酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊免疫球蛋白及細(xì)胞因子的影響

郭元晟，靳 鵬

（1.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊免疫球蛋白及細(xì)胞因子的影響

郭元晟1，靳 鵬2

（1.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.河北省灤平縣農(nóng)牧局，河北 灤平 068250）

［目的］通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)研究日糧中添加酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關(guān)鍵細(xì)胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供理論依據(jù)。［方法］采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機(jī)分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組）。其中，Ⅰ組為對(duì)照組，日糧中添加無(wú)機(jī)硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎(chǔ)），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的酵母硒。預(yù)飼期15 d，正飼期60 d。［結(jié)果］在日糧中添加酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA以及細(xì)胞因子IL-1、IL-2及IL-6的含量。［結(jié)論］在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強(qiáng)效果，以添加0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）效果最佳。

酵母硒；烏珠穆沁羊；免疫功能；細(xì)胞因子

牲畜的各種疾病給畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。多年以來(lái)，人們通過(guò)在飼料中添加一定量的抗生素來(lái)減少牲畜疾病的發(fā)生。但是，隨著使用抗生素添加劑的弊端逐漸被人們所認(rèn)識(shí)，研究人員開(kāi)始致力于開(kāi)發(fā)安全可靠的飼料添加劑以提升動(dòng)物的健康水平，從而提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。免疫球蛋白普遍存在于血液、組織液、外分泌液中，具有抗菌、抗病毒、激活補(bǔ)體等生物學(xué)功能，可以體現(xiàn)動(dòng)物免疫功能的強(qiáng)弱。其中IgG、IgM、IgA是動(dòng)物血清中重要的免疫球蛋白，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤及中和毒素等作用［1］。 白細(xì)胞介素（interleukin，IL）是由免疫系統(tǒng)、造血系統(tǒng)或炎癥反應(yīng)中的活化細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)—內(nèi)分泌效應(yīng)等有重要的影響。白介素1（IL-1）來(lái)自激活的單核巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞，能促進(jìn)T細(xì)胞的激活，是造血生長(zhǎng)因子的輔助因子。白介素2（IL-2）由T細(xì)胞產(chǎn)生，可以引起T細(xì)胞增殖并維持T細(xì)胞在體外的持續(xù)生長(zhǎng)，故稱(chēng)為T(mén)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。白介素6（IL-6）是機(jī)體為保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而分泌的一種多功能細(xì)胞因子，在B細(xì)胞生長(zhǎng)分化時(shí)起關(guān)鍵作用，故稱(chēng)為B細(xì)胞生長(zhǎng)因子。因此，血清免疫球蛋白及細(xì)胞因子水平是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)，可以反映機(jī)體的免疫功能狀態(tài)［2］。大量研究證實(shí)，膳食或動(dòng)物飼料中添加礦物質(zhì)元素硒，對(duì)人或動(dòng)物機(jī)體具有營(yíng)養(yǎng)及免疫調(diào)節(jié)作用［3］。該研究旨在通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)研究日糧中添加酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊免疫球蛋白及關(guān)鍵細(xì)胞因子的影響，為合理確定內(nèi)蒙古錫林郭勒地區(qū)烏珠穆沁羊日糧中酵母硒的適宜添加量以及酵母硒在該地區(qū)肉羊養(yǎng)殖中的推廣使用提供依據(jù)。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

表2 烏珠穆沁羊血清中IgG含量測(cè)定結(jié)果 g/L

表3 烏珠穆沁羊血清中IgM含量測(cè)定結(jié)果 g/L

表4 烏珠穆沁羊血清中IgA含量測(cè)定結(jié)果 g/L

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 5～6月齡的健康烏珠穆沁羊240只，體重相近。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將240只健康烏珠穆沁羯羊隨機(jī)分成4組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組），每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。其中Ⅰ組為對(duì)照組，日糧中添加無(wú)機(jī)硒（亞硒酸鈉）0.3 mg/kg（DM基礎(chǔ)），其他3組為酵母硒組，日糧中分別添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM 基礎(chǔ)）的酵母硒。 預(yù)飼期 15 d，正飼期60 d。

1.3 飼養(yǎng)管理及試驗(yàn)日糧 實(shí)驗(yàn)羊只進(jìn)欄前對(duì)羊舍進(jìn)行全面消毒，預(yù)飼期間對(duì)羊只進(jìn)行健康檢查、驅(qū)蟲(chóng)、疫苗接種等。每天清掃圈舍，以保持圈內(nèi)清潔，整個(gè)圈舍采取自然通風(fēng)，所有圈舍進(jìn)行不定期消毒。實(shí)驗(yàn)羊只由專(zhuān)人管理，試驗(yàn)期肉羊自由采食，自由飲水。試驗(yàn)日糧組成參照國(guó)內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 816-2004，并做適當(dāng)調(diào)整，其配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.4 樣品采集 在正式試驗(yàn)第1、30、60天清晨，每組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2只羊，每個(gè)處理組共12只，進(jìn)行靜脈采血，離心制備血清，置于-70℃超低溫冰箱中凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法 血清中IgG、IgM、IgA含量采用試劑盒法測(cè)定，試劑盒購(gòu)自南京建成生物有限公司，具體操作按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。血清中IL-1、IL-2及IL-6含量利用放免法測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SAS 9.0軟件中的One-way ANOVA統(tǒng)計(jì)程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P＜0.05表示各處理間差異顯著。

表5 烏珠穆沁羊血清中IL-1含量測(cè)定結(jié)果 ng/mL

表6 烏珠穆沁羊血清中IL-2含量測(cè)定結(jié)果 ng/mL

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgG含量的影響由表2可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgG的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天和第60天時(shí)，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgG含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.2 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgM含量的影響由表3可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgM的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天時(shí)，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)第60天時(shí)，3個(gè)酵母硒添加組羊只血清中的IgM含量均顯著高于Ⅰ組 （P<0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.3 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgA含量的影響由表4可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IgA的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天時(shí)，Ⅲ組羊只血清中的IgA含量顯著高于Ⅰ組（P<0.05）；在試驗(yàn)第60天時(shí)，Ⅲ組、Ⅳ組羊只血清中的IgA含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.4 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IL-1含量的影響 由表5可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清IL-1的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天和第60天時(shí)，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-1含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅳ組效果最好。

2.5 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IL-2含量的影響 由表6可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清IL-2的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天時(shí)，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2 含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)第60天時(shí)，Ⅲ組和Ⅳ組羊只血清中的IL-2含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅲ組效果最好。

2.6 酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清中IL-6含量的影響 由表7可知，添加無(wú)機(jī)硒和酵母硒對(duì)烏珠穆沁羊血清IL-6的含量均有不同程度的提高作用。在試驗(yàn)第30天和第60天時(shí)，3個(gè)酵母硒添加組羊只血清中的IL-6含量均顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組差異不顯著（P＞0.05），以添加劑量為0.9 mg/kg（DM基礎(chǔ)）的Ⅳ組效果最好。

表7 烏珠穆沁羊血清中IL-6含量測(cè)定結(jié)果 ng/mL

3 討論

硒對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)有重要作用，其參與調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞及非特異性免疫效應(yīng)細(xì)胞的功能。關(guān)于硒對(duì)反芻動(dòng)物免疫機(jī)能的影響報(bào)道并不一致。黃志堅(jiān)等［4］在奶牛飼料中添加富硒酵母，隨著補(bǔ)硒天數(shù)的增加，補(bǔ)硒各組奶牛血液中淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力和T淋巴細(xì)胞百分率顯著增多。汪傳松等［5］研究表明，引用人工硒茶5周后，外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及IgM水平都有明顯提高。雒國(guó)彬等［6］報(bào)道，隨著酵母硒添加量的提高，奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量呈先升高后降低的趨勢(shì)。Swecker等［7］研究發(fā)現(xiàn)，奶牛補(bǔ)硒后可增加初乳及犢牛血清中的IgG水平，但對(duì)IgM無(wú)顯著影響。王傳蓉等［8］報(bào)道，補(bǔ)硒可使母牛分娩后12 h血清中的IgM、IgG含量顯著提高，且IgA的含量也有所增加。He等［9］報(bào)道，補(bǔ)硒可以提高慢性肝炎病人外周血單核細(xì)胞分泌IL-2的能力。Safir等［10］研究表明，補(bǔ)硒可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌IL-1和IL-6。倪麗麗［11］研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加有機(jī)硒，可使其血清中的IgM、IgG、IgA、IL-1及IL-2含量顯著提高。該研究結(jié)果顯示，日糧中添加一定量的酵母硒能夠顯著提高烏珠穆沁羊血清中 IgM、IgG、IgA、IL-1、IL-2及IL-6的含量，這與前人大多數(shù)的研究結(jié)果是一致的。

4 結(jié)論

在烏珠穆沁羊日糧中添加酵母硒能顯著提高烏珠穆沁羊的免疫水平，綜合飼養(yǎng)成本及免疫增強(qiáng)效果，以添加量為0.6 mg/kg（DM基礎(chǔ)）效果最佳。

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Effect of Dietary Supplementation of Selenium-enriched Yeast on Immunoglobulin and Cytokine of Ujumqin Sheep

GUO Yuan-sheng1，JIN Peng2
（1.Xilingol Vocational College，Xilinhot 026000，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Bureau of Luanping County of Hebei Province，Luanping 068250，China）

［Objective］ In order to rationally determine the optimal supplementation level of Selenium-enriched Yeast in diet of Ujumqin Sheep in Xilingol region of Inner Mongolia and to provide theoretical basis for the promotion and application of Selenium-enriched Yeast in local mutton sheep industry,the effect of dietary supplementation of Selenium-enriched yeast on immunoglobulin and key cytokine of Ujumqin Sheep was evaluated in this study. ［Methods］ The experiment was conducted by randomized design with a single factor.A total of 240 healthy wether of Ujumqin Sheep were included in this study and were randomly divided into 4 groups （Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ group）.The groupⅠwas served as control group,of which the diet was supplemented with 0.3 mg/kg of inorganic selenium （sodium selenite，DM basis）.The Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ groups were served as experimental groups,of which the diet were supplemented with 0.3,0.6,0.9 mg/kg of Selenium-enriched Yeast （DM basis）.The pre-feeding period lasted for 15 d and the formal-feeding period lasted for 60 d. ［Results］ The serum content of IgM,IgG,IgA and IL-1,IL-2,IL-6 of Ujumqin Sheep were significantly increased when their diet was supplemented with Selenium-enriched yeast. ［Conclusion］ The dietary supplementation of Selenium-enriched yeast was able to enhance the immunity function of Ujumqin Sheep.In view of the feeding cost and immunopotentiation effect,supplementation level of 0.6 mg/kg Selenium-enriched yeast（DM basis） in diet was optimal and recommended.

Selenium-enriched yeast；Ujumqin Sheep；immunity function；cytokine

S816.72；S826.5

A文章順序編號(hào)1672-5190（2016）03-0039-03

2016－01－24

郭元晟（1982—），男，講師，博士，主要研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。

（責(zé)任編輯：趙俊利）