刺葉錦雞兒根與地上部分化學(xué)成分初步研究

賈月梅， 潘　蘭， 賈新岳， 力瓦衣丁·買合蘇提， 石明輝， 賈曉光

(新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所， 烏魯木齊　830002)

?

刺葉錦雞兒根與地上部分化學(xué)成分初步研究

賈月梅， 潘蘭， 賈新岳， 力瓦衣丁·買合蘇提， 石明輝， 賈曉光

(新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所， 烏魯木齊830002)

目的分析和比較刺葉錦雞兒根及地上部分的化學(xué)成分，探索地上部分代替根部的可能性。方法采用系統(tǒng)預(yù)試法，對刺葉錦雞兒水提液、醇提液、石油醚提取液進(jìn)行初步研究，并對其根與地上部分總黃酮含量進(jìn)行定量分析。結(jié)果刺葉錦雞兒根及地上部分均含有氨基酸、糖、多糖、酚類、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、生物堿、甾體和三萜類、香豆素、內(nèi)酯和揮發(fā)油等化學(xué)成分。刺葉錦雞兒根部總黃酮含量為0.46%，地上部分總黃酮含量為1.4%。結(jié)論刺葉錦雞兒根與地上部分具有相似的化學(xué)成分，研究為刺葉錦雞兒地上部分能否代替根入藥提供了依據(jù)。

刺葉錦雞兒； 根； 地上部分； 化學(xué)成分

刺葉錦雞兒(Caragana acanthophylla Kom.)為豆科錦雞兒屬植物，主要生長在干山坡、荒漠、沙地，為落葉灌木，耐干旱，根系發(fā)達(dá)，有豐富的根瘤菌，具有良好的防風(fēng)固沙、保持水土、提高土壤肥力和改善土壤物理性狀的作用[1-3]，而且還具有薪炭、飼用、綠肥、蜜源等資源價值[4-6]。刺葉錦雞兒的根在民間常作為抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，具有活血、止痛、利尿、強(qiáng)壯的功效[7]。然而，鑒于刺葉錦雞兒的根系非常發(fā)達(dá)且具有良好的保持水土特性，如果對其進(jìn)行過度采挖，勢必造成嚴(yán)重的生態(tài)破壞。本課題組前期研究[3]采用Ⅱ型膠原蛋白誘導(dǎo)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)大鼠模型，考察刺葉錦雞兒根與地上部分乙醇提取物的體內(nèi)抗RA活性。結(jié)果顯示，刺葉錦雞兒根與地上部分提取物均可降低RA大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)，抑制踝關(guān)節(jié)腫脹程度；下調(diào)大鼠血清中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和C反應(yīng)蛋白水平，上調(diào)IL-10水平；病理切片顯示，刺葉錦雞兒根與地上部分可顯著減少滑膜增生及炎性細(xì)胞浸潤。刺葉錦雞兒根與地上部分均具有抗RA活性，且地上部分的抗RA活性優(yōu)于根，說明刺葉錦雞兒地上部分有代替根入藥的可能。為了進(jìn)一步證明刺葉錦雞兒地上部分能代替根入藥，本研究對刺葉錦雞兒的地上部分及根進(jìn)行化學(xué)成分比較研究，以探索刺葉錦雞兒地上部分能否代替根入藥，也為進(jìn)一步研究提供試驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試藥、試劑及儀器刺葉錦雞兒采集于新疆烏魯木齊市紅雁池，經(jīng)賈曉光研究員鑒定為刺葉錦雞兒(Caragana acanthophylla Kom)。試劑(茚三酮試劑、雙縮脲試劑、Fehling試劑、氯化鈉明膠試劑、1%FeCl3試劑、α-萘酚、溴酚藍(lán)、三氯化鋁試劑、乙酸鎂試劑、鐵氰化鉀、異羥肟酸鐵試劑、硝酸銀、堿性碘化鉍鉀試劑、苦味酸試劑、硅鎢酸試劑等)自制，石油醚、乙醇、三氯甲烷等試劑為分析純。多用粉碎機(jī)(9FZ-25，四川簡陽市大地機(jī)械廠)，電子天平(FA1104N，上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司)，數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-S2，金壇市醫(yī)療儀器廠)，三用紫外儀(ZF-2C型，上海市安亭電子儀器廠)。

1.2方法

1.2.1樣品供試液制備[8-11]水提液的制備：稱取實(shí)驗(yàn)品粗粉適量，置具塞錐形瓶中，加入蒸餾水10倍量，不時振搖，浸泡24 h，過濾，取濾液，供糖、多糖及苷類、多肽、氨基酸等成分的檢識。醇提液的制備：取樣品適量，加入8倍量的乙醇，回流提取1 h，濾過。濾液回收至無醇味，取一半的濃縮液，加10 mL乙醇溶解，供檢識有機(jī)酸、鞣質(zhì)、蒽醌、黃酮、甾體和三萜類化合物。另一半濃縮液加5%鹽酸10 mL，充分?jǐn)嚢?，濾過，濾液供生物堿類化合物的檢識。不溶部分，加乙酸乙酯10 mL溶解，再用5%氫氧化鈉溶液振搖洗滌2次，獲得的乙酸乙酯溶液，水浴上蒸干，殘留物用乙醇15 mL溶解，供內(nèi)酯、香豆素、強(qiáng)心苷類化合物的檢識。石油醚提取液的制備：取實(shí)驗(yàn)品粗粉適量，置燒杯中，加入石油醚(60～90℃) 10倍量，密閉，室溫放置2 h后濾過，濾液置于蒸發(fā)皿中濃縮后即得。

1.2.2總黃酮含量測定1.2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制采用 Al(NO3)3-NaNO2比色法。精密稱取蘆丁對照品適量，置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，使其濃度為160 μg/mL對照品溶液。分別精密吸取0、0.5、1、2、3、4、5 mL蘆丁對照品溶液置于25 mL容量瓶，加70%乙醇至5 mL，先加5%亞硝酸鈉1 mL，搖勻，放置6 min，再加入10%硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min，加10%NaOH試液10 mL，再加70%乙醇至刻度，搖勻，放置15 min，以試劑做空白參比液測500 nm處的吸光度。以吸光度做線性回歸，得蘆丁含量與吸光度的回歸方程Y=0.016X+0.012，r=0.999 5。

1.2.2.2樣品總黃酮含量測定稱取刺葉錦雞兒根、地上部分粗粉各10 g，分別置于圓底燒瓶中，加150 mL70%乙醇,水浴回流提取2 h，連續(xù)提取3次，合并濾液，減壓濃縮，干燥，獲得浸膏。將各部位浸膏用70%乙醇溶解，定容至25 mL，取1 mL置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，作為供試品溶液。取供試品溶液2 mL，于500 nm處按“1.2.2.1”項(xiàng)下方法測吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算刺葉錦雞兒不同部位的總黃酮含量。

2　結(jié)果與分析

2.1刺葉錦雞兒根及地上部分不同提取液化學(xué)成分檢測結(jié)果刺葉錦雞兒根及地上部分氨基酸、黃酮、酚類、有機(jī)酸、生物堿等化學(xué)成分的檢測結(jié)果見表1～3。由表1結(jié)果知，刺葉錦雞兒根可能含有糖、多糖、氨基酸、酚類、鞣質(zhì)、生物堿、有機(jī)酸、黃酮類、甾體和三萜類、內(nèi)酯、香豆素和揮發(fā)油等成分。地上部分可能含糖、多糖、氨基酸、鞣質(zhì)、酚類、有機(jī)酸、黃酮類、生物堿、甾體和三萜類、香豆素、內(nèi)酯和揮發(fā)油等化學(xué)成分。

2.2總黃酮含量測定結(jié)果定量分析結(jié)果表明，刺葉錦雞兒根部黃酮含量為0.46%，地上部分總黃酮含量為1.40%。

表1　刺葉錦雞兒根及地上部分水提取液檢測結(jié)果

注：“+”表示反應(yīng)呈陽性；“-”表示反應(yīng)呈陰性。

3　討論

目前從錦雞兒屬植物中共分離出200余種化合物，包括黃酮類、二苯乙烯類、萜類、甾醇類、苯丙素類、有機(jī)酸、內(nèi)酯、香豆素、生物堿等化合物，含量最大的是黃酮類化合物和二苯乙烯類化合物，分別占錦雞兒屬化合物總量的30%和20%左右[12-15]。本研究結(jié)果也符合文獻(xiàn)中報道的化學(xué)成分種類范圍。在后續(xù)工作中，本課題組將對刺葉錦雞兒根及地上部分進(jìn)行系統(tǒng)研究，以深入比較其化學(xué)成分的具體差異。

表2　刺葉錦雞兒根及地上部分醇提取液檢測結(jié)果

注：“+”表示反應(yīng)呈陽性；“-”表示反應(yīng)呈陰性。

表3　刺葉錦雞兒根及地上部分石油醚提取液檢測結(jié)果

注：“+”表示反應(yīng)呈陽性；“-”表示反應(yīng)呈陰性。

現(xiàn)代藥理研究表明錦雞兒具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗骨質(zhì)疏松、抗腫瘤、抗氧化、防治心血管類疾病、抗菌等作用[16-19]。黃酮類化合物是錦雞兒屬植物中一類重要的活性成分，通過對刺葉錦雞兒不同藥用部位總黃酮含量進(jìn)行定量分析，發(fā)現(xiàn)刺葉錦雞兒地上部分的黃酮類化合物含量高于其根部，為刺葉錦雞兒地上部分利用提供了依據(jù)。

[1]姚彥臣.我國錦雞兒屬灌叢草地類型的基本特點(diǎn)及其經(jīng)濟(jì)評價[J].中國草地,1992,14(2):55,60.

[2]曹成有,蔣德明,阿拉木薩.小葉錦雞兒人工固沙區(qū)植被恢復(fù)生態(tài)過程的研究[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報,2000,l1(3):349-350.

[3]潘蘭,賈新岳,石明輝,等.新疆產(chǎn)四種錦雞兒的民族植物學(xué)調(diào)查[J].中國現(xiàn)代中藥,2013,15(7):578-579.

[4]劉增文,李雅素.黃土丘陵區(qū)檸條林地養(yǎng)分狀況及其循環(huán)規(guī)律[J].生態(tài)學(xué)雜志,1997,16(6):27-29.

[5]劉晶,魏紹成,李世鋼.檸條飼料生產(chǎn)的開發(fā)[J].草業(yè)科學(xué),2003,20(6):32-35.

[6]劉國謙,張俊寶,劉東慶.檸條的開發(fā)利用及草粉加工飼喂技術(shù)[J].草業(yè)科學(xué),2003,20(27):26-32.

[7]賈敏如,李星煒.中國民族藥志要[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2005:131-132.

[8]潘蘭,李曉瑾,賈曉光,等.瘤果黑種草化學(xué)成分的初步研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,47(2):300-302.

[9]周琴,賈新岳,潘蘭,等.哈薩克民間藥用角果藜化學(xué)成分初步研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,49(5):891-894.

[10]邱黛玉.中藥化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院, 2007:21-28.

[11]侯小濤,鄧家剛,戴 航,等.銀合歡種子化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)[J].時珍國醫(yī)國藥,2009,20(1):62-63.

[12]宋萍,馬歡,田婭.藏藥鬼箭錦雞兒化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J].中國藥物與臨床, 2009,9(12):1149-1151.

[13]楊中鐸,李濤,楊明俊,等.錦雞兒屬植物化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展[J].中成藥,2008,30(11):1678-1681.

[14]Luo HF, Zhang LP, Hu CQ．Five novel oligostilbenes from the roots of Caragana sinica[J]. Tetrahedron, 2001, 57(23):4849-4854.

[15]孫慧玲,張倩,李東,等.固相微萃取/氣相色譜/質(zhì)譜法分析錦雞兒莖揮發(fā)性成分[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(10):63-64.

[16]孫智華.中間錦雞兒倍半萜類化合物的分離及活性研究[D].上海:復(fù)旦大學(xué),2004:3-6.

[17]陳龍，張一冰，顧海鵬，等.錦雞兒脂溶性成分GC-MS分析[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012,18(7):123-125.

[18]金桂林.檸條籽化學(xué)成分及生物活性研究[D].上海:第二軍醫(yī)大學(xué),2008:13-36.

[19]高海峰,鄭兵兵,王薊花,等.白皮錦雞兒黃酮醇類化合物及其抗菌和抗氧化活性[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2011,23(23):853-856,930.

(本文編輯周芳)

Preliminary study of the chemical components on the root and aerial part of Caragana acanthophylla Kom

JIA Yuemei, PAN Lan, JIA Xinyue, Liwayiding Maihesuti, SHI Minghui, JIA Xiaoguang

(XinjiangInstituteofChineseMateriaMedicaandEthnodrug,Urumqi830002,China)

ObjectiveIn order to identify and compare the chemical constituents between the root and aerial part of Caragana acanthophylla Kom, explore the possibility that the ground part can instead of the roots. MethodThe chemical constituents of water extract, petroleum ether extract, and ethanol extract were studied by systemic preparative test. The total flavonoids contents of root and aerial part from C. acanthophylla Kom were determined further. ResultsThe roots and the aerial part of C. acanthophylla Kom. contained amino acids, sugar, polysaccharide, phenols, tannin, organic acids, flavonoids, alkaloids, steroids and triterpene, coumarin, lactones and volatile oil. The contents of total flavonoids from C. acanthophylla Kom were 0.46% (root) and 1.4% (aerial part). ConclusionThere was no significant differences between the root and aerial part of C. acanthophylla Kom on chemical compositon. These basic information provided theory basis for the aerial part of C. acanthophylla Kom instead of the root of C. acanthophylla Kom.

CaraganaacanthophyllaKom; root; aerial part; chemical constituents

國家自然科學(xué)基金-新疆聯(lián)合基金(U1203202)； 新疆維吾爾自治區(qū)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(XJDX0201-2013-02)

賈月梅(1987-)，女，在讀碩士，研究方向：食品、藥品研究。

賈曉光，男，研究員，碩士生導(dǎo)師，研究方向：中藥民族藥，E-mail:xgjia@vip.sina.com。

新疆錦雞兒植物研究

R28

A

1009-5551(2016)10-1219-05

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.10.001

2016-04-28]

專題研究作者簡介：賈曉光，男，研究員，碩士生導(dǎo)師，國務(wù)院特貼專家，新疆維吾爾自治區(qū)優(yōu)秀專家，新疆維吾爾自治區(qū)人民政府參事，新疆維吾爾自治區(qū)專家顧問團(tuán)成員，2013年度自治區(qū)科技進(jìn)步特等獎獲得者。兼任新疆藥學(xué)會副理事長、新疆中醫(yī)藥學(xué)會常務(wù)理事、中國民族植物學(xué)會理事、中國藥用植物保育委員會委員、中國植物學(xué)會第四十屆理事會藥用植物專業(yè)委員會委員、新疆植物學(xué)會第七、八屆理事會常務(wù)理事。主持國家科技支撐計(jì)劃、科技部國際科技合作、聯(lián)合基金項(xiàng)目、國家中醫(yī)藥管理局第四次中藥資源普查(新疆)試點(diǎn)項(xiàng)目、新疆維吾爾自治區(qū)“十二五”科技重大專項(xiàng)、新疆維吾爾自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化、新疆維吾爾自治區(qū)科研院所改革與發(fā)展、自然科學(xué)基金、高技術(shù)領(lǐng)域服務(wù)平臺建設(shè)、烏魯木齊市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃等10余項(xiàng)，科研經(jīng)費(fèi)達(dá)4 800余萬元。先后分別獲省部級科技進(jìn)步特等獎1項(xiàng)、一等獎2項(xiàng)、二等獎6項(xiàng)、三等獎7項(xiàng)及地州級科技進(jìn)步一、二、三等獎共18項(xiàng)。出版專著11部，主編《紫草》、《新疆常見中草藥栽培技術(shù)》、《天山雪蓮》、《維吾爾藥用植物DNA條形碼集》、《新疆特色藥用資源圖譜Ⅰ》、《新疆藥用植物名錄》。發(fā)表論文160余篇，其中SCI收錄9篇。申請發(fā)明專利21項(xiàng)，已授權(quán)17項(xiàng)，已實(shí)施5項(xiàng)。起草新疆維吾爾自治區(qū)DB165藥材栽培標(biāo)準(zhǔn)15項(xiàng)，主持和參加起草產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)16項(xiàng)。研發(fā)治療白癜風(fēng)新藥“復(fù)方卡力孜然酊”和仿制新藥12種，開發(fā)保健食品并獲得批文8個。

錦雞兒屬為豆科植物，全世界約有100余種，我國產(chǎn)62種，新疆有26種，種類約占全國種類的1/2，占全世界的1/3，是中國錦雞兒屬種類多樣性最多的地區(qū)，也是世界錦雞兒屬種類最集中的地區(qū)之一，資源極為豐富。該屬植物主要集中分布在草原和荒漠的干旱和半干旱地區(qū)，均具有耐干旱、耐貧瘠、抗逆性強(qiáng)的生物學(xué)特性優(yōu)勢；錦雞兒屬植物根系較發(fā)達(dá)，具有防風(fēng)固沙、保持水土和改善土壤養(yǎng)分的作用，具有飼用、綠肥、薪炭、蜜源、藥用等價值。該屬植物的根、地上部分、花、木部心材、種子等部位均可入藥，在藏藥、蒙藥、朝藥、中藥等傳統(tǒng)藥中廣泛應(yīng)用，享有盛名。在國家自然科學(xué)基金-新疆聯(lián)合基金(U1203202)的資助下，本課題組對錦雞兒屬植物的化學(xué)成分及藥理活性研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了吐魯番錦雞兒化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究、刺葉錦雞兒化學(xué)成分研究、吐魯番錦雞兒等新疆產(chǎn)4種錦雞兒屬植物總黃酮含量及有害元素含量的測定，以期為錦雞兒屬藥用植物資源的合理開發(fā)及臨床的安全性應(yīng)用提供依據(jù)。