明顯輕。正常對(duì)照組：心肌纖維形態(tài)平均， 排列成束， 見極少結(jié)締組織， 肌束無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)， 心肌細(xì)胞排列， 形態(tài)， 染色質(zhì)明顯， 細(xì)胞橫截面積較小。

3 討論

心臟肥大是心肌細(xì)胞外部和（或）內(nèi)部刺激的自適應(yīng)響應(yīng)， 引起心肌肥大的原因包括高血壓、心肌梗死、心律失常、瓣膜病等多種疾病。在病理學(xué)上， 只有心臟肌肉細(xì)胞的體積增加， 而非數(shù)量上增多。肥大心肌雖然有利保持在心肌肥大的早期階段正常的心臟功能， 但心肌肥大不是無限度的， 如果病因歷久而不能被消除， 心肌肥厚也可以增加耗氧量和減少心肌的合規(guī)性， 則肥大心肌的功能不能長(zhǎng)期維持正常而終轉(zhuǎn)向心力衰竭。腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）管理充血性心臟衰竭的整個(gè)病理過程， 和局部RAS對(duì)靶器官的效應(yīng)更為重要。血管緊張素Ⅱ作為RAS的中心， 已經(jīng)扭轉(zhuǎn)心肌肥厚的研究重點(diǎn)和重塑[3， 4]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 腹主動(dòng)脈縮窄28 d高血壓大鼠出現(xiàn)了不同程度的心肌肥厚， AT1拮抗劑纈沙坦能減弱心肌肥厚的形成， 降低局部心肌血管緊張素Ⅱ水平， 可見血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑不僅阻斷AT1受體， 降低心腦血管局部血管緊張素Ⅱ水平及心肌保護(hù)的重建中起著非常重要的作用[5]。

心肌肥大的分子機(jī)制尚不清楚， 但從細(xì)胞水平可分為核基因轉(zhuǎn)錄激活、細(xì)胞外肥大刺激、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。心肌肥厚的本質(zhì)特征是由核基因表達(dá)的變化， 其次是胚胎心臟基因如β-MHC標(biāo)記、α-skeletal-actin、ANF表達(dá)[6]。ANF通常由心房肌細(xì)胞分泌， 分泌增加合成可作為心肌肥厚和心室肌細(xì)胞在胚胎心臟鈉元素表示一個(gè)指標(biāo)高， 可以合成更多的心臟鈉元素；出生后下降明顯， 與心肌肥大后增加。在本次實(shí)驗(yàn)中， 發(fā)現(xiàn)大鼠腹主動(dòng)脈縮窄28 d后， 心肌間質(zhì)增生， 心肌纖維增大， 纖維化， 心臟重量指數(shù)明顯增加， 心室肌鈉分泌的心臟也有明顯增加， 藥物干預(yù)后明顯減少， 這說明鈉心元素的超生理劑量也可能參與心肌肥厚的發(fā)生和發(fā)展[7]。本實(shí)驗(yàn)通過藥物AT1拮抗劑纈沙坦的干預(yù)證實(shí)了其是治療高血壓、逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的一個(gè)新策略。

綜上所述， 心肌肥厚指數(shù)及ANF、AngⅡ含量可作為間接判斷高血壓心肌肥厚程度的指標(biāo)， AT1拮抗劑纈沙坦能削弱心肌肥厚的形成， 并能降低心臟局部ANF、AngⅡ水平。

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[收稿日期：2016-07-28]