氫化物發(fā)生及冷蒸汽-原子吸收分光光度法測(cè)定金銀花中砷和汞的含量

邢鳳晶，陸君，崔巍，劉影

1.錦州市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，遼寧錦州121000；2.錦州市中心醫(yī)院，遼寧錦州121000

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氫化物發(fā)生及冷蒸汽-原子吸收分光光度法測(cè)定金銀花中砷和汞的含量

邢鳳晶1，陸君1，崔巍1，劉影2

1.錦州市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，遼寧錦州121000；2.錦州市中心醫(yī)院，遼寧錦州121000

目的建立氫化物發(fā)生及冷蒸汽-原子吸收分光光度法測(cè)定金銀花飲片中砷和汞含量的檢驗(yàn)方法。方法樣品經(jīng)微波消解后，原子吸收法測(cè)定砷和汞的含量。結(jié)果砷和汞的回收率分別為107.1%和96.8%，RSD分別為2.3%和3.1%（n=6）。結(jié)論本方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于現(xiàn)行藥典中重金屬及有害元素的檢查。

金銀花；氫化物發(fā)生；冷蒸汽-原子吸收分光光度法；砷；汞

金銀花（Lonicera ponica Thunb）為忍冬屬植物，是我國(guó)常用的傳統(tǒng)珍貴藥材，同時(shí)也是制作清涼飲料的重要原料，具有“清熱解毒，涼散風(fēng)熱”之功效［1-2］。由于近年來(lái)金銀花的用途越來(lái)越廣，用量越來(lái)越大，從藥用到食品、飲料和日用化工等，導(dǎo)致價(jià)格持續(xù)上漲，從而也誘發(fā)了金銀花大量造假，為了外觀更鮮艷，用工業(yè)硫磺熏蒸金銀花導(dǎo)致金銀花重金屬及有害元素顯著上升［3-4］。砷、汞都是蓄積性毒物，其污染可通過(guò)食物鏈傳遞、富集和放大，主要危害人的神經(jīng)系統(tǒng)，也可對(duì)皮膚黏膜及泌尿、生殖等系統(tǒng)造成損害，其含量高低直接對(duì)人體形成危害。目前我國(guó)對(duì)砷和汞的檢測(cè)多采用原子熒光光譜法，但利用原子熒光光譜法進(jìn)行重金屬及有害元素檢查并未被收載于《中國(guó)藥典》的各個(gè)版本中，因此本實(shí)驗(yàn)收集市面上零售的5批金銀花飲片分別采用藥典規(guī)定的氫化物法和冷蒸汽法對(duì)金銀花中砷和汞進(jìn)行測(cè)定，方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，為客觀反映目前我國(guó)市場(chǎng)上零售的金銀花飲片的質(zhì)量提供參考。

1　儀器與材料

AA-7000型原子吸收分光光度計(jì)及工作站（島津），附砷、汞空心陰極燈（北京有色金屬研究總院），氫化物發(fā)生器HVG-1A（島津），冷汞發(fā)生器MVU-1A（島津），CEM微波消解儀（美國(guó)），XA-105電子分析天平（METTLER TOLEDO）。硝酸為電子級(jí)，鹽酸、硫酸、硼氫化鈉、氫氧化鈉、碘化鉀、抗壞血酸、氯化亞錫為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為高純水，砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院GBW08611 15083），汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液：100μg/mL（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院GBW（E）080124 15103）。金銀花150309（來(lái)源：亳州，產(chǎn)地：山東）；金銀花150701（來(lái)源：安國(guó)，產(chǎn)地：山東）；金銀花150301（來(lái)源：玉林，產(chǎn)地：河南）；金銀花150222（來(lái)源：河北，產(chǎn)地：山東）；金銀花150901（來(lái)源：平邑，產(chǎn)地：山東）經(jīng)錦州市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心鑒定為真品。

2　方法與結(jié)果

2.1樣品處理

取樣品粗粉0.5 g，精密稱(chēng)定，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸10 mL，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解儀內(nèi)進(jìn)行消解。消解完全后，取消解罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)緩緩濃縮至2～3 mL，放冷，用水定容至25 mL。同法制備試劑空白溶液。精密吸取空白溶液和供試品溶液各10 mL，加入25%碘化鉀溶液（臨用前配制）1mL，10%抗壞血酸溶液（臨用前配制）1mL，用鹽酸（20→100）稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3min，取出，放冷，測(cè)定吸收值，從砷標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出砷的含量。精密吸取空白溶液和供試品溶液各5mL，置冷汞發(fā)生器反應(yīng)瓶中，向反應(yīng)瓶中加0.5 mol/L硫酸溶液100 mL，10 mL酸性氯化亞錫溶液，測(cè)定吸收值，從汞標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出汞的含量。

2.2測(cè)定條件

砷檢測(cè)波長(zhǎng)：193.7 nm；汞檢測(cè)波長(zhǎng)：253.7 nm；狹縫0.7 nm；點(diǎn)燈方式：BGC-D；燃燒器高度：19.5 mm。

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000μg/mL）1mL，置1 000 mL量瓶中，加2%硝酸稀釋至刻度，制成每1 mL含砷1μg的砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別精密量取20mL置200 mL量瓶中，加2%硝酸稀釋至刻度，再分別精密量取0、5、10、20、30、40 mL置100 mL量瓶中，制成每1 mL分別含砷0 ng、5 ng、10 ng、20 ng、30 ng、40 ng的溶液。分別精密量取10mL置25mL量瓶中，加入25%碘化鉀溶液（臨用前配制）1 mL，10%抗壞血酸溶液（臨用前配制）1mL，用鹽酸（20→100）稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3 min，取出，放冷，測(cè)定吸收值，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制砷標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：A=0.014175C-0.019981，線性范圍為0～16 ng，r=0.995 8。

精密量取汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/mL）10mL，置1 000mL量瓶中，加2%硝酸稀釋至刻度。分別精密量取1mL置100mL量瓶中，加2%硝酸稀釋至刻度，制成每1 mL含汞10 ng的汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液。再分別精密量取0、5、10、15、20、25 mL，置冷汞發(fā)生器反應(yīng)瓶中，向反應(yīng)瓶中加0.5 mol/L硫酸溶液100 mL，10 mL酸性氯化亞錫溶液，測(cè)定吸收值，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制汞標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：A=0.0023246C-0.00089048，線性范圍為0～250 ng，r=0.998 5。

表1　砷加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=6）

表2　汞加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.4檢出限

將空白溶液連續(xù)進(jìn)樣11次，計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率，得出儀器檢出限=3標(biāo)準(zhǔn)偏差/靈敏度，結(jié)果砷的儀器檢出限為0.2 ng；汞的儀器檢出限為0.1 ng。

2.5精密度實(shí)驗(yàn)

分別吸取上述40 ng/mL砷標(biāo)準(zhǔn)液和250 ng/mL汞標(biāo)準(zhǔn)液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定吸收度，結(jié)果RSD分別為0.7%和1.7%，表明精密度良好。

2.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取批號(hào)為150309的金銀花樣品，按上述樣品處理方法平行制備6份樣品測(cè)定，結(jié)果RSD分別為2.7%和1.1%，表明重復(fù)性良好。

2.7加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱(chēng)取批號(hào)為150309的金銀花樣品（含砷0.5 mg/kg）6份，分別精密加入砷標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 ng/mL）15 mL，按樣品制備方法對(duì)樣品進(jìn)行處理，并按以上條件測(cè)定，計(jì)算砷加標(biāo)回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

精密稱(chēng)取批號(hào)為150309的金銀花樣品（含汞1.6 mg/kg）6份，分別精密加入汞標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 ng/mL）8 mL，按樣品制備方法對(duì)樣品進(jìn)行處理，并按以上條件測(cè)定，計(jì)算汞加標(biāo)回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.8樣品測(cè)定

按上述測(cè)定方法對(duì)5批不同樣品進(jìn)行砷含量測(cè)定和汞含量測(cè)定，結(jié)果分別見(jiàn)表3和表4。

表3　樣品中砷元素的含量（n=5）

表4　樣品中汞元素的含量（n=5）

3　討論

砷（As）元素水溶液在酸性條件下與強(qiáng)還原劑NaBH4反應(yīng)，生成氣態(tài)的氫化物，由氬氣帶入原子吸收分光光度計(jì)燃燒頭上的石英管內(nèi)進(jìn)行原子化，在193.7 nm測(cè)量其吸光度。

在常溫下，用氯化亞錫還原劑（SnCl2·2H2O）將水樣中化合態(tài)汞還原為金屬汞蒸氣，內(nèi)置載氣泵將汞蒸氣帶入AA的石英流通池中，結(jié)合AA使用Hg燈253.7 nm波長(zhǎng)做定量測(cè)定。

由于汞對(duì)環(huán)境污染較大，不能直接排放到空氣中，需要在測(cè)定完成后用空氣泵把汞蒸氣引入配置0.5%高錳酸鉀和5%硫酸的混合液中吸收。

從樣品分析結(jié)果看出，市面上零售的金銀花飲片中含砷、汞量都較高，其中有三批含汞量超出藥典規(guī)定限度，因此臨床、生產(chǎn)企業(yè)在采購(gòu)以及使用這些飲片時(shí)一定要注意，同時(shí)也建議相關(guān)食藥監(jiān)部門(mén)對(duì)所管轄區(qū)內(nèi)的中藥材市場(chǎng)進(jìn)一步監(jiān)管規(guī)范。

汞的測(cè)定可用分光光度法、冷蒸汽原子吸收法、原子熒光法、電化學(xué)法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法、電感耦合等離子質(zhì)譜法等?！吨袊?guó)藥典》2015版四部重金屬及有害元素檢查中要求汞的測(cè)定采用冷蒸汽吸收法，但該項(xiàng)目下的內(nèi)容中采用的是氫化物發(fā)生裝置［5］。該實(shí)驗(yàn)中詳細(xì)地介紹了冷蒸汽吸收法的操作步驟，具有簡(jiǎn)單、快速和靈敏度高，操作成本低的特點(diǎn)，符合藥典規(guī)定，可以滿(mǎn)足藥品檢驗(yàn)檢測(cè)的要求。

［1］張金蓮，張文.金銀花中微量元素分析［J］.微量元素與健康研究，2004，21（3）：22-27.

［2］呂琳琳，羅威巍，張?jiān)伱?ICP-AES法測(cè)定金銀花、金蓮花中多種微量元素［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（27）：11796-11797.

［3］中央二套《經(jīng)濟(jì)半小時(shí)》暗訪隆回硫磺金銀花［EB/OL］.http：//www.longhuiren.net/XinWen/N-4413.aspx.2013-03-27/ 2013-06-20．

［4］葉子申.廈門(mén)商報(bào)業(yè)界揭金銀花造假內(nèi)幕：九成金銀花硫磺熏制［EB/OL］.http：//www.zyctd.com/info-item-342159-1-1.html，2011-08-29/2013-06-20.

［5］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（四部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：205.

Hydride Generation and Cold Vapor-atom ic Absorption Spectrophotometry in M easuring the Contents of Arsenic and M ercury in Honeysuck le

XING Feng-jing1，LU Jun1，CUIWei1，LIU Ying2
1.Jinzhou Drug Inspection and Testing Center，Jinzhou，Liaoning Province，121000 China；2.Jinzhou Central Hospital，Jinzhou，Liaoning Province，121000 China

Objective To establish the inspection method of hydride generation and cold vapor-atomic absorption spectrophotometry inmeasuring the contents of arsenic and mercury in honeysuckle.Methods The contents of arsenic and mercury weremeasured by the atomic absorptionmethod after themicrowave resolution of samples.Results The recycle rates of arsenic and mercury were respectively 107.1%and 96.8%，and RSD were respectively 2.3%and 3.1%（n=6）.Conclusion Themethod is easy and accuratewith good repeatability，which can be used in examining the heavymetal and toxic element in the current pharmacopoeia.

Honeysuckle；Hydride generation；Cold vapor-atomic absorption spectrophotometry；Arsenic；Mercury

R927

A

1672-5654（2016）08（b）-0104-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.23.104

2016-05-16）

邢鳳晶（1982.10-），男，遼寧錦州人，碩士研究生，主管藥師，研究方向：中藥質(zhì)量控制。