新疆天山牦牛附紅細(xì)胞體病的診斷

袁立崗，齊亞銀，李 靜，蒲敬偉，李 巖

（1. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第十二師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆烏魯木齊　830009；2. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊　830063；3. 新疆石河子大學(xué)動物科技學(xué)院，新疆石河子　832000）

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新疆天山牦牛附紅細(xì)胞體病的診斷

袁立崗1，齊亞銀3，李 靜2，蒲敬偉1，李 巖2

（1. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第十二師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆烏魯木齊830009；2. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊830063；3. 新疆石河子大學(xué)動物科技學(xué)院，新疆石河子832000）

為查明導(dǎo)致新疆天山放牧牦牛貧血、消瘦的原因，對疑似病牛進行病理剖檢觀察，同時采集可疑牦牛血液（抗凝血）50份，采用血液滴片法和推片染色法進行鏡檢。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病牛眼結(jié)膜和胸腔、腹腔內(nèi)各臟器表面粘膜均呈現(xiàn)不同程度的黃染；10頭病牛紅細(xì)胞的變形率超過20%，其中7頭變形率超過50%；紅細(xì)胞表面呈現(xiàn)低色素性，并附著形態(tài)不一的附紅細(xì)胞體。結(jié)果揭示，附紅細(xì)胞體為此次牦牛貧血、消瘦的主要病因；在平時的飼養(yǎng)管理中，應(yīng)防止牛群之間的交叉感染，尤其是在免疫接種時，要注意勤換針頭。

天山牦牛；附紅細(xì)胞體；診斷

附紅細(xì)胞體病是由血液原蟲——附紅細(xì)胞體（EP）寄生于紅細(xì)胞表面或游離于血漿、組織液及腦脊液中引起的人獸共患傳染病，臨床上以發(fā)熱、溶血性貧血和黃疽為主要特征［1-3］。早在1928年，英國人Schilling報道了關(guān)于嚙齒類動物的附紅細(xì)胞體?。?］，隨后世界各地關(guān)于各種動物附紅細(xì)胞體的報道不斷出現(xiàn)。在我國，附紅細(xì)胞體病主要見于豬、牛、羊和寵物，但至今未查閱到關(guān)于牦牛附紅細(xì)胞體病的詳細(xì)研究報道。

1　背景

2014年冬季，新疆天山牦牛放牧區(qū)的牦牛出現(xiàn)了不同程度的貧血、消瘦、食欲不佳現(xiàn)象，給當(dāng)?shù)啬撩駧砹溯^大的經(jīng)濟損失。為查明導(dǎo)致該病變的主要原因，采用病例剖檢、發(fā)病史調(diào)查及實驗室檢測相結(jié)合的手段，開展了本次調(diào)查。

2　材料與方法

2.1材料

2.1.1樣品來源。放牧牦?？鼓獦悠?0份。

2.1.2儀 器 及 試 劑。 顯 微 鏡（OLYMPUS CX22）、抗凝采血管、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、瑞氏染液（自配）。

2.2方法

2.2.1血樣采集。頸靜脈無菌采集牦牛血液。

2.2.2解剖與病變觀察。按照常規(guī)剖檢方法，觀察牦牛眼結(jié)膜、陰道粘膜、各臟器（肝臟、脾臟、腸道表面等）表面顏色等。

2.2.3血液推片、染色、鏡檢。將采集的1滴牦牛抗凝血（約15微升），以45度斜角均勻推片，在血涂片反面用記號筆標(biāo)記，用瑞氏染液染色，置10×100倍油鏡下觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)：高倍鏡下，在紅細(xì)胞分布區(qū)觀察8～10個視野，若紅細(xì)胞周圍呈波浪狀、星芒狀、鋸齒狀改變，且周圍有染成紫色的各種形態(tài)（如星形、啞鈴形、點狀，等等）的附紅細(xì)胞體即為陽性，反之則為陰性。

2.2.4血液直接滴片鏡檢。將采集的新鮮血樣加等量的生理鹽水稀釋后，吸取1滴置于載玻片上，加蓋玻片，置10×100倍油鏡下觀察。按紅細(xì)胞變形率來判定：變形率10%為“-”，變形率 在10%～20%為“+”，20%～50%為“++”，50%～75%為“+++”，≥75%為“++++”。

3　結(jié)果

3.1臨床病理剖檢結(jié)果

疑似病例消瘦，眼結(jié)膜黃染，胸腔臟器表面、肝臟表面、腸道表面粘膜均呈現(xiàn)不同程度的黃染（圖1）。

3.2血液推片、染色、鏡檢結(jié)果

血液推片，瑞氏染色，然后在10×100倍油鏡下觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，牦牛紅細(xì)胞變形，紅細(xì)胞表面呈較為嚴(yán)重的低色素性（圖2）；牦牛紅細(xì)胞表面附著各種形態(tài)的附紅細(xì)胞體，有逗點狀、啞鈴狀、長桿狀等（圖3）；并且牦牛的紅細(xì)胞變形率均接近50%（圖3～4）。

圖1　牦牛臟器表面粘膜黃染

圖2　牦牛紅細(xì)胞推片、染色、鏡檢結(jié)果

圖3　牦牛紅細(xì)胞推片結(jié)果（瑞氏染色、鏡檢）

圖4　牦牛紅細(xì)胞推片結(jié)果（瑞氏染色、鏡檢）

3.3血液直接滴片鏡檢結(jié)果

血液滴片檢查結(jié)果顯示，50頭試驗牛中，10頭牛的紅細(xì)胞變形率超過20%，其中7頭牛的紅細(xì)胞變形率超過50%。

表1　疑似感染牦牛紅細(xì)胞變形率統(tǒng)計結(jié)果

4　討論

經(jīng)查閱相關(guān)資料，未見關(guān)于牦牛附紅細(xì)胞體病的相關(guān)報道。本研究從臨床病例觀察、解剖觀察、病牛血樣的采集、血液推片染色鏡檢、血液滴片制備及觀察等五個方面，對此次牦牛附紅細(xì)胞體病疫情進行了確診。

附紅細(xì)胞體一般多發(fā)于蚊蟲滋生的夏季，進行過免疫接種的牛群，流行病學(xué)調(diào)查表明，此次疫情的發(fā)生可能與人為操作失誤有關(guān)。

附紅細(xì)胞體的分類到目前為止還尚未明確，但最新分析結(jié)果表明［5］，附紅細(xì)胞體屬于柔膜體綱血支原體屬，是一種較為嚴(yán)重的人獸共患病原體。鑒于牦牛附紅細(xì)胞體病較少發(fā)生，應(yīng)提高飼養(yǎng)人員的防護意識，防止附紅細(xì)胞體病在本地區(qū)牦牛中再次發(fā)生。

［1］ 趙曉薇. 附紅細(xì)胞體病的研究進展［J］.中國人獸共患病學(xué)報，2007，23（10）：1047-1049.

［2］ 蔡寶祥. 家畜傳染病學(xué)［M］. 4版. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：141-143.

［3］ 李花，李海峰，許應(yīng)天. 實驗動物附紅細(xì)胞體感染率變化規(guī)律初探［J］. 延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報，2007，29（2）：134-137.

［4］ 吳文德，劉福懷，黃維義，等. 牛附紅細(xì)胞體?。跩］. 中國獸醫(yī)雜志，2004，40（10）：51-52.

［5］ 張浩吉，顧萬軍，王政富，等. 溫氏附紅細(xì)胞體部分16S rRNA基因的序列測定和分析［J］. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2006，28（2）：152-155.

（責(zé)任編輯：朱迪國）

Diagnosis on Eperythrozoonosis of Tianshan Yaks in Xinjiang Autonomous Region

Yuan Ligang1，Qi Yayin3，Li Jing2，Pu Jingwei1，Li Yan2
（1. Animal Husbandry and Veterinary Station of the Agricultural Division Twelve in Xinjiang Production and Construction Corps，Urumqi，Xinjiang 830009；2. Animal Husbandry and Veterinary Station of the Xinjiang Production and Construction Corps，Urumqi，Xinjiang 830063；3. College of Animal Science and Technology，Shihezi，Xinjiang 832000）

In order to fi nd out the cause of anemia and weight loss in grazing yaks，the suspected yaks were observed by pathological examination，50 blood samples（anticoagulant）were collected by blood droplet method and slide staining method. Results showed that the eye conjunctiva，the chest and abdominal cavity viscera mucosal surfaces of infected yaks presented different degrees of stained yellow；The erythrocyte deformation rate of 10 infected yaks were more than 20%，in which 7 infected yaks were more than 50%；Erythrocyte surface presented hypochromic and was adhered different forms of Eperythrozoon. The test results revealed that Eperythrozoon was the main cause of anemia and weight loss of yaks. Therefore，during the normal feeding and management，the cross-infection between the yaks should be controlled，the syringe needles should be frequently changed，especially in the time of vaccination.

Tianshan yaks；Eperythrozoon；diagnosis

S851.3

B

1005-944X（2016）09-0014-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.09.005

兵團科技支疆專項——天山牦牛主要疫病流行病學(xué)調(diào)查及防控措施的研究（2010ZJ0）

齊亞銀