內(nèi)蒙古地區(qū)健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的主要血液指標(biāo)比較分析

姜建強，戴 欽 ，那仁巴圖，哈斯楚魯，白 龍，寶 山 ，額爾德木圖 ，額爾敦木圖

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動物疾病臨床診療技術(shù)重點實驗室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古阿拉善經(jīng)濟開發(fā)區(qū)農(nóng)牧業(yè)服務(wù)中心，內(nèi)蒙古 阿拉善左旗 750336；3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；4.內(nèi)蒙古阿拉善右旗農(nóng)牧業(yè)和科學(xué)技術(shù)局，內(nèi)蒙古 阿拉善右旗 737300；5.內(nèi)蒙古鄂托克旗蒙西鎮(zhèn)農(nóng)牧業(yè)執(zhí)法隊，內(nèi)蒙古 鄂托克旗 016062；6.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市家畜改良工作站，內(nèi)蒙古 臨河區(qū) 015000；7.內(nèi)蒙古蘇尼特右旗畜牧工作站，內(nèi)蒙古 蘇尼特右旗 011200）

內(nèi)蒙古地區(qū)健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的主要血液指標(biāo)比較分析

姜建強1，戴 欽2，那仁巴圖3，哈斯楚魯4，白 龍5，寶 山6，額爾德木圖7，額爾敦木圖1

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動物疾病臨床診療技術(shù)重點實驗室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古阿拉善經(jīng)濟開發(fā)區(qū)農(nóng)牧業(yè)服務(wù)中心，內(nèi)蒙古 阿拉善左旗 750336；3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；4.內(nèi)蒙古阿拉善右旗農(nóng)牧業(yè)和科學(xué)技術(shù)局，內(nèi)蒙古 阿拉善右旗 737300；5.內(nèi)蒙古鄂托克旗蒙西鎮(zhèn)農(nóng)牧業(yè)執(zhí)法隊，內(nèi)蒙古 鄂托克旗 016062；6.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市家畜改良工作站，內(nèi)蒙古 臨河區(qū) 015000；7.內(nèi)蒙古蘇尼特右旗畜牧工作站，內(nèi)蒙古 蘇尼特右旗 011200）

旨在了解內(nèi)蒙古地區(qū)健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的主要血液指標(biāo)之間的差異。從內(nèi)蒙古阿拉善左旗等地采集健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝血液樣本107份，采用瑞氏染色法和吉姆薩染色法對制備的血液涂片進行染色，觀察并比較健康及患病雙峰駝血液的紅細(xì)胞與白細(xì)胞的形態(tài)特征；利用血液細(xì)胞分析儀測定血液樣本的血細(xì)胞含量，并對相同及不同地區(qū)的健康及患病雙峰駝的主要血常規(guī)指標(biāo)進行統(tǒng)計學(xué)分析；應(yīng)用比值方法估計血液樣本的血漿含量。結(jié)果表明，患病駝血液中的嗜堿性粒細(xì)胞含量較少，嗜酸性粒細(xì)胞含量較多，且血小板含量較健康駝多；來自相同地區(qū)的患病駝與健康駝的各種血細(xì)胞含量無顯著差異（P＞0.05）；不同地區(qū)的健康駝血細(xì)胞含量趨于平穩(wěn)，但不同地區(qū)的患病駝血細(xì)胞含量變化存在較大波動；雙峰駝的血漿含量為0.349 0～0.736 5，患陰道蠅蛆病的雙峰駝血漿含量普遍高于健康雙峰駝。

陰道蠅蛆??；雙峰駝；血細(xì)胞含量；差異

圖1 雙峰駝陰道感染黑須污蠅

圖2 黑須污蠅幼蟲

圖3 健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的血液涂片觀察

雙峰駝陰道蠅蛆病的病原為黑須污蠅的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期幼蟲。黑須污蠅是我國北方草原及半荒漠草原地區(qū)常見的寄生性蠅類。該病一般在每年的4月底至5月初開始出現(xiàn)，9月底至10月初消失，其中6月、7月、8月為該病流行的高峰期，7月為最高峰［1］。研究表明，黑須污蠅只寄生在活體動物組織內(nèi)［2］。 據(jù)報道，黑須污蠅可感染山羊［3］、馬［4］、狗［5］、鵝［6］，也可感染人類［7］。

當(dāng)黑須污蠅在雙峰駝的陰門處產(chǎn)下幼蟲后，通常會有數(shù)個蠅蛆以頭在里尾在外的形式在陰門處形成蠅蛆孔道，使陰門腫脹、緊閉，蠅蛆破壞陰道內(nèi)部組織時可引起局部組織出血（見圖1、圖2）。陰道蠅蛆病在我國阿拉善地區(qū)駱駝群體中的發(fā)病率為20%～30%，死亡率為 2%左右［8］。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 于2014年8月，分別從內(nèi)蒙古阿拉善盟阿拉善左旗、阿拉善右旗，錫林郭勒盟蘇尼特右旗以及鄂爾多斯市鄂托克旗采集健康和患陰道蠅蛆病雙峰駝的血液樣本，每只雙峰駝采集1份，共107份。血液樣本用EDTA-K2抗凝。

1.2 血液涂片的觀察 利用采集的雙峰駝血液樣本制備全血涂片。為了更容易地觀察到嗜酸性粒細(xì)胞與嗜堿性粒細(xì)胞，待血細(xì)胞沉降分層后吸取白細(xì)胞層進行涂片 （帶有其他血細(xì)胞，但以白細(xì)胞居多），并用瑞氏染色法和吉姆薩染色法對其進行染色，于顯微鏡下觀察紅細(xì)胞與白細(xì)胞的形態(tài)特征。

1.3 血常規(guī)分析 利用BC-2600Vet型血液細(xì)胞分析儀（Mindray公司產(chǎn)品）對血液樣本進行血常規(guī)指標(biāo)的檢測。

表1 內(nèi)蒙古地區(qū)健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的血常規(guī)指標(biāo)測定與比較分析結(jié)果

表2 樣本的血漿含量統(tǒng)計結(jié)果

表3 血漿含量方差分析

1.4 血漿含量分析 采用比值方法估計血漿含量。將采集的血液樣本2 500 r/min離心10 min后，用游標(biāo)卡尺分別測量上部血漿的寬度及下部血細(xì)胞的寬度（包括白細(xì)胞層與紅細(xì)胞層），用血漿寬度與全血寬度比值來表示血漿含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)用SAS軟件進行Oneway ANOVA（單因素非均衡數(shù)據(jù)）分析，差異性水平為 α=0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 血液涂片觀察 對雙峰駝的血涂片進行觀察可以看出，雙峰駝的紅細(xì)胞為橢圓形無核細(xì)胞（見圖3A），中性粒細(xì)胞核分葉較多（見圖3A），多在4～5葉；在患病駝的血液中存在發(fā)生形變的白細(xì)胞，且血小板含量較健康駝多（見圖3B）；在患病駝血液中嗜堿性粒細(xì)胞含量較少（見圖3C），但存在較多含量的嗜酸性粒細(xì)胞（見圖3D）。

2.2 健康及患陰道蠅蛆病雙峰駝的血細(xì)胞含量差異性分析 由表1可以看出，來自同一地區(qū)的患病駝與健康駝的各種血細(xì)胞含量無顯著差異 （P＞0.05），僅存在不同程度的波動。對不同樣本來源地區(qū)的患病駝血細(xì)胞含量進行分析（DUNCAN分組對比）可知，多個地區(qū)的患病駝血細(xì)胞含量呈現(xiàn)顯著差異，如阿拉善左旗患病駝白細(xì)胞總量 ［（27.47±8.06）×109/L］顯著高于阿拉善右旗患病駝白細(xì)胞總量［（12.46±3.87）×109/L］（P＜0.05），阿拉善左旗、阿拉善右旗、蘇尼特右旗的患病駝淋巴細(xì)胞含量均顯著高于鄂托克旗患病駝淋巴細(xì)胞含量 （P＜0.05），等。此外，健康駝的部分血細(xì)胞含量也呈現(xiàn)出顯著的地區(qū)差異，并且主要集中在阿拉善左旗和阿拉善右旗這兩個地區(qū)的雙峰駝，如阿拉善左旗健康駝的白細(xì)胞總量、單核細(xì)胞含量、中性粒細(xì)胞含量及血小板含量均顯著高于阿拉善右旗健康駝（P＜0.05）。由此可知，各地區(qū)健康駝的血細(xì)胞含量趨于平穩(wěn)，但不同地區(qū)的患病駝血細(xì)胞含量變化較不同地區(qū)的健康駝血細(xì)胞含量變化存在較大波動。

2.3 血漿含量分析 測量樣本的血漿寬度及下部血細(xì)胞的寬度，采用比值方法估計血漿含量。結(jié)果表明，樣本的血漿含量從0.349 0～0.736 5不等。對血漿含量數(shù)據(jù)進行初步統(tǒng)計分析，結(jié)果見表2。

對獲得的數(shù)據(jù)進行分組，組1為血漿含量過低組 （0.349 0～0.455 6）， 組 2為血漿含量正常組（0.461 5～0.597 0），組 3 為血漿含量過高組（0.600 0～0.736 5），用SAS軟件對3組數(shù)據(jù)進行One-way ANOVA分析，結(jié)果見表3。由表3可知，在0.05水平下組1、組2、組3之間相互存在顯著差異 （P＜0.05）。統(tǒng)計各組雙峰駝陰道蠅蛆病的發(fā)病率，組1為17.6%，組2為13.5%，組3為82.4%。由此可知，患陰道蠅蛆病的雙峰駝血漿含量普遍高于健康雙峰駝。

3 討論

3.1 全血涂片 從血液涂片可以看出，患病駝的血細(xì)胞組成與健康駝存在一定的差別，患病駝的部分白細(xì)胞發(fā)生形變，且有較多含量的嗜酸性粒細(xì)胞，但嗜堿性粒細(xì)胞含量較少。有學(xué)者對單峰駝的中性粒細(xì)胞進行形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)，單峰駝的中性粒細(xì)胞存在較多的分葉核，核質(zhì)比較低，并存在類似于嗜酸性粒細(xì)胞中的層狀顆粒［9］。由圖3C可以看出，患病雙峰駝的中性粒細(xì)胞的核質(zhì)比較低，推測在蠅蛆病發(fā)病過程中嗜酸性粒細(xì)胞發(fā)揮重要的抵抗作用，且中性粒細(xì)胞可能對嗜酸性粒細(xì)胞起到一種間接的補償作用。

3.2 血細(xì)胞含量 該研究結(jié)果表明，患病駝的中性粒細(xì)胞含量普遍較健康駝高（P＞0.05）。在其他寄生蟲感染，如陰道滴蟲感染中，中性粒細(xì)胞能夠同時包圍殺滅蟲體，在有氧環(huán)境下中性粒細(xì)胞對陰道滴蟲的殺滅率為97%，無氧條件下為15%［10］。從血小板含量來看，大部分地區(qū)的患病駝略高于健康駝，原因可能是蠅蛆造成的傷口引起機體應(yīng)激，產(chǎn)生多量的血小板用于傷口血液凝固，促進傷口愈合。但從實際觀察來看，血小板的保護機制并沒有明顯作用，蠅蛆的不斷生長與蠕動使傷口不斷擴大、惡化，直至蠅蛆落地，若在此期間有新的蠅蛆寄生，則會造成傷口持久不能愈合，最終破壞雙峰駝外陰或陰道的正常組織結(jié)構(gòu)，嚴(yán)重的甚至發(fā)生脫肛與脫陰。有研究表明，與人血小板相比，駱駝的血小板擁有更大的α顆粒、致密體及鞭狀擴展，但是缺乏與表面相連的開放管道系統(tǒng)，這些駱駝與人及其他動物血小板之間的結(jié)構(gòu)差異和變化可能在駱駝的止血和血栓形成過程中發(fā)揮重要作用［9］。

3.3 血漿含量差異 研究過程中發(fā)現(xiàn)，采集的血液中血漿含量差異較大，3組血漿含量在0.05水平下存在顯著差異。Yagil等［11］在研究駱駝紅細(xì)胞時發(fā)現(xiàn)，駱駝在飲水后有大量水會進入血液。從各組的陰道蠅蛆病發(fā)病率來看，患病駝的血漿含量相對較高，存在陰道蠅蛆病導(dǎo)致雙峰駝血漿含量升高的可能。但在該研究中，因為地域、氣候、環(huán)境等影響因素較多，且所采集樣本群體為野外采食狀態(tài)，在采血之前并沒有進行統(tǒng)一飼養(yǎng)，因此群體與群體、個體與個體之間的營養(yǎng)狀況存在較大差異，所以不考慮血漿含量對雙峰駝陰道蠅蛆病血細(xì)胞含量變化的影響，僅對此提出疑問。血漿含量升高和陰道蠅蛆病的發(fā)生之間是否存在關(guān)聯(lián)性仍有待進一步研究。

4 小結(jié)

相同地區(qū)的患病駝與健康駝血細(xì)胞含量變化并不顯著，只存在一定程度的增高與降低，但是不同來源地區(qū)的雙峰駝（包括健康和患病駝）血細(xì)胞含量存在較大差異，這可能與不同群體的雙峰駝所處的環(huán)境、營養(yǎng)狀況及發(fā)病階段（病程約7 d左右）有關(guān)。該研究結(jié)果可為進一步闡明健康與患陰道蠅蛆病的雙峰駝的生理指標(biāo)變化特征及不同地區(qū)雙峰駝群體的生理特征差異提供科學(xué)依據(jù)。

［1］呼和巴特爾，白音巴圖，杜躍峰.雙峰駱駝陰道蠅蛆病流行病學(xué)調(diào)查［J］.內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報，1994（4）：59-62.

［2］呼和巴特爾，白音巴圖，杜躍峰.黑須污蠅（Wohlfahrtia magnifica Schiner.1862）生活習(xí)性的觀察與研究［J］.內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報，1994（2）：1-4.

［3］SOTIRAKI S，STEFANAKIS A，HALL M J.Assessment of coypermethrin and doramectin for controlling wohlfahrtiosis in Crete［J］.Vet Parasitol，2003，116（4）：327-332.

［4］FARKAS R，KéPES G.Traumatic myiasis of horses caused by Wohlfahrtia magnifica［J］.Act Vet Hung，2001，49（3）：311-318.

［5］FARKSA R，HALL M J，BOUZAGOU A K，et al.Traumatic myiasis in dogs caused by Wohlfahrtia magnifica and its importance in the epidemiology of wohlfahrtiosis of livestock ［J］.Med Vet Entomol，2009，23 （Suppl 1）：80-85.

［6］HADANI A，BEN YAAKOV B，ROSEN S.Myiasis caused by Wohlfahrtia magnifica （Schiner,1862）in the Arabian camel（Camelus dromedarius）in the Peninsula of Sinai［J］.Rev Elev Vet Trop，1989，42（1）：33-38.

［7］BAYINDIR T，MIMAN O，MIMAN M C，et al.Bilateral aural myiasis（Wohlfahrtia）：a case with chronic suppurative otitis media［J］.Turkiye Parazitol Derg，2012，34（1）：65-67.

［8］額爾敦木圖，達(dá)能太，王立華，等.阿拉善雙峰駱駝陰道蠅蛆病的發(fā)病調(diào)查 ［J］. 中國獸醫(yī)雜志，2012，48（3）：46-47.

［9］GADER A G，GHUMLAS A K，HUSSAIN M F，et al.The ultrastructure of camel blood platelets：a comparative study with human，bovine，and equine cells ［J］.Platelets，2008，19（1）：51-58.

［10］趙建玲，高興政，屈明.中性粒細(xì)胞殺滅陰道毛滴蟲作用的研究［J］.中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，2008，25（5）：366-369.

［11］YAGIL R，SOD-MORIAH U A，MEYERSTEIN N.Dehydration and camel blood.Ⅱ.Shape，size，and concentration of red blood cells ［J］.Am J Physiol，1974，262 （2）：301-304.

Comparison and Analysis on Main Blood Parameters of Healthy and Vaginal Myiasis Bactrian Camels in Inner Mongolia

JIANG Jian-qiang1，DAI Qin2，Narenbatu3，Hasichulu4，Bailong5，Baoshan6，Eerdemutu7，Eerdunmutu1
（1.Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease of Ministry of Agriculture，College of Veterinary Medicine，Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot 010018，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Service Center of Alxa Economic Development Zone of Inner Mongolia,Alxa Left County 750336，China；3.College of Animal Science，Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018，China；4.Agricultural， Animal Husbandry，Science and Technology Bureau of Alxa Right County of Inner Mongolia，Alxa Right County 737300，China；5.Agricultural and Animal Husbandry Enforcement Team in Mengxi Town of Otog County of Inner Mongolia，Otog County 016062，China；6.Livestock Improvement Workstation of Bayannur of Inner Mongolia，Linhe District 015000，China；7.Animal Husbandry Workstation of Sonid Right County of Inner Mongolia，Sonid Right County 011200，China）

The aim of the present study was to understand the differences in main blood parameters between healthy and vaginal myiasis Bactrian camels in Inner Mongolia.A total of 107 Blood samples were collected from healthy and vaginal myiasis Bactrian camels in Alxa Left County and other main Bactrian camels distributing regions of Inner Mongolia.The blood smears were prepared and subsequently stained by Wright′s and Giemsa′s staining methods.The morphological characteristics of red blood cells and white blood cells of healthy and diseased Bactrian camels were observed and compared.The content of blood cells was determined by automatic blood cell analyzer.The main routine blood index of healthy and diseased Bactrian camels from the same and different regions were statistically analyzed.The ratio method was used to evaluate the plasma content of blood samples.The results revealed that the content of basophilic granulocyte in diseased Bactrian camels blood was relatively lower,but the content of eosinophilic granulocyte was relatively higher.Higher content of blood platelets in healthy Bactrian camels blood was found.No significant differences in blood cells content between healthy and diseased Bactrian camels from the same region were observed （P＞0.05）.Obvious changes in blood cells content of diseased Bactrian camels from different regions were found,but no obvious regional changes were observed in healthy Bactrian camels.The plasma content of the Bactrian camels included in this study ranged from 0.349 0 to 0.736 5,and the plasma content of most diseased Bactrian camels was higher than that of healthy Bactrian camels.

vaginalmyiasis；Bactrian camels；blood cells content；differences

S858.245.9

A文章順序編號：1672-5190（2016）04-0008-04

2016－03－20

項目來源：國家自然科學(xué)基金項目（地區(qū)基金，31360591）；內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金項目（2012MS0421）；教育部留學(xué)回國人員科研啟動基金項目 ［教外司留（2011）1139號］；內(nèi)蒙古自治區(qū)人才開發(fā)基金項目［2010（108-111040）］。

姜建強（1989—），男，碩士研究生，主要研究方向為動物解剖及黏膜免疫。

額爾敦木圖（1965—），男，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要研究方向為動物解剖及黏膜免疫。

（責(zé)任編輯：趙俊利）