余思義 付祖權(quán) 高揚(yáng) 谷長勤 劉曉麗 程國富 胡薛英
摘要:采用常規(guī)病理學(xué)方法和實(shí)驗(yàn)室診斷方法,對湖北通城某鴕鳥養(yǎng)殖場的患病死亡鴕鳥進(jìn)行了剖檢、組織病理學(xué)檢查及細(xì)菌、霉菌的分離培養(yǎng)。結(jié)果表明,該批鴕鳥感染曲霉菌,結(jié)合其發(fā)病經(jīng)過,該批鴕鳥是受到強(qiáng)烈驅(qū)趕和毆打后,其機(jī)體抵抗力下降,誘發(fā)曲霉菌感染而發(fā)生氣囊炎以致其死亡。
關(guān)鍵詞:鴕鳥;驅(qū)趕毆打應(yīng)激;曲霉菌病
中圖分類號:S858.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2016)06-1511-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.06.037
鴕鳥是非洲一種體形巨大、不會(huì)飛但奔跑很快的鳥,也是世界上現(xiàn)存體型最大的鳥類。由于鴕鳥生長速度快、適應(yīng)性廣,其規(guī)模化養(yǎng)殖和商品化飼養(yǎng)得到快速發(fā)展[1,2]。
曲霉菌病是由曲霉菌屬的多種曲霉菌所引起的多種禽類、哺乳動(dòng)物和人類共患的真菌病。其主要特征是在呼吸器官組織中發(fā)生炎癥并形成肉芽腫結(jié)節(jié)。曲霉菌為條件性致病菌,主要是免疫功能低下者,如患有慢性疾病者,長期應(yīng)用廣譜抗生素、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑者等[3]。
湖北通城某鴕鳥養(yǎng)殖場發(fā)生鴕鳥連續(xù)死亡。據(jù)悉鴕鳥死亡前飼養(yǎng)員對其進(jìn)行了驅(qū)趕和毆打。通過對死亡鴕鳥進(jìn)行尸體剖檢、病原分離、組織病理學(xué)檢查,最終確診鴕鳥患有曲霉菌病。本研究為今后鴕鳥曲霉菌病的診斷及流行病學(xué)調(diào)查提供了參考和依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 發(fā)病鴕鳥來源
2014年2月10~11日,湖北省通城縣某鴕鳥養(yǎng)殖場突發(fā)大量鴕鳥死亡事件。據(jù)該鴕鳥養(yǎng)殖戶敘述,2014年2月4日該場飼養(yǎng)的鴕鳥被飼養(yǎng)員驅(qū)趕打傷,于當(dāng)日晚發(fā)生鴕鳥死亡,其后陸續(xù)不斷有鴕鳥死亡。
1.2 剖檢變化和病理學(xué)檢查
對鴕鳥養(yǎng)殖場進(jìn)行現(xiàn)場勘查,了解死亡鴕鳥死前的臨床癥狀;對死亡鴕鳥進(jìn)行剖檢,觀察各組織器官的病理學(xué)變化,取鴕鳥的肺、氣囊、心、肝、腦、脾、腎等組織器官,經(jīng)10%福爾馬林溶液固定后,進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片以及常規(guī)HE染色。觀察組織病理學(xué)變化并用NIS-Elements高清晰度彩色圖文分析系統(tǒng)記錄觀察結(jié)果。
1.3 霉菌的分離培養(yǎng)
取死亡鴕鳥的肝臟、腦、氣囊組織,無菌操作接種于察氏固體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)96 h,觀察有無霉菌生長。挑取生長的霉菌做涂片,在光學(xué)顯微鏡下觀察霉菌菌絲形態(tài)。
1.4 細(xì)菌的分離培養(yǎng)
取鴕鳥的肝臟、腦、氣囊組織,無菌操作接種于麥康凱培養(yǎng)基上,并于37 ℃培養(yǎng)24 h,觀察有無細(xì)菌菌落生長。
2 結(jié)果與分析
2.1 剖檢變化和病理學(xué)檢查結(jié)果
2014年2月10日剖檢送檢的死亡鴕鳥2只。鴕鳥死亡有多日,其體表見有淺表性外傷,剖檢可見頸部皮下及軀體部皮下有多處淤斑。胸腹腔內(nèi)未見明顯異常變化,其中一只氣囊局部可見黃色滲出物(圖1),腹腔有淡黃色積液。腦部血管明顯擴(kuò)張,呈暗紅色,揭開腦膜,腦組織血管亦見明顯淤血。
2月11日在鴕鳥養(yǎng)殖場現(xiàn)場勘察。發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖場內(nèi)鴕鳥羽毛蓬亂,沾有多量淤泥,羽毛不潔,鳥舍內(nèi)有5只死鴕鳥,其中2只為2月10日死亡,另3只是2月9日死亡。鳥舍內(nèi)地面潮濕,呈淤泥狀。
現(xiàn)場抽取4只死亡鴕鳥進(jìn)行剖檢,發(fā)現(xiàn)其主要的病理變化為:鴕鳥頸部皮下有多塊瘀斑(圖2);喉頭腫脹,有大量透明黏液;氣囊增厚,呈黃色,局部有黃色干酪樣滲出物團(tuán)塊(圖3),有的氣囊伴有出血(圖4);心臟柔軟,心室塌陷,心包內(nèi)積液增多,呈黃色透明狀,有的出現(xiàn)心肌出血;小腸黏膜可見局灶性出血,呈團(tuán)塊狀;腸壁菲薄,其中一只伴有明顯的臌氣,充滿砂石;一只肌胃兩側(cè)軟組織出血;腦膜未見明顯異常,腦組織血管明顯可見,有一只腦脊液增多,似有粘連;肝表面有白色膜狀滲出物;肺、腎、脾未見明顯異常。
病理組織學(xué)檢查顯示主要病變發(fā)生在氣囊和腸道。表現(xiàn)為氣囊增厚,氣囊上有多個(gè)壞死灶,壞死灶周圍有大量異嗜性粒細(xì)胞浸潤(圖5),壞死灶中有分支狀的真菌菌絲團(tuán)塊(圖6);有的氣囊見局灶性出血(圖7);有的氣囊上有肉芽腫形成,中央可見均質(zhì)紅染的壞死灶,周圍有多核巨細(xì)胞圍繞(圖8)。腸組織的腸絨毛脫落,有出血,可見腸淋巴小結(jié)增生。其他組織如肝、心、腎、肺均未見異常變化。
2.2 霉菌的分離培養(yǎng)結(jié)果
取鴕鳥的肝臟、腦、氣囊組織,無菌操作接種于察氏固體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)96 h,在各個(gè)培養(yǎng)基上均出現(xiàn)了同一種菌落,且數(shù)量較多,比例較高。該菌落表面粗糙,有絨毛,由中心到四周呈放射狀,顏色初始為白色,之后變?yōu)辄S色、灰綠色,但邊緣始終為白色,在菌落上有清晰的劃分層次的同心圓。
挑取菌落,涂片鏡檢,見大量菌絲纏繞,呈典型的“丫”字樣二分叉菌絲結(jié)構(gòu),還有燒瓶狀頂囊,這些特征符合煙曲霉菌的特征,結(jié)合霉菌的菌落培養(yǎng)結(jié)果,初步判定分離到的主要菌落為煙曲霉菌。
2.3 細(xì)菌的分離培養(yǎng)結(jié)果
取鴕鳥的肝臟、腦、氣囊組織,無菌操作接種于麥康凱培養(yǎng)基上,并于37 ℃培養(yǎng)24 h,未見細(xì)菌菌落生長。
3 小結(jié)與討論
對死亡鴕鳥的尸體剖檢和組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示死亡鴕鳥氣囊呈典型的肉芽腫性氣囊炎,在病灶中可見有真菌菌絲團(tuán)塊;真菌培養(yǎng)結(jié)果顯示氣囊組織中有曲霉菌,據(jù)此診斷該批鴕鳥死亡是由于霉菌感染導(dǎo)致鴕鳥發(fā)生氣囊炎,因氣囊炎而導(dǎo)致其死亡。
曲霉菌等真菌通常對人和動(dòng)物是無害的,在機(jī)體免疫力減弱時(shí)侵入體內(nèi),引起條件致病性真菌病的發(fā)生[3]。文獻(xiàn)資料表明,機(jī)體免疫力降低時(shí),各種真菌感染幾率增高[4],其中應(yīng)激反應(yīng)是導(dǎo)致機(jī)體免疫力降低的因素之一,引起應(yīng)激的原因很多,驅(qū)趕、外傷、采血等[5-7]。從該養(yǎng)殖戶鴕鳥的發(fā)病過程及尸體剖檢結(jié)果顯示,鴕鳥身體多處瘀傷表明有受到劇烈驅(qū)趕和毆打,造成鴕鳥產(chǎn)生強(qiáng)烈應(yīng)激反應(yīng),繼而導(dǎo)致鴕鳥機(jī)體抵抗力下降[6,8],從而誘發(fā)曲霉菌感染而導(dǎo)致其死亡。
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