五酯膠囊對(duì)他克莫司藥代動(dòng)力學(xué)的影響

米　麗，位　華，李敬超，秦士新，茅建輝

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五酯膠囊對(duì)他克莫司藥代動(dòng)力學(xué)的影響

米麗1，位華2，李敬超3，秦士新4，茅建輝1

目的觀察不同劑量五酯膠囊對(duì)他克莫司藥代動(dòng)力學(xué)的影響。方法40名健康志愿者，隨機(jī)分為5組，在口服給藥2 mg 他克莫司5 min后，分別給予0、1、2、6及8粒五酯膠囊，于給藥前、給藥后不同時(shí)間點(diǎn)靜脈取血，置于抗凝管中，保存至分析測(cè)定。結(jié)果他克莫司的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC0→t、Tmax隨著五酯膠囊劑量的增大而增大，最大時(shí)分別可達(dá)到(459.3±114.2)ng/(h·ml)和(3.125±1.356)h，而Cmax則在五酯膠囊服用2粒時(shí)最大，達(dá)(43.539±10.656)ng/ml。口服清除率 (CL/F ratio), 1粒五酯膠囊時(shí)，就降至到51.67%，當(dāng)服用8粒時(shí)，降至到27.09%。結(jié)論合用五酯膠囊后，他克莫司在體內(nèi)代謝速度減慢，清除率降低，血藥濃度升高。

他克莫司；五酯膠囊；藥動(dòng)學(xué); 高效液相色譜法

他克莫司(Tac rolimus，F(xiàn)K506，他克莫司普樂(lè)可復(fù))，是1984年由日本科學(xué)家首次從鏈霉菌代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，目前在臨床上作為一種新型免疫抑制藥使用。五酯膠囊主要是以中藥南五味子進(jìn)行醇提取，然后經(jīng)沉淀分離獲得其中脂溶性的有效成分，具有包括保肝降酶、抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)、抗炎抗病毒等多種生物活性[1]，同時(shí)具有明確的肝細(xì)胞損傷阻滯作用，能明顯改善肝細(xì)胞代謝[2]，穩(wěn)定肝細(xì)胞膜的功能和通透性，有效地降低肝細(xì)胞廣泛損害后的血清轉(zhuǎn)氨酶(ALT或AST)升高[3]，目前已經(jīng)成為肝炎治療中重要的藥物選擇。文獻(xiàn)[4]報(bào)道，接受器官移植患者服用他克莫司和五酯膠囊，患者體內(nèi)他克莫司的穩(wěn)態(tài)血藥濃度顯著上升，且未見(jiàn)明顯的排異反應(yīng)發(fā)生率提升風(fēng)險(xiǎn)。若兩藥能組合服用，可能減少他克莫司的治療劑量，從而減少移植患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。筆者觀察不同劑量五酯膠囊對(duì)健康人體內(nèi)他克莫司藥代動(dòng)力學(xué)的影響，初步探討兩藥合用的劑量比，為臨床合理使用兩藥提供理論依據(jù)。

1　對(duì)象與方法

1.1對(duì)象40名健康志愿者，均為男性，平均 (24.5±1.6)歲，體重(68.1±5.4) kg，身高 (171.6±3.2) cm。實(shí)驗(yàn)前所有志愿者經(jīng)過(guò)體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均正常。 試驗(yàn)前詳細(xì)告知志愿者試驗(yàn)過(guò)程及內(nèi)容，并簽訂知情通知書(shū)后，報(bào)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2給藥方案受試者于試驗(yàn)前1 d下午6時(shí)進(jìn)入臨床醫(yī)院Ⅰ期病房，7時(shí)進(jìn)清淡飲食，10時(shí)以后禁食，不禁水。 40名志愿者隨機(jī)分為5 組，每組8人。5組的他克莫司劑量均為1.2 mg/kg，而五酯膠囊分別是0、1、2、6、8粒，兩藥合用時(shí)按先五酯膠囊后他克莫司，間隔5 min。

1.3抽血時(shí)間于給藥(他克莫司)前及給藥后0、2.5、5、10、15、30 min, 以及1、2、3、4、 6、8、12、24、36、48 h，肘窩內(nèi)側(cè)靜脈取血0.3 ml，置肝素抗凝管中。

1.4藥品與儀器設(shè)備藥品：五酯膠囊1粒，來(lái)自四川禾正制藥有限責(zé)任公司；他克莫司，硬膠囊1 mg，50粒盒，F(xiàn)ujisawa Ireland Ltd，注冊(cè)證號(hào) H20020376。儀器：Agilent 6410A 液-質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)(美國(guó)安捷倫公司)，TDL-5型高速離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器)廠。

1.5實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制移液管精密量取混合入對(duì)照品的儲(chǔ)備液，采用乙腈-水(混合比例10∶90，v/v)混合溶液逐級(jí)稀釋，得到濃度分別為1、2.5、5、10、25、50、100、250、500 ng/ml的他克莫司標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻后作為制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的溶液備用，4 ℃冰箱保存。

1.5.2他克莫司測(cè)定取全血100 μl，加入具塞離心管中，漩渦震蕩約30 s；加含內(nèi)標(biāo)物利托那韋的甲醇300 μl，混合均勻；漩渦震蕩2 min，12 000 r/min，離心10 min，移取上層溶液(有機(jī)相)100 μl，靜置30 s，加入液-質(zhì)聯(lián)用設(shè)備，分析檢測(cè)。色譜儀條件：色譜柱,Zorbax SB型，C18柱(3.5 pm，100 mm×2.1 mm，安捷倫)；流動(dòng)相使用乙睛-甲醇-0.1%甲酸水(甲酸水作為溶液)；流速，0.3 ml/min；運(yùn)行時(shí)間 8.0 min；柱溫，35 ℃。質(zhì)譜條件：離子源，ESI；模式，正離子；毛細(xì)管電壓，4000 V；使用氮?dú)膺M(jìn)行霧化，霧化壓力為40 psi；氮?dú)馊ト軇瑴囟葹?50 ℃，流速為10 L/min；高純氮?dú)庾鳛榕鲎矚?，壓力?.1 MPa；質(zhì)譜的半峰寬均為0.6 amu。他克莫司的MRM條件為826-616，傳輸能量250 V，碰撞能量45 eV；利托那韋的MRM條件為721-296，傳輸能量175 V，碰撞能量15 eV。

2　結(jié)　　果

他克莫司的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC0→t、Tmax隨著五酯膠囊劑量的增大而增大，最大時(shí)分別可達(dá)到(459.3±114.2)ng/(h·ml)和(3.125±1.356)h，而Cmax則在五酯膠囊服用2粒時(shí)最大，達(dá)(43.539±10.656)ng/ml。而CL/F、CL/F ratio則隨著五酯膠囊劑量的增大而逐漸減小(表1)。合用五酯膠囊的各組服藥后不同時(shí)間點(diǎn)全血中他克莫司濃度均高于未合用五酯膠囊的組(圖1)。

表1　健康志愿者服用五酯膠囊和他克莫司后體內(nèi)他克莫司的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)　±s；n=8)

注：組1～5他克莫司劑量均為1.2 mg/kg，而五酯膠囊分別是0、1、2、6、8粒。表示與組1比較，①P<0.05，②P<0.01

圖1　健康志愿者他克莫司合用不同劑量五酯膠囊后人體全血中他克莫司的平均血藥濃度-時(shí)間曲線2 mg FK506表示2 mg的他克莫司，五酯膠囊表示五酯膠囊

3　討　　論

本次試驗(yàn)采用液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，研究了合用五酯膠囊后他克莫司在人全血中的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程。經(jīng)考察，由本方法測(cè)得的合用五酯膠囊后他克莫司體內(nèi)主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)達(dá)峰時(shí)間、峰濃度、藥-時(shí)曲線下面積均有明顯增加，藥物半衰期縮短，t1/2減少百分率為54.5%。提示合用五脂膠囊后，他克莫司在體內(nèi)代謝速度減慢，清除率降低，藥物血藥濃度升高，這一結(jié)果與文獻(xiàn)[5，6]報(bào)道類似。

本研究結(jié)果顯示，他克莫司Tmax隨五酯膠囊劑量的遞增逐漸延遲，即從1.5 h延長(zhǎng)至3.125 h；對(duì)于他克莫司CL/F ratio，當(dāng)同時(shí)服用1粒五酯膠囊時(shí)，就降至51.67%，當(dāng)服用8粒時(shí)，降至27.09%。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，他克莫司的Cmax及AUC隨五酯膠囊劑量的增加逐漸增大：當(dāng)劑量增加至6粒時(shí)，他克莫司的藥時(shí)曲線下面積上升到373，同時(shí)服用1粒五酯膠囊時(shí)，他克莫司Cmax值就顯著提高到了35.28 ng/ml，2粒時(shí)，Cmax上升為最大值43.539，直到6粒時(shí)，Cmax值有所降低并出現(xiàn)了個(gè)平臺(tái)期，且C12、C24維持5～10 ng/ml。

以上表明，五酯膠囊能夠明顯升高健康志愿者體內(nèi)處于穩(wěn)定的他克莫司血藥濃度，并隨五酯膠囊劑量的增加，其血藥濃度升高。當(dāng)口服2 mg 他克莫司，同時(shí)服用五酯膠囊 6粒時(shí)，他克莫司 C12 h谷濃度上升至7.556 ng/ml，C24 h仍能維持在5 ng/ml以上，因此將其作為推薦組合劑量。

[1]陳超，鄔義強(qiáng)，林述龍.五酯膠囊聯(lián)合西藥治療慢性乙型肝炎42例療效觀察[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2008, 29(11)：23-24.

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[3]MacPhee I A, Holt D W. A. pharmacogenetic strategy for immunosuppression based on the CYP3A5 genotype [J]. Transplantation, 2008, 85(2):163-165.

[4]劉麗娟，賴雁威，李慧云，等. 肝移植患者他克莫司谷血藥濃度監(jiān)測(cè)意義和臨床個(gè)體化用藥調(diào)節(jié)[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2015，25(12)：1026-1030.

[5]Park J Y, Shin H K，Choi Y W，etal. Gomisin A induces Ca2+-dependent activation of eNOS in human coronary artery endothelial cells [J]. J Ethnopharmaco1, 2009, 125(2)：291-296.

[6]徐艷霞.中草藥對(duì)肝細(xì)胞色素P450的作用[J].中國(guó)藥理通訊，2005，22(3)：64-68.

(2015-08-26收稿2015-11-30修回)

(責(zé)任編輯武建虎)

Effect of Wuzhi capsules on pharmacokinetics of tacrolimus

MI Li1，WEI Hua2, LI Jingchao3, QIN Shixin4, and MAO Jianhui1.

1.Department of Gastroenterology, 4.Medical Department,Shanghai Municipal Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Force, Shanghai 201103, China; 2.Department of Gastroenterology, Shanghai Changzheng Hospital，Shanghai 200433，China; 3. Medical Department, Hainan Provincial Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Force, Haikou 570203, China

ObjectiveTo evaluate the effect of different doses of Wuzhi capsules on the pharmacokinatics of Tacrolimus in healthy human body. Methods40 healthy volunteers were divided into 5 groups, and 0, 1, 2, 6, 8 capsules of Wuzhi capsules were given to each group accordingly after 2 mg of tacrolimus was given systematically. Venous blood was collected before and at different time points after drug administration. Blood samples were collected in anti-coagulation tubes and stored till analysis. ResultsThe dose of tacrolimus was increased with the increase of the dose of Wuzhi capsules AUC0→t, Tmax, and the largest were (459.3±114.2)ng·h/ml and(3.125±1.356)h, respectively, and Cmax was the largest after taking two capsules (43.539±10.656) ng/ml. The CL/F ratio decreased from 51.67% to 27.09% when the dose of Wuzhi capsules increased from 1 capsule to 8 capsules. ConclusionsThe metabolic rate of tacrolimus decreases, the clearance rate decreases and the blood concentration increases when Wuzhi capsules are administered together with tacrolimus.

Tacrolimus; Wuzhi capsules; pharmacokinetics；HPLC

米麗，碩士，主管藥師。

201103,武警上?？傟?duì)醫(yī)院：1.藥劑科，4.醫(yī)務(wù)處;2.200041上海, 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院藥劑科;3.570203?？冢渚Ｄ峡傟?duì)醫(yī)院醫(yī)務(wù)處

位華，E-mail: wh7975@163.com

R978; R657.3