平歐榛子油對(duì)高血脂大鼠部分器官的修復(fù)效應(yīng)

呂春茂，葛 君，孟憲軍，董文軒，王琬瑩，李 瀟

（沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，遼寧 沈陽110161）

平歐榛子油對(duì)高血脂大鼠部分器官的修復(fù)效應(yīng)

呂春茂，葛 君，孟憲軍，董文軒，王琬瑩，李 瀟

（沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，遼寧 沈陽110161）

建立SD大鼠高血脂癥模型并作灌胃處理，通過測定模型腎臟、心臟、骨骼肌生理指標(biāo)及其組織病理變化，確定平歐榛子油對(duì)高脂血癥大鼠腎臟、心臟、骨骼肌的修復(fù)效應(yīng)。腎臟指標(biāo)測定結(jié)果顯示，飼喂平歐榛子油低劑量、中劑量、高劑量高血脂大鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性較高脂對(duì)照組差異顯著，分別提高了2%、6%、15%；丙二醛（MDA）含量與高脂對(duì)照組差異也顯著，分別降低了14%、28%、32%；過氧化氫酶（CAT）活性與高脂對(duì)照組差異極顯著，分別提高了22%、39%、57%；豆油組、低劑量組、中劑量組、高劑量組甘油三酯（TG）水平較高脂對(duì)照組分別降低了13%、13%、37%、34%。心臟指標(biāo)測定結(jié)果顯示，飼喂平歐榛子油低劑量組、中劑量組的高血脂大鼠SOD活性、MDA含量差異不顯著，高劑量組SOD活性、MDA含量差異顯著，SOD提高了12%，MDA降低了30%；豆油和低劑量組TG水平顯著降低，分別降低了8%、7%，而中劑量組和高劑量組TG水平極顯著降低33%、33%；豆油組、低劑量組、中劑量組、高劑量組谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）含量較高血脂對(duì)照差異顯著，分別提高了31%、34%、33%、21%。骨骼肌指標(biāo)測定結(jié)果顯示，飼喂榛子油的高血脂大鼠SOD和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、MDA和TG含量均有顯著變化，膽固醇（TC）含量差異不顯著。連續(xù)飼喂平歐榛子油可以提高高血脂大鼠抗氧化能力，對(duì)高血脂大鼠腎臟、心臟、骨骼肌具有一定的修復(fù)作用。

平歐榛子油；SD大鼠；高血脂癥；修復(fù)效應(yīng)

平歐榛子，屬樺木科榛屬植物，它是以東北野生平榛為母本，歐洲大果榛子為父本，通過種間遠(yuǎn)緣雜交選育成的新品種，在我國黑龍江、遼寧、河南、河北、山東等地區(qū)栽植。平歐榛子營養(yǎng)豐富，果仁中含有蛋白質(zhì)、維生素B1、維生素B2及8種必須氨基酸，尤其脂肪含量突出。劉娜、呂春茂［1］等（2011）測定了平歐大榛子榛仁營養(yǎng)組成、常溫下（25℃）榛子油過氧化值并采用氣相色譜法對(duì)榛仁的脂肪酸成分進(jìn)行了分析，結(jié)果表明榛仁含脂肪61.5%、蛋白質(zhì)20.6%、總糖9.3%、粗纖維3.6%、水分4.2%，常溫下（25℃）儲(chǔ)藏的榛油較穩(wěn)定，過氧化值變化不明顯，一般維持在1.10 mmol/kg；平歐榛子油中不飽和脂肪酸含量高達(dá)92%，分別為油酸77.22%、亞油酸14.06%、亞麻酸0.13%、棕櫚酸5.04%、棕櫚油酸0.18%、花生酸0.18%、花生四烯酸0.44%。而不飽和脂肪酸具有降低血中膽固醇和甘油三酯的功效，起到預(yù)防心腦血管疾病的作用［2］，并能促進(jìn)脂溶性維生素的吸收，可以有效地提高人的抵抗能力，調(diào)節(jié)人的神經(jīng)體系，增補(bǔ)大腦營養(yǎng)［3-5］，對(duì)體弱、病后虛弱、易饑餓的人都有很好的靜養(yǎng)作用。

高血脂癥可分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類。原發(fā)性與先天性和遺傳有關(guān)，是由于單基因缺陷或多基因缺陷使參與脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的受體、酶或載脂蛋白異常所致。繼發(fā)性多是由于諸如糖尿病，甲狀腺功能低下、肥胖、高血壓、肝腎疾病、腎上皮質(zhì)功能亢進(jìn)等病變造成機(jī)體代謝紊亂引起，還包括其他因素如年齡、性別、飲食、吸煙、體力活動(dòng)、精神緊張、情緒活動(dòng)等。隨著我國居民生活水平的提高，高熱量、高脂肪的食物越來越多的進(jìn)入了人們的日常生活，心血管疾病和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病率明顯增加，心血管疾病及動(dòng)脈粥樣硬化中，高血脂癥是一項(xiàng)重要的因素［6］，全球每年有1 200萬［7］人死于由高血脂癥所引起的心血管疾病。目前，臨床上較多使用藥物預(yù)防和治療高血脂癥，但容易出現(xiàn)肌損傷、肝損傷、腎損傷等副作用，因此使用生物源功能性提取物防治高血脂癥具有重要的現(xiàn)實(shí)意義［8-10］。

近些年國內(nèi)已有很多關(guān)于榛子的研究報(bào)道，但主要集中在榛子栽培和加工工藝及理化特性方面，而對(duì)榛子油降血脂及高脂模型組織器官的修復(fù)作用方面研究很少。呂春茂等人采用SD大鼠建立高血脂模型并做灌胃處理，證實(shí)平歐榛子油有明顯的降血脂作用，同時(shí)可以降低高血脂癥大鼠肝臟脂質(zhì)沉積，具有預(yù)防脂肪肝的作用［11］。繼續(xù)上述成果，針對(duì)繼發(fā)性高血脂癥，將模型組、治療組與對(duì)照組相比，通過對(duì)大鼠腎臟、心臟、骨骼肌中各相關(guān)指標(biāo)的測定及其組織病理切片的觀察，來探討榛子油對(duì)高血脂大鼠上述器官的修復(fù)作用，從而為榛子油的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和材料

健康潔凈級(jí)SD（Sprague-dawley）大鼠60只（遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供），飼養(yǎng)地點(diǎn)為沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室（遼寧省科學(xué)技術(shù)廳頒發(fā)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證，許可證號(hào)：SYXK（遼）2011-0001），大鼠體重60～80 g，用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，室內(nèi)通風(fēng)良好，室溫20～26℃，相對(duì)濕度40%～70%，12 h交替光線照明［12］；榛子（榛子由本溪縣三陽大果榛子專業(yè)生產(chǎn)合作社提供）；基礎(chǔ)飼料（沈陽市于洪區(qū)前民動(dòng)物試驗(yàn)飼料廠提供）；高脂飼料［13］（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）：基礎(chǔ)飼料78.8%，豬油10%，蛋黃粉10%，膽固醇1%，牛膽酸鈉0.2%；豬油、蛋黃粉，市購后自制；牛膽酸鈉、膽固醇，北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；金龍魚大豆油（益海嘉里有限公司），脂肪酸 （質(zhì)量）分?jǐn)?shù)：亞麻酸6.9%，油酸24.2%，硬脂酸2.5%，棕櫚酸7.2%，花生酸2.3%；氯化鈉注射液（辰歐藥業(yè)股份有限公司提供）。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備

1.2.1實(shí)驗(yàn)試劑超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒；丙二醛（MDA）試劑盒；過氧化氫酶（CAT）試劑盒；總膽固醇（TC）試劑盒；甘油三酯（TG）試劑盒；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）試劑盒，谷胱甘肽過氧化氫酶（GSHPX）：均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.2.2儀器設(shè)備TDL-5000B型離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司產(chǎn)品；HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋：國華電器有限公司產(chǎn)品；DHG-9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品；PHS-25型數(shù)顯PH計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；多功能粉碎機(jī)：永康市帥通工具有限公司產(chǎn)品；HM550型冷凍切片機(jī)：中威儀器公司 （香港）；XS-212光學(xué)顯微鏡：南京江南永新光學(xué)有限公司產(chǎn)品。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1榛子油的制備將平歐榛子去殼，取其仁烘干、粉碎后過20目篩，稱取200 g過篩的榛子仁粉，采用用正己烷萃取法，以超聲波為輔助技術(shù)提取榛子油，然后用抽濾法分離溶劑混合物與殘?jiān)Ｌ崛」に嚕洪蛔印茪ぁ制扑椤娓伞鬯椤^篩（20目）→稱重（200 g）→裝料、添加有機(jī)溶劑（1 g∶6.3 mL）→超聲波回流萃取 （210 W）→抽濾（47.5℃，31.2min）→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)→榛子油［14］，備用。

1.3.2高脂大鼠模型的制備與處理60只大鼠隨機(jī)分為兩組，空白對(duì)照組和高脂模型組，組間體質(zhì)量無明顯差異。其中空白對(duì)照組10只，給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)；模型組50只，給予高脂飼料喂養(yǎng)。模型組喂養(yǎng)70 d后，尾靜脈采血1.0 mL，測定血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG），TC、TG均有明顯升高并出現(xiàn)體重增加，行動(dòng)遲緩為造模成功。每隔一周測定血脂水平，并觀察大鼠的一般狀況［15］。

將成膜后將高脂模型隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為高脂對(duì)照組、豆油試驗(yàn)組、榛子油低劑量組、榛子油中劑量組、榛子油高劑量組。隨后進(jìn)行灌胃處理，高脂對(duì)照組（500mg/（kg·d）生理鹽水）、豆油試驗(yàn)組（500 mg/（kg·d））、榛子油低劑量組（50 mg/ （kg·d））、榛子油中劑量組（500mg/（kg·d））、榛子油高劑量組（1 000 mg/（kg·d）），空白對(duì)照組（500 mg/ （kg·d）生理鹽水）。分組當(dāng)天開始灌胃，連續(xù)灌胃40 d。

末次灌胃后禁食12 h，腹腔注射3mL/kg水合氯醛，待大鼠深度麻醉后，取其腎臟、心臟、骨骼肌，每種組織的一小部分用于冷凍切片的制作，其余迅速用液氮冷凍，放置-80℃冰箱保存，用于各個(gè)組織生化指標(biāo)的測定。

1.3.3生化指標(biāo)的測定

1）組織勻漿的制備稱取組織（0.2～1 g），按勻漿介質(zhì)（8 g/L NaCl溶液）1∶9的比例放入研缽中，在冰浴條件下制備勻漿，3 000 r/min低溫離心 10 min，取上清液4℃冰箱冷藏備用［16］。

2）測定指標(biāo)丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸（TBA）法測定，超氧化物歧化酶（SOD）采用黃嘌呤氧化酶法測定，過氧化物酶（CAT）采用鉬酸銨法測定，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）采用比色法測定，甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）采用氧化酶法測定。操作步驟嚴(yán)格遵守試劑盒說明書進(jìn)行，計(jì)算公式等詳見各試劑盒使用說明書。

1.3.4冷凍切片的制作冷凍切片是一種組織不經(jīng)過脫水、透明處理，不需要石蠟包埋的制片方法。選取新鮮活體組織，修成0.9 cm3的小塊，厚度不能超過5 mm，取材要平整規(guī)則，避開壞死出血區(qū)，盡量剔除脂肪、毛發(fā)、硬骨等。取材后將組織包埋在盛有膠水的圓筒形錫箔紙內(nèi)，盡量把組織放在圓筒中央，-20℃下冷凍2 min。隨后切片，切片厚度以10μm為宜，將組織展平，利用溫差將組織貼于防脫片上，隨后進(jìn)行蘇木素染色3-5 min、水洗、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒、再水洗2～3 min（恢復(fù)藍(lán)色）、1%水溶性伊紅1min、梯度乙醇脫水、二甲苯浸泡等步驟。最后中性樹膠封片，避免出現(xiàn)起泡，陽光下晾干，制成永久性玻片標(biāo)本，供光學(xué)顯微鏡觀察使用。

1.3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間差異性比較采用t檢驗(yàn)處理。以P＜0.05有顯著差異，P＜0.01認(rèn)為極顯著差異，置信水平95%。

2　結(jié)果與分析

2.1榛子油對(duì)高血脂大鼠腎臟的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1　榛子油對(duì)大鼠腎臟參數(shù)的影響Table 1　Effects of hazelnut oil on kidney in rats

2.1.1榛子油對(duì)大鼠腎臟中超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響由表1可知，高脂對(duì)照組中SOD的活性明顯低于空白對(duì)照組（p＜0.01），說明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比榛子油低劑量組能顯著地提高高脂大鼠腎臟中SOD的活性，提高了2%（0.01＜P＜0.05），而榛子油中劑量組和榛子油高劑量組能極顯著地提高大鼠腎臟中SOD的活性，分別提高了6%、15%（P＜0.01）。豆油試驗(yàn)組與高脂對(duì)照組差異不明顯，說明豆油試驗(yàn)組在提高高脂大鼠腎臟中SOD的作用不明顯，而榛子油3種劑量組中SOD活性的提高隨著劑量的增加而增加，榛子油高劑量組的效果較明顯。

2.1.2榛子油對(duì)大鼠腎臟中丙二醛（MDA）含量的影響由表1可知，高脂對(duì)照組中MDA含量顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），說明高血脂癥大鼠建模成功。與豆油試驗(yàn)組相比榛子油低劑量組、榛子油中劑量組、榛子油高劑量組都能顯著地降低高脂大鼠腎臟中MDA的含量，分別降低了14%、28%、32% （P＜0.01）。而榛子油中劑量組與榛子油高劑量組差異不明顯，說明飼喂榛子油中劑量即可，無需再增加劑量。

2.1.3榛子油對(duì)大鼠腎臟中過氧化氫（CAT）的影響由表1可知，高脂對(duì)照組中CAT活性顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.01），說明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比，豆油試驗(yàn)組沒有明顯變化，榛子油低劑量組、榛子油中劑量組、榛子油高劑量組都顯著性提高高脂大鼠腎臟中CAT的活性，分別提高了22%、39%、57%（P＜0.01），三者之間存在顯著性差異，存在劑量選擇性，高劑量組在提高CAT活性上效果更好。

2.1.4榛子油對(duì)大鼠腎臟中甘油三酯（TG）的影響由表1可知，高脂對(duì)照組大鼠腎臟中TG的水平極顯著高于空白對(duì)照組（p＜0.01），表明大鼠高血脂癥建模成功 。與高脂對(duì)照組相比豆油試驗(yàn)組、榛子油低劑量組、榛子油中劑量組、榛子油高劑量組都明顯的降低了高脂大鼠腎臟中TG的水平，分別降低了13%、13%（0.01＜P＜0.05）、37%、34%（P＜0.01）。因此榛子油中劑量組和高劑量組都有較好的效果，綜合考慮選擇中劑量的榛子油。

2.2榛子油對(duì)高血脂大鼠心臟的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

2.2.1榛子油對(duì)大鼠心臟超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響由表2可知，高脂對(duì)照組大鼠心臟中的SOD活性明顯低于空白對(duì)照組（P＜0.01），表明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比豆油試驗(yàn)組、榛子油低劑量組、榛子油中劑量組都沒有顯著性的變化（P＞0.05），而榛子油高劑量組SOD的活性與高脂對(duì)照組相比出現(xiàn)了顯著性升高的情況，提高了12%（P＜0.01）。說明榛子油的抗機(jī)體氧化的效果與油脂的劑量有關(guān)，高劑量組效果較好。

表2　榛子油對(duì)大鼠心臟參數(shù)的影響Table 2　Effects of hazelnut oil on heart in rats

2.2.2榛子油對(duì)大鼠心臟丙二醛（MDA）含量的影響由表2可知，高脂對(duì)照組的MDA含量極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），表明大鼠高血脂癥建模成功。豆油試驗(yàn)組、榛子油低劑量組、榛子油中劑量組與高脂對(duì)照組相比大鼠心臟中MDA的含量無顯著性變化（P＞0.05），但榛子油高劑量組與高脂對(duì)照組相比有顯著性的降低，降低了30%（P＜0.01）。說明榛子油高劑量組在降低高脂大鼠心臟MDA含量上有顯著的療效。

2.2.3榛子油對(duì)大鼠心臟甘油三酯（TG）含量的影響由表2知，高脂對(duì)照組的TG含量極顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.01），表明大鼠高血脂癥建模成功。豆油試驗(yàn)組及榛子油3種劑量組都具有明顯的降TG的效果，分別降低了8%、7%（0.01＜P＜0.05）、32%、32%（P＜0.01）。其中榛子油中劑量組和高劑量組與低劑量組相比具有更好的降TC的效果，說明榛子油比豆油具有更好的降低TG的作用，并且與油脂的劑量有關(guān)。

2.2.4榛子油對(duì)大鼠心臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）含量的影響由表2知，高脂對(duì)照組的GPT含量極顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.01），表明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比，豆油試驗(yàn)組及榛子油3種劑量組具有顯著的提高GPT的效果，分別提高了31%、34%、32%、21%（0.01＜P＜0.05）。說明不同劑量榛子油在提高高血脂大鼠心臟中GPT上具有相似的效果，與榛子油的劑量無關(guān)。

2.3榛子油對(duì)高血癥大鼠骨骼肌的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3　榛子油對(duì)大鼠骨骼肌參數(shù)的影響Table 3　Effects of hazelnut oil on skeletalmuscle in rats

2.3.1榛子油對(duì)大鼠骨骼肌甘油三酯（TG）的影響由表3可知，高脂對(duì)照組的TG含量極顯著的高于空白對(duì)照組（P＜0.01），說明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比，豆油試驗(yàn)組、榛子油低劑量組、榛子油中劑量組、榛子油高劑量組在降低高脂大鼠骨骼肌中TG水平上都有極顯著的作用，分別降低了18%、5%、17%、33%（P＜0.01）。豆油試驗(yàn)組與榛子油中劑量組的效果相似，榛子油高劑量組降TC的效果較好。

2.3.2榛子油對(duì)大鼠骨骼肌總膽固醇（TC）的影響由表3可知，高脂對(duì)照組的TC水平明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.01），說明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比，豆油試驗(yàn)組和3種榛子油劑量組沒有顯著性差異（P＞0.05），說明豆油和榛子油對(duì)高脂癥大鼠骨骼肌中的TC無作用。

2.3.3榛子油對(duì)大鼠骨骼肌超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPX）的影響由表3可知，高脂對(duì)照組大鼠骨骼肌的SOD、GSH-PX水平明顯低于空白對(duì)照組 （P＜0.01），MDA含量明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.01），說明大鼠高血脂癥建模成功。與高脂對(duì)照組相比，各個(gè)給油組都有顯著的變化（P＜0.01），SOD活性分別提高了27%、41%、40%、54%（P＜0.01）；MDA含量分別降低了10%、15%、14%、22%（P＜0.01）；GSH-Px分別提高了15%、16%、34%、56%（P＜0.01）。豆油和榛子油對(duì)調(diào)節(jié)高血脂大鼠骨骼肌的抗氧化能力都有效果，而榛子油高劑量組的效果較為明顯。

2.4榛子油對(duì)大鼠腎臟病理變化的影響由圖1可知高血脂模型對(duì)照組與空白對(duì)照組相比，高血脂模型對(duì)照組大鼠的腎小球囊腔變窄，腎小球體積增大，這是由于腎小球水腫變性，液體外滲，導(dǎo)致的腎小球腫大，腎小囊囊腔變窄，并且高脂對(duì)照組的腎小球數(shù)量增多，因而出現(xiàn)極性增生性腎小球腎炎的現(xiàn)象。豆油試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比大鼠的腎小球仍然呈現(xiàn)水腫，細(xì)胞核數(shù)目增多，腎小囊腔窄小的現(xiàn)象，腎炎癥狀沒有得到緩和。經(jīng)過給予榛子油低劑量組的大鼠與高脂對(duì)照組相比大鼠的腎小球水腫的癥狀有減輕的跡象，出現(xiàn)了腎小囊腔，腎炎現(xiàn)象得到緩和；榛子油中劑量組與高脂對(duì)照組相比大鼠的腎小囊腔明顯增大，與榛子油低劑量組相比腎炎有更明顯的恢復(fù)；高劑量榛子油與中劑量榛子油組相比腎小球水腫現(xiàn)象基本消失，基本恢復(fù)了空白對(duì)照組大鼠腎臟的狀態(tài)。因此中、高劑量的榛子油對(duì)由高血脂引起的腎炎有較好的治療作用。

圖1　不同實(shí)驗(yàn)組大鼠腎小球組織切片F(xiàn)ig.1　Slice of rat glomerular organized of different treatment during feeding period

2.5榛子油對(duì)大鼠骨骼肌病理變化的影響

2.5.1榛子油對(duì)大鼠骨骼肌肌纖維橫切面的影響將各組大鼠麻醉解剖后肉眼觀察大鼠骨骼肌形態(tài)，各組大鼠骨骼肌大小、形狀正常，外膜光滑。

骨骼肌 H.E染色結(jié)果顯示（圖2），各組大鼠的骨骼肌的形態(tài)變化差異明顯，空白對(duì)照組大鼠后骨骼肌肌束粗壯，肌絲排列緊密，肌細(xì)胞呈檳榔狀，并且細(xì)胞核形態(tài)正常，數(shù)量適中；高血脂模型對(duì)照組大鼠骨骼肌肌束呈萎縮狀明顯細(xì)弱，肌絲排列稀松，肌細(xì)胞間隙變大，呈狹長狀，形態(tài)異常；豆油試驗(yàn)組大鼠與高脂對(duì)照組相比骨骼肌仍呈狹長狀，肌細(xì)胞間隙略微減小，但與空白對(duì)照組相比仍有很大的空隙；榛子油低劑量組與高脂對(duì)照組大鼠相比骨骼肌肌束間隙雖然有所縮減，但間隙與空白對(duì)照組仍然有差異，并且肌細(xì)胞仍呈狹長狀，因此低劑量榛子油對(duì)恢復(fù)病態(tài)大鼠骨骼肌沒有明顯效果；榛子油中劑量組與高脂對(duì)照組大鼠相比骨骼肌肌絲排列緊密，但肌束細(xì)弱；榛子油高劑量組與高脂對(duì)照組大鼠相比骨骼肌肌束恢復(fù)粗壯，肌絲間隙基本消失，肌細(xì)胞形狀接近檳榔狀；從以上描述可知榛子油對(duì)高脂癥大鼠骨骼肌具有一定的保護(hù)作用，并與榛子油的劑量選擇有關(guān)，3種劑量中榛子油高劑量組效果較好。

圖2　不同實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌橫切面組織切片F(xiàn)ig.2　Transverse slice of rat skeletalmuscle of different during feeding period

2.5.2榛子油對(duì)大鼠骨骼肌肌纖維縱切面的影響骨骼肌 H.E染色結(jié)果顯示（圖3），光鏡下觀察骨骼肌的縱切面，空白對(duì)照組大鼠骨骼肌肌纖維形態(tài)正常，肌絲排列緊密，肌束粗壯，肌細(xì)胞表現(xiàn)光滑，細(xì)胞核清晰，結(jié)構(gòu)清楚；高血脂模型對(duì)照組大鼠骨骼肌肌纖維出現(xiàn)溶解、斷裂現(xiàn)象，鏡下有大量的肌纖維碎片，肌絲排列稀松，形態(tài)異常；豆油試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比大鼠骨骼肌部分肌纖維溶解、斷裂，與高脂對(duì)照組相比肌絲排列略微緊密，說明豆油對(duì)病態(tài)大鼠骨骼肌的恢復(fù)有一定的效果，但效果不明顯；榛子油低劑量組與高脂對(duì)照組大鼠相比骨骼肌肌絲整齊，無斷裂現(xiàn)象，但與空白對(duì)照組相比肌絲排列稀松；榛子油中劑量組與空白對(duì)照組相比骨骼肌絲形態(tài)基本恢復(fù)正常，肌絲排列緊密，但肌細(xì)胞表面粗糙；榛子油高劑量組與空白對(duì)照組大鼠相比骨骼肌肌細(xì)胞表面光滑，肌絲形態(tài)基本恢復(fù)正常，肌絲排列緊密，細(xì)胞核清晰。

2.6榛子油對(duì)大鼠心臟病理變化的影響

對(duì)心臟心肌縱切面進(jìn)行H.E染色的結(jié)果顯示（圖4），光鏡下觀察各組大鼠心肌，空白對(duì)照組大鼠心肌纖維排列有序，走行正常，胞漿與胞核顯色分明；高血脂模型組大鼠心肌纖維走行紊亂，肌束間界限不清晰，發(fā)生了水腫，肌纖維出現(xiàn)了部分溶解、斷裂現(xiàn)象，伊紅著色變深，出現(xiàn)嗜伊紅濃染現(xiàn)象，說明肌細(xì)胞發(fā)生了病變；豆油試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比心肌纖維走行不清，肌束間出現(xiàn)界限，但仍然存在嗜伊紅現(xiàn)象；榛子油低劑量組與高脂對(duì)照組和豆油試驗(yàn)組相比有明顯的改善，肌纖維走向清晰，但肌束間空隙狹小，仍有水腫現(xiàn)象出現(xiàn)，嗜伊紅現(xiàn)象有所減輕；榛子油中劑量組與高脂對(duì)照組和豆油試驗(yàn)組相比肌纖維走向清晰，肌束間空隙增加，水腫現(xiàn)象基本消失；榛子油高劑量組與空白對(duì)照組相比肌纖維走行基本恢復(fù)正常，水腫現(xiàn)象消失，肌束間界限清晰。

圖3　不同實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌縱切面組織切片F(xiàn)ig.3　Longitudinal slice of rat skeletalmuscle of different during feeding period

圖4　不同實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織切片F(xiàn)ig.4　Slice of ratm yocardial of different during feeding period

3　結(jié)語

探討了平歐榛子油對(duì)高血脂癥大鼠部分器官如心臟、腎臟、骨骼肌的修復(fù)效應(yīng)及保護(hù)功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：對(duì)于高血脂癥大鼠腎臟來說，榛子油在提高大鼠腎臟中SOD、CAT活性和降低MDA、TG水平上有一定的作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，榛子油在抗氧化功能以及降血脂上具有劑量選擇性，即榛子油高劑量組對(duì)大鼠腎臟具有較好的修復(fù)作用；對(duì)于高血脂癥大鼠心臟來說，榛子油在提高大鼠心臟組織中SOD、CAT、GPT活性和降低心臟組織中MDA、TG含量也具有一定作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，榛子油在降血脂和提高心臟抗氧化功能上也具有一定的劑量選擇性，綜合心臟各個(gè)指標(biāo)考慮，榛子油高劑量組在保護(hù)心臟方面效果明顯；大鼠骨骼肌中GSHPx是谷胱甘肽氧化系統(tǒng)中主要的酶，與SOD協(xié)同清除機(jī)體內(nèi)的自由基。SOD和GSH-Px活性隨著榛子油劑量的增加有所提高，MDA的含量有所降低，說明榛子油對(duì)大鼠的抗氧化系統(tǒng)具有修復(fù)作用，并且大鼠骨骼肌中的TG有顯著的降低，而且隨著榛子油劑量的增加效果越明顯。

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Prothetic Effect of Flat-European Hybrid Hazelnut Oil on Partial Organs of Ratsw ith Hyperlipidem ia

LV Chunmao，GE Jun，MENG Xianjun，DONGWenxuan，WANGWanying，Li Xiao
（College of Food Science，Shenyang Agricultural University，Shenyang 110161，China）

The hyperlipidem ia model of SD rats was established and handled w ith gavage.The physiological indexes and histopathologic of kidneys，hearts and skeletalmuscles in themodel rats were observed to determ ine the effectof the Flat-European hybrid hazelnutoil on partial organs of rats induced by high fatdiet.The resultsof kidney indexes testshowed that the superoxide dismutase （SOD）activity was significantly increased by 2%，6%，and 15%，respectively for the high fatgroup treated in low，m iddle，and high doses using Flat-European hybrid hazelnut oil，while a significant decrease ofmalonaldehyde（MDA）content by 14%，28%，and 32%，and a significant increase ofcatalase（CAT）activity by 22%，39%，and 57%，comparingw ith the high fat controlgroup.Another decrease of triglyceride（TG）contentby 13%，13%，37%，and 34%was observed for soybean oiland hybrid hazelnut in low doses group，and hazelnutoil inm iddle and high dose group compared to the high fat control group.The results of heart indexes test showed that the differences of SOD activity and MDA content were not significant for the groups treated in low and m iddle doses w ith Flat-European hybrid hazelnut oil，however，an increase of SOD activity by12%and a decrease of MDA by 30%were significantly observed for the groups treated in high doses of Flat-European hybrid hazelnut oil.The TG contents of the groups treated w ith soybean oil and hybrid hazelnut in low doses significantly decreased by 8%and 7%，while those of the groups treated w ith hybrid hazelnut inm iddle and high doses extremely significantly decreased by 33%and 33%.The alanine aminotransferase（GPT）content increased by 31%，34%，33%，and 21%for soybean oiland hybrid hazelnut in low doses group，hazelnut oil inm iddle and high dose group compared to the high fat control group.The results of skeletalmuscle test presented significant changes in SOD activity，glutathione peroxidase（GSH-Px）activity，MDA content and TG content for the high fat groups treated w ith Flat-European hybrid hazelnutoil.However，the change in cholesterol（TC）contentwas notobvious.This study revealed that the antioxidantability of the high fatgroup could be improved by dosing Flat-European hybrid hazelnutoil，and the prothetic effect for kidneys，heart，and skeletal musclewasobserved.

flat-european hybrid hazelnutoil，sprague-daw ley rats，hyperlipidem ia，prothetic effect

TS 201.4

A

1673—1689（2016）04—0429—09

2014-11-20

遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2014027011）。

呂春茂（1970—），男，內(nèi)蒙古包頭人，工學(xué)博士，副教授，主要從事食品生物技術(shù)研究。E-mail：bt_lcm@126.com