野葛塊根異黃酮的提取及抗氧化研究

李　玲，譚　力，全沁果，全　浩，何福林，黃光文，邵金華，閆旭宇，*

(1.湖南科技學(xué)院 化學(xué)與生物工程學(xué)院，湘南優(yōu)勢(shì)植物資源綜合利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 永州 425199；2.浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

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野葛塊根異黃酮的提取及抗氧化研究

李玲1，2，譚力1，全沁果3，全浩1，何福林1，黃光文1，邵金華1，閆旭宇1，*

(1.湖南科技學(xué)院 化學(xué)與生物工程學(xué)院，湘南優(yōu)勢(shì)植物資源綜合利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 永州 425199；2.浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

以土家山區(qū)野葛塊根為試驗(yàn)材料，采用超聲波輔助乙醇提取野葛塊根異黃酮。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以提取率為響應(yīng)值，運(yùn)用4因素4水平響應(yīng)面分析法研究提取過(guò)程中工藝參數(shù)對(duì)提取率的影響，并對(duì)異黃酮提取物的抗氧化性能進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：最適提取工藝條件為乙醇濃度81.0%，超聲時(shí)間41.2 min，提取溫度61.2℃，料液比(m/V)1∶9.5，原料粒徑40目。在此工藝條件下，野葛塊根異黃酮的平均提取率為3.43%。所提取的野葛塊根異黃酮的抗氧化效果低于Vc，但能與其產(chǎn)生一定的協(xié)同作用。

野葛；異黃酮；抗氧化

野葛為豆科葛屬多年生落葉草質(zhì)藤本植物，藥用價(jià)值較高，是一種重要的野生植物資源。野葛的適應(yīng)性很強(qiáng)，廣泛分布在我國(guó)除西藏、新疆以外的地區(qū)，尤其是湖南地區(qū)的溫暖濕潤(rùn)環(huán)境，可促使野葛快速蔓生，是張家界市土家族聚居區(qū)的名貴特產(chǎn)之一[1]。研究發(fā)現(xiàn)，野葛葛根中異黃酮種類豐富，有葛根素、大豆甙元、金雀花異黃素、大豆甙等30多種異黃酮成分，其中葛根素是葛根的特有成分和主要有效成分，約占野葛總異黃酮含量的50%。葛根異黃酮具有防治和改善心腦血管疾病、抗腫瘤、抗氧化、降血脂、解酒護(hù)肝、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)等多種藥理作用，其藥理活性強(qiáng)，藥效明確，臨床應(yīng)用廣泛，具有良好的發(fā)展前景[2-8]。目前，野葛中異黃酮的提取方法主要有加熱回流法、超聲波輔助提取法、微波輔助萃取法等。與傳統(tǒng)加熱回流和水解相比，超聲提取與微波提取法具有省時(shí)節(jié)能、提取率高等優(yōu)點(diǎn)，可降低提取溫度、縮短提取時(shí)間，有利于葛根素提取的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展[9-12]。關(guān)于野葛異黃酮含量的確定，一般采用葛根素或大豆苷元為標(biāo)準(zhǔn)品。結(jié)合實(shí)際，本試驗(yàn)采用超聲波輔助提取法，用土家野生葛根塊根為原料，以乙醇為提取劑來(lái)提取野葛塊根異黃酮，以葛根素為標(biāo)準(zhǔn)品，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)測(cè)定所提取野葛塊根異黃酮的含量，并研究了野葛塊根異黃酮對(duì)DPPH自由基的清除作用，初步探索其抗氧化性能，為綜合開發(fā)利用野葛塊根提供一定的數(shù)據(jù)積累。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1原料與試劑

新鮮野葛塊根，于2014年9月采自湖南張家界山區(qū)(土家族聚居區(qū))；葛根素標(biāo)準(zhǔn)品，上海源葉生物科技有限公司；DPPH為分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠。

1.1.2儀器與設(shè)備

UV-2800型紫外可見分光光度計(jì)，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司；KQ5200B型超聲波清洗器，昆山超聲儀器有限公司；SHIMADZU型分析天平，日本島津公司；WG-71電熱鼓風(fēng)干燥箱，天津市泰斯特儀器有限公司；FZ-102植物粉碎機(jī)，上海勝啟儀器儀表有限公司；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；K201D-Ⅱ旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長(zhǎng)盛實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1提取工藝流程

野葛塊根→切塊→烘干→粉碎→乙醇提取→過(guò)濾→提取液。

1.2.2葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

以葛根素為標(biāo)準(zhǔn)品，將配制好的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液在250 nm下進(jìn)行比色測(cè)定，以吸光度(D)為縱坐標(biāo)，葛根素質(zhì)量濃度c(mg·mL-1)為橫坐標(biāo)，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為D=0.0268c+0.0662，R2=0.999 0。

1.2.3野葛塊根異黃酮提取率的計(jì)算

野葛塊根異黃酮的提取率計(jì)算公式為：

(1)

式(1)中：W為野葛塊根異黃酮的提取率；D為吸光度值；Q為稀釋的總倍數(shù)；V為過(guò)濾液總體積(mL)；m為所稱量的試驗(yàn)材料質(zhì)量(mg)。

1.3單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，研究乙醇濃度、提取溫度、超聲時(shí)間、料液比和原料粒徑對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響，確定超聲輔助提取異黃酮的最適工藝參數(shù)范圍。

1.3.1乙醇濃度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

準(zhǔn)確稱取干燥的野葛塊根粉末2.0 g，分別用40%，50%，60%，70%，80%，90%的乙醇溶液浸泡30 min后，在料液比1∶10，溫度50℃，超聲時(shí)間20 min條件下，研究乙醇濃度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響。

1.3.2提取溫度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

準(zhǔn)確稱取干燥的野葛塊根粉末2.0 g，用最適乙醇濃度溶液浸泡30 min 后，在料液比1∶10，超聲時(shí)間20 min的條件下，分別在30，40，50，60，70℃提取，研究提取溫度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響。

1.3.3超聲時(shí)間對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

準(zhǔn)確稱取干燥的野葛塊根粉末2.0 g，用最適乙醇濃度溶液浸泡30 min后，在最適提取溫度，料液比1∶10條件下，分別設(shè)定輔助提取時(shí)間為10，20，30，40，50 min，研究超聲時(shí)間對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響。

1.3.4料液比對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

準(zhǔn)確稱取干燥的野葛塊根粉末2.0 g，用最適乙醇濃度溶液浸泡30 min后，在最適提取溫度和最適超聲時(shí)間下，分別設(shè)定料液比為1∶5，1∶10，1∶15，1∶20，1∶25，研究料液比對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響。

1.3.5原料粒徑對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

準(zhǔn)確稱取干燥的野葛塊根粉末2.0 g，固定其他條件為最適條件，設(shè)置原料粒徑分別為20，40，60，80，100目，研究原料粒徑對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響。

1.4響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以異黃酮提取率為響應(yīng)值，選取單因素實(shí)驗(yàn)中對(duì)野葛塊根異黃酮提取率影響較顯著的因素進(jìn)行4因素4水平響應(yīng)面試驗(yàn)，確定超聲波輔助提取野葛塊根異黃酮的最適工藝參數(shù)。

1.5抗氧化性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

用分析天平準(zhǔn)確稱取DPPH標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，以95%乙醇溶液定容至100mL，得到10%的DPPH溶液。用移液管準(zhǔn)確移取該溶液3mL，分別加入不同濃度的樣液各1mL，充分搖勻，置于室溫陰暗處?kù)o置30 min，在波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定吸光度(Di)。同時(shí)測(cè)定1mL溶劑與3mLDPPH溶液混合后的吸光度(Dc)，以及1mL樣液與3mL95%乙醇溶液混合后的吸光度(Dj)。根據(jù)公式計(jì)算出抑制率。抗氧化能力用抑制率來(lái)表示，抑制率越大，說(shuō)明抗氧化性越強(qiáng)，其計(jì)算公式為：

清除率(%)=[1-(Di-Dj)/Dc]×100

2　結(jié)果與分析

2.1野葛塊根異黃酮提取條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1乙醇濃度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

在提取溫度為50℃，料液比1∶10，超聲時(shí)間為20 min的條件下，由圖1可知，隨著乙醇濃度的增大，野葛塊根異黃酮的提取率逐漸增加，當(dāng)乙醇濃度為80%時(shí)，提取率最高，之后下降。因此，乙醇濃度以80%為宜。

圖1　乙醇濃度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響Fig.1　Effects of ethanol concentrations on isoflavone extraction rate

2.1.2提取溫度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

在乙醇濃度為80%，料液比1∶10，超聲時(shí)間20 min的條件下，由圖2可知，當(dāng)超聲溫度為60℃時(shí)，野葛塊根異黃酮的提取率達(dá)到最大。因此，超聲波輔助提取的溫度宜控制在60℃。

圖2　提取溫度對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響Fig.2　Effects of extraction temperature on isoflavone extraction rate

2.1.3超聲時(shí)間對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

在乙醇濃度為80%，料液比1∶10，提取溫度60℃條件下，由圖3可知，野葛塊根異黃酮的提取率隨著超聲時(shí)間的增加而增加，當(dāng)提取時(shí)間延長(zhǎng)至40 min時(shí)，提取率最高，而后有所降低。因此，超聲時(shí)間宜控制在40 min。

2.1.4料液比對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

在乙醇濃度為80%，超聲時(shí)間40 min，提取溫度為60℃條件下，由圖4可知，當(dāng)料液比為1∶10時(shí)，野葛塊根中異黃酮的提取率最高，當(dāng)液體比例進(jìn)一步增大后，提取率明顯降低。因此，料液比以1∶10為最適條件。

圖3　超聲時(shí)間對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響Fig.3　Effects of ultrasound-assisted extraction time on isoflavone extraction rate

圖4　料液比對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響Fig.4　Effects of solid to liquid ratio on isoflavone extraction rate

2.1.5原料粒徑對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響

在乙醇濃度為80%，超聲時(shí)間40 min，提取溫度為60℃，料液比1∶10的條件下，由圖5可知，當(dāng)粒徑達(dá)40目以后，異黃酮提取率已趨于平穩(wěn)。因此，從經(jīng)濟(jì)方面考慮，以40目粒徑為最適條件。

圖5　原料粒徑對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響Fig.5　Effects of particle size on isoflavone extraction rate

2.2響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，原料粒徑的變化對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響較小，故確定乙醇濃度、提取溫度、超聲時(shí)間和料液比為響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)因素，固定原料粒徑為40目，以提取率為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，試驗(yàn)方案及結(jié)果見表1。

表1響應(yīng)面試驗(yàn)方案及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Table 1Design scheme and results of response surface test

試驗(yàn)號(hào)乙醇濃度/%提取溫度/℃超聲時(shí)間/min料液比/(g·mL-1)異黃酮提取率/%提取率預(yù)測(cè)值/%17550401∶102.392.5328550401∶102.482.6337570401∶102.622.6648570401∶102.882.9258060351∶52.432.5668060451∶52.692.8078060351∶152.272.3588060451∶152.492.5597560401∶52.512.53108560401∶52.762.75117560401∶152.342.34128560401∶152.502.48138050351∶102.562.51148070351∶102.712.71158050451∶102.732.72168070451∶102.902.94177560351∶102.822.73188560351∶102.972.90197560451∶103.042.93208560451∶103.233.14218050401∶52.482.33228070401∶52.642.55238050401∶152.202.11248070401∶152.342.31258060401∶103.383.42268060401∶103.493.42278060401∶103.463.42288060401∶103.403.42298060401∶103.363.42

采用Design Expert 8.0.5b軟件對(duì)表1中試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多項(xiàng)擬合回歸，得到異黃酮提取率(Y)對(duì)乙醇濃度(A)、提取溫度(B)、超聲時(shí)間(C)和料液比(D)的二次多項(xiàng)回歸模型方程：Y=-96.59533+1.66060A+0.49972B+0.71813C+0.57270D+0.00085AB+0.00040AC-0.00090AD+0.00010BC-0.00010BD-0.00040CD-0.010627A2-0.004692B2-0.009127C2-0.025077D2。

為了檢驗(yàn)回歸方程的有效性，進(jìn)一步確定各因素對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響程度，對(duì)回歸模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表2。模型的F=22.90，極顯著；失擬項(xiàng)的P值為 0.060 1，不顯著，說(shuō)明數(shù)據(jù)沒(méi)有異常點(diǎn)；決定系數(shù)R2=0.958 2，說(shuō)明響應(yīng)值的變化中有95.82%來(lái)源于所選因素，表明模型擬合度好，回歸方程能很好地描述各因素與響應(yīng)值之間的關(guān)系，方法可靠。

回歸模型中一次項(xiàng)A達(dá)到顯著水平，而B，C，D均達(dá)到極顯著水平；二次項(xiàng)中4個(gè)因素的P值均小于0.01，說(shuō)明試驗(yàn)中4個(gè)因素的二次項(xiàng)都具有極顯著影響，表明實(shí)驗(yàn)因素與響應(yīng)值不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系；但4個(gè)因素兩兩交互項(xiàng)不顯著。考查P值與F值大小，可得各因素對(duì)野葛塊根異黃酮提取率的影響，依次為料液比(D)>超聲時(shí)間(C)>提取溫度(B)>乙醇濃度(A)。

用Design Expert 8.0.5b軟件對(duì)二次多項(xiàng)式回歸方程進(jìn)行計(jì)算，確定最適的提取條件為：乙醇濃度80.95%、提取溫度61.22℃、超聲時(shí)間41.24 min、料液比1∶9.52，在原料粒徑為40目下，預(yù)測(cè)提取率為3.452%。考慮到實(shí)際操作的局限性，提取工藝最終修正為：乙醇濃度81.0%、提取溫度61.2℃、超聲時(shí)間41.2 min、料液比(m/V)1∶9.5(g·mL-1)、原料粒徑為40目。此條件下進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)證，設(shè)置4個(gè)試驗(yàn)組，每組平行測(cè)定3次，如表3所示，野葛塊根異黃酮實(shí)際提取率為3.43%，與預(yù)測(cè)值接近。

表2響應(yīng)面回歸模型方差分析

Table 2ANOVA results of the constructed response surface regression

方差來(lái)源平方和自由度均方FP顯著性模型3.98140.2822.90<0.0001**A0.1010.108.130.0128*B0.1310.1310.490.0059**C0.1510.1511.700.0041**D0.1610.1612.600.0032**AB0.00722510.0072250.580.4581AC0.00040010.0004000.0320.8601AD0.00202510.0020250.160.6924BC0.00010010.0001000.0080580.9297BD0.00010010.0001000.0080580.9297CD0.00040010.0004000.0320.8601A20.4610.4636.89<0.0001**B21.4111.41113.95<0.0001**C20.3410.3427.210.0001**D22.5512.55205.43<0.0001**殘差0.17140.012失擬項(xiàng)0.16100.0165.350.0601純誤差0.01240.00302總和4.1528R20.9582

注：**表示極顯著(P<0.01)；*表示顯著(P<0.05)。

對(duì)常規(guī)浸提方法與超聲輔助浸提工藝進(jìn)行比較，即在最適工藝的基礎(chǔ)上取消超聲輔助處理步驟。同樣設(shè)置4個(gè)處理組，每組重復(fù)3次。由表3可知，常規(guī)方法下野葛塊根異黃酮提取率平均僅為2.53%，超聲波輔助浸提法提取效率較常規(guī)方法具有明顯優(yōu)勢(shì)。

表3常規(guī)方法與優(yōu)化方法的野葛塊根異黃酮提取率

Table 3The extraction rate of isoflavones by regular or optimized extraction method

試驗(yàn)組提取率/%常規(guī)方法超聲輔助浸提12.52±0.063.42±0.0622.50±0.093.45±0.0432.55±0.033.41±0.0742.52±0.063.42±0.04平均值2.53±0.063.43±0.05

注：表中數(shù)據(jù)代表平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，下同。

2.3野葛塊根異黃酮對(duì)DPPH自由基的清除作用

為了確定野葛塊根異黃酮的抗氧化能力，測(cè)定了其對(duì)DPPH自由基的清除作用，結(jié)果見圖6。隨著野葛塊根異黃酮和Vc濃度的增加，二者對(duì)自由基的清除率均逐漸增加，當(dāng)濃度大于0.6 mg·mL-1時(shí)，二者對(duì)自由基的清除率增速均漸趨平緩；將異黃酮和Vc按1∶1體積混合后，其對(duì)DPPH的清除效果強(qiáng)于異黃酮提取物單體?？傮w而言，野葛塊根異黃酮對(duì)羥基自由基的清除率低于Vc，但能與Vc產(chǎn)生一定的協(xié)同效應(yīng)。

圖6　野葛塊根異黃酮和Vc對(duì)自由基的清除效果Fig.6　The radical-scavenging effect of Vc and extracted isoflavone

3　討論

黃酮類化合物一般易溶于水、乙醇等極性強(qiáng)的溶劑中，難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中，且乙醇對(duì)細(xì)胞膜的破壞作用比水強(qiáng)，使得黃酮類化合物更易溶出，故本研究選擇乙醇作為提取溶劑[13]。通過(guò)對(duì)加熱回流法、微波輔助萃取法、超聲波輔助提取法、常規(guī)浸提法等提取異黃酮的方法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)超聲波輔助提取法能加快野葛細(xì)胞破碎的速度、降低能耗、節(jié)省時(shí)間，且提取的產(chǎn)品純度較高[14]，因此，本試驗(yàn)選擇超聲波輔助乙醇提取法提取野葛塊根中的異黃酮。

單因素及響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果表明，超聲波輔助乙醇法提取野葛塊根異黃酮時(shí)，各因素對(duì)異黃酮提取效果的影響依次為料液比>超聲時(shí)間>提取溫度>乙醇濃度。最適提取條件為：乙醇濃度81.0%，超聲時(shí)間41.2 min，提取溫度61.2℃，料液比1∶9.5，原料粒徑為40目；在此條件下，異黃酮的提取率為3.43%，較常規(guī)浸提法的提取率高出近1個(gè)百分點(diǎn)，極大地提高了野葛塊根異黃酮的生產(chǎn)效率，且節(jié)約能耗，在實(shí)際生產(chǎn)中具有較好的應(yīng)用前景。

DPPH自由基是一種非常穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，在517 nm處有一強(qiáng)吸收峰，黃酮類化合物的電子可與其孤對(duì)電子配對(duì)，使其在517 nm處吸光度變小，吸光值的變化即可反映樣品對(duì)自由基的清除能力[15]。在本研究中，隨著野葛塊根異黃酮濃度的增加，其對(duì)自由基的清除率也逐漸增加，但略低于Vc，說(shuō)明野葛塊根異黃酮具有一定的抗氧化活性。

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(責(zé)任編輯高峻)

Extraction and antioxidant effects of isoflavone in Pueraria lobata (Willd.) Ohwi root tuber

LI Ling1，2，TAN Li1，QUAN Qin-guo3，QUAN Hao1，HE Fu-lin1，HUANG Guang-wen1，SHAO Jin-hua1，YAN Xu-yu1，*

(1.Department of Chemistry and Biological Engineering，Hunan University of Science and Engineering，Key Laboratory of Comprehensive Utilization of Advantage Plants Resources in Hunan South，Yongzhou 425199，China;2.College of Agriculture and Biotechnology，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China;3.Institute of Agro-products Processing Science and Technology，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Laboratory of Agro-products Quality Safety Risk Assessment，Ministry of Agriculture，Beijing 100193，China)

In the present study，isoflavone was extracted from Pueraria lobata(Willd.) Ohwi root tuber collected in Tujia Mountain by ultrasound-assisted ethanol extraction.Based on single factor test analysis，main technology parameters of the extraction process were optimized by response surface design of 4 factors and 4 levels，and antioxidant effects of the extracted isoflavone were also studied.The results showed that the optimum extraction technology was as follows:the ethanol concentration was 81.0%，ultrasound-assisted extraction time was 41.2 min，extraction temperature was 61.2℃，solid to liquid ratio (m/V) was 1∶9.5，and particle size of raw material was 40 mesh.Under this condition，the extraction rate of isoflavone reached 3.43%.The antioxidant effects of the extracted isoflavone were weaker than that of vitamin C，but it could yield synergetic effect with vitamin C.

Pueraria lobata(Willd.) Ohwi;isoflavone;antioxidants

浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)Acta Agriculturae Zhejiangensis，2016，28(3):496-501http://www.zjnyxb.cn

李玲，譚力，全沁果，等.野葛塊根異黃酮的提取及抗氧化研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，28(3)： 496-501.

10.3969/j.issn.1004-1524.2016.03.22

2015-08-10

中國(guó)博士后科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2014M561768)；湖南科技學(xué)院湘南優(yōu)勢(shì)植物資源綜合利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金(XNZW14C12)；湖南省永州市2015年度指導(dǎo)性科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015-10)；永州市科技創(chuàng)新項(xiàng)目(永財(cái)企指2015[25]號(hào)-9)

李玲(1982—)，女，山西長(zhǎng)治人，博士，副教授，研究方向?yàn)橹参锷锛夹g(shù)。E-mail:liling7826@126.com

，閆旭宇，E-mail:yanxuyu1979@163.com

S58；TQ464

A

1004-1524(2016)03-0496-06