腫瘤異常蛋白在胃腸腫瘤中的臨床價(jià)值△

邱志遠(yuǎn)　陶曙　雷珍　鐘錫明　范鈺

江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院1腫瘤科，2胃腸外科，江蘇　鎮(zhèn)江　212002

腫瘤異常蛋白在胃腸腫瘤中的臨床價(jià)值△

邱志遠(yuǎn)1陶曙2#雷珍1鐘錫明1范鈺1

江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院1腫瘤科，2胃腸外科，江蘇鎮(zhèn)江212002

目的探討腫瘤異常蛋白（TAP）對(duì)胃腸腫瘤的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)的臨床價(jià)值。方法比較97例胃腸腫瘤患者（研究組）和97例健康成人（對(duì)照組）的TAP表達(dá)情況，并根據(jù)有無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與常規(guī)腫瘤標(biāo)志物（cTM）的檢出率進(jìn)行比較。結(jié)果研究組的TAP陽性率為47.4%高于對(duì)照組的5.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；TAP陽性率亦高于同組的cTM陽性率（35.1%），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；研究組中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的TAP陽性率為90.9%，cTM陽性率為63.6%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.004）。結(jié)論TAP檢測(cè)可以提高胃腸腫瘤診斷的準(zhǔn)確率，對(duì)胃腸腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷也具有一定的臨床價(jià)值。

腫瘤異常蛋白；胃腸腫瘤；腫瘤標(biāo)志物

Oncol Prog，2016，14（4）

胃癌和大腸癌是最常見的消化道腫瘤，嚴(yán)重威脅人類的健康，隨著人們生活水平提高，生活方式的改變以及環(huán)境污染加重等因素影響，近年來其發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)，發(fā)病年齡也呈年輕化趨勢(shì)［1］。若能對(duì)疾病進(jìn)行早期診斷，及時(shí)發(fā)現(xiàn)病情變化，這將會(huì)明顯提高胃癌和大腸癌患者的預(yù)后。但目前臨床上胃癌和大腸癌的篩查方法價(jià)格均較高，且準(zhǔn)備程序復(fù)雜，致實(shí)行率低。尋找特異性抗原一直是腫瘤研究的熱點(diǎn)，但迄今尚未發(fā)現(xiàn)胃癌和大腸癌的特異性腫瘤標(biāo)志物。腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）是機(jī)體細(xì)胞癌變過程初期致癌因子促發(fā)原癌基因和抑癌基因突變后產(chǎn)生的異常糖蛋白和鈣-組蛋白復(fù)合物的總稱［2］。TAP適用癌譜廣，可發(fā)現(xiàn)癌前期病變，具有較高的檢測(cè)靈敏度和特異度［3］。本研究對(duì)TAP與常規(guī)腫瘤標(biāo)志物（common tumor markers，cTM）進(jìn)行比較，以探討TAP在胃腸腫瘤診斷和病情監(jiān)測(cè)中的價(jià)值，從而為選取有效的臨床診斷與預(yù)后評(píng)價(jià)TM提供參考依據(jù)。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

經(jīng)江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，以2014年5月至2015年5月該院收治的胃腸腫瘤患者97例作為研究對(duì)象（研究組）。所有患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為胃腸腫瘤，但肝腎功能和血常規(guī)檢查均正常。排除患有免疫缺陷、肝炎、糖尿病、結(jié)核等疾病者，預(yù)計(jì)生存時(shí)間≥6個(gè)月，卡氏評(píng)分≥70分。其中男性62例，女性35例；年齡31～81歲，平均年齡（61.2±9.9）歲；胃癌50例，大腸癌47例；79例行根治性手術(shù)，8例行姑息性切除術(shù)，6例無法行手術(shù)切除；出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移者44例，無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移者53例。隨機(jī)選取同期在該院體檢中心體檢的健康成人作為對(duì)照組（97例）。其中男性65例，女性32例，年齡35～79歲，平均年齡（58.9±8.7）歲。兩組年齡、性別方面比較差異比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2TAP檢測(cè)方法1.2.1制作采指端末梢血，推制薄厚均勻的血片3張，干燥后移置凈化臺(tái)約10 m in，使血片的溫度和濕度（溫度20～25℃，相對(duì)濕度40%～55%）達(dá)到工作條件。然后將凝聚助劑（浙江瑞生醫(yī)療公司）充分搖勻，用滴管垂直滴在血片上，每張間隔均勻滴加3滴（每滴約50 μl），待凝聚助劑自然干燥（1.5～2 h）后在血片上形成圓形“斑點(diǎn)”（液滴斑點(diǎn)直徑10～12 mm）。

1.2.2檢測(cè)將標(biāo)本置于TAP綜合診斷儀顯微鏡下，用4倍平場(chǎng)消色差物鏡，在顯示屏上依次掃描觀察標(biāo)本的三個(gè)斑點(diǎn)，尋找特異形態(tài)的凝聚物，遇可疑圖像轉(zhuǎn)用高倍鏡分辨。

1.2.3結(jié)果判斷血液中存在TAP時(shí)，可與凝聚助劑反應(yīng)生成特異的圖像。①陰性：斑點(diǎn)內(nèi)有雪花狀、樹枝狀、樹輪狀或散沙狀黑褐色小顆粒等。②陽性：凝聚物呈完整的橢圓形、不規(guī)則圓形或多邊形結(jié)晶樣凝聚物，凝聚物直徑＞38 μm，具有折光性，部分有中央淡染區(qū)，并有少量黑褐色顆粒；一部分具有較強(qiáng)折光性，中央透明；有的凝聚物周圍有褐色細(xì)小顆粒形成的弧形條帶狀，凝聚物與褐色細(xì)小顆粒間有網(wǎng)結(jié)狀花紋；有的凝聚物周圍可見散在的黑色顆粒。（圖1）

圖1　TAP檢測(cè)陰性與陽性典型結(jié)果

1.3cTM檢測(cè)方法

抽取空腹靜脈血5 m l，3500 r/m in離心分離留取血清，置于-80℃冰箱保存待測(cè)。應(yīng)用Century XP及德國西門子公司提供的配套試劑盒，采用電化學(xué)發(fā)光方法，按照說明書嚴(yán)格操作，室內(nèi)和室間質(zhì)量控制均符合標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果判定：CEA 0～15 ng/m l，CA125 0～35 U/m l，CA199 0～40 U/m l，CA153 0～30 U/m l，CA242 0～25 U/m l，CA50 0～20 U/m l，任一項(xiàng)檢測(cè)值超出該指標(biāo)上限為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，TAP和cTM檢測(cè)的陽性率組間比較以及研究組內(nèi)的分層比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1TAP檢測(cè)結(jié)果比較

研究組的TAP陽性檢出率為47.4%（46/97），其中胃癌和大腸癌患者的TAP陽性檢出率分別為46.0%（23/50）和48.9%（23/47），均高于正常對(duì)照組的5.2%（5/97），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。大腸癌組的TAP陽性檢出率高于胃癌組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2TAP和cTM檢測(cè)結(jié)果比較

研究組的TAP陽性率為47.4%（46/97），cTM陽性率為35.1%（34/97），兩種檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的TAP和cTM檢測(cè)結(jié)果比較

研究組中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的TAP陽性率為90.9%（40/44），cTM陽性率為63.6%（28/44），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.004）；無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的TAP陽性率和cTM陽性率均為11.3%（6/53），檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1　復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的TAP和cTM檢測(cè)結(jié)果

3　討論

TM是腫瘤組織中一種分子水平的代謝產(chǎn)物，也可以是機(jī)體受到腫瘤應(yīng)激的產(chǎn)物。目前常用的血清TM主要有CEA、CA125、CA199等［4］，但單一檢測(cè)一種標(biāo)志物，其診斷準(zhǔn)確性較差，而使用多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)則會(huì)導(dǎo)致組合數(shù)量上升，診斷特異性下降，同時(shí)多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的經(jīng)濟(jì)性和可行性還有待商榷。

TAP是細(xì)胞癌變后基因表達(dá)的共性物質(zhì)，在腫瘤生成和發(fā)展過程中，達(dá)到一定程度后向血液排放，間接表示細(xì)胞癌變的數(shù)量和程度，并可通過指端血液中檢出［5］。TAP多為早期診斷檢測(cè)，以辨別良惡性病灶，為預(yù)防腫瘤的發(fā)生提供了有力證據(jù)，但卻無人將其和常用的TM檢測(cè)進(jìn)行對(duì)比，導(dǎo)致在病情監(jiān)測(cè)中的意義并不明確。

本研究運(yùn)用TAP技術(shù)和電化學(xué)發(fā)光方法檢測(cè)cTM，對(duì)胃腸腫瘤進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，結(jié)果表明，TAP技術(shù)可以提高胃腸腫瘤診斷的靈敏度。對(duì)所有患者進(jìn)行TAP和cTM檢測(cè)比較，檢測(cè)cTM中單一標(biāo)志物陽性率均較低，聯(lián)合檢測(cè)陽性率升高。從檢測(cè)結(jié)果來看，TAP陽性率高于cTM陽性率，雖然結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但擴(kuò)大樣本量則有望得到有意義的結(jié)果。因此，對(duì)胃腸腫瘤進(jìn)行TAP檢測(cè)分析，可能提高胃腸腫瘤診斷的準(zhǔn)確率。

本研究還顯示，TAP檢測(cè)可作為預(yù)測(cè)胃腸道腫瘤患者復(fù)發(fā)的敏感指標(biāo)。分組比較結(jié)果顯示，TAP陽性率高于cTM陽性率，提示應(yīng)用TAP監(jiān)測(cè)，可早期發(fā)現(xiàn)病情變化，以便及時(shí)予治療者采取進(jìn)一步檢查，尋找復(fù)發(fā)病灶，并對(duì)疾病進(jìn)行干預(yù)，從而有效降低腫瘤復(fù)發(fā)率，提高患者生存率與生存質(zhì)量。因此，TAP檢測(cè)對(duì)于胃癌和大腸癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷具有一定的臨床價(jià)值。

腫瘤與TM檢測(cè)不存在一一對(duì)應(yīng)關(guān)系，如果檢測(cè)單一TM，檢測(cè)的靈敏度低、準(zhǔn)確性差、可檢測(cè)的腫瘤種類少；而聯(lián)合應(yīng)用TM檢測(cè)，則可極大地提高腫瘤檢測(cè)的靈敏度，腫瘤輔助診斷的準(zhǔn)確性和腫瘤篩查的檢出率［6］。因此，腫瘤早期診斷和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的方法選擇，對(duì)患者的治療效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)具有重要意義。TAP檢測(cè)是一種組合TM檢測(cè)技術(shù)，是在同一反應(yīng)體系中將CEA、CA199等臨床幾十種糖鏈異常的腫瘤標(biāo)志物（堿性磷酸酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、人絨毛膜促性腺激素、α1-抗胰蛋白酶及酸性磷酸酶等）一次性組合檢測(cè)，高度集聚腫瘤信號(hào)，不僅極大地提高了腫瘤檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，而且可以檢測(cè)到更多種類的腫瘤，具有目前臨床常用TM檢測(cè)無法具備的“獨(dú)特價(jià)值”。

綜上，TAP對(duì)比TM檢測(cè)具有如下優(yōu)點(diǎn)：①高靈敏度，精確性好；②可以彌補(bǔ)單項(xiàng)指標(biāo)的不足；③血液系統(tǒng)是體內(nèi)主要的信號(hào)通道，通過血液檢測(cè)TAP具有易取得，方便保存及創(chuàng)傷小的特點(diǎn)；④可以對(duì)復(fù)發(fā)情況和治療效果進(jìn)行監(jiān)控；⑤預(yù)測(cè)腫瘤的預(yù)后情況；⑥費(fèi)用低，易普及。在腫瘤診斷和病情監(jiān)測(cè)方面，TAP檢測(cè)較cTM敏感，可以作為胃腸腫瘤診斷、早期預(yù)防、療效監(jiān)測(cè)以及預(yù)后判斷的指標(biāo)，具有一定的臨床價(jià)值。但是，本研究樣本量較少，今后還需擴(kuò)大樣本量，增加疾病種類，完善隨訪資料，進(jìn)一步驗(yàn)證和對(duì)比，明確TAP及TM對(duì)病情監(jiān)測(cè)和預(yù)后的意義。

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The clinical value of tumor abnormal protein in gastrointestinal tumors△

QIU Zhi-yuan1TAO Shu2#LEI Zhen1ZHONG Xi-m ing1FAN Yu1
1Department of Oncology，2Department of Gastrointestinal Surgery，the Affiliated People's Hospital of Jiangsu University，Zhenjiang 212002，Jiangsu，China

Objective To evaluate the clinical value of tumor abnormal protein（TAP）in the diagnosis and prognosis of gastrointestinal tumors.Method We compared the TAP expression level of 97 patients（study group）and 97 healthy adults（control group），and the recurrence，metastasis，and detection rate of common tumor markers（cTM）were analyzed. Result The positive rate of TAP in study group was 47.4%，significantly higher than that of control group at 5.2%（P＜0.05），and also higher than that of the cTM in same group at 35.1%，but the difference was not statistically significant（P＞0.05）；Besides，the positive rate of TAP and cTM in patients w ith recurrence or metastasis were 90.9%and 63.6%，respectively，and the difference was statistically significant（P=0.004）.Conclusion TAP facilitates the diagnosis of gastrointestinal tumors，and is a potential predictor for metastasis and recurrence.

TAP；gastrointestinal tumors；tumor markers

R735

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.04.13

2015-11-27）

鎮(zhèn)江市社會(huì)發(fā)展基金（SH2015062）；江蘇大學(xué)臨床科技發(fā)展基金（JLY2010003）

（corresponding author），郵箱：qzyjsu@sina.com