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    玄龍止咳方中藥物配伍對麻黃有效成分影響的研究

    2016-09-16 09:17:27曹蕾王協(xié)和楊紅梅張婧宋英
    中藥與臨床 2016年3期
    關(guān)鍵詞:偽麻黃堿麻黃堿玄參

    曹蕾,王協(xié)和,楊紅梅,張婧,宋英

    ·品種品質(zhì)·

    玄龍止咳方中藥物配伍對麻黃有效成分影響的研究

    曹蕾1,王協(xié)和1,楊紅梅1,張婧1,宋英2

    目的:考察玄龍止咳方中其它藥物對麻黃中麻黃堿和偽麻黃堿含量的影響。方法:色譜條件為Wondasil-C18色譜柱(250 mm x 4.6 mm,5 μm);流動相:以0.1%的磷酸(含0.1%的三乙胺)為流動相A,甲醇為流動相B;柱溫30 ℃;流速:1.0 mL·min-1;進樣體積:10μL,檢測波長210 nm。結(jié)果:與麻黃單煎液的濾液相比,五味子能促使麻黃堿的含量升高,升高率達(dá)39.98%;僵蠶和百部都能使麻黃堿和偽麻黃堿含量降低,約降低10%。結(jié)論:麻黃與其他藥物配伍時,麻黃堿和偽麻黃堿容易受到影響,含量或升高或降低。故而在麻黃提取時,配伍應(yīng)當(dāng)?shù)玫街匾?,同時為玄龍止咳方的制備方法提供依據(jù)。

    玄龍止咳方;麻黃堿;偽麻黃堿;配伍實驗

    玄龍止咳方是成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院的一個臨床常用方劑,由玄參、麻黃、地龍、僵蠶、百部、紫菀等藥味組成,具有滋陰宣肺,祛風(fēng)止咳之功效,治療中最具特色之處是內(nèi)外風(fēng)兼治,滋陰祛風(fēng)兼顧,療效顯著。為了適應(yīng)臨床需要,擬將其開發(fā)為院內(nèi)制劑。其中麻黃為方中臣藥,味辛性溫,為“肺經(jīng)主藥”,“發(fā)表出汗,去邪熱氣,止咳逆上氣”,蜜制則增潤肺之功,尤適于肺燥失宣所致喘咳之癥。其止咳平喘主要有效成分為麻黃堿、偽麻黃堿[1]。有報道麻黃與其他藥物配伍發(fā)生配伍反應(yīng)使其有效成分含量降低[2],為了保障制劑的質(zhì)量,故而考察處方配伍對其臣藥麻黃中有效成分的影響。

    1 實驗材料

    Agilent 1100 高效液相色譜儀(美國惠普公司) 、BP211D型電子分析天平(德國塞多利公司)、水浴鍋DK-98-Ⅱ(天津市泰斯特儀器有限公司;鹽酸麻黃堿(批號:171241-201007)、鹽酸偽麻黃堿(批號:171237-201208)均購于中國食品藥品檢定研究院;甲醇、乙腈為色譜純;其他試劑為分析純; 玄參、麻黃等9味藥材均購于新荷花飲片有限公司,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科副主任藥師盛蓉鑒定,均符合2010版《中華人民共和國藥典》一部及地方標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

    2 方法與結(jié)果

    2.1麻黃與其他藥味的配伍試驗

    2.1.1麻黃單煎液制備 取麻黃20 g,加10倍量水,煎煮兩次,每次1 h,合并兩次濾液濃縮至200 mL。

    2.1.2配伍試驗 麻黃-玄參配伍 按處方比例稱取二倍處方量麻黃和玄參(麻黃20 g),加10倍量水煎煮2次,每次1 h,合并兩次濾液,濃縮到200 mL,即得麻黃玄參配伍樣品溶液。

    麻黃與其它藥材的配伍 按處方比例稱取二倍處方量的麻黃和地龍、麻黃和僵蠶、麻黃和百部、麻黃和紫菀、麻黃和麥冬、麻黃和五味子、麻黃和防風(fēng)(麻黃均為20 g),各自加10倍量水,其余步驟同麻黃-玄參配伍。

    2.2麻黃中有效成分的測定

    2.2.1色譜條件[3-5]Wondasil-C18色譜柱(250 mm ×4.6 mm,5 um);流動相:以0.1%的磷酸(含0.1%的三乙胺)為流動相A,甲醇為流動相B(A∶B=96∶4);柱溫30 ℃;流速:1.0 mL·min-1;進樣體積:10 μL,檢測波長210 nm。

    2.2.2對照品溶液的制備 分別精密稱定鹽酸麻黃堿4.11 mg、鹽酸偽麻黃堿4.59 mg于25 mL的容量瓶中,加甲醇定容到刻度制成質(zhì)量濃度為0.1644 mg·mL-1、0.1836 mg·mL-1的混合溶液,作為對照品,備用。

    2.2.3線性關(guān)系考察 精密吸取“2.2.2”項下對照品溶液,1,2,3,4,10 mL分別于10mL容量瓶中,分別標(biāo)號1,2,3,4,5號對照品溶液,用甲醇稀釋至刻度,超聲后過濾,按“2.1.2”色譜條件進樣。以進樣量濃度為橫坐標(biāo),峰面積(A)為縱坐標(biāo),進行線性回歸,得回歸方程。鹽酸麻黃堿回歸方程為:Y =28078X +12.796 (r =1.0)、鹽酸偽麻黃堿的回歸方程為:Y =28295X -5.6160(r =0.9999) 。結(jié)果表明:鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿分別在0.1644 μg~1.644 μg,0.1836 μg~1.8136 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.2.4供試品溶液的制備 取“2.1”項下樣品溶液5 mL定容至10”ml容量瓶中,加1%鹽酸甲醇定容至刻度 ,搖勻,濾過,即得。按“2.2.1”項下色譜條件測定,結(jié)果見表1(含量變化以麻黃單煎液為參考)。

    編號配伍組合鹽酸麻黃堿/mg含量變化/%含量變化/%鹽酸偽麻黃堿/mg 1麻黃—玄參0.71666.552.02133.04 2麻黃—地龍0.68692.141.9530-0.44

    3麻黃—僵蠶0.6075-9.671.7642-10.07 4麻黃—五味子0.941439.981.97580.72 5麻黃—防風(fēng)0.67570.481.96910.38 6麻黃—百部0.6045-10.111.7195-12.34 7麻黃—紫菀0.67810.831.9596-0.10 8麻黃—麥冬0.6621-1.551.96940.40 9麻黃單煎液0.67250.001.96160.00

    由表1可知,玄龍止咳方中僵蠶和百部對鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的影響比較顯著,其中僵蠶和百部都能使鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿降低10%左右。而方中五味子,能顯著增加鹽酸麻黃堿的含量,玄參對其也有增強作用,但是效果不顯著。

    2.3配伍驗證試驗

    按處方比例稱取麻黃和僵蠶、麻黃和百部、麻黃和五味子(分別含麻黃20 g)三種配伍各三份分別煎煮2次,每次加10倍量水煎煮1 h,濾液合并,濃縮至200 mL。取5 mL按供試品溶液制備方法制備,“2.2.1”項下色譜條件測定,結(jié)果麻黃僵蠶合煎液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量均值分別為0.6059 mg,1.7653 mg,RSD值分別為1.94%,1.77%,麻黃百部合煎液中二者含量均值分別為0.6057 mg,1.7177mg,RSD值分別為2.13%,1,79%,麻黃五味子合煎液中為0.9397,1.9745 mg,RSD值分別為1.31%,1.58%。

    3 討論

    麻黃堿和偽麻黃堿均為苯丙胺類生物堿[6],二者的堿性比較強,故而能使溶液pH變化比較大的藥物或許對其提取影響比較大。測得麻黃-五味子合煎液的pH為2.78,故而能促使其溶出,但是五味子僅能顯著增加鹽酸麻黃堿的含量,而對鹽酸偽麻黃堿的含量無明顯影響,有可能是五味子與麻黃中其它成分反應(yīng)轉(zhuǎn)化為麻黃堿,也有可能是因為麻黃堿和偽麻黃堿構(gòu)型不同,五味子中的有機酸[7]更容易與麻黃堿結(jié)合生成可溶性的鹽。麻黃和其他藥材合煎液的pH多在5.0左右,而和地龍的合煎液堿性稍強一些,為6.54,但是實驗結(jié)果表明其對鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃的含量影響基本不大。而且在麻黃地龍煎煮的過程中出現(xiàn)大量灰色絮狀沉淀,但是隨著進一步加熱之后,絮狀沉淀消失,轉(zhuǎn)為黑色小固體,推斷有可能一開始的絮狀沉淀是地龍中的蛋白質(zhì)[8]類成分與麻黃混合時產(chǎn)生的包裹作用,隨著水浴加熱,蛋白質(zhì)被破壞包裹物也被釋放出來。

    僵蠶和百部都能明顯降低麻黃堿和偽麻黃堿的含量。僵蠶與麻黃合煎時并沒有產(chǎn)生沉淀,液體呈混濁狀(藥液不澄清,不透明,但是沒有顆粒狀沉淀),冰箱冷藏之后仍然為混濁狀,沒有產(chǎn)生沉淀。所以猜想有可能是僵蠶中一些小分子酸性氨基酸如谷氨酸[8]等,與麻黃堿和偽麻黃堿反應(yīng)生成了不溶于水,而又能穩(wěn)定分散的小分子物質(zhì)。百部與麻黃配伍中產(chǎn)生了黑色沉淀,有可能是百部中某些酸類如草酸、檸檬酸[9],與麻黃堿和偽麻黃堿生成了不溶于水的鹽所致。

    [1] 李佳蓮,方磊,張永清,等.麻黃的化學(xué)成分和藥理活性的研究進展[J].中國現(xiàn)代中藥,2012,14(7):21.

    [2] 戴國友,謝和兵,劉志輝,等.肺寧合劑提取工藝中甘草和麻黃的配伍規(guī)律研究[J].中國藥業(yè),2008,17(22):21.

    [3] 葉莎,李興華,任欣欣.HPLC法測定復(fù)脈靈膠囊中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿含量[J].中國藥師,2013,16(6):841.

    [4] 吳曼.HPLC法測定咳喘平合劑中鹽酸麻黃堿、偽麻黃堿的含量[J].海峽藥學(xué),2012,24(4):48.

    [5] 陸燕萍,劉佳麗,鞏曉宇.麻黃藥理作用及含量測定的研究進展[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2013,10(24):38.

    [6] 周玲,吳德康,唐于平,等.麻黃中化學(xué)成分研究進展[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,4(1):71.

    [7] 羅家洪,莊艷.五味子化學(xué)成分及生理活性研究進展[J].臨床合理用藥,2014,8(9):174.

    [8] 趙建國,彭延古,彭新君,等.薄層色譜法分離僵蠶中蛋白質(zhì)和氨基酸類成分的研究[J].湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,25(2):26.

    [9] 鐘英.對葉百部化學(xué)成分及質(zhì)量研究[D].廣州:廣州中醫(yī)藥大學(xué),2010.

    (責(zé)任編輯:李蕓霞)

    Study on effects of compatibility of medicines on active ingredients of Mahuang in XuanLong Zhike Fang /

    CAO Lei1,WANG Xie-he1,YANG Hong-mei1, ZHANG Jing1, SONG Yng2//(1.College of pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ,Chengdu 611137, Sichuan; 2.Teaching Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610072, Sichuan)

    Objective: To investigate the influence of other drugs in XuanLong Zhike Fang on the contents of ephedrine and pseudoephedrine in Mahuang. Method: HPLC conditions were as following: Wondasil-C18column (250 x 4.6 mm, 5 um)was used. Mobile phase was methanol - 0.1% phosphate (including 0.1% of triethylamine). Flow rate was 1.0 mL·min-1. Column temperature was set at 30 ℃ with injection volume 10 μL and detection wavelength was 210 nm. Result: Compared with single Mahuang decoction, Wuweizi can increase ephedrine content with the rate of 39.98%. Jiangchan and Baibu can decrease the content of ephedrine and pseudoephedrine about 10%. Conclusion: The compatibility of Mahuang and other drugs will influence the contents of ephedrine and pseudoephedrine content. Therefore, the effect of compatibility should be paid attention to in the extraction of Mahuang. And The result can provide the basis for preparation of XuanLong Zhike Fang .

    XuanLong Zhike Fang;ephedrine;pseudoephedrine;compatibility test

    R 284.1

    A

    1674-926X(2016)03-007-03

    四川省科技廳項目(CKY2014007)

    1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,四川 成都 611137;2.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,四川 成都 610072

    曹蕾(1989),女,碩士,從事中藥制劑研究Tel:1340859995 Email:1206490185@qq.com

    宋英(1959),男,學(xué)士,從事中藥學(xué)研究Tel:028-87783735 Email:806380106@qq.com

    2015-09-01

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