化學(xué)發(fā)光免疫測定在生化檢驗中的應(yīng)用效果評價

桂明 周曉霞

[摘要] 目的 分析化學(xué)發(fā)光免疫測定在生化檢驗中的應(yīng)用效果與評價。 方法 選取2013年5月～2015年5月我院580例甲狀腺腫瘤患者，按拋硬幣法將其分為兩組各290例，一組使用化學(xué)發(fā)光免疫檢測法，設(shè)為檢測組，另一組采用放射免疫分析法，設(shè)為放射組。對兩組檢測結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果 檢測組靈敏度、特異性以及檢測符合率等指標(biāo)均顯著高于放射組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。檢測組甲狀腺球蛋白水平為（690.8±89.1）ng/mL，放射組為（631.2±51.3）ng/mL，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.872，P<0.05）。 結(jié)論 化學(xué)發(fā)光免疫檢測具有較高靈敏度與準(zhǔn)確性，在臨床診斷與治療中應(yīng)用效果顯著，對準(zhǔn)確診斷出患者病情意義重大，有一定的臨床推廣價值。

[關(guān)鍵詞] 化學(xué)發(fā)光免疫測定；生化檢驗；應(yīng)用效果；放射免疫分析法；評價

[中圖分類號] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2016）05-0113-03

化學(xué)發(fā)光免疫測定法又被稱為化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測定法，國際上通稱為chemiluminescent immunoassay，即CLIA。該方法通過磁場將抗原、抗體沉淀部分與游離部分進(jìn)行分離，從而達(dá)到定量或定性檢測的目的，廣泛應(yīng)用于臨床病毒、腫瘤標(biāo)志物、免疫系統(tǒng)疾病以及心臟疾病的診治過程。本次研究以甲狀腺腫瘤為主要研究方向，選取本院580例甲狀腺腫瘤患者，就化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測定法與放射免疫分析法在生化檢驗中的應(yīng)用效果展開研究，并結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研與臨床經(jīng)驗，對化學(xué)發(fā)光免疫測定在其他疾病臨檢確診過程中的應(yīng)用進(jìn)行了簡要闡述，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年5月～2015年5月580例甲狀腺腫瘤患者，按拋硬幣法將其分為檢測組和放射組各290例，其中檢測組男142例，女148例，年齡7～85歲，平均（46.2±7.5）歲，病程1～6年，平均（3.2±1.3）年；放射組男151例，女139例，年齡9～83歲，平均（47.3±4.2）歲，病程1.5～8年，平均（4.3±1.7）年。本次研究在取得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會認(rèn)證通過的前提下進(jìn)行，所有患者均與我院簽署《調(diào)查研究知情同意書》，符合《甲狀腺病理診斷》（人民軍醫(yī)出版社，2011版）中的臨床標(biāo)準(zhǔn)，排除心腦血管疾病、特殊情況過敏、腎功能嚴(yán)重障礙以及有精神病史或家族精神病史的患者。檢測組患者性別、年齡、病程等一般資料與放射組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

將各組人員進(jìn)行編號并分別抽取3 mL靜脈血，將患者血液中加入適量肝素（Glaxo Wellcome Production，國藥準(zhǔn)字J20090006）抗凝，離心分離，3500 r/min，取血漿凍存，檢測患者甲狀腺球蛋白，檢測時間控制在4 h以內(nèi)。

放射組患者采取放射免疫法進(jìn)行檢測，使用FJ-20003/50P型γ全自動雙探頭放射免疫計數(shù)儀（西安國營二六二廠提供）對患者甲狀腺球蛋白進(jìn)行檢測。

檢測組患者采取化學(xué)發(fā)光免疫法進(jìn)行檢測。MAGLUMI-4000型分析儀與配套化學(xué)發(fā)光試劑盒（深圳新產(chǎn)生業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司）進(jìn)行甲狀腺球蛋白檢驗，采用雅培i2000儀器與配套試劑（美國雅培公司）進(jìn)行第三方驗證。

1.3 觀察指標(biāo)

通過對各組甲狀腺球蛋白檢測結(jié)果進(jìn)行分析，以假陽性和假陰性檢出率為依據(jù)，對兩種檢測方法特異性和靈敏性進(jìn)行比較。放射免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為11.45～20.25 ng/mL，化學(xué)發(fā)光免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為0.73～84 ng/mL。靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100.0%，特異性=真陰性/（真陰性+假陽性）×100.0%，符合率=（真陽性+真陰性）/總例數(shù)×100.0%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

文中涉及數(shù)據(jù)均在SPSS13.0中輸入，計數(shù)資料采取率（%）表示，行χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，行t檢驗，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組檢測結(jié)果比較

檢測組實際陽性143例，陰性147例，檢測出真陽性142例，真陰性142例。放射組實際陽性146例，陰性144例，檢測出真陽性125例，真陰性118例。采用化學(xué)發(fā)光免疫法的檢測組檢測甲狀腺球蛋白靈敏度、符合率、特異性等數(shù)據(jù)明顯高于采用放射免疫檢測法的放射組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 兩組甲狀腺球蛋白水平比較

檢測組甲狀腺球蛋白水平為（690.8±89.1）ng/mL，放射組為（631.2±51.3）ng/mL，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.872，P<0.05）。

3 討論

化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)最早應(yīng)用于20世紀(jì)70年代，當(dāng)時只作為示蹤信號，且靈敏度與發(fā)光時間明顯不足，局限了應(yīng)用領(lǐng)域。隨著醫(yī)學(xué)儀器技術(shù)發(fā)展，到80年代中期，出現(xiàn)辣根過氧化物酶標(biāo)記技術(shù)，大大提高了信號強(qiáng)度，延長了發(fā)光時間，解決了測定技術(shù)難題?；瘜W(xué)發(fā)光通常被分為3大類型：第一種為發(fā)光酶免疫測定，即LEIA；第二種為發(fā)光物免疫測定，即LIA；第三種為發(fā)光輔助因子免疫測定，即LEIA?；瘜W(xué)發(fā)光類型雖然各異，但其內(nèi)在原理卻能通用，化學(xué)發(fā)光均為通過化學(xué)發(fā)光物質(zhì)通過化學(xué)反應(yīng)從而產(chǎn)生光輻射[1]。本次研究所討論的化學(xué)發(fā)光免疫測定方法與放射免疫測定方法具有一定相似之處，二者都可以用Ag-L+CR→light進(jìn)行標(biāo)示（Ag-L代表發(fā)光物；CR代表協(xié)同反應(yīng)物）[2]?；瘜W(xué)發(fā)光免疫測定用途十分廣范，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，化學(xué)發(fā)光免疫測定法常見于腫瘤測定過程之中，憑借其特有的光輻射，能對CA153、CA242、CEA、NES、AFP、PSA等十多種腫瘤進(jìn)行測定。

本次研究結(jié)果表明，使用化學(xué)發(fā)光免疫測定對甲狀腺球蛋白濃度進(jìn)行檢測，檢測靈敏度、符合率、特異性均明顯高于放射免疫檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。利用化學(xué)發(fā)光原理對甲狀腺球蛋白濃度進(jìn)行檢驗更加簡單實用，更為靈敏的檢測出甲狀腺疾病，且具有高準(zhǔn)確率，解決了甲狀腺疾病臨檢難題。TG屬于甲狀腺中主要蛋白形式，占蛋白總量的75%左右，是甲狀腺激素生物合成的首要前提。在蛋白水解酶的作用因素下，甲狀腺激素脫離TG釋放入血，在正常前提下，循環(huán)血中有微量TG存在。TG半衰期在（4～60）h左右，在各種甲狀腺疾病，尤其是甲狀腺腫瘤，患者血液中TG濃度均有不同程度的增高。本次研究采用化學(xué)發(fā)光免疫檢測法和放射免疫法對甲狀腺腫瘤患者TG水平進(jìn)行檢測，結(jié)果表明檢測組TG水平明顯高于放射組，提示TG水平可作為甲狀腺腫瘤術(shù)前和術(shù)后變化的反映指標(biāo)，且具有高靈敏性，因此甲狀腺腫瘤患者應(yīng)定期復(fù)查TG水平。

此外，化學(xué)發(fā)光免疫檢測還廣泛應(yīng)用于臨床生化檢驗中，包括病毒檢測、心臟疾病檢測等。具體內(nèi)容如：（1）梅毒螺旋體檢測。臨床常用方法為對患者體內(nèi)非密螺旋體特異性抗體進(jìn)行檢測，之后再進(jìn)行確證檢測，根據(jù)結(jié)果才能確診，常用的人工檢測方法效率低且耗時長，操作復(fù)雜，無法滿足臨床要求，在何惠[3]等的研究中，采用化學(xué)發(fā)光免疫檢測則可利用全自動分析儀，通過兩步法進(jìn)行定性檢測，能有效降低假陽性率，提高臨床檢出準(zhǔn)確率。（2）乙肝病毒標(biāo)志物檢測。在乙型病毒性肝炎傳統(tǒng)檢測過程中多采用ELISA法進(jìn)行定性檢測，無法滿足臨床定量的需求，由于目前多以HBsAg作為病毒感染的判斷標(biāo)志物，因此可采用化學(xué)發(fā)光免疫測定法對乙肝HBsAg抗原進(jìn)行測定，達(dá)到定量與定性的雙重標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度可達(dá)100%，符合率和特異性分別可達(dá)97.61%，98.74%，且各檢測指標(biāo)均符合臨床診療需求，在較大范圍內(nèi)線性良好。（3）腫瘤標(biāo)志物檢測。腫瘤標(biāo)志物存在與細(xì)胞和組織當(dāng)中，包括蛋白質(zhì)、酶、激素等，國內(nèi)外大部分學(xué)者通過化學(xué)發(fā)光免疫測定法檢測腫瘤標(biāo)志物，對腫瘤患者早期診斷和術(shù)后檢測提供了有參考價值的指標(biāo)，例如張國軍等[4]人以化學(xué)發(fā)光免疫測定發(fā)對血清中鱗狀細(xì)胞癌抗原以及cy-fra21-1濃度進(jìn)行測定，從而實現(xiàn)了對食管癌的有效診斷和病情觀察，效果良好。（4）心臟疾病檢測。陳麗珠等[5]對心臟病患者心肌損傷標(biāo)志物和肌紅蛋白間的關(guān)系進(jìn)行了數(shù)據(jù)分析，結(jié)果顯示三者間有密切相關(guān)性，因此在心臟疾病臨檢過程中可利用化學(xué)發(fā)光免疫測定對臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測，能實現(xiàn)對心臟疾病患者及時、準(zhǔn)確、有效的診斷和臨床癥狀監(jiān)護(hù)。

在臨床生化檢驗過程中，能有效滿足疾病標(biāo)記的抗原畢竟占少數(shù)，因此還需對檢測方法進(jìn)行充分優(yōu)化，具體表現(xiàn)為：（1）有效提升分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和靈敏度，提高分析結(jié)果放大倍數(shù)，延長檢驗下限，擴(kuò)大化學(xué)發(fā)光免疫檢測的應(yīng)用范圍，使其發(fā)揮更大的臨床價值[6-9]；（2）提高分析儀器的準(zhǔn)確性，以促進(jìn)儀器小型化、智能化轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)展方向[10-12]；（3）化學(xué)發(fā)光免疫測定對發(fā)光物的生成和催化劑效果依賴較大，為有效擴(kuò)大應(yīng)用范圍，提升檢測靈敏度，還需研發(fā)出新型發(fā)光物和催化劑，同時還需修飾和增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)效果，進(jìn)一步探討新型分析方法， 提升檢驗準(zhǔn)確性[13-18]。

綜上，化學(xué)發(fā)光免疫檢測具有較高靈敏度與準(zhǔn)確性，在臨床診斷與治療中應(yīng)用效果顯著，對準(zhǔn)確診斷出患者病情意義重大，有一定的臨床推廣價值。

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（收稿日期：2015-12-30）