利用ELISA檢測(cè)方法檢驗(yàn)規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病野毒感染情況

王雪東

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150030；2.黑龍江職業(yè)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150111）

利用ELISA檢測(cè)方法檢驗(yàn)規(guī)模化豬場(chǎng)偽狂犬病野毒感染情況

王雪東1，2

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150030；2.黑龍江職業(yè)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150111）

為了了解黑龍江省雙城區(qū)豬場(chǎng)豬偽狂犬病野毒感染情況，利用ELISA方法，對(duì)雙城周邊7個(gè)不同規(guī)模豬場(chǎng)的52份血樣進(jìn)行豬偽狂犬病野毒感染情況的檢驗(yàn)，總體結(jié)果有17頭份顯示陽(yáng)性，占總數(shù)32.7%

豬場(chǎng)偽狂犬?。籈LISA檢測(cè)

豬偽狂犬?。╬orcine pseudorabies）是由偽狂犬病病毒引起的一種急性傳染病。豬是該病毒的天然宿主，感染種豬和所生仔豬可長(zhǎng)期帶毒。自然狀況下，鼠類也可常年攜帶該病毒，這都為本病的流行提供了便利條件。不同年齡豬感染該病常呈現(xiàn)出不同的臨床表現(xiàn)。成年豬常為隱性感染。公豬感染后常因引起睪丸腫脹、萎縮等原因使種用性能降低。生產(chǎn)母豬感染后可發(fā)生返情、屢配不孕等，妊娠母豬感染后可引起流產(chǎn)、死胎及呼吸系統(tǒng)癥狀。感染仔豬的臨診特征為體溫升高，新生仔豬主要表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，還可侵害消化系統(tǒng)。這都為養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

為了解雙城周邊規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病野毒感染病況，并為后續(xù)凈化工作做好前期工作，作者利用ELISA檢測(cè)方法，對(duì)雙城周邊7個(gè)豬場(chǎng)的52份血樣進(jìn)行豬偽狂犬病野毒感染情況的檢驗(yàn)，檢驗(yàn)方法及結(jié)果如下：

1　材料與方法

1.1待檢血清樣本每個(gè)待檢豬場(chǎng)按10%比例進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)采血，將收集到豬血液樣本經(jīng)促凝處理，分離血清，-20℃冷凍保存，待檢。

1.2器材美國(guó)寶特酶標(biāo)儀、上海?，敽銣叵?、8道微量移液器及吸頭、量筒、加樣槽、計(jì)時(shí)器等。

1.3試劑盒豬偽狂犬病病毒gpI抗體檢測(cè)試劑盒（購(gòu)于IDEXX北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司）、蒸餾水。

1.4檢測(cè)方法豬偽狂犬病病毒gpI抗體檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)均參照試劑盒內(nèi)說(shuō)明書進(jìn)行。

2　結(jié)果

表1　各豬場(chǎng)PRV-gpI-Ab（豬偽狂犬病野毒抗體）檢測(cè)結(jié)果

3　結(jié)果分析

本次實(shí)驗(yàn)在雙城周邊隨機(jī)抽取7個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)進(jìn)行采樣，樣本包含所有豬群，按10%采樣。從結(jié)果中看，不同豬場(chǎng)具有不同的感染率，最低為22.2%，最高可達(dá)57.1%。由于本次采樣數(shù)量并不多，并未按照公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬等進(jìn)行分類，但仍發(fā)現(xiàn)公豬的陽(yáng)性相對(duì)較高，處于不同時(shí)期的豬的感染情況還有待于進(jìn)一步檢查、計(jì)算。公豬呈現(xiàn)陽(yáng)性，對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)的威脅比較大。成年豬可呈陰性感染，通過(guò)與其直接接觸可引起本病的發(fā)生，配種也可造成本病的傳播。

豬可通過(guò)鼻道或口腔而自然感染，感染后病毒在扁桃體、咽黏膜增殖，再經(jīng)嗅神經(jīng)等神經(jīng)的鞘淋巴到達(dá)腦、脊髓；或由口、咽黏膜經(jīng)呼吸道進(jìn)入肺泡。病毒可隨血液到達(dá)全身各處。另外，鼠可因食入病豬肉而常年帶毒，因此，預(yù)防本病也需做好滅鼠工作。

豬偽狂犬病目前尚無(wú)有效藥物治療，在緊急情況下，可選用高免血清進(jìn)行治療，有望降低本病死亡率。疫苗免疫接種仍是預(yù)防及控制本病的根本有效措施。目前，弱毒滅活苗、野毒滅活苗、基因缺失苗等已研制成功，在多處流行地區(qū)使用，大大降低了本病的發(fā)生，減少經(jīng)濟(jì)損失。建議在豬場(chǎng)建立、完善免疫程序，實(shí)施切實(shí)可行的免疫措施，以減少豬偽狂犬病野毒感染的比例，最好能凈化豬場(chǎng)偽狂犬病。值得注意的是，當(dāng)一個(gè)豬場(chǎng)同時(shí)接種兩種基因缺失疫苗時(shí)，病毒可能會(huì)出現(xiàn)基因重組，因此同一豬場(chǎng)，尤其同一頭豬，嚴(yán)禁同時(shí)接種兩種基因缺失疫苗。

在豬場(chǎng)可以進(jìn)行豬偽狂犬病野毒感染的診斷方法有很多，例如可做接種動(dòng)物試驗(yàn)，分離病毒進(jìn)行中和試驗(yàn)；或通過(guò)病理切片做直接免疫熒光檢查；本實(shí)驗(yàn)中利用ELISA技術(shù)檢驗(yàn)豬血清中的偽狂犬病野毒抗體，操作簡(jiǎn)單易行，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，效果良好。

［1］賀紀(jì)云.我國(guó)部分規(guī)模化偽狂犬病野毒感染狀況調(diào)查及凈化方案的初步研究［D］.河南：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.13-29.

［2］金和平.規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病的凈化研究［J］.河北畜牧獸醫(yī)，（35）：21-22.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.09.016

王雪東（1978～），黑龍江人，講師，本科