多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片在肺癌診療中的應(yīng)用價(jià)值

王曉川，韓水仲，趙文慶，孫良起，蔣歡歡，鄭國(guó)寶

多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片在肺癌診療中的應(yīng)用價(jià)值

王曉川1，韓水仲2，趙文慶3，孫良起1，蔣歡歡1，鄭國(guó)寶1

目的 探討多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片在肺癌診療中的應(yīng)用價(jià)值。方法 采用多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測(cè)肺癌患者157例、良性肺病177例、健康體檢者41例血清中的12種腫瘤標(biāo)志物(CA125、CA19-9、Ferritin、CA153、CA242、CEA、AFP、NSE、PSA、f-PSA、HGH、β-HCG)。結(jié)果 肺癌組腫瘤標(biāo)記物陽(yáng)性率為92.36%，良性肺病組為76.83%，健康對(duì)照組為7.32%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。肺癌組血清中腫瘤標(biāo)記物CEA、CA242陽(yáng)性率與良性肺病組、健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，而β-HCG、AFP、f-PSA、PSA、HGH等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。肺癌組血清中腫瘤標(biāo)記物CA19-9、NSE、CEA、CA242、CA125、CA153水平顯著高于肺良性病變組和健康對(duì)照組(均P<0.05)，而β-HCG、f-PSA、PSA、HGH等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片僅可用于肺癌的早期輔助診斷，并不能作為肺癌的確診指標(biāo)。

肺癌；腫瘤標(biāo)志物；多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片

肺癌是嚴(yán)重威脅人類健康的高發(fā)病率、高死亡率疾病之一。在世界范圍內(nèi)，每年新增180萬(wàn)肺癌病例，占癌癥總數(shù)的13%[1]。在中國(guó)，肺癌排名惡性腫瘤死因的第一位[2]。由于大多數(shù)肺癌早期并不呈現(xiàn)典型癥狀，因此70%的肺癌患者在確診時(shí)已經(jīng)是局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(Ⅲb/IV期)，失去了最佳的手術(shù)或治療時(shí)機(jī)，致使肺癌患者5 a生存率低于15%。如果在肺癌早期進(jìn)行診斷和治療，可顯著改善肺癌的預(yù)后，并降低其死亡率。目前，對(duì)肺癌的早期診斷方法主要包括胸透、CT掃描等，但上述方法無(wú)法全面鑒別肺部良性的“結(jié)節(jié)”病變與惡性腫瘤，而且檢測(cè)取樣時(shí)對(duì)患者可能造成損害[3]。多腫瘤標(biāo)志物蛋白質(zhì)芯片是一種高通量、高靈敏度、高特異性和微型化的蛋白質(zhì)分析工具，可用于對(duì)腫瘤進(jìn)行高通量的早期篩查、輔助診斷及療效觀察等。本研究利用12種腫瘤標(biāo)志物蛋白質(zhì)芯片技術(shù)探討腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌診斷的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2016年5月，在中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院經(jīng)細(xì)胞學(xué)或組織學(xué)診斷為肺癌的患者157例，男105例，女52例，年齡(64.30±11.06)歲；良性肺病(包括慢性阻塞型肺炎、肺炎、肺結(jié)核)177例，男136例，女41例，年齡(61.82±16.91)歲；健康體檢者41例，男26例，女15例，年齡(60.12±17.59)歲。

1.2 檢測(cè)方法 所有患者或健康體檢者均清晨空腹采靜脈血，2 000 r·min-1離心5 min，收集上清進(jìn)行檢測(cè)，如不能當(dāng)天檢測(cè)，可于2～8 ℃保存。受檢者血清中的腫瘤標(biāo)志物使用多腫瘤標(biāo)志物定量檢測(cè)試劑盒(蛋白芯片—化學(xué)發(fā)光法，湖州數(shù)康生物科技有限公司，浙江)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行，檢測(cè)結(jié)果采用HD-2001A/LU-07生物芯片檢測(cè)儀進(jìn)行分析。參考試劑盒說(shuō)明書，12種腫瘤標(biāo)志物的臨界值為：癌抗原125(cancer antigen 125,CA125)<35 U·mL-1，糖鏈抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)<35 U·mL-1，鐵蛋白Ferritin(女性<219 ng·mL-1，男性<322 ng·mL-1)，癌抗原153(cancer antigen 153, CA153)<35 U·mL-1，糖鏈抗原242(carbohydrate antigen 242, CA242)<20 U·mL-1，癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)<5 ng·mL-1，甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)<20 ng·mL-1，神經(jīng)元烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)<13 ng·mL-1，前列腺特異性抗原(prostate specific antigen, PSA)<5 ng·mL-1，游離前列腺特異性抗原(free prostate specific antigen, f-PSA)<1 ng·mL-1，生長(zhǎng)激素(human growth hormone,HGH)<7.5 ng·mL-1，絨毛膜促性腺激素β亞基(β-human chorionic gonadotrophin, β-HCG)<3 mIU·mL-1。對(duì)患者或健康體檢者進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，當(dāng)12種腫瘤標(biāo)志物一種或一種以上為陽(yáng)性，則認(rèn)為其為陽(yáng)性，當(dāng)12種腫瘤標(biāo)志物均陰性，則認(rèn)為其為陰性。敏感性=肺癌組陽(yáng)性例數(shù)/肺癌組總例數(shù)；特異性=(肺良性病變組中陰性例數(shù)+健康體檢組陰性例數(shù))/(肺良性病變組總例數(shù)+健康體檢組總例數(shù))；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=肺癌組陽(yáng)性例數(shù)/陽(yáng)性檢測(cè)樣本總例數(shù)；陰性預(yù)測(cè)值=(健康體檢組陰性例數(shù)+肺良性病變組中陰性例數(shù))/陰性檢測(cè)樣本總例數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 各組腫瘤標(biāo)記物蛋白芯片陽(yáng)性率的比較 經(jīng)檢測(cè)，肺癌組145例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為92.36%，良性肺病組136例陽(yáng)性，陽(yáng)性率76.83%，健康對(duì)照組3例陽(yáng)性，陽(yáng)性率7.32%。肺癌組陽(yáng)性率顯著高于良性肺病組(χ2=15.012，P<0.01)和健康對(duì)照組(χ2=124.555，P<0.01)，見(jiàn)表1。肺癌組血清CEA、CA242水平與良性肺病組、健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。良性肺病組CEA、CA242、CA125與健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見(jiàn)表1。血清中的12種腫瘤標(biāo)志物對(duì)肺癌診斷的敏感性最高為CA125(69.43%)，特異性最高為HGH(99.54%)，見(jiàn)表2。

表1 3組中12種腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性率比較 %

注：①肺癌組與良性肺病組相比:P<0.05；②肺癌組與健康對(duì)照組相比:P<0.05。

表2 腫瘤標(biāo)志物對(duì)肺癌診斷的敏感性和特異性 %

2.2 3組單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的比較 肺癌組血清中CA19-9、NSE、CEA、CA242、AFP、CA125、CA153水平顯著高于良性肺病組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，而β-HCG、f-PSA、PSA、HGH差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。良性肺病組NSE、CEA、CA242、Ferritin、CA125顯著高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 各組12中血清腫瘤標(biāo)志物水平比較±s)

注：①肺癌組與良性肺病組相比:P<0.05；②良性肺病組與健康對(duì)照組相比:P<0.05；③肺癌組與健康對(duì)照組相比:P<0.05。

3 討論

近年來(lái)，肺癌發(fā)病率已上升至人類惡性腫瘤的首位，由于其預(yù)后較差，嚴(yán)重威脅人類生命健康。早期診斷和治療肺癌能極大提高患者的生存率和生存時(shí)間。本研究采用蛋白芯片檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)肺癌患者血清中12種腫瘤標(biāo)志物，結(jié)果肺癌組陽(yáng)性率為92.36%，顯著高于良性肺病組和健康對(duì)照組。

本研究中肺癌組CEA(59.24%)的陽(yáng)性率顯著高于良性肺病組(29.94%)和健康對(duì)照組(2.44%)，與文獻(xiàn)報(bào)道基本相符[4-5]。CEA是一種細(xì)胞表面相關(guān)糖蛋白，通常在早期胎兒的胃腸道、肝、胰及成人胃腸道等產(chǎn)生[6]。血清中CEA的水平與癌細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)，有報(bào)道稱血清中CEA水平可較好評(píng)價(jià)肺癌治療效果[7-8]。

CA242是一種糖鏈類黏蛋白，其在健康人際良性疾病患者血清中含量很低，但在腺癌的表達(dá)較高，特別是在胰腺癌的診斷及直腸癌的預(yù)后方面有較高的臨床價(jià)值[9-11]。研究報(bào)道CA242在肺癌中升高，而且在不同時(shí)期的肺癌中及治療前后其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[12]。因此，CA242對(duì)肺癌的早期診斷及臨床預(yù)后判定具有參考價(jià)值。本研究中，CA242的敏感性為22.93%，特異性為92.66%，說(shuō)明單獨(dú)CA242檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷價(jià)值較低。而有報(bào)道CA242聯(lián)合其它腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)具有重要價(jià)值，如CA242/CA19-9聯(lián)合檢測(cè)，在胰腺癌患者中100%升高，CA242/CEA在肺癌患者中80.61%升高[13]。本研究中，肺癌組中CEA、CA242血清水平均顯著高于肺良性病變組和健康對(duì)照組。兩者聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)肺癌的敏感性為62.42%，特異性為71.60%，說(shuō)明CA242聯(lián)合CEA檢測(cè)對(duì)肺癌具有較高的診斷價(jià)值。

CA125是卵巢癌患者卵巢上皮細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，而正常卵巢細(xì)胞不分泌[14]。有報(bào)道在肺癌患者中，CA125的陽(yáng)性率為44.87%[15]。本研究中，CA125在肺癌患者中的陽(yáng)性率為69.43%，在肺良性病變組的陽(yáng)性率為66.67%，兩者差異不顯著，但均高于健康對(duì)照2.44%，說(shuō)明CA125不是肺癌特異性標(biāo)志物，但可用于肺部損傷的檢測(cè)。CEA、CA242、CA125這3種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，敏感性為89.17%，但特異性僅為67.43%。

因此，多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片僅可用于肺癌的早期診斷，不能作為肺癌的確診指標(biāo)，CEA與CA242的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌的早期診斷意義較大。

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Value of Multi-tumor Markers Protein Biochip in the Diagnosis of Lung Cancer

WANG Xiao-chuan1, HAN Shui-zhong2, ZHAO Wen-qing3, SUN Liang-qi1, JIANG Huan-huan1, ZHENG Guo-bao1

(1.Department of Clinical Laboratory,No. 150 Central Hospital of People′s Liberation Army,Luoyang 471031,China；2.Pulike Biological Engineering,Inc,Luoyang 471031,China；3.Luoyang First Hospital of Traditional Chinese Medicine,Luoyang 471031,China)

ObjectiveTo evaluate the clinical value of multi-tumor markers protein biochip in the diagnosis of lung cancer.MethodsSerum CA125, CA19-9, Ferritin, CA15-3, CA242, CEA, AFP, NSE, PSA, f-PSA, HGH, β-HCG were detected by multi-tumor markers protein biochip in 157 patients with lung cancer, 177 patients with benign lung disease, and 41 healthy people in control group.ResultsThe positive rate of 12 tumor markers(92.36%) in lung cancer was significant higher than that in benign lung disease (76.83%) and healthy people (7.32%)(allP<0.01). The positive rate of CEA and CA242 in lung cancer showed significant differences compared with benign lung disease and healthy people (allP<0.05), but no significant differences in β-HCG, AFP, f-PSA, PSA, HGH. Serum levels of CA19-9, NSE, CEA, CA242, CA125, CA153 were significant higher in lung cancer than that in benign lung disease and healthy people (allP<0.05), but no significant differences in β-HCG, f-PSA, PSA, HGH (allP>0.05).ConclusionMulti-tumor markers biochip might contribute to the early diagnosis for lung cancer, but not to be a definite diagnosis biomarker.

lung cancer；tumor markers；multi-tumor markers protein biochip

1672-688X(2016)04-0265-04

10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2016.04.008

2016-07-04

1.中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院，河南洛陽(yáng) 471031 2.普萊柯生物工程股份有限公司，河南洛陽(yáng) 471031 3.洛陽(yáng)市第一中醫(yī)院，河南洛陽(yáng) 471031

王曉川(1985-)，男，河南洛陽(yáng)人，主管技師，從事臨床檢驗(yàn)工作。

鄭國(guó)寶，男，主任醫(yī)師，E-mail：zhengguobao123@126.com

R734.2

B