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    響應(yīng)面法優(yōu)化酶-超聲波輔助同步提取鴨骨素工藝

    2016-10-29 07:08:42劉佳慧王修俊王紀(jì)輝
    保鮮與加工 2016年4期
    關(guān)鍵詞:液料提取液可溶性

    劉佳慧,王修俊,*,尹 爽,田 多,王紀(jì)輝

    (1.貴州大學(xué)發(fā)酵工程與生物制藥省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽 550025;2.貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院,貴州 貴陽 550025)

    響應(yīng)面法優(yōu)化酶-超聲波輔助同步提取鴨骨素工藝

    劉佳慧1,2,王修俊1,2,*,尹爽1,2,田多1,2,王紀(jì)輝1,2

    (1.貴州大學(xué)發(fā)酵工程與生物制藥省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽 550025;2.貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院,貴州 貴陽 550025)

    以新鮮鴨骨為原料,采用酶-超聲波輔助同步提取鴨骨素,并以可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量為考察指標(biāo),在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法優(yōu)化鴨骨素提取工藝條件。結(jié)果表明,酶-超聲波輔助同步提取鴨骨素的最佳工藝條件為:超聲溫度62℃,超聲功率248W,超聲時(shí)間5.1 h,酶添加量

    1.34%。此條件下鴨骨素提取液中可溶性固形物含量和蛋白質(zhì)含量分別為(25.8±0.047)°Bx和(20.9± 0.018)g·100 g-1。采用酶-超聲波輔助同步提取的鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量極顯著高于單一酶解法、微波提取法和超聲波提取法(P<0.01)。

    鴨骨素;提取工藝;酶解;超聲波;響應(yīng)面法

    我國是畜禽肉類消費(fèi)量最大的國家之一,而動(dòng)物骨骼約占動(dòng)物體重的20%~30%,因此我國畜禽骨資源極為豐富[1-3]。三穗麻鴨是我國四大名鴨之一,貴州省三穗縣大力發(fā)展鴨產(chǎn)業(yè),現(xiàn)已成為貴州省的特色優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè),但每年都有大量的鴨骨未得到充分利用,只是部分加工成骨油、飼用骨粉、肥料等附加值很低的傳統(tǒng)產(chǎn)品[4-6],造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。鴨骨素中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),但是精深加工開發(fā)與利用方面較差,導(dǎo)致精細(xì)加工產(chǎn)品及功能性產(chǎn)品較少。

    畜禽骨骨素是新鮮畜禽骨經(jīng)酸法、堿法和酶法制得的初級(jí)骨提取物,具有一定的增香效果。骨素產(chǎn)品作為一種天然的營養(yǎng)食品,富含蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸及其他無機(jī)鹽,這些物質(zhì)都是易于被人體吸收和必需的營養(yǎng)物質(zhì)。根據(jù)骨素的這些特性可以將其添加到營養(yǎng)口服液、速溶氨基酸沖劑等保健品當(dāng)中,從而達(dá)到促進(jìn)新陳代謝和傷口愈合的效果。因此,可以用該類物質(zhì)來研制滿足不同人群需求的保健食品。

    酶解法是一種新的動(dòng)物蛋白水解液的生產(chǎn)方法,與現(xiàn)有的化學(xué)法和物理法相比,具有定向、易控、溫和等優(yōu)點(diǎn)[7-10]。近年來,聲學(xué)技術(shù)同生物、食品技術(shù)領(lǐng)域不斷交叉、滲透,應(yīng)用超聲技術(shù)在水溶液中提高酶活力、促進(jìn)酶催化反應(yīng)已有研究報(bào)道[11-12]。超聲波不但能加速酶解速度,而且能改善產(chǎn)品品質(zhì),優(yōu)化反應(yīng)條件[13-14];同時(shí)在食品加工技術(shù)中,超聲可以輔助或強(qiáng)化提取。本試驗(yàn)采用酶-超聲波輔助同步提取法對(duì)鴨骨中鴨骨素的提取效果進(jìn)行研究,通過Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析,獲得提取效果最佳的工藝參數(shù)條件,為鴨骨副產(chǎn)品深加工的開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料與設(shè)備

    1.1.1材料與試劑

    新鮮鴨骨,由貴州三穗翼宇鴨業(yè)有限公司提供,預(yù)處理后于-18℃冰箱中保存,備用。

    木瓜蛋白酶(800U/mg)、堿性蛋白酶(800U/mg)、中性蛋白酶(800 U/mg)、胰蛋白酶(800 U/mg),均由上海源葉生物有限公司生產(chǎn);硫酸銅、硫酸鉀、硫酸、硼酸、氫氧化鈉等,均為國產(chǎn)分析純。

    1.1.2儀器與設(shè)備

    FA2004B電子天平,DZKW-4電子恒溫水浴鍋,GZX-GF101-3-BS-Ⅱ電子恒溫鼓風(fēng)干燥箱,RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,GL-20G高速冷凍離心機(jī),SIN82T手持式折光儀,HC-300T2高速多功能粉碎機(jī),KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器。

    1.2方法

    1.2.1鴨骨素提取工藝流程

    鴨骨→解凍→粉碎→超聲酶解→滅酶→過濾→離心→濃縮→鴨骨素提取液

    1.2.2操作要點(diǎn)

    1.2.2.1原料選擇

    挑選較大的鴨腿骨、胸骨和翅骨,盡量剔除鴨肉。

    1.2.2.2粉碎

    將鴨骨于粉碎機(jī)內(nèi)粉碎5min,成鴨骨泥。

    1.2.2.3滅酶

    將粉碎后的鴨骨置于95℃水浴鍋中滅酶15min。

    1.2.2.4過濾、離心

    酶解液過濾后以4 000 r/min離心10min。

    1.2.2.5濃縮

    取離心后上層酶解液,置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上80℃濃縮10min,至接收燒瓶中液體無明顯增加。

    1.2.3試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

    1.2.3.1單因素試驗(yàn)

    準(zhǔn)確稱取鴨骨粉100 g,液料比120mL/100 g(由于液料比較小情況下獲得酶解產(chǎn)物較少,不利于后續(xù)試驗(yàn),所以選擇液料比120 mL/100 g),超聲溫度60℃,超聲時(shí)間3 h,超聲功率210W,加酶量1.0%的條件下,考察木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物含量的影響,進(jìn)行酶種類的篩選。

    準(zhǔn)確稱取鴨骨粉100 g,在液料比120mL/100 g木瓜蛋白酶添加量1.0%,超聲溫度60℃,功率210W,時(shí)間3 h的條件下,以鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量為指標(biāo),分別考察超聲溫度、超聲功率、超聲時(shí)間、加酶量、液料比對(duì)酶解提取效果的影響,初步確定因素與水平,單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

    表1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1 Single factor experiment design

    1.2.3.2響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以總可溶性固形物含量(°Bx)和蛋白質(zhì)含量為響應(yīng)值,根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,以超聲溫度、超聲功率、超聲時(shí)間、加酶量為主要影響因素。進(jìn)行四因素三水平組合試驗(yàn),因素與水平見表2。

    表2 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平編碼表Table2 ExperimentalvariablesandlevelsforBox-Behnken design

    1.2.3.3不同提取方式的比較

    酶解法提取條件:準(zhǔn)確稱取鴨骨100g,加入木瓜蛋白酶1.0%,液料比120mL/100g,水浴溫度60℃條件下酶解3h,測(cè)定鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量。

    超聲法提取條件:準(zhǔn)確稱取鴨骨100g,液料比120mL/100g,超聲溫度60℃,超聲時(shí)間3h,測(cè)定鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量。

    微波法提取條件:準(zhǔn)確稱取鴨骨100g,液料比120mL/100g,微波功率300W,提取時(shí)間1h,測(cè)定鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量。

    1.2.4測(cè)定項(xiàng)目與方法

    1.2.4.1可溶性固形物含量(SSC)

    使用手持折光儀測(cè)量,用百利度(°Bx)來反映可溶性固形物的含量。

    1.2.4.2蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法[15]測(cè)定。計(jì)算公式為:

    式中:X為試樣中蛋白質(zhì)的含量(g/100g);V1為試液消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積(mL);V2為空白試劑消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積(mL);V3為吸取消化液的體積(mL);c為硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液濃度(mol/L);0.0140為1.0mL硫酸[C(1/2H2SO4)=1.000mol/L]或鹽酸[C(HCl)=1.000mol/L]標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量(g);m為試樣的質(zhì)量(g);F為氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。

    1.2.5數(shù)據(jù)處理

    采用Excel2003軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用Design-Expert8.0.6軟件對(duì)響應(yīng)面試驗(yàn)進(jìn)行分析,采用SPSS17.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1單因素試驗(yàn)結(jié)果

    2.1.1酶種類的選擇

    研究表明[16]酶解液中可溶性固形物含量與蛋白質(zhì)含量呈線性關(guān)系,為節(jié)約選酶試驗(yàn)的時(shí)間,暫以可溶性固形物含量為考察指標(biāo)。由圖1可知,采用不同種類的酶對(duì)鴨骨進(jìn)行酶解,酶解液中可溶性固形物含量較對(duì)照有不同程度的增加。其中,以木瓜蛋白酶水解后鴨骨素提取液中可溶性固形物含量最高。因此,選用木瓜蛋白酶對(duì)鴨骨素進(jìn)行提取。

    2.1.2超聲溫度對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖2可知,隨著超聲溫度的升高,鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量均呈先升高后降低的趨勢(shì)。進(jìn)行酶解反應(yīng)時(shí),隨著溫度升高,酶解反應(yīng)加快,當(dāng)超聲溫度為60℃時(shí),鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量最高,但繼續(xù)升高超聲溫度,蛋白酶變性失活,不利于酶解反應(yīng)。在溫度的作用下,鴨骨中可溶性固形物和蛋白質(zhì)也在不斷溶出,因此,在酶和超聲溫度的雙重作用下,確定適宜的超聲溫度為60℃。

    2.1.3超聲功率對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖3可知,隨著超聲功率的提高,鴨骨素提取液中可溶性固形物與蛋白質(zhì)含量均呈先下降后上升再下降的變化趨勢(shì)。超聲功率較低時(shí),隨超聲功率升高,酶的活性逐漸上升,促進(jìn)鴨骨素的析出,超聲功率為240W時(shí)兩指標(biāo)均達(dá)到最高值,而當(dāng)超聲功率繼續(xù)提高時(shí)酶活性則下降[17-20]。適宜功率的超聲波在一定程度上促進(jìn)酶的催化作用,影響程度因酶的種類而不同,試驗(yàn)中要根據(jù)不同的酶選擇最佳的超聲功率,本試驗(yàn)確定適宜的超聲功率為240W。

    2.1.4超聲時(shí)間對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖4可知,隨超聲時(shí)間延長(zhǎng),鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量均不斷升高,當(dāng)超聲5 h時(shí),鴨骨素中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量達(dá)到最高,之后其含量均呈下降趨勢(shì),這可能是由于超聲5 h時(shí)酶促反應(yīng)充分,繼續(xù)增加超聲時(shí)間不再促進(jìn)酶的水解。因此,確定適宜的超聲時(shí)間為5 h。

    2.1.5加酶量對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖5可知,當(dāng)加酶量過少時(shí),酶解速度較慢或酶解反應(yīng)不完全,隨著加酶量的增加,鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量均不斷升高。當(dāng)酶添加量為1.3%時(shí),可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量達(dá)到最高值,此時(shí)鴨骨被酶完全水解,繼續(xù)增加酶的用量則可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量不再升高。因此,確定適宜的加酶量為1.3%。

    2.1.6液料比對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖6可知,當(dāng)液料比為60mL/100 g時(shí),鴨骨素提取液中可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量達(dá)最高,之后繼續(xù)增加溶劑用量,可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量持續(xù)下降,這是因?yàn)槿軇┑脑黾邮狗磻?yīng)體系內(nèi)酶的濃度變小,導(dǎo)致酶與底物反應(yīng)不徹底,從而使可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量下降。因此,確定適宜液料比為60mL/100 g。

    2.2響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.1回歸模型的建立及方差分析

    為確定鴨骨素的最佳提取工藝,參考單因素試驗(yàn)結(jié)果,通過Box-Behnken進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn),試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表3。

    表3 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table3 DesignandresultsofBox-Behnkentest

    利用Design-Expert8.0.6軟件對(duì)表3中的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析,得到SSC(Y1)、蛋白質(zhì)含量(Y2)對(duì)自變量A、B、C、D(其中變量以得到的-1到1區(qū)間的最佳條件代入)的二次多項(xiàng)回歸方程為:

    Y1=25.64+1.13A+0.82B+0.90C+0.68D-0.20AB-0.13AC+0.55AD-0.47BC-0.32BD-0.100CD-3.67A2-2.58B2-2.66C2-2.69D2

    Y2=20.58+0.98A+1.51B+0.17C+0.57D-0.097AB-0.085AC-0.22AD-0.44BC-0.22BD-0.062CD-2.75A2-1.41B2-2.30C2-1.94D2

    以可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量為響應(yīng)值的響應(yīng)面方差分析結(jié)果分別見表4、5。

    由表4可知,響應(yīng)面模型P<0.0001,表明回歸模型的回歸效果極顯著;失擬項(xiàng)P=0.3054>0.05,即模型失擬項(xiàng)不顯著,表明響應(yīng)面模型符合,即試驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠。本模型的R2=0.9741,表明響應(yīng)面模型與試驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合良好[21]。響應(yīng)面模型的顯著性分析結(jié)果表明:A、B、C、D、A2、B2、C2、D2對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物含量影響極顯著(P<0.01),AD、BC對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物含量影響顯著(P<0.05)。各試驗(yàn)因素對(duì)提取液中可溶性固形物含量的影響依次是A(超聲溫度)>C(超聲時(shí)間)>B(超聲功率)>D(加酶量)。

    由表5可知,響應(yīng)面模型P<0.0001,表明回歸模型的回歸效果極顯著;失擬項(xiàng)P=0.1733>0.05,即模型失擬項(xiàng)不顯著,表明響應(yīng)面模型符合,即試驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠。本模型的R2=0.9589,表明響應(yīng)面模型與試驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合良好。響應(yīng)面模型的顯著性分析結(jié)果表明:A、B、D、A2、B2、C2、D2對(duì)鴨骨提取液中蛋白質(zhì)含量影響極顯著(P<0.01),各試驗(yàn)因素對(duì)鴨骨素提取液中蛋白質(zhì)含量的影響依次是B(超聲功率)>A(超聲溫度)>D(加酶量)>C(超聲時(shí)間)。

    表4 可溶性固形物含量為響應(yīng)值的回歸模型方差分析結(jié)果Table4 Thevarianceanalysisresultsoftheregressionmodel withthesolublesolidcontentastheresponsevalue

    表5 蛋白質(zhì)含量為響應(yīng)值的回歸模型方差分析結(jié)果Table 5 The results of variance analysis of the regressionmodel with protein content as the response value

    2.2.2響應(yīng)面交互作用分析

    2.2.2.1可溶性固形物含量

    由Design-Expert8.0.6軟件繪制以可溶性固形物含量為響應(yīng)值的各因子交互作用的響應(yīng)面圖,見圖7。

    由圖7A、B可知,超聲溫度和超聲功率、超聲溫度和超聲時(shí)間的交互作用對(duì)鴨骨素提取液中可溶性固形物含量的影響不明顯;由圖7C、D可知,隨著超聲溫度的升高和加酶量的增加,以及超聲功率的增加和超聲時(shí)間的延長(zhǎng),鴨骨素提取液中可溶性固形物含量呈先增后降的變化趨勢(shì),超聲溫度和加酶量、超聲功率和超聲時(shí)間的交互作用對(duì)鴨骨素中可溶性固形物含量的影響達(dá)顯著水平;由圖7E可知,隨著超聲功率和加酶量的增加,可溶性固形物含量先升高后下降;由圖7F可知,隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)和酶的增加,鴨骨素提取液中可溶性固形物含量先上升后降低,當(dāng)超聲時(shí)間為5 h、酶添加量達(dá)到1.3%時(shí),可溶性固形物含量達(dá)到最高點(diǎn)。

    2.2.2.2蛋白質(zhì)含量

    由Design-Expert 8.0.6軟件繪制以蛋白質(zhì)含量為響應(yīng)值的各因子交互作用的響應(yīng)面圖,見圖8。

    圖8A反映出隨著超聲溫度的升高和超聲功率的增大,鴨骨素提取液中蛋白質(zhì)含量明顯增高,方差分析結(jié)果表明,超聲溫度和超聲功率交互作用對(duì)蛋白質(zhì)含量的影響達(dá)到極顯著水平;由圖8B可知,隨著超聲溫度的升高和超聲時(shí)間的延長(zhǎng),蛋白質(zhì)含量先升高后降低;由圖8C、D可知,隨著超聲溫度的升高和加酶量的增加及超聲功率和時(shí)間的增加,蛋白質(zhì)含量增加不顯著;由圖8E可知,隨著超聲功率和加酶量的增加,蛋白質(zhì)含量先升高后下降;由圖8F可知,隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)和加酶量的增加,蛋白質(zhì)含量達(dá)到最高點(diǎn)后下降,在超聲時(shí)間5 h,加酶量1.3%時(shí),蛋白質(zhì)含量最高。

    2.2.3響應(yīng)面分析優(yōu)化結(jié)論驗(yàn)證

    對(duì)二次多元回歸模型進(jìn)行分析并求解,得出鴨骨素提取最佳工藝參數(shù)為:超聲溫度61.59℃,超聲功率248.57W,超聲時(shí)間5.07 h,加酶量1.34%,此條件下可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量分別可達(dá)到25.82°Bx、20.99 g·100 g-1。為證實(shí)響應(yīng)面法優(yōu)化所得結(jié)論的準(zhǔn)確性,將最佳工藝修正為超聲溫度62℃、超聲功率248W、超聲時(shí)間5.1 h、加酶量1.34%,此條件下進(jìn)行3次平行試驗(yàn),測(cè)得可溶性固形物和蛋白質(zhì)含量平均值分別為(25.8±0.047)°Bx、(20.9±0.018)g·100 g-1。該值落在響應(yīng)值的95%置信區(qū)間內(nèi),說明響應(yīng)面優(yōu)化得到的工藝參數(shù)可靠。

    2.3不同提取方式的比較

    由表6可知,酶-超聲波輔助同步提取法與單一酶解法比較,鴨骨提取液中蛋白質(zhì)含量提高了約

    26.6%,可溶性固形物含量提高了約23.4%,且遠(yuǎn)高于單一微波提取法和單一超聲波提取法。因此,酶-超聲波輔助同步提取法是提取鴨骨素的最佳方法。

    表6 不同提取方式的比較Table 6 Comparison of different extractionmethods

    3 結(jié)論

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過響應(yīng)面分析法,得到酶-超聲波輔助法同步提取鴨骨中鴨骨素的最佳工藝參數(shù)為:超聲溫度62℃,超聲功率248W,超聲時(shí)間5.1 h,加酶量1.34%。此條件下,鴨骨素提取液中可溶性固形物含量為(25.8±0.047)°Bx,蛋白質(zhì)含量為(20.9±0.018)g·100 g-1,較單一酶解提取法、微波法和超聲波法鴨骨提取液中蛋白質(zhì)含量和可溶性固形物含量都有不同程度的提高。

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    Optim ization of Enzymatic-Ultrasonic Assisted Extraction of Duck Bone Extract by Response SurfaceM ethodology

    LIU Jia-hui1,2,WANG Xiu-jun1,2,*,YIN Shuang1,2,TIAN Duo1,2,WANG Ji-hui1,2

    (1.Guizhou Province Key Laboratory of Fermentation Engineering and Biopharmacy,Guizhou University,Guiyang550025,China;2.Collegeof LiquorMaking&Food Engineering,Guizhou University,Guiyang550025,China)

    The fresh duck bone was taken as raw material,the duck bone extractwas obtained by enzymatic-ultrasonic assisted extraction with the contents of soluble solid and protein as indexes.On the basis of single factor experiment,response surface method was used to optimize the extraction process of duck bone.The results showed that,the optimum technological conditions for the simultaneous extraction of duck bone by enzymatic-ultrasonic assisted extraction were:ultrasonic temperature 62℃,ultrasonic power 248W,ultrasonic time 5.1 h,enzyme addition amount of 1.34%.Under these conditions,the total soluble solid content could reach(25.8±0.047)°Bx and the protein content could reach(20.9±0.018)g·100 g-1.The contents of soluble solid and protein in duck bone extractwith enzymatic-ultrasonic assisted extractionmethod were extremely significant higher than that of single enzyme hydrolysis,microwave or ultrasonic extractionmethod(P<0.01).

    duck bone extract;extraction process;enzymatic hydrolysis;ultrasonic;response surfacemethod

    TS251.94

    A

    10.3969/j.issn.1009-6221.2016.04.018

    貴州省科技成果轉(zhuǎn)化引導(dǎo)基金計(jì)劃(黔科合成轉(zhuǎn)字[2014]5093號(hào))

    劉佳慧(1992—),女,漢族,在讀碩士,研究方向:農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程。

    王修俊,學(xué)士,教授,碩士生導(dǎo)師,研究方向:食品保鮮貯藏與加工,食品質(zhì)量安全與品質(zhì)控制。

    2016-04-11

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