新疆兩色金雞菊提取物抗脂質(zhì)過氧化及對糖尿病小鼠的保護作用

張　婷，李慧芳，呂　博, 唐　輝，姚新成，劉青廣

(1.石河子大學藥學院，新疆 石河子　832000；2.石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥劑科，新疆 石河子　832008)

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新疆兩色金雞菊提取物抗脂質(zhì)過氧化及對糖尿病小鼠的保護作用

張婷1，李慧芳1，呂博2, 唐輝1，姚新成1，劉青廣1

(1.石河子大學藥學院，新疆 石河子832000；2.石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥劑科，新疆 石河子832008)

目的比較新疆兩色金雞菊乙酸乙酯和正丁醇提取物體外抗脂質(zhì)過氧化的能力，并考察正丁醇提取物對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的2型糖尿病小鼠體重、體內(nèi)生化指標和主要臟器的影響。方法響應面優(yōu)化提取兩色金雞菊總黃酮部位，提取液經(jīng)石油醚萃取后，剩余水相分別用乙酸乙酯和正丁醇萃取，獲得乙酸乙酯(EAE)和正丁醇提取物(BE)。采用硫代巴比妥酸法測定提取物抗脂質(zhì)過氧化能力；STZ誘導的糖尿病小鼠灌胃給予正丁醇提取物(0.2、0.4、0.8 g·kg-1)連續(xù)4周，監(jiān)測小鼠體重變化、血漿生化指標以及肝臟、胰腺、腎臟的臟器系數(shù)和組織病理切片考察對機體的作用。結(jié)果在亞油酸反應體系下，測得EAE和BE抗脂質(zhì)過氧化能力(SC50)分別為：(443.96±11.24) mg·L-1和(840.29±16.38) mg·L-1；采用大鼠肝勻漿體系測得結(jié)果為：(23.59±3.67) mg·L-1和(60.37±4.27) mg·L-1。正丁醇提取物能明顯改善糖尿病小鼠體重下降的趨勢，增加臟器系數(shù)；同時能明顯改善體內(nèi)多項生化指標；經(jīng)HE染色病理切片檢查，正丁醇提取物各劑量組均對受損的肝臟、胰腺和腎臟具有一定的修復和改善作用。結(jié)論新疆兩色金雞菊乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定的抗脂質(zhì)過氧化的能力，正丁醇提取物對糖尿病小鼠受損器官有一定的保護作用。

兩色金雞菊；正丁醇提取物；脂質(zhì)過氧化；鏈脲佐菌素；生化指標；臟器系數(shù)；糖尿病小鼠

糖尿病(diabetes mellitus, DM)是一種與胰島素產(chǎn)生和作用異常相關(guān)、以高血糖癥為主要特征的代謝性疾病，包括以胰島素絕對缺乏為主的1型(type 1 diabetes, TD1)和以胰島素相對缺乏和胰島素抵抗為主的2型(type 2 diabetes, TD2)兩種。目前，糖尿病已成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后嚴重危害人類健康的第三大慢性病[1]。臨床上DM的治療主要以注射外源性的胰島素(insulin)和口服多種化學藥物(磺酰脲類、雙胍類、糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑等)來控制和影響機體血糖水平。但長期使用外源性的胰島素和化學藥物都表現(xiàn)出一定程度的胰島素抵抗、受體脫敏、肝腎損害和嚴重胃腸道反應等不良反應。為了克服和減小這些不良反應，人們開始關(guān)注從天然植物中尋找能夠有效治療DM的有效活性成分或有效部位。目前，從天然植物中尋找療效確切、作用緩和、具有多作用靶點和作用途徑，同時，具有較少不良反應的有效成分或有效部位已經(jīng)成為DM藥物研發(fā)中的熱點[2-5]。

新疆兩色金雞菊又名“雪菊”、“昆侖雪菊”，為菊科金雞菊屬一年生草本植物兩色金雞菊(CoreopsistinctoriaNutt.)的干燥頭狀花序(C.tinctoriaflowering tops,CTF)。在新疆和田地區(qū)廣泛種植，主要分布于和田昆侖山區(qū)海拔2 300～3 000 m的高海拔山區(qū)。當?shù)鼐用癯２杉湫迈r頭狀花泡茶飲，可治療燥熱煩渴、心慌、胃腸不適、食欲不振等病癥[6]，是維吾爾族民間世代傳承下來的一種養(yǎng)生、保健的天然植物[7]?，F(xiàn)代藥效學研究證實，新疆兩色金雞菊提取物具有較好的降血壓、降血脂、抗炎等功效[8-9]，同時也具有抗氧化、降血糖和恢復或修復機體糖不耐受的作用[10]。

本研究采用響應面優(yōu)化提取兩色金雞菊總黃酮部位，提取液經(jīng)石油醚萃取后，剩余水相分別用乙酸乙酯和正丁醇萃取，獲得乙酸乙酯(EAE)和正丁醇提取物(BE)?？疾煲宜嵋阴ズ驼〈继崛∥锟怪|(zhì)過氧化的能力；同時考察正丁醇提取物灌胃給藥對由鏈脲佐菌素(STZ)誘導的DM小鼠體內(nèi)生化指標以及肝臟、胰腺、腎臟和體重的影響。通過本研究，初步探討新疆兩色金雞菊提取物對DM小鼠的作用效果，為充分利用新疆兩色金雞菊植物資源、開發(fā)相關(guān)糖尿病的醫(yī)藥產(chǎn)品或保健食品提供參考。

1　儀器與材料

1.1實驗動物SPF級♂昆明小鼠，體質(zhì)量(25±5) g；SPF級SD大鼠，體質(zhì)量250 g，由新疆醫(yī)科大學動物實驗中心提供，生產(chǎn)許可證:SCXK(新)2011-0004。室內(nèi)通風良好，飼養(yǎng)環(huán)境模擬自然晝夜光照12 h·d-1，溫度21～23 ℃，濕度40%～45%，自由飲水。高糖高脂飼料為每100 kg中含膽固醇25%、膽酸鈉0.4%、蛋黃粉10%、蔗糖15%、豬油10%。高糖高脂飼料由新疆醫(yī)科大學動物實驗中心提供。

1.2試劑與藥品試劑：亞油酸、硫氰酸鐵、硫代巴比妥酸、EDTA-2Na、Tween20、三氯乙酸、維生素C、叔丁基對羥基茴香醚(butylated hydroxyanisole, BHA)；乙醇等各種化學試劑均為分析純(購于國藥集團化學試劑有限公司)；鏈脲佐菌素(≥98%, streptozotocin, Sigma公司)；鹽酸二甲雙胍(中美上海施貴寶制藥有限公司)；水為去離子純凈水。

原藥材：兩色金雞菊購于新疆和田地區(qū)策勒縣努爾鄉(xiāng)高海拔種植區(qū)(2013年11月)，經(jīng)石河子大學藥學院李鵬副教授鑒定為菊科金雞菊屬一年生草本植物蛇目菊的干燥頭狀花序。

1.3儀器Shimadzu-UV2600紫外分光光度計(日本島津)；SHA-B水浴恒溫振蕩器(北京光明)；羅氏Advantage 2型血糖儀及配套試紙；電子天平(北京Sartorius)；TP300超聲波提取器(北京天鵬電子技術(shù)有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-2000(上海亞榮)；Fsh-2型可調(diào)高速組織勻漿機(江蘇省金壇市宏華儀器廠)；日立7080全自動生化測定儀(日本Hitachi)。

2　方法

2.1兩色金雞菊提取物的制備以總黃酮提取率(總黃酮質(zhì)量/藥材干重)為指標，采用響應面優(yōu)化設計程序，獲得超聲波提取最優(yōu)條件：提取時間29.5 min，液料比20.6 ∶1，59.84%乙醇。提取液經(jīng)減壓濃縮，至無醇味，再用石油醚1 ∶1進行萃取。去除石油醚層，依次使用乙酸乙酯和水飽和的正丁醇進行萃取，可獲得乙酸乙酯和正丁醇萃取液。萃取液經(jīng)減壓旋轉(zhuǎn)濃縮，揮至盡干，置冷凍干燥儀中干燥，得乙酸乙酯提取物(EAE)和正丁醇提取物(BE)。

2.2抗脂質(zhì)過氧化能力實驗-硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)

2.2.1亞油酸反應體系下測定提取物抗脂質(zhì)過氧化能力[11]分別精密移取1.0 mL不同濃度的樣品溶液(20、40、80、160、200 mg·L-1)置10 mL具塞試管中，加入1.0 mL亞油酸溶液(2.5%的Tween 20水溶液)和2.0 mL PBS緩沖液(0.05 mol·L-1，pH 7.0)及1.0 mL去離子水，震蕩混勻。混合溶液置(40±1)℃電熱恒溫培養(yǎng)箱中，每隔24 h用硫氰酸鐵法測定1次過氧化物生成量。當所測的溶液吸光度A由最大值開始變小時，分別取0.5 mL的反應溶液，加入1.0 mL三氯乙酸溶液(20%，含0.67%TBA)，混合液沸水浴10 min，放冷，于λ=532 nm進行測定吸光度值(A)。同時以維生素C和BHA作為陽性對照，平行測定3次。

計算方法：脂質(zhì)過氧化抑制率/%=(1-Ai/Ao)×100

其中Ai為含試樣培養(yǎng)液的吸光度；Ao為空白培養(yǎng)液(以水替代樣品)的吸光度。

2.2.2大鼠肝細胞勻漿反應體系下提取物抗脂質(zhì)過氧化實驗[12-13]1%大鼠肝細胞勻漿制備：取Sprague Dawley大鼠1只，腹腔麻醉，處死。迅速于4 ℃下摘取肝臟。去除肝臟表面附著的脂肪組織，并用4 ℃的0.9%的生理鹽水進行清洗。洗滌完畢后用吸水紙吸干，剪取適量肝臟組織，稱重。按1 ∶9(重量體積比)加入0.9%的生理鹽水(含0.1 mmol·L-1EDTA-2Na和0.01 mol·L-1蔗糖)進行組織勻漿，連續(xù)3～5次，每次20 s。取組織勻漿繼以3 000～4 000 r·min-1離心10～15 min，取適量上清液進行測定。

實驗方法：0.2 mL樣品乙醇溶液(20、40、80、120、200 mg·L-1)加入1.0 mL 1%大鼠肝組織勻漿，然后加入50 μL FeCl2(0.5 mmol·L-1)和50 μL H2O2溶液(0.5 mmol·L-1)，于37 ℃孵育1 h后，加入1.0 mL含0.67%硫代巴比妥酸的15%三氯醋酸水溶液中，沸水浴15 min，于λ=532 nm進行測定吸光度值(A)。同時以維生素C和BHA作為陽性對照，平行測定3次。計算公式和計算方法見“2.2.1”。

2.3正丁醇提取物對DM小鼠體重、體內(nèi)生化指標和主要器官的影響

2.3.1糖尿病小鼠模型的建立[14]將75只♂昆明小鼠適應性喂養(yǎng)1周后，從中隨機抽取12只作為正常組，其余所有小鼠禁食12 h，腹腔注射鏈脲佐菌素溶液(0.1 g·kg-1, ip)；正常對照組給予相同體積的無菌檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，間隔4d后第2次腹腔注射STZ溶液，經(jīng)過72 h后，禁食10 h，進行口服葡萄糖耐受實驗，選擇2 h血糖≥11.1 mmol·L-1的小鼠進行分組實驗。

2.3.2糖尿病小鼠分組及給藥正常對照組：給予同體積的0.9%氯化鈉注射液。將造模成功的60只小鼠隨機分為5組：模型組，給予同體積0.9%氯化鈉注射液；陽性對照組，給予同體積的鹽酸二甲雙胍(0.12 g·kg-1)；實驗組，給予同體積的新疆兩色金雞菊正丁醇萃取部位低劑量組(0.2 g·kg-1)、中劑量組(0.4 g·kg-1)、高劑量組(0.8 g·kg-1)。模型組與實驗組均為12只，加前述正常對照組共6組。正常對照組自由飲水給予基礎飼料，其余各組給予充分飲水與高脂高糖飼料，于每天固定時間點灌胃(ig)給藥，連續(xù)給藥4周。

2.4測定指標

2.4.1體重變化檢測每日觀察小鼠的外觀、飲水量、攝食量、墊料潮濕程度以及行為活動，每周測量體重1次。實驗結(jié)束后空腹測定體重，計算實驗前后體重變化率。

體重變化率/%=(實驗前體重-實驗結(jié)束后體重)/原體重×100%

2.4.2肝臟、胰腺、腎臟指數(shù)的測定各實驗組在給藥4周后，空腹稱重。小鼠摘眼球取血后立即處死，低溫條件下迅速打開腹腔取出肝臟、胰腺、腎臟，用0.9%氯化鈉注射液進行漂洗，濾紙吸干后稱重并記錄，計算臟器指數(shù)。肝臟指數(shù)/%=肝臟質(zhì)量(mg)/小鼠體重(g)×100

胰腺指數(shù)/%=胰腺質(zhì)量(mg)/小鼠體重(g)×100

腎臟指數(shù)/%=腎臟質(zhì)量(mg)/小鼠體重(g)×1002.4.3體內(nèi)生化指標測定采用全自動生化測定儀測定小鼠血漿中多項指標：肝功能(TP、ALB、ALT、AST、GGT、ALP)、血糖(GLU)和血脂(TC、TG、HDL)。

2.4.4組織病理學檢查將上述取得的肝臟、腎臟和胰腺組織拭干后，眼科剪剪取組織塊適量浸泡于10%甲醛溶液中固定，24 h后乙醇梯度脫水，石蠟包埋切片，二甲苯漂洗后，HE染色做病理切片檢查。

2.5提取物抗脂質(zhì)過氧化能力(SC50)計算SC50(50% concentration of scavenging activity,SC50)計算：以樣品lgC為橫坐標，脂質(zhì)過氧化抑制率(%)為縱坐標，進行l(wèi)gC抑制率%最小二乘法回歸，獲得回歸方程。根據(jù)回歸方程計算出各樣品50%抑制率時所需的樣品濃度。

3　結(jié)果

3.1亞油酸反應體系下測定提取物抗脂質(zhì)過氧化結(jié)果Fig 1的結(jié)果顯示，亞油酸反應體系中，BHA表現(xiàn)出很強的抗脂質(zhì)過氧化的能力，在低濃度(20 mg·L-1)條件下，其脂質(zhì)過氧化抑制率達到42.12%；在高濃度(200 mg·L-1)下，其脂質(zhì)過氧化抑制率可達到65.62%；在20～200 mg·L-1濃度范圍內(nèi)正丁醇與乙酸乙酯提取物對脂質(zhì)過氧化的抑制能力隨濃度的增加呈現(xiàn)增強的趨勢，在高濃度(200 mg·L-1)下，正丁醇與乙酸乙酯對脂質(zhì)過氧化的抑制率分別為35%、40%，與陽性對照維生素C的抑制率相當。

3.2大鼠肝細胞勻漿反應體系下提取物抗脂質(zhì)過氧化結(jié)果由Fig 2測定結(jié)果可知，在1%大鼠肝細胞勻漿反應體系中，在濃度為20～200 mg·L-1范圍內(nèi)，BHA表現(xiàn)出很強的抗脂質(zhì)過氧化的能力，其脂質(zhì)過氧化抑制率達到75.47%～88.11%；在10～200 mg·L-1濃度范圍內(nèi)，正丁醇提取物對脂質(zhì)過氧化的抑制能力呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，隨著其濃度的增大對脂質(zhì)過氧化抑制能力越強，在高濃度(200 mg·L-1)下，其脂質(zhì)過氧化抑制率可達到100%，并且其抑制活性明顯高于陽性對照維生素C與BHA。

Fig 1　Lipid peroxidation inhibitory activity of extracts from C.tinctoria in linoleic acid reaction system

Fig 2　Lipid peroxidation inhibitory activity of extracts fromC. tinctoria in 1% rat liver homogenate reaction system

3.3兩色金雞菊提取物抗脂質(zhì)過氧化能力根據(jù)測定結(jié)果進行統(tǒng)計，按“2.5”的方法計算各樣品抑制脂質(zhì)過氧化能力SC50值，由Tab 1結(jié)果可知，乙酸乙酯和正丁醇提取物在兩個反應體系中均對脂質(zhì)過氧化均具有一定的抑制能力。在亞油酸體系和1%大鼠肝細胞體系中，正丁醇提取物與乙酸乙酯提取物、維生素C和BHA的抗脂質(zhì)過氧化能力(SC50)差異均有顯著性(P<0.05)。

3.4正丁醇提取物對糖尿病小鼠體重及主要器官的影響

3.4.1小鼠體態(tài)和外形觀察正常對照組小鼠精神狀態(tài)良好，活動量較大，皮毛光滑，墊料干燥；模型組小鼠精神萎靡，活動量小，皮毛發(fā)黃，稀疏且無光澤，形體消瘦，墊料潮濕；給藥各組小鼠隨著給藥周期的延長精神狀態(tài)逐漸好轉(zhuǎn)，皮毛較模型組有光澤，墊料較干燥。

3.4.2各組小鼠不同時期體重變化經(jīng)過4周對糖尿病小鼠的給藥，兩色金雞菊提取物對小鼠的體重影響見Tab 2，連續(xù)灌胃給藥4周后，兩色金雞菊正丁醇提取物低劑量和高劑量組體重與DM模型組體重之間差異有顯著性；根據(jù)實驗前與實驗結(jié)束體重變化(%)結(jié)果比較，兩色金雞菊正丁醇提取物各劑量組均能明顯改善DM小鼠體重下降的趨勢。

3.4.3對糖尿病小鼠器官臟器系數(shù)的影響兩色金雞菊提取物對小鼠器官臟器系數(shù)的影響見Tab 3。經(jīng)4周連續(xù)灌胃給藥后，與STZ模型組相比，BE高劑量組小鼠肝臟指數(shù)、胰腺指數(shù)、腎臟指數(shù)明顯降低，差異均有顯著性(P<0.05)，說明給藥能減小或改善這3個組織增生、充血等癥狀。

3.4.4對糖尿病小鼠體內(nèi)生化指標的影響兩色金雞菊提取物對糖尿病小鼠體內(nèi)生化指標的影響見Tab 4。由上表結(jié)果可知，經(jīng)連續(xù)4周灌胃給藥后，除AST和HDL外，藥物高劑量組與STZ模型組相比差異均有顯著性(P<0.05)，數(shù)值明顯降低，說明新疆兩色金雞菊正丁醇提取物能有效降低糖尿病小鼠的血糖、血脂水平，并且改善或恢復與肝臟功能相關(guān)的生化指標。

3.4.5肝臟的HE染色結(jié)果如Fig 3結(jié)果所示，通過光鏡觀察可以發(fā)現(xiàn)正常對照組肝細胞大小較均勻，結(jié)構(gòu)規(guī)則，并且以肝中央靜脈為中心向四周呈放射狀整齊排列；模型組的小鼠肝細胞腫脹，且有大小不等的脂肪空泡，在中央靜脈周圍的細胞排列紊亂，結(jié)構(gòu)不清晰；與模型組比較，各給藥組小鼠的肝組織結(jié)構(gòu)明顯改善，脂肪空泡減少，且細胞排列的較規(guī)則，提取物高劑量組與陽性對照藥鹽酸二甲雙胍顯示出較好的修復和改善作用。

Tab 1　Lipid peroxidation inhibitory activity of extracts from C. tinctoria(SC50)

*P<0.05vsascorbic acid;#P<0.05vsBHA

Tab 2　Effect of n-butanol extract from C. tinctoria on body weight in diabetic ±s，n=12)

*P<0.05vsSTZ model

Tab 3　Effect of n-butanol extract from C. tinctoria on viscera indexes in diabetic ±s,n=12)

*P<0.05vsSTZ model

Tab 4　Effect of n-butanol extract from C. tinctoria on plasma biochemical indexes in diabetic ±s,n=12)

*P<0.05vsSTZ model

Fig 3　The photograms of mice liver tissue by haematoxylin eosin(HE) staining(×400)

A: Normal; B: STZ model; C: Metformin; D: Low dosage; E: Middle dosage; F: High dosage

3.4.6胰腺的HE染色結(jié)果 如Fig 4所示，正常對照組胰腺腺泡細胞均包膜完整，胞核清晰，胰島團為圓形或卵圓形，邊界清晰，每個胰島團內(nèi)細胞數(shù)量較多，胞質(zhì)豐富；模型組胰腺腺泡細胞排列松散，胰島細胞壞死明顯；給藥各組與模型組比較，胰腺腺泡細胞排列松散減輕，胰島細胞壞死減輕，胰島細胞有再生現(xiàn)象，尤其是提取物高劑量組與陽性對照鹽酸二甲雙胍組較為明顯。

3.4.7腎臟的HE染色結(jié)果如Fig 5所示，正常對照組腎臟的腎小球飽滿，與囊壁無空隙，結(jié)構(gòu)整齊； 模型組小鼠腎小球萎縮囊腔增大，且結(jié)構(gòu)紊亂，腎小球硬化的現(xiàn)象；與模型組比較，各給藥組較上述病理改變均出現(xiàn)不同程度地減輕，腎小球仍有萎縮，與囊壁空隙比正常稍大，其中提取物高劑量組與陽性對照鹽酸二甲雙胍組改善最為明顯。

Fig 4　The photograms of mice pancreatic tissue by HE staining(×400)

A: Normal; B: STZ model; C: Metformin; D: Low dosage; E: Middle dosage; F: High dosage

Fig 5　The photograms of mice kidney tissue by HE staining(×400)

4　討論

在DM的發(fā)生和發(fā)展過程中，血液中高濃度的血糖和游離脂肪酸(FFA)不能被機體充分利用，兩類物質(zhì)極易發(fā)生生物氧化反應，產(chǎn)生大量的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)，這些物質(zhì)會導致細胞產(chǎn)生氧化應激反應[15]。氧化應激反應信號通路的激活會導致體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂、胰島β細胞凋亡、胰島素分泌受損和胰島素抵抗等一系列病理過程。因此，活性氧簇和氧化應激反應是引起DM產(chǎn)生和發(fā)展的作用機制之一[16]。因此，用體外實驗方法考察兩色金雞菊提取物的抗脂質(zhì)過氧化能力，對探討通過抑制氧化應激反應途徑對DM的作用有一定的指導意義。

本實驗通過亞油酸反應體系和1%大鼠肝細胞反應體系來考察兩色金雞菊乙酸乙酯和正丁醇提取物對脂質(zhì)過氧化的抑制能力，結(jié)果顯示兩種提取物均對脂質(zhì)過氧化具有一定的抑制作用。有研究表明，兩色金雞菊乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、總黃酮提取物、水提物和兩色金雞菊中性黃酮等部位，在體外均對 α-葡萄糖苷酶活性有較好的抑制作用[17]。本實驗通過考察正丁醇提取物對脂質(zhì)過氧化的抑制能力，同時考察正丁醇提取物對2型糖尿病小鼠的保護作用。另外，在構(gòu)建2型糖尿病小鼠時，可通過少量多次注射STZ方式損傷胰島細胞，再以高糖高脂飼料誘導小鼠胰島素抵抗，進而構(gòu)建2型糖尿病實驗模型。經(jīng)過連續(xù)4周灌胃給藥后，與STZ模型組相比，正丁醇提取物可增加糖尿病小鼠體重，減小主要臟器系數(shù)，并且對糖尿病小鼠血漿中多數(shù)生化指標有較好的改善作用。通過對主要臟器組織病理切片分析，正丁醇提取物對糖尿病小鼠肝臟、胰腺和腎臟的損傷有一定的改善與修復作用。本研究為兩色金雞菊的活性部位和有效活性成分的發(fā)現(xiàn)提供參考，同時也為新疆兩色金雞菊的傳統(tǒng)用法或民間習用提供科學依據(jù)。

(致謝:本實驗在石河子大學藥學院藥物分析研究室、石河子大學醫(yī)學院病理教研室及石河子大學第一附屬醫(yī)院檢驗科完成，向在實驗過程中給予指導和幫助的老師表示感謝!)

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Inhibition of lipid peroxidation and protective effects on diabetic mice of extracts fromCoreopsistinctoriaNutt. in Xinjiang

ZHANG Ting1, LI Hui-fang1, LYU Bo2, TANG Hui1,YAO Xin-cheng1，LIU Qing-guang1

(1.SchoolofPharmacy,ShiheziUniversity,ShiheziXinjiang832000,China;2.DeptofPharmacy,theFirstAffiliatedHospitalofMedicalCollegeofShiheziUniversity,ShiheziXinjiang832008,China)

AimTo compare the inhibition of lipid peroxidation of ethyl acetate extract(EAE) and n-butanol(BE) extract fromCoreopsistinctoriaNutt.invitro. To investigate the parameters such as body weight, biochemical indexes in plasma, and viscera indexes on type 2 diabetes mice by intraperitoneal injection of streptozotocin(STZ).MethodsThe extracts were prepared by response surface methodology. The extracts were suspended in distilled water and defatted with petroleum ether. The aqueous layer was successively extracted with ethyl acetate and n-butanol. The inhibition of lipid peroxidation activity was determined by thiobarbituric acid method. The effects of extract BE on diabetic mice were observed at the dosage of 0.2,0.4,0.8 g·kg-1(ig)for 4 weeks. The parameters were observed such as weight of body changes, organ coefficients of liver, pancreas and kidney, biochemical indexes in plasma and viscera pathological sections.ResultsIn the linoleic acid reaction system, the SC50value of the EAE and BE was (443.96±11.24) mg·L-1, (840.29±16.38) mg·L-1, respectively, and that in rat liver homogenate was (23.59±3.67) mg·L-1, (60.37±4.27) mg·L-1, respectively. Compared with diabetic model group, BE could significantly improve the trend of weight loss, and increase viscera indexes. The pathological sections showed that BE had the recovery and improvement effects on the damage of liver, pancreas and kidney.ConclusionsThe extracts ofC.tinctoriahave a certain anti-lipid peroxidation activityinvitro. And BE has a certain capacity to improve and repair damaged organs for DM mice.

CoreopsistinctoriaNutt.; n-butanol extract；lipid peroxidation; streptozotocin; biochemical indexes; organ coefficient; diabetic mice

2016-03-29,

2016-05-04

新疆生產(chǎn)兵團重點領域科技攻關(guān)項目(No 2014BA031)；石河子大學高層次人才科研啟動項目(No RCZX201328)

張婷(1991-)，女，碩士生，研究方向：藥物分析,E-mail: 1134373650@qq.com；

姚新成(1973-)，男，博士，副教授，研究方向：中藥與天然產(chǎn)物活性，通訊作者，E-mail: yxc@whu.edu.cn

10.3969/j.issn.1001-1978.2016.09.017

A

1001-1978(2016)09-1272-07

R-332；R284.1；R322；R587.105

網(wǎng)絡出版時間：2016-8-23 14:29:00網(wǎng)絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160823.1429.034.html