新輔助化療對(duì)宮頸鱗癌Bub1、p53的影響*

衛(wèi)玲　干麗敏　朱小軍　張慶明　楊榮（甘肅省腫瘤醫(yī)院婦瘤科　蘭州730050）

新輔助化療對(duì)宮頸鱗癌Bub1、p53的影響*

衛(wèi)玲干麗敏朱小軍張慶明楊榮
（甘肅省腫瘤醫(yī)院婦瘤科蘭州730050）

目的：探究新輔助化療對(duì)宮頸鱗癌中Bub1、p53的影響及其機(jī)理。方法：在我院接受治療的宮頸鱗癌患者40例均采用新輔助化療治療。根據(jù)組織攝取部位不同分為癌旁組和癌中組。觀察治療前后癌旁組和癌中組的Bub1、p53的含量。結(jié)果：癌中組的Bub1均增高，p53均降低，接近癌旁組。結(jié)論：新輔助化療治療宮頸鱗癌臨床療效顯著，其機(jī)理可能是通過(guò)升高Bub1、降低p53含量進(jìn)行調(diào)節(jié)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)起到了抑制的作用。

宮頸鱗癌；新輔助化療；Bub1；p53

宮頸癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在發(fā)展中國(guó)家的婦科發(fā)病率高居第一位，在女性惡性腫瘤中及與腫瘤相關(guān)的女性死亡因素中居第二位［1］，近年來(lái)的研究結(jié)果表明［2］，隨著宮頸癌普查技術(shù)的發(fā)展和普及，早期宮頸癌的發(fā)病率越來(lái)越高且趨向年輕化，約54%的患者年齡＜50歲［3］。目前治療宮頸癌的主要手段是放療、化療和手術(shù)治療。1983年Frie等首次報(bào)道宮頸鱗癌是對(duì)化療（TP方案）敏感的腫瘤，從此，化療就在宮頸癌綜合治療中發(fā)揮著不可替代的作用［4］，所以手術(shù)治療的同時(shí)，新輔助化療也成為當(dāng)前宮頸癌治療過(guò)程中的重要步驟。新輔助化療（NACT）是指在局部治療（手術(shù)或放療）之前給予的全身化療，也叫早期化療。本研究通過(guò)免疫組化法研究分析Bub1、p53的含量變化，進(jìn)而觀察新輔助化療在臨床上治療宮頸鱗癌的有效性，并探討其作用機(jī)理?，F(xiàn)報(bào)告如下：

1　資料與方法

1.1一般資料在我院接受治療的宮頸鱗癌患者40例，年齡50～65歲，平均年齡57.3歲；病程0.4～0.6年，平均病程0.5年。所有患者均通過(guò)組織學(xué)方法進(jìn)行確診。

1.2試劑免疫組化試劑盒（Dako envision system labeled polymer，rHRP Anti-mouse and Anti-rabbit k1491），購(gòu)于美國(guó)Dako公司；p53一抗工作液，購(gòu)于上?；蛴邢薰荆籅ub1（Rabbit polyclonal to Bub1，aa1-312），購(gòu)于美國(guó)Abcam公司，試驗(yàn)稀釋度為1∶50。

1.3組織來(lái)源對(duì)患者化療前和化療后取病理組織，分為癌旁組織（癌旁組）和癌中組織（癌中組）。

1.4實(shí)驗(yàn)方法對(duì)患者進(jìn)行化療前取樣，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)學(xué)檢查，確定患者患有宮頸鱗癌，并測(cè)定Bub1、p53的含量，化療后對(duì)患者再次取樣，測(cè)定Bub1、p53的含量。其中免疫組織化學(xué)法按試劑盒說(shuō)明書操作，抗原修復(fù)采用水煮沸法，用小牛血清代替一抗作陰性對(duì)照，用已知宮頸鱗癌陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照。Bub1蛋白陽(yáng)性著色主要定位于細(xì)胞核漿；p53蛋白陽(yáng)性著色主要定位于細(xì)胞核。采用雙人雙盲法觀察結(jié)果，隨機(jī)選擇10個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)1 000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1患者進(jìn)行新輔助化療前Bub1蛋白在宮頸癌中的表達(dá)Bub1蛋白陽(yáng)性著色主要定位于細(xì)胞核漿，呈黃色或棕黃色顆粒。癌旁組Bub1陽(yáng)性率為87.5%，癌中組Bub1陽(yáng)性率為57.5%。兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。見(jiàn)表1、圖1。

表1　新輔助化療前宮頸鱗癌組織及正常宮頸黏膜中Bub1的表達(dá)

圖1　早癌Bub1（400倍）

2.2患者進(jìn)行新輔助化療后Bub1蛋白在宮頸癌中的表達(dá)癌旁組Bub1陽(yáng)性率為87.5%，癌中組Bub1陽(yáng)性率為82.5%。兩組比較無(wú)顯著性差異，P＞0.05。見(jiàn)表2。

表2　新輔助化療后宮頸鱗癌組織及正常宮頸黏膜中Bub1的表達(dá)

2.3患者進(jìn)行新輔助化療前p53蛋白在宮頸鱗癌中的表達(dá)p53蛋白陽(yáng)性著色主要定位于細(xì)胞核，呈黃色或棕黃色顆粒。癌旁組p53陽(yáng)性率為0.0%；癌中組p53陽(yáng)性率為52.5%。兩組比較有顯著性差異，P＜0.01。見(jiàn)表3、圖2。

表3　新輔助化療前宮頸鱗癌組織及正常宮頸黏膜中p53的表達(dá)

圖2　早癌p53（400倍）

2.4患者進(jìn)行新輔助化療后p53蛋白在宮頸鱗癌中的表達(dá)癌旁組p53陽(yáng)性率為0.0%；癌中組p53陽(yáng)性率為5.0%。兩組比較無(wú)顯著性差異，P＞0.05。見(jiàn)表4。

表4　新輔助化療后宮頸鱗癌組織及正常宮頸黏膜中p53的表達(dá)

3　討論

我們采用免疫組化來(lái)分析40例宮頸鱗癌（癌中組織）及40例正常宮頸黏膜（癌旁組織）中Bub1的表達(dá)情況，結(jié)果宮頸鱗癌組織中Bub1表達(dá)明顯低于正常黏膜，兩組之間存在明顯差異。經(jīng)過(guò)新輔助化療后，癌中組織的Bub1表達(dá)明顯增高，接近癌旁組織（P＞0.05）。雖然臨床病例有限，但為臨床治療癌癥提供了重要指導(dǎo)。研究結(jié)果顯示，在正常的宮頸黏膜組織中Bub1蛋白表達(dá)較高，這說(shuō)明一定量的Bub1蛋白可能是維持人類正常細(xì)胞有絲分裂所必須的。40例宮頸鱗癌及40例正常宮頸黏膜中p53表達(dá)結(jié)果顯示：正常宮頸黏膜中未發(fā)現(xiàn)p53蛋白，而40例宮頸鱗癌組織中p53陽(yáng)性率為52.5%。經(jīng)過(guò)新輔助化療后，患者癌中組織中p53顯著降低，接近癌旁組織中p53的含量，證明手術(shù)前對(duì)患者進(jìn)行新輔助化療可以明顯改變p53的含量，有利于患者后期的恢復(fù)，提高患者的生存率。

在新輔助化療中，采用紫杉醇通過(guò)抑制微管解聚可阻滯細(xì)胞周期，進(jìn)而殺傷腫瘤。有研究顯示紫杉醇這種殺傷作用有賴于具有完整功能的紡錘體檢查點(diǎn)。紡錘體檢查點(diǎn)是細(xì)胞周期的最后關(guān)卡［5］。目前，臨床上對(duì)于紫杉醇的用量也不盡相同，有研究報(bào)道，175 mg/m2的紫杉醇對(duì)晚期初次化療的宮頸癌有效率為17%，而250 mg/m2紫杉醇有效率可達(dá)25%［6］，患者化療后的副作用較小，生存率較高，這提示在臨床治療宮頸鱗癌時(shí)，不能單純的應(yīng)用手術(shù)治療，應(yīng)該配合有效的化療，起到抑制腫瘤生長(zhǎng)因子的作用，為手術(shù)后的快速恢復(fù)提供一定的基礎(chǔ)，提高手術(shù)成功率，減輕患者的痛苦及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

［1］WHO.Comprehensive cervical cancer control:a guide to essential practice［M］.Switzerland:World Health Organization，2006.1

［2］王悅，魏利.宮頸癌手術(shù)治療進(jìn)展［J］.中華實(shí)用診斷與治療雜志，2012，26（12）:1147-1149

［3］Filippeschi M，Moncini I，Bianchi B，et al.What Kind of surgery for cervical carcinoma［J］？G Chir，2012，33（4）:139-146

［4］徐鳳梅，王敏.宮頸癌及癌前病變組織中COX-2mRNA的表達(dá)及臨床意義［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2009，47（17）:33-34

［5］傅云峰，謝幸，葉大風(fēng).腫瘤與紡錘體檢查點(diǎn)的研究現(xiàn)狀［J］.國(guó)際腫瘤學(xué)雜志，2005，32（1）:3-6

［6］Legge F，F(xiàn)uoco G，Lorusso D，et al.Pharmacotherapy of cervical cancer ［J］.Expert Opin Pharmacother，2010，11（12）:2059-2075

R737.33

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.06.015

甘肅省社會(huì)發(fā)展類課題（編號(hào)：2015CGKJ63）

2016-04-03）