不同菌型幽門螺桿菌感染消化性潰瘍血清中T細胞亞群的變化及臨床意義

鄧丹，李遠發(fā)，陳瑞紅，馮慶，彭為

(仙桃市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 仙桃　433000)

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不同菌型幽門螺桿菌感染消化性潰瘍血清中T細胞亞群的變化及臨床意義

鄧丹，李遠發(fā)，陳瑞紅，馮慶，彭為

(仙桃市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 仙桃433000)

目的檢測不同菌型幽門螺桿菌(Hp)感染消化性潰瘍(PU)患者血清中T細胞亞群的變化以及白細胞介素-17(IL-17)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)的表達。方法按照隨機數(shù)字表法選擇經(jīng)胃鏡檢查確診的PU患者共88例，同期納入30例健康體檢者作為對照組；檢測Hp感染狀況并分型，檢測所有研究對象外周血T 淋巴細胞亞群活性、IL-17、TGF-β含量。結(jié)果Hp陽性組患者CD4+和IL-17水平明顯高于Hp陰性組，而TGF-β水平明顯低于Hp陰性組(P<0.01)；Ⅱ型Hp組患者CD4+和IL-17水平明顯低于Ⅰ型Hp組，TGF-β水平明顯高于Ⅰ型Hp組(P<0.01)；在Ⅰ型Hp感染組，十二指腸球部潰瘍(DU)患者的CD4+和IL-17表達水平明顯高于胃潰瘍(GU)患者，而TGF-β水平明顯低于GU患者(P<0.01)；在Ⅱ型Hp組，CD4+、IL-17和TGF-β水平在DU與GU間的表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論血清CD4+T細胞增高及其細胞因子IL-17和TGF-β的表達異常可能在Hp感染PU中發(fā)揮了重要調(diào)節(jié)作用。

消化性潰瘍;幽門螺桿菌;T淋巴細胞亞群;因果律

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)感染是多種消化系統(tǒng)疾病誘發(fā)因素[1-2]，不同類型的Hp在消化性潰瘍(PU)過程中直接破壞胃黏膜的致病力是不一樣的。輔助性T細胞17(Th17)與調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)均屬CD4+T細胞亞群，在功能上相互制約，其比例失衡在Hp感染PU發(fā)病中起到重要調(diào)節(jié)作用[5]。而對不同菌型Hp感染PU患血清中T細胞亞群狀況尚未見報道；本研究探討了不同菌型Hp感染PU患者血清中T細胞亞群及其細胞因子的變化。

1　資料與方法

1.1臨床資料按照隨機數(shù)字表法選擇仙桃市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科門診及住院2011年3月至2013年2月間收治PU患者共88例；其中Hp陽性的患者62例，十二指腸球部潰瘍(DU)36例，胃潰瘍(GU)276例，Hp陰性者26例；根據(jù)Hp陽性分為三組。Hp陰性組(26例)：男性17例，女性9例；年齡25～59歲，平均(39.17±4.22)歲；Ⅰ型Hp感染組(40例)：男性27例，女性13例；年齡26～62歲，平均(40.28±4.18)歲；DU為22例，GU為18例；Ⅱ型Hp感染組(22例)：男性15例，女性7例；年齡26～60歲，平均(39.77±4.30)歲；DU為14例，GU為8例；同期納入30位健康體檢者作為對照組(Hp陰性)，其中男性19例，女性11例；年齡27～60歲，平均(40.05±5.49)歲；各組在性別、年齡臨床資料方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2診斷標(biāo)準消化性潰瘍：參照《消化性潰瘍病診斷與治療規(guī)范》[6]標(biāo)準； Hp 感染診斷標(biāo)準[7]：采用14C或13C標(biāo)記尿素呼氣試驗進行檢測。Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染診斷：采取血清HpCagA、VacA、UreB以及UreA基因抗體法檢測，CagA、VacA帶中任一者或兩者同時陽性為Ⅰ型，未見CagA、VacA帶陽性而僅UreB和UreA區(qū)帶中任意一者或兩者同時陽性為Ⅱ型。

1.3納入與排除標(biāo)準納入標(biāo)準：(1)本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情協(xié)議書；(2)符合以上相關(guān)診斷標(biāo)準；(3)所有患者3個月未接受過任何治療；(4)所有研究對象經(jīng)血常規(guī)、心電圖、生化、影像學(xué)、彩超等檢查排除其他疾病及腫瘤；(5)年齡18～65歲。排除標(biāo)準：(1)妊娠或哺乳其女性；(2)正參與其他臨床試驗者；(3)其他不符合上述納入標(biāo)準中任何一條者。

1.4檢測指標(biāo)

1.4.1血清T細胞亞群和NK細胞檢測檢測指標(biāo)包括CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+，均經(jīng)相應(yīng)抗體免疫熒光染色后，在流式細胞儀(Counter 型，美國BD公司)上進行檢測，試劑均購于美國SD公司。

1.4.2血清白細胞介素(IL)-17、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β含量檢測采取Elisa法檢測，試劑盒由上海賣約爾生物科技有限公司提供。

2　結(jié)果

2.1各組血清T細胞亞群比較Ⅰ型Hp組和Ⅱ型Hp組患者CD4+水平明顯高于對照組和Hp陰性組，Ⅱ型Hp組患者CD4+水平明顯低于Ⅰ型Hp組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；其他指標(biāo)各組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具體見表1。

2.2Hp感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍患者血清CD4+水平比較Ⅰ型Hp感染患者，CD4+在十二指腸球部潰瘍的表達水平明顯高于胃潰瘍(P<0.01)；在Ⅱ型Hp感染者，則差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2　Hp感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍患者血清CD4+水平比較

注：與本組十二指腸球部潰瘍比較aP<0.01。

2.3各組血清IL-17和TGF-β水平比較Ⅰ型Hp組和Ⅱ型Hp組患者血清IL-17水平明顯高于Hp陰性組，血清TGF-β水平明顯低于Hp陰性組(P<0.01)；Ⅱ型Hp組患者血清IL-17水平明顯低于Ⅰ型Hp組，血清TGF-β水平明顯高于Ⅰ型Hp組，(均P<0.01),見表3。

表3　各組血清IL-17和TGF-β水平比較

注：與Hp陰性組比較aP<0.01；與Ⅱ型Hp組比較bP<0.01。

2.4Hp感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍患者血清IL-17和TGF-β水平比較在Ⅰ型Hp組，十二指腸球部潰瘍患者血清IL-17水平明顯高于胃潰瘍，TGF-β水平明顯低于胃潰瘍(P<0.01)；在Ⅱ型Hp組，血清IL-17和TGF-β水平在十二指腸球部潰瘍組與胃潰瘍組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

表1　各組血清T細胞亞群和NK細胞比較±s

注：與對照組比較aP<0.01；與Hp陰性組比較bP<0.01；與Ⅱ型Hp組比較cP<0.01。

表4　Hp感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍患者血清IL-17和TGF-β水平比較

注：與本組胃潰瘍比較aP<0.01。

3　討論

近年，Hp感染PU的免疫學(xué)發(fā)病機制取得較大進展，Hp感染胃腸道上皮細胞后可進行抗原提呈細胞，介導(dǎo)細胞免疫反應(yīng)，其中以CD4+T淋巴細胞免疫反應(yīng)為主[5]。在PU發(fā)生發(fā)展過程中，不同菌型Hp感染介導(dǎo)了不同途徑，發(fā)揮了不同的致病作用[8-9]。

本研究結(jié)果顯示：Hp陽性患者CD4+水平明顯高于對照組和Hp陰性組，與以往研究報道基本一致[10]。此外，本研究進一步發(fā)現(xiàn)，Ⅰ型Hp組患者的CD4+水平明顯高于Ⅱ型Hp組，且對于Ⅰ型Hp感染患者十二指腸球部潰瘍的CD4+表達水平明顯高于胃潰瘍(P<0.01)；而在Ⅱ型Hp感染者，CD4+在十二指腸球部潰瘍的表達水平與胃潰瘍比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。以上結(jié)果提示：CD4+增加參與Ⅰ型和Ⅱ型Hp導(dǎo)致潰瘍的機制，且在Ⅰ型HP感染中以及十二指腸潰瘍球部潰瘍中表現(xiàn)更為突出，這可能與它們產(chǎn)生毒素不一致有關(guān)。

CD4+T細胞家族由輔助性T 細胞和調(diào)節(jié)性T 細胞等亞群組成，其亞型Th17和Treg細胞可分泌多種細胞因子，其中Th17可產(chǎn)生IL-17等促炎性反應(yīng)因子，IL-17作為一種促炎性細胞因子，能夠誘導(dǎo)成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、角質(zhì)細胞分泌IL-6、PGE2、金屬蛋白酶-1等，從而發(fā)揮其黏膜破壞作用[11]。Treg可分泌TGF-β等抑炎性因子，可在誘導(dǎo)人體自身免疫耐受、維持機體免疫穩(wěn)態(tài)等方面發(fā)揮重要作用[12]。當(dāng)CD4+T細胞亞群比例失衡及其相關(guān)促炎和抗炎因子表達異常時能夠引起胃黏膜炎癥損傷，進而誘發(fā)PU。以往研究證實，Hp感染PU患者體內(nèi)Th17細胞和其細胞因子IL-17 明顯升高，而Treg細胞和TGF-β明顯降低[4]。

本組結(jié)果顯示：Ⅰ型Hp組和Ⅱ型Hp組患者血清IL-17水平明顯高于Hp陰性組，血清TGF-β水平明顯低于Hp陰性組(P<0.01)，與以往報道結(jié)果近似[5]。Ⅱ型Hp組患者血清IL-17水平明顯低于Ⅰ型Hp組，血清TGF-β水平明顯高于Ⅰ型Hp組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。在Ⅰ型Hp組，十二指腸球部潰瘍患者血清IL-17水平明顯高于胃潰瘍，TGF-β水平明顯低于胃潰瘍(P<0.01)；在Ⅱ型Hp組，血清IL-17和TGF-β水平在十二指腸球部潰瘍組與胃潰瘍組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

以往研究證實，Hp感染者血清IL-17水平明顯高于健康者，而DU患者血清IL-17表達受CagA影響[13]，本研究結(jié)果與上述文獻報道結(jié)果相似。結(jié)合以往研究表明，不同菌型Hp感染通過誘導(dǎo)IL-17和TGF-β間的比例失衡，從而導(dǎo)致PU發(fā)生。因此，以上結(jié)果進一步提示CD4+參與Ⅰ型和Ⅱ型HP導(dǎo)致潰瘍的機制，同樣在Ⅰ型HP感染中以十二指腸潰瘍球部潰瘍更為明顯。

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Changes and Clinical significance of T cell subset in serum of peptic ulcer patients with infection of different types of bacteria Helicobacter Pylori

DENG Dan,LI Yuanfa,CHEN Ruihong,et al

(DepartmentofGastroenterology,FirstRenminHospital,Xiantao,Hubei433000,China)

ObjectiveTo investigate changes of T cell subset in serum of peptic ulcer(PU) patients with infection of different types of bacteria helicobacter pylori(Hp) and expressions of interleukin(IL)-17 and transforming growth factors(TGF)-β.MethodsEighty-eight patients with PU confirmed by gastroscope examination were chosen ifor the study,and at the same time 30 healthy examined people as control group.Types of Hp infection were detected.Peripheral blood T lymphocyte subsets and NK cells activities were detected by flow cytometer in all cases.Levels of IL-17 and TGF-β were detected by Elisa method.ResultsCD4+and IL-17 in Hp positive group were obviously higher,while TGF-β was evidently lower than Hp negative group(P<0.01).CD4+and IL-17 in Hp typeⅡgroup were obviously lower,while TGF-β was evidently higher than HpⅠgroup (P<0.01).In Hp typeⅠgroup,CD4+and IL-17 of duodenal ulcer(DU) patients were obviously higher,while TGF-β was evidently lower than gastric ulcer(GU) patients(P<0.05).In Hp typeⅡgroup,CD4+,IL-17 and TGF-β in DU and GU were not significantly different(P>0.05).ConclusionsIncrease in serum CD4+T cell and abnormal expressions of IL-17 and TGF-β may play an important regulating role in PU patients with Hp infection.

Peptic ulcer;Helicobacter pylori;T-lymphocyte subsets;Causality

10.3969/j.issn.1009-6469.2016.08.032

2015-09-18，

2016-01-20)