紅掌葉片愈傷組織誘導與植株再生的優(yōu)化

陳彥霖

摘要：以亞麗桑娜紅掌（Anthurium andraeanum cv. Arizona）為研究對象，研究了不同激素配比對愈傷組織誘導、不定芽分化、芽增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)等方面的影響。結果表明，培養(yǎng)基MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L為愈傷組織誘導的最適培養(yǎng)基；培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0 mg/L+6-KT 1.5 mg/L為不定芽分化的最適培養(yǎng)基；培養(yǎng)基MS+6-BA 0.8 mg/L為繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基；培養(yǎng)基MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L為誘導生根的最佳培養(yǎng)基。

關鍵詞：亞麗桑娜紅掌（Anthurium andraeanum cv. Arizona）；誘導；植株再生；愈傷組織

中圖分類號：S688.4 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）06-1572-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.06.053

亞麗桑娜是紅掌（Anthurium andraeanum cv. Arizona）的盆栽品種之一，為天南星科花燭屬多年生草本花卉，葉片綠色，長卵形，株高50～55 cm，冠幅40～50 cm，佛焰苞深紅色，肉穗花序黃色，直徑10 cm左右。亞麗桑娜紅掌因其花色紅艷，葉形獨特，單花期可長達4～6個月，周年可開花，深受廣大消費者的喜愛。因此，亞麗桑娜紅掌成為花卉市場紅掌品種中的主要栽培品種，在栽培中應用范圍廣[1]。但由于其生長慢、分蘗少，常采用組織培養(yǎng)的方式進行繁殖。本試驗以亞麗桑娜紅掌為研究對象，研究了不同激素配比對愈傷組織誘導、不定芽分化、芽增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)等方面的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 外植體 亞麗桑娜紅掌購于武漢市某卉市場。外植體取材前2周內(nèi)不再向母株澆水，選擇生長健壯、無病、展葉兩周的幼嫩葉片作為外植體，外植體采集回來后先用流水洗凈，再用無菌蒸餾水沖洗2次，再用75%乙醇浸泡10 s，然后用無菌蒸餾水沖洗3次，再用0.1%的HgCl2浸泡8 min，再用無菌蒸餾水沖洗4次，然后在超凈工作臺上將幼葉切成帶主葉脈的大小為1.5 cm×1.0 cm的長方塊[2]。

1.1.2 培養(yǎng)基 MS作為基本培養(yǎng)基，在組培苗的不同培育階段分別添加不同種類和濃度的植物激素以及其他附加物，按常規(guī)方法配制并分裝，在121 ℃的條件下滅菌20 min，直至冷卻后備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 愈傷組織誘導 用鑷子將滅菌后的外植體接種到添加不同種類和濃度激素的MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)[3]，激素配比見表1。每瓶接種3個外植體，每個處理10瓶，重復3次，取平均值。培養(yǎng)時將溫度為24～26 ℃，光照時間為12 h/d，光照度為1 000～1 500 lx[4]。

1.2.2 不定芽分化 愈傷組織長到0.5 cm時，切下接入誘導不定芽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)?；九囵B(yǎng)基選用MS，添加6-BA與6-KT、NAA不同濃度配比組成分化培養(yǎng)基[5]，激素配比見表2。培養(yǎng)時溫度為24～26 ℃，光照時間為12 h/d，光照度為1 000～2 000 lx。

1.2.3 不定芽增殖培養(yǎng) 將誘導獲得的無菌芽切下轉至增殖培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)（表3），適當增加光照時長和光照度，研究其不定芽的增殖情況。

1.2.4 生根培養(yǎng) 經(jīng)過約7次增殖培養(yǎng)后，將高2 cm以上的芽由叢生芽上單個切下轉至生根培養(yǎng)基上誘導生根（表4）[6]，適當增加光照時間和光照度，研究其生根情況。

2 結果與分析

2.1 愈傷組織的誘導結果

選用MS為基礎培養(yǎng)基，將消毒切割后的葉片外植體接種到添加了不同濃度的6-BA和2，4-D的9種培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，30 d后觀察結果。結果（表5）表明，培養(yǎng)基MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L的誘導率最高，為70.0%。

2.2 不定芽的分化結果

2.2.1 不同激素配比對不定芽分化率的影響 將誘導形成的愈傷組織切成大小為1～2 cm2的小塊，接種到含有不同種類和濃度的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，基礎培養(yǎng)基為MS，每天觀察并統(tǒng)計分化芽的愈傷組織數(shù)，計算分化率。結果（表6）表明，培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0 mg/L+6-KT 1.5 mg/L的分化率最高，為83.3%。

2.2.2 不同激素配比對不定芽增殖的影響 隨著繼代培養(yǎng)次數(shù)的增加，植株出現(xiàn)生長不良，氣生根增多，調(diào)整培養(yǎng)基如表7所示。結果表明，單純使用6-BA有利于亞麗桑娜紅掌繼代增殖。綜合考慮，最適宜不定芽繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.8 mg/L，增殖系數(shù)在4.0以上。

2.3 生根培養(yǎng)

將高2 cm以上的芽由叢生芽上單個切下移入不同外源激素水平的生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，20 d后觀察并統(tǒng)計生根情況。結果（表8）表明，在基本培養(yǎng)基中添加NAA和IBA對亞麗桑娜紅掌組培苗生根均有促進作用，NAA對根的誘導效果明顯優(yōu)于IBA，兩者的組合最佳配方為MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L。

3 小結

3.1 愈傷組織誘導

在MS培養(yǎng)基中添加6-BA可誘導亞麗桑娜紅掌外植體產(chǎn)生愈傷組織，但單純添加6-BA誘導率低，在加入2，4-D后誘導率明顯增加，但隨著2，4-D濃度的增加，誘導率反而降低。MS+6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L誘導率最高，且形成的愈傷組織生長狀態(tài)良好，生長速度快。

3.2 不定芽分化

6-BA與6-KT、NAA不同濃度配比，均可誘導不定芽分化，6-KT對不定芽的分化效果比NAA要好，最適合亞麗桑娜紅掌不定芽分化的培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+6-KT 1.5 mg/L，且出芽速度較快。隨著繼代培養(yǎng)次數(shù)的增加，植株出現(xiàn)生長不良，氣生根增多，原因可能是6-BA、6-KT和NAA在植株體內(nèi)不斷積累所致，因此建議繼代培養(yǎng)2代后調(diào)整培養(yǎng)基的激素配比，減少激素濃度，從試驗結果來看，綜合增殖系數(shù)和芽的長勢，將6-BA的濃度控制在0.2～0.8 mg/L效果較好。

3.3 生根培養(yǎng)

NAA和IBA對亞麗桑娜紅掌組培苗生根均有促進作用。單獨使用NAA，根系粗短，單獨使用IBA；根系細長，生根率前者也高于后者，因此，NAA對根的誘導效果明顯優(yōu)于IBA，但兩者結合使用，效果更佳，其最佳組合配方為MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L。

參考文獻：

[1] 高安輝，韋 茜，陳家龍，等.盆栽紅掌品種篩選試驗[J].貴州農(nóng)業(yè)科學，2005，33（5）：58-59.

[2] 林 茂，王華新，唐遒冥，等.紅掌組織培養(yǎng)研究進展[J].北方園藝，2012（24）：192-196.

[3] 郭軍戰(zhàn)，費昭雪，成密紅，等.紅掌不同外植體愈傷組織誘導與不定芽分化的研究[J].西北林學院學報，2006，21（3）：72-74.

[4] 楊利平，陳乃明，何貴整，等.“紅國王”紅掌愈傷組織的誘導與植株再生[J].林業(yè)科技通訊，2015（2）：38-40.

[5] 何貴整，陳麗文，時 群，等.紅掌組培快繁技術研究[J].北方園藝，2012（22）：115-118.

[6] 關麗霞，謝永剛，彭世勇，等.紅掌葉不同部位愈傷組織的誘導及植株再生[J].遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術學院學報，2007，9（1）：25-27.