YKL-40在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的價值

徐志偉，王冠男，葉龍強，湯耀東，李桃紅，董縐縐

YKL-40在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的價值

徐志偉，王冠男，葉龍強，湯耀東，李桃紅，董縐縐

目的探討YKL-40在良惡性胸腔積液中的鑒別診斷價值。方法選取胸腔積液患者95例，其中惡性胸腔積液（MPE）42例，良性胸腔積液（BPE）53例。采用夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測胸腔積液及血漿中YKL-40濃度。結(jié)果MPE中YKL-40顯著高于BPE中（＜0.05）。然而，胸腔積液中YKL-40和癌胚抗原（CEA）間無相關(guān)性（=0.2478，=0.298）。YKL-40在診斷MPE的最佳臨界值為180.2 ng/ml，受試者工作特征曲線下面積為0.7944 （95％0.68～0.89，＜0.01），其敏感度為83.9％，特異度為73.3％，具有較高的診斷價值。結(jié)論檢測胸腔積液中YKL-40有助于MPE的鑒別診斷。

胸腔積液；YKL-40；鑒別診斷

良惡性胸腔積的液鑒別診斷一直是臨床工作中的難點。胸腔鏡等檢查特異性高［1］，但屬于有創(chuàng)檢查，高齡患者無法耐受。因此，亟須尋找一種簡單無創(chuàng)、敏感性及特異性較好的方法。YKL-40是一種殼多糖酶樣蛋白，通常在炎癥和腫瘤過程中產(chǎn)生，主要由巨噬細胞、滑液細胞、軟骨細胞和中性粒細胞分泌［2］。血漿YKL-40水平在多種惡性疾病中升高，并和預后相關(guān)，另外在哮喘、肝硬化、肉瘤樣變、骨關(guān)節(jié)炎和炎癥性腸病等疾病升高［3-5］。目前，YKL-40的功能尚未完全明確，可能在組織重組發(fā)揮作用?？紤]到腫瘤在其發(fā)展過程中同時伴隨顯著的組織重構(gòu)，因此研究YKL-40可能對惡性胸腔積液（MPE）的診斷提供幫助。癌胚抗原（CEA）是上皮來源腫瘤細胞的腫瘤標記物。本研究擬采用夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測胸腔積液及血漿中YKL-40表達水平，并評估其在MPE中的診斷效能。報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2013年1月至2015年12月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院收治的胸腔積液患者247例，胸腔積液患者于住院24h內(nèi)，未經(jīng)過任何治療前收集標本。MPE診斷需符合下列3項：（1）影像學結(jié)果符合原發(fā)性支氣管肺癌并發(fā)胸腔積液；（2）經(jīng)纖維支氣管鏡或者胸腔鏡取得的肺部組織活檢，病理學確診為肺癌；（3）胸腔積液脫落細胞學檢查檢測到轉(zhuǎn)移性腫瘤細胞［6-7］。剔除符合以下任意一項者：（1）入院前半年內(nèi)，曾罹患有胸部外傷者或接受任何關(guān)于創(chuàng)性胸膜腔檢查治療者；（2）曾接受過任何抗腫瘤或抗結(jié)核治療，使用過糖皮質(zhì)激素、非甾體抗炎藥，或免疫抑制劑者；（3）合并有其他免疫因素性疾?。唬?）胸腔積液的病因診斷不清楚者。

1.2方法（1）抽取胸腔積液患者清晨空腹靜脈血4ml，分離血漿，低溫（-80℃）冰箱凍存，待統(tǒng)一檢測；（2）采用標準胸腔穿刺術(shù)抽取胸水后，留取新鮮胸水10ml， 3 000 r/min離心10 min，收集上清液置于-80℃冰箱保存，待測定YKL-40；（3）YKL-40采用ELISA測定，兔抗人YKL-40多克隆抗體試劑盒（購自上海藍基生物有限公司），嚴格按試劑說明書操作。根據(jù)標本吸光度繪制標準曲線并計算YKL-40濃度。采用化學發(fā)光法分析檢測CEA。

1.3統(tǒng)計方法應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析，如結(jié)果符合正態(tài)分布，計量資料用平均數(shù)±標準差表示，采用檢驗；若不符合正態(tài)分布，采取中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，采取Wilcoxon秩和檢驗行組間比較；曲線分析胸腔積液及血漿中YKL-40水平在鑒別良惡性胸腔積液中的價值；Spearman's研究胸腔積液及血漿的相關(guān)性。＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1一般情況最終有95例患者納入研究。良性胸腔積液（BPE）患者53例，其中結(jié)核性胸腔積液36例，肺炎旁胸腔積液12例，心源性胸腔積液5例；MPE 42例，其中肺腺癌20例，肺鱗癌16例，轉(zhuǎn)移性腫瘤6例。良惡性胸腔積液患者年齡、性別、BMI差異均無統(tǒng)計學意義（均＞0.05）；總白蛋白、乳酸脫氫酶、腺苷脫氨酶差異均有統(tǒng)計學意義（均＜0.05），見表1。

表1　兩組一般情況及胸腔積液相關(guān)指標

表2　兩組患者血漿和胸腔積液中YKL-40及CEA表達水平

2.2兩組血漿和胸腔積液中YKL-40及CEA比較胸腔積液YKL-40濃度（［189.22± 74.93）ng/ml］高于血漿中YKL-40濃度（［144.43±54.85）ng/ml，=3.363，＜0.05］。MPE胸腔積液中YKL-40濃度高于BPE組（＜0.01），然而，血漿中YKL-40差異無統(tǒng)計學意義（＞0.05）；MPE組胸腔積液及血漿CEA均高于BPE組（均＜0.05）。見表2。

2.3YKL-40在MPE診斷中的價值胸腔積液中YKL-40的曲線下面積（AUC）（0.7944，95％0.68～0.89，＜0.05）具備較高的診斷價值。YKL-40診斷MPE的最佳臨界值為180.2ng/ml，其敏感度為83.9％，特異度為73.3％。胸腔積液CEA濃度為30.24 ng/ml診斷MPE的AUC為（0.8626，95％0.78～0.94，＜0.05），具備較高的診斷價值，敏感度為87.2％，特異度為82.3％。兩項指標AUC＞0.7，具有較準確診斷價值，兩項AUC差異無統(tǒng)計學意義（=3.29，=0.19）。見圖1。

2.4MPE中YKL-40濃度表達和外周血CEA相關(guān)性研究胸腔積液中YKL-40濃度和CEA間無相關(guān)性（=0.2478，=0.298）。

3　討論

圖1　胸腔積液中YKL-40及CEA診斷良惡性胸腔積液的受試者工作特征曲線

惡性腫瘤的生物學行為主要表現(xiàn)為實質(zhì)細胞的惡性增殖與間質(zhì)成分（微環(huán)境）的重塑。目前研究發(fā)現(xiàn)YKL-40可能類似生長因子在微環(huán)境的重塑中發(fā)揮重要作用。研究其表達水平可能對腫瘤診斷提供幫助。

本研究顯示，患者胸腔積液YKL-40濃度顯著高于血漿中YKL-40濃度（＜0.05）。其原因可能與YKL-40在局部微環(huán)境釋放較多，并發(fā)揮重組作用有關(guān)。并且在MPE中YKL-40濃度高于其他疾病所致胸腔積液中的濃度。胸腔積液中YKL-40的ROC曲線下面積（0.7944，95％0.68～0.89，＜0.05）具有較高的診斷價值。YKL-40診斷MPE的最佳臨界值為180.2 ng/ml，其敏感度為83.9％，特異度為73.3％，提示胸腔積液中YKL-40表達水平在MPE診斷具有較大意義。本研究結(jié)果與Attia等［8］報道基本一致，然而，Attia等未進一步研究YKL-40和其他MPE診斷標志物之間是否存在相關(guān)性。本研究通過Spearman's相關(guān)性分析胸腔積液YKL-40與血漿CEA的關(guān)系，結(jié)果示兩者間無相關(guān)性（=0.2609，=0.1562），可能與納入樣本數(shù)偏少，未能進一步行亞組分析有關(guān)。

究其原因，首先，YKL-40可能具有類似生長因子的作用，細胞實驗及動物實驗中，通過抑制YKL-40在腫瘤細胞中的表達，腫瘤內(nèi)皮細胞遷移能力明顯減低，血管數(shù)量較對照組減少明顯［9］。其次，YKL-40和VEGF信號通路存在相互作用，還可能和細胞緊密連接丟失以及MMP家族激活相關(guān)。

［1］Light RW.Update on tuberculous pleural effusion［J］.Respirology，2010，15（3）：451-458.

［2］Volck B，Johansen JS，Stoltenberg M，et al.Studies onYKL-40 in knee joints of patientswithrheumatoidarthritisandosteoarthritis.Involvement of YKL-40inthe joint pathology［J］.Osteoarthritis Cartilage，2001，9 （3）：203-214.

［3］ChoiIK，KimYH，KimJS，etal.Highserum YKL-40is a poor prognosticmarker in patients with advanced non-small cell lung cancer［J］.Acta Oncol，2010，49（6）：861-864.

［4］ThomI，AndritzkyB，SchuchG，etal.ElevatedpretreatmentserumconcentrationofYKL-40-An independent prognostic biomarker for poorsurvival inpatientswithmetastaticnonsmallcelllungcancer［J］.Cancer，2010，116（17）：4114-4121.

［5］RoslindA，JohansenJS，ChristensenIJ，et al.Highserumlevels ofYKL-40inpatients with squamous cell carcinoma of the head and neck are associated with short survival ［J］.Int J Cancer，2008，122（4）：857-863.

［6］Hooper C，Lee YC，Maskell N.Investigation of a unilateral pleural effusion in adults：BritishThoracicSocietyPleuralDisease Guideline 2010［J］.Thorax，2010，65（Suppl 2）：i4-i17.

［7］黃鑫炎，謝燦茂.胸腔積液的診斷進展：診斷思路［J］.內(nèi)科急危重癥雜志，2012（3）：129-133.

［8］Attia A，Rasmy A，Amin A，et al.Evaluation of pleural fluid YKL-40 as a marker of malignant pleural effusion［J］.Egyptian Journalof ChestDiseasesandTuberculosis，2015，64（2）：489-495.

［9］ShaoR，HamelK，PetersenL，etal.YKL-40，a secreted glycoprotein，promotes tumor angiogenesis［J］.Oncogene，2009，28（50）：4456-4468.

10.3969/j.issn.1671-0800.2016.08.047

R561

A

1671-0800（2016）08-1067-03

2016-05-04

（本文編輯：孫海兒）

寧波市自然科學基金項目（2016A610193）

315040寧波，寧波市醫(yī)療中心李惠利東部醫(yī)院

徐志偉，Email：xu-zw@ qq.com