雪菊花黃酮分散片的處方工藝研究

龔飛　戴青　郁建平

摘要：對雪菊花黃酮分散片的處方工藝進行優(yōu)化，以崩解時間、片劑表面形態(tài)或軟材制備情況為考察指標，通過單因素以及正交試驗，考察不同輔料的種類及用量對雪菊花黃酮分散片的影響，確定最佳處方。結(jié)果表明，最佳處方工藝為25%雪菊花提取物，64%微晶纖維素（MCC），5%交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮（PVPP），5%低取代羥丙基纖維素（L-HPC）和1%硬脂酸鎂，其崩解時間為（63±5）s。采用此工藝所制備的雪菊花黃酮分散片溶出度高，分散均勻性好，質(zhì)量可控，滿足速釋的要求，具有一定的開發(fā)和利用價值。

關鍵詞：雪菊花；黃酮；分散片；制備工藝

中圖分類號：S567.21+9；R284 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）06-1526-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.06.041

雪菊又名血菊，學名為兩色金雞菊（Coreopsis tinctoria Nutt.），是菊科金雞菊屬的一年生草本植物，主要生長在中國新疆昆侖山脈[1]。雪菊花作為一種藥食兩用資源，長期沖泡飲用，具有清熱解毒、活血化瘀健胃健脾的功能，可用于心慌、痢疾等病癥，同時可降低血壓和血脂[2-4]。雪菊花作為一種藥用植物，具有抗炎[5]、抗癌[6，7]、抗病毒[8]以及抗糖尿病等作用[9，10]。雪菊花中黃酮類化合物是主要有效成分，總黃酮含量達到12%以上，遠超過其他菊類[11]。分散片具有在水中迅速崩解，分散均勻，制備工藝簡單，生物利用度高的特點[12，13]。分散片穩(wěn)定性好，服用方便，攜帶簡單，特別適合老幼及吞咽困難患者[14]。該研究旨在對雪菊花黃酮分散片進行初步研究，以期為雪菊花進一步開發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器

HZY-A200型電子天平（福州華志科學儀器有限公司），TDP-6A型單沖壓片機（南通市華宇制藥機械有限公司），CJY-300D型片劑脆碎度測定儀、LB-2D型崩解時限測定儀、RCZ-6B3型藥物溶出度儀、YPD-300C智能片劑硬度測定儀。

1.2 試劑

雪菊花總黃酮（自制，經(jīng)紫外分光光度計檢測，含量>50%），蘆?。ê?99.9%，上海源葉生物科技有限公司），微晶纖維素（MCC）、預膠化淀粉、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）、羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）（湖州展望化學藥業(yè)有限公司），交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮（PVPP，上海金穗生物科技有限公司），硫酸鈣（AR，天津市科密歐化學試劑有限公司），糊精（遼寧東源藥業(yè)有限公司），可溶性淀粉（安徽山河藥用輔料股份有限公司），滑石粉（廣西龍勝華美滑石開發(fā)有限公司），PEG-4000（湖南爾康制藥股份有限公司），PEG-6000（遼陽奧克納米材料有限公司），硬脂酸鎂（北京化學試劑有限公司），無水乙醇、95%乙醇（AR，天津市富宇精細化工有限公司），試驗用水均為雙蒸水。

1.3 片劑的制備

將原、輔料分別過100目篩后充分干燥，按處方比例混勻后加50%乙醇溶液制軟材，24目篩制粒，50 ℃干燥30 min，24目篩整粒，外加崩解劑及潤滑劑，混合均勻后壓片。

2 結(jié)果與分析

2.1 輔料的選擇

2.1.1 填充劑的選擇 按處方量加入25%主藥、64%填充劑、10%崩解劑和1%的潤滑劑，按“1.3”制備分散片，選用硫酸鈣、糊精、預膠化淀粉、微晶纖維素作為填充劑，以片劑表面形態(tài)和崩解時間為考察指標，優(yōu)選填充劑種類，試驗結(jié)果見表1。選用預膠化淀粉和微晶纖維素作為組合對象，按比例1∶2、1∶1、2∶1進行試驗，以片劑表面形態(tài)、崩解時間和硬度作為考察指標，優(yōu)選填充劑合適的組合，試驗結(jié)果見表2。由表1和表2的比較可知，選用微晶纖維素作為填充劑崩解時間和硬度都較為適中，綜合考察，選用微晶纖維素作為填充劑較為合適。

2.1.2 崩解劑的選擇 以微晶纖維素作為填充劑，按“1.3”制備分散片，分別選用PVPP、L-HPC、CMS-Na 3種崩解劑作為考察對象，采用L9（34）設計正交試驗，以崩解時間作為考察指標，確定崩解劑的用量及種類，試驗設計見表3，結(jié)果及分析見表4，方差分析見表5。由表5可知，以崩解時間作為評價指標，影響因素主次為A>B>C，且A因素對于崩解時間有顯著影響（P<0.05）。由于C因素對于崩解時間的影響較小，根據(jù)正交試驗以及實際結(jié)果，確定最優(yōu)的處方為A3B3，即以1.0 g PVPP和1.0 g L-HPC為崩解劑的組合方式。

2.1.3 崩解劑加入方式的選擇 按照“1.3”的制備方法，擬采用崩解劑內(nèi)加、外加以及內(nèi)外加的方式進行試驗，組合方式見表6。由表6可知，組合6的加入方式崩解時間最短，為最優(yōu)的組合方式，即采用崩解劑內(nèi)加與外加相結(jié)合的方式，內(nèi)加與外加的比例為2∶1，即內(nèi)加0.66 g PVPP、0.66 g L-HPC和外加0.34 g PVPP、0.34 g L-HPC。

2.2 崩解時限及分散性測定

按照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩA崩解時限檢查法，分別取3批樣品各6片，置于（37±1） ℃水中測定崩解時限，測得崩解時間為（63±5）s，符合《中國藥典》對于分散片的質(zhì)量要求。按照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅠA片劑方法檢查，分別取3批樣品各6片，置250 mL燒杯中，加15～25 ℃的水100 mL，振搖3 min，分散片在水中能全部崩解，且均能通過二號篩。

2.3 含量測定

2.3.1 標準曲線的制備 準確稱取100 ℃烘干至恒重的蘆丁標準品25.0 mg，置于50 mL容量瓶中，加適量70%乙醇使其完全溶解后，定容，即得到0.5 mg/mL蘆丁標準品溶液。分別量取上述蘆丁標準品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 mL于25 mL容量瓶中，分別加入5%的亞硝酸鈉溶液1 mL，搖勻，放置6 min，然后各加入10%的硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min，最后各加入5%的氫氧化鈉溶液5 mL，用70%的乙醇溶液進行定容，放置15 min。以第一管試劑溶液做空白，在505 nm波長處測定吸光度。以濃度C為橫坐標，吸光度A為縱坐標，得到線性回歸方程A=11.978C-0.002 3，R2=0.999 8，濃度在0.02～0.10 mg/mL范圍內(nèi)線性關系良好。

2.3.2 穩(wěn)定性試驗 取同一批次分散片粉末，稱取240 mg，置于50 mL容量瓶中，加入適量60%乙醇，超聲波溶解5 min，樣品過0.45 μm微孔濾膜。取濾液0.5 mL于25 mL容量瓶中，按“2.3.1”操作，在505 nm處每隔10 min測定一次吸光度。結(jié)果表明，樣品在30 min內(nèi)穩(wěn)定性良好，RSD為0.63%。

2.3.3 精密性試驗 取“2.3.2”樣品溶液，按“2.3.1”操作，在505 nm處連續(xù)測定吸光度6次，結(jié)果表明，儀器精密度良好，RSD為0.15%。

2.3.4 重現(xiàn)性試驗 取同一批次分散片樣品6份，按“2.3.2”制備供試品溶液。取濾液0.5 mL于25 mL容量瓶中，按“2.3.1”操作，在505 nm處測定吸光度，RSD為0.32%，表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.3.5 加樣回收率試驗 取同一批次已知含量分散片粉末9份，每份為420 mg，按“2.3.2”制備供試品溶液。精密量取0.5 mL供試品溶液于25 mL容量瓶中，再分別加入0.5 mg/mL蘆丁標準品溶液0.5、1.0、1.5 mL，按“2.3.1”操作，在505 nm處測定吸光度，計算回收率，結(jié)果見表7。由表7可知，平均回收率為99.28%，RSD為1.26%，表明本方法的加樣回收率試驗符合要求，說明該方法作為含量測定方法是可行的。

2.3.6 樣品含量測定 分別取雪菊花黃酮分散片三批，每批20片，研細。分別稱取約240 mg置于50 mL容量瓶中，加入適量60%乙醇溶液，超聲波溶解5 min，樣品過0.45μm微孔濾膜。量取0.5 mL濾液于25 mL容量瓶中，按“2.3.1”操作，計算得總黃酮含量為68.10 mg/片。

2.4 溶出度測定

取雪菊花總黃酮分散片，按《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩC溶出度測定法中第一法操作，以900 mL脫氣蒸餾水、pH 1.0鹽酸溶液、pH 4.0乙酸緩沖液、pH 6.8磷酸緩沖液作為溶出介質(zhì)，溫度（37±0.5） ℃，轉(zhuǎn)速為50 r/min，并分別于1、5、10、15、30、45 min取樣10 mL，并同時補充10 mL等溫溶出介質(zhì)，樣品立即用0.45μm微孔濾膜過濾，移取5 mL溶液于25 mL容量瓶中，按“2.3.1”處理，測定吸光度，計算出各個時間點的累積溶出度（圖1）。由圖1可知，以pH 1.0鹽酸緩沖液、pH 4.0乙酸緩沖液作為溶出介質(zhì)，在30 min時，累積溶出度都小于85%，以pH 6.8磷酸緩沖液、蒸餾水作為溶出介質(zhì)時，在5 min時溶出度均超過85%，能達到速釋的要求。以pH 6.8磷酸緩沖液作為溶出介質(zhì)，較蒸餾水只是釋放速度稍快。綜合考察，選用蒸餾水作為溶出介質(zhì)，既滿足要求又能夠節(jié)省原料，符合要求。

3 討論

雪菊花作為一種藥食兩用的植物資源，黃酮含量較高，提高其藥用價值，具有良好的應用前景。研究對雪菊花黃酮分散片進行制備，優(yōu)選的制備工藝明顯降低了其崩解時間，分散均勻性也符合規(guī)定，選用的溶出介質(zhì)顯著的提高了黃酮的溶出度，達到速釋的要求。

在研究中曾以單因素考察硬脂酸鎂、滑石粉、PEG-4000以及PEG-6000作為潤滑劑對分散片的影響。試驗結(jié)果表明，硬脂酸鎂作為潤滑劑所制備的分散片更加光滑、平整、有光澤，且崩解時間、分散均勻性均符合要求。綜合考慮選用硬脂酸鎂作為潤滑劑較為合適。

在黏合劑的選用預試驗過程中，考察過5%淀粉漿、1%淀粉漿、蒸餾水、50%乙醇以及95%乙醇。試驗結(jié)果表明，50%乙醇作為黏合劑，制得的軟材適中，顆粒粉末比例均勻，休止角、壓縮度以及崩解時間均較小。綜合考察，選用50%乙醇作為黏合劑較為合適。

在研究中，制備分散片采用的是濕法制粒壓片法， 其制備工藝的關鍵在于制得粉末的流動性要好。用優(yōu)化處方制備的分散片崩解迅速，硬度合適，脆碎度較好，溶出度高，且其制備工藝簡單、可行，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

參考文獻：

[1] 吳 瑛，王秀芳，袁守亮.響應面分析昆侖雪菊水溶性黃酮類化合物的提取工藝[J].食品科學，2013，36（6）：129-133.

[2] LIU W X，DENG J H，XU H. Pharmacognostical studies on the flower of species Coreopsis sp.[J].Journal of Medicine and Pharmacy of Chinese Minorities，2009（1）：24-25.

[3] 蘭 衛(wèi)，趙保勝，李玉清，等.昆侖雪菊中多種含量成分的測定[J].中國實驗方劑學雜志，2012，18（10）：101-103.

[4] 張彥麗，阿布都熱合曼·合力力，阿依吐倫·斯馬義.苯酚-硫酸法測定維吾爾藥昆侖雪菊多糖含量的研究[J].藥物分析雜志，2010，30（11）：2205-2207.

[5] MOTOHIKO U，TOSHIHIRO A，KEN Y，et al.Constituents of compositae plants.2. Triterpene diols，triols，and their 3-O-fatty acid esters from edible chrysanthemum flower extract and their antiinflammatory effects[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry，2001，49（7）： 3187-3197.

[6] KEN Y，TOSHIHIRO A，YOSHIMASA K，et al.Inhibitory effect of heliantriol C： A component of chrysanthemum，on tumor promotion by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate in two-stage carcinogenesis in mouse skin[J].Phytomedicine，1998（5）：215.

[7] UKIYA M，AKIHISA T，TOKUDA H，et al.Constituents of compositae plants III. Anti-tumor promoting effects and cytotoxic activity against human cancer cell lines of triterpene diols and triols from edible chrysanthemum flowers[J]. Cancer Letters，2002，177（1）：7-12.

[8] HU C Q，CHEN K，SHI Q，et al.Anti-AIDS agents，10. Acacetin-7-O-beta-D-galactopyranoside， an anti-HIV principle from Chrysanthemum morifolium and a structure-activity correlation with some related flavonoids[J].Journal of Natural Products，1994，57（1）：42-51.

[9] 張淑鵬，李琳琳，木合布力·阿布力孜，等.昆侖雪菊對α葡萄糖苷酶的抑制作用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2011，11（6）：1055-1058.

[10] 張 燕，李琳琳，木合布力·阿布力孜，等.新疆昆侖雪菊5種提取物對α-葡萄糖苷酶活性的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（7）：166-169.

[11] 買買提·艾買提，木合布力·阿布立孜，孟 磊.新疆昆侖雪菊水溶性總黃酮含量的測定[J].海峽藥學，2010，22（10）：56-58.

[12] 蘇占輝，王書君，張滋明，等.金銀花總黃酮分散片處方工藝優(yōu)選[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（6）：8-11.

[13] 左安剛，周 英，李 俐，等.山楂葉總黃酮分散片的研制[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（11）：26-29.

[14] 張兆旺.中藥藥劑學專論[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.