五谷蟲的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

胡美變，嚴(yán)丹，汪云偉，李娜，肖禾，吳純潔

五谷蟲的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

胡美變1，嚴(yán)丹1，汪云偉1，李娜1，肖禾2，吳純潔1

目的：初步建立五谷蟲的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)方法。方法：按照中國(guó)藥典規(guī)定的相應(yīng)方法對(duì)五谷蟲進(jìn)行性狀描述、顯微鑒別、水分測(cè)定、灰分測(cè)定和醇浸出物含量測(cè)定，以及薄層鑒別。結(jié)果：顯微鑒別結(jié)果表明五谷蟲粉末的顯微特征有體內(nèi)外壁碎片、肌纖維、氣管及剛毛；水分含量為3.43％～11.34％；總灰分含量為4.24％～6.03％；酸不溶性灰分含量為0.33％～3.68％；醇浸出物含量為14.57％～34.51％；薄層鑒別結(jié)果表明五谷蟲含有丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、甘氨酸。結(jié)論：研究結(jié)果可用于五谷蟲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的初步評(píng)價(jià)以及為其進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

五谷蟲；顯微鑒別；薄層鑒別；醇浸出物；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

五谷蟲出自《滇南本草》，為麗蠅科動(dòng)物大頭金蠅Chrysomyisa megacephala （Fabricius）或其他近緣動(dòng)物的幼蟲或蛹?xì)?，具有健脾消積，清熱除疳的功能。主治疳積發(fā)熱，食積瀉痢，疳瘡，疳眼，走馬牙疳［1］。現(xiàn)代研究表明五谷蟲具有抗菌抗病毒，抗腫瘤活性，可用來治療小兒厭食癥，牙疳、口瘡，感染創(chuàng)面，骨髓炎等疾?。?］。五谷蟲是一種營(yíng)養(yǎng)成分全面，富含高蛋白、低糖、低脂肪、礦物質(zhì)元素及維生素的動(dòng)物性食物。五谷蟲蛋白質(zhì)提供的各種氨基酸均能滿足兒童和成人的需要，其蛋白所含蛋白纖維少，易于消化吸收，作為未被開發(fā)利用的優(yōu)質(zhì)高蛋白質(zhì)食物，是人類理想的新蛋白質(zhì)資源［3］。目前行業(yè)內(nèi)對(duì)五谷蟲的化學(xué)成分以及藥理活性研究甚多，但是對(duì)五谷蟲的質(zhì)量分析研究未見有深入系統(tǒng)的研究，僅《上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《山東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》收有，但是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不全面，僅有性狀描述，蟲體顯微鑒別，水分測(cè)定等［4～7］。因此，為了進(jìn)一步提升與完善五谷蟲的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，本實(shí)驗(yàn)擬增加五谷蟲粉末鑒別、薄層鑒別及含量測(cè)定，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器

BP211D萬分之一天平（SARTORIUS AG），LEICA DM 1000研究級(jí)生物顯微鏡（Leica Microsystems CMS GmbH），CLF-04 200 g密封型手提式粉碎機(jī)（浙江省溫嶺市創(chuàng)力藥材器械廠制造），水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司），AS10200AT超聲波清洗器（天津奧爾賽恩斯儀器有限公司），UPT-11-10T優(yōu)普系列超純水器（成都超純科技有限公司），烘箱（寧波東南儀器有限公司）。

1.2實(shí)驗(yàn)材料

共收集八批五谷蟲樣品（四川省荷花池藥材市場(chǎng)，批號(hào)分別為2014120601、2014120602、2014120603、2014120604、2014120605、2014120606、2014120607、2014120608），由成都中醫(yī)藥大學(xué)標(biāo)本實(shí)驗(yàn)中心盧先明教授鑒定為麗蠅科動(dòng)物大頭金蠅或其他近緣動(dòng)物的幼蟲或蛹?xì)ぁo水乙醇（分析純，成都市科龍化工試劑廠）。丙氨酸（批號(hào)：140680-200401）、甘氨酸（批號(hào)：110735-200102）、纈氨酸（批號(hào)：110874-201204）、亮氨酸（批號(hào)：110876-200204），均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1性狀特征

五谷蟲凈制品，呈扁圓柱形，長(zhǎng)1～2 cm。棕黃色或棕褐色，全體有數(shù)十個(gè)環(huán)節(jié)，頭部較尖。質(zhì)松脆易碎，斷面中空。氣微臭，味淡。見圖1。

圖1　五谷蟲的外觀圖

2.2顯微鑒別

取五谷蟲樣品適量，粉碎，過80目篩，分別用稀甘油、水合氯醛進(jìn)行粉末制片，在生物顯微鏡下觀察。顯微鑒別結(jié)果見圖2。

圖2　五谷蟲粉末顯微鑒別（×400）

2.2.1體外壁 體外壁碎片無色，淡黃色或黃棕色，表面平或具短小的刺狀突起，有的著生有剛毛。

2.2.2體內(nèi)壁 體內(nèi)壁組織淡黃棕色，內(nèi)方有略呈錐形的乳狀突起，其頂端淡紅棕色至紅棕色，鈍圓或銳尖，有的分叉成剪刀狀，山字狀。

2.2.3肌纖維 肌纖維無色或淡黃色，多碎斷，具橫紋，平直或呈微波狀。

2.2.4氣管 氣管壁碎片略彎曲或呈弧狀，具棕色或深棕色的螺旋絲。

2.2.5剛毛 剛毛黃色或棕黃色，先端銳尖或鈍圓，長(zhǎng)約15～120 μm。

2.3水分測(cè)定［8］

按照2010年版中國(guó)藥典一部附錄Ⅸ H第一法測(cè)定五谷蟲的水分含量。結(jié)果見表1。

表1　五谷蟲水分測(cè)定結(jié)果（n=2）

2.4灰分測(cè)定［8］

按照2010年版中國(guó)藥典附錄一部附錄Ⅸ K灰分測(cè)定法測(cè)定五谷蟲總灰分含量和酸不溶性灰分含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2　五谷蟲總灰分、酸不溶性灰分測(cè)定結(jié)果（n=2）

520141206036.022.79 6.032.750.122.06 620141206036.032.71 720141206045.733.35 5.733.3600.21 820141206045.733.36 920141206054.303.71 4.243.682.171.15 10 20141206054.173.65 11 20141206065.871.31 5.811.281.463.31 12 20141206065.751.25 13 20141206074.290.64 4.290.6302.24 14 20141206074.290.62 15 20141206084.700.85 4.710.840.31.68 16 20141206084.720.83

2.5浸出物測(cè)定［8］

按照2010年版中國(guó)藥典一部附錄Ⅹ A熱浸法測(cè)定五谷蟲的醇溶性浸出物含量。測(cè)定結(jié)果見表3。

表3　五谷蟲浸出物測(cè)定結(jié)果（n=2）

2.6薄層鑒別

五谷蟲總氨基酸是五谷蟲具有平喘作用的有效成分，并且具有明顯的解痙作用。據(jù)報(bào)道［9］，蠅蛆（五谷蟲）中含有十七種氨基酸，并且丙氨酸、甘氨酸、亮氨酸、纈氨酸含量較高，因此本實(shí)驗(yàn)擬采用以上4種氨基酸建立五谷蟲的薄層鑒別方法。

2.6.1供試品溶液的制備 稱取五谷蟲粉末（過3號(hào)篩）0.8 g，置50 mL的具塞錐形瓶中，分別加70％乙醇10 mL，超聲處理15 min，濾過，取濾液作為供試品溶液。

2.6.2對(duì)照品溶液的制備 取丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、甘氨酸對(duì)照品適量，加70％乙醇制成每1 mL含0.2 mg的混合溶液，作為混合對(duì)照品溶液。

2.6.3點(diǎn)樣、展開與顯色 分別各吸取八批五谷蟲供試品溶液10μl、混合對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（3：1：1）為展開劑，室溫展開，取出，晾干，噴以2％茚三酮乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。見圖3。

圖3　五谷蟲中氨基酸TLC圖

3 小結(jié)與結(jié)論

3.1顯微鑒別

圖2為八批五谷蟲樣品所共有的顯微特征，即八批樣品中均有體內(nèi)外壁碎片、肌纖維、氣管及剛毛五個(gè)顯微特征，因此可作為五谷蟲的顯微鑒別特征，只是八批樣品中這些顯微特征的形狀和顏色有所差異。本實(shí)驗(yàn)五谷蟲粉末的鑒別結(jié)果除剛毛外，與2009年版《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和2004年版《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中五谷蟲的橫切面的顯微鑒別結(jié)果一致。

3.2水分測(cè)定

由表1可知八批五谷蟲樣品的水分含量最高為11.34％，因此擬定五谷蟲的水分含量不超過12.0％。2009年版《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和2004年版《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定五谷蟲的水分含量不超過12.0％，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

3.3灰分測(cè)定

由表2可知八批五谷蟲樣中總灰分含量最高為6.03％，酸不溶性灰分含量最高為3.68％，因此擬定五谷蟲的總灰分含量不超過6.0％，酸不溶性灰分不超過3.0％。

3.4浸出物測(cè)定

由表3可知八批五谷蟲樣品中醇浸出物含量最高達(dá)34.51％，最低為14.57％，因此擬定五谷蟲的醇浸出物含量不少于20％。

3.5薄層鑒別

由圖3可知八批五谷蟲樣品中均含有丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、甘氨酸，因此可以用以上四種氨基酸作為五谷蟲的薄層鑒別。

從性狀、顯微鑒別、水分、醇浸出物、薄層鑒別、總灰分及酸不溶性灰分七個(gè)方面對(duì)五谷蟲質(zhì)量考查結(jié)果可知八批樣品質(zhì)量有所差異。由于歷版中國(guó)藥典中未收入五谷蟲，只有《上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《山東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》、《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中收有，并且《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的五谷蟲為麗蠅科昆蟲大頭金蠅Chrysomyia megacephala （Fab.） 的干燥幼蟲體，而《上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的五谷蟲除麗蠅科昆蟲大頭金蠅Chrysomyia megacephala （Fab.）外，還包括其它近緣昆蟲的干燥幼蟲，但是《山東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的五谷蟲為蠅科昆蟲舍蠅Musca domestica Vicina Macg.成熟幼蟲的人工養(yǎng)殖品，可見四個(gè)地方規(guī)定的五谷蟲科屬種有所差異，尤其是山東，與其他三個(gè)地方相比較，差異性更大。因此，有必要規(guī)范全國(guó)五谷蟲的科屬種。

本實(shí)驗(yàn)為五谷蟲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提升研究，但是由于本實(shí)驗(yàn)樣品批次較少，因此筆者認(rèn)為如果深入研究五谷蟲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，需增加五谷蟲樣品批次，并且應(yīng)采購(gòu)不同省市的市售五谷蟲，對(duì)全國(guó)范圍內(nèi)五谷蟲的質(zhì)量進(jìn)行綜合研究與評(píng)價(jià)，最后建立健全五谷蟲質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

［1］ 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1998：191.

［2］ 孫曉亞，劉虹霞，張國(guó)剛.蟾飼五谷蟲及五谷蟲的研究概況［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，28 （7）：581-584.

［3］ 白鋼，張翼翔.蠅蛆營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定與評(píng)價(jià)［J］.包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，26（1）：10-13.

［4］ 湖南省食品藥品監(jiān)督管理局.湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)［M］.湖南：湖南科學(xué)技術(shù)出版社，2009：299.

［5］ 廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)：1冊(cè)［M］.廣州：廣東科學(xué)技術(shù)出版社，2004：34.

［6］ 山東省食品藥品監(jiān)督管理局.山東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)［M］.濟(jì)南：山東友誼出版社，2002：24.

［7］ 上海市衛(wèi)生局.上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)［M］.上海：上海市衛(wèi)生局，1994：46.

［8］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

［9］ 斯琴高娃，曹曉娟，董交其，等.蠅蛆的營(yíng)養(yǎng)分析［J］.飼料博覽（技術(shù)版），2008，02：60-61.

（責(zé)任編輯：胡慧玲）

Research on quality standards of Wuguchong

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HU Mei-bian1， YAN Dan1， WANG Yun-wei1， LI Na1， XIAO He2， WU Chunjie1//（1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， ，Chengdu 611137， Sichuan； 2. Minjiangyuan Pharmaceutical co.，LTD of Chengdu， Chengdu 611000 ，Sichuan）

Objective: To establish the quality standards of Wuguchong. Method: According to the methods recorded in Chinese Pharmacopoeia published in 2010， the items were carried out including characteristic description， microscopic identification， measurement of moisture content， ash content， alcohol extract， and TLC identification. Result: The results of microscopic identification showed that powder of Wuguchong had body wall fragments， muscle fiber， trachea and bristles. The moisture content was in the range of 3.43％～11.34％. The total ash content was in the range of 4.24％～6.03％. The acid insoluble ash content was in the range of 0.33％～3.68％. The alcohol extracts was in the range of 14.57％～34.51％. The results of TLC indicated that Wuguchong contained alanine， leucine， valine and glycine. Conclusion: The results of the experiment can be used for initial development of the quality standards of Wuguchong and provide the basis for its further study.

Wuguchong； microscopic identification； TLC； alcohol extract； quality standards

·炮制制劑·

R 282

A

1674-926X（2016）03-003-03

1. 成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 611137；2. 成都岷江源藥業(yè)有限公司，四川 成都 611000

胡美變（1992-），女，碩士，從事中藥炮制與制劑研究 Tel：18381076106 Email：185344621@qq.com

吳純潔，男，教授，從事中藥炮制與制劑研究Email：wcj-one@263.net

2015-07-02