復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)及沙門氏菌感染的影響

周　嶺　丁雪梅　羅玉衡　王建萍　白世平　孟懷旺　張克英*

(1．四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所,動物抗病營養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，雅安625014；2.重慶優(yōu)寶生物技術(shù)股份有限公司，重慶400711)

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復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)及沙門氏菌感染的影響

周嶺1丁雪梅1羅玉衡1王建萍1白世平1孟懷旺2張克英1*

(1．四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所,動物抗病營養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，雅安625014；2.重慶優(yōu)寶生物技術(shù)股份有限公司，重慶400711)

本試驗(yàn)旨在研究復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)及沙門氏菌感染的影響。將600只50周齡健康蛋雞按產(chǎn)蛋率無差異原則隨機(jī)分為4個(gè)組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，微生態(tài)制劑組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑，復(fù)合酸化劑組隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑，微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑并隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑。飼養(yǎng)試驗(yàn)期為16周，然后從對照組選擇60只雞，按照上述4個(gè)處理分為4個(gè)組，以1.3×108CFU沙門氏菌進(jìn)行攻毒，攻毒試驗(yàn)期為13 d。結(jié)果表明：復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、血液血紅蛋白含量、生殖器官超氧化物歧化酶活性和總抗氧化能力無顯著影響(P>0.05)。復(fù)合酸化劑、微生態(tài)制劑及兩者聯(lián)用均能顯著降低蛋雞臟蛋率(P<0.05)。微生態(tài)制劑組蛋雞血液白細(xì)胞數(shù)顯著低于對照組(P<0.05)，免疫球蛋白G含量較對照組有提高的趨勢(P=0.061)。復(fù)合酸化劑組和微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組蛋雞輸卵管峽部丙二醛含量顯著低于對照組(P<0.05)。與對照組相比，復(fù)合酸化劑組沙門氏菌攻毒第7天和第14天蛋雞輸卵管沙門氏菌陽性率顯著降低(P<0.05)，但微生態(tài)制劑組和微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組的沙門氏菌陽性率沒有顯著變化(P>0.05)。綜上，本試驗(yàn)所用復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑可從降低臟蛋率、提高抗氧化能力及免疫力上改善蛋雞健康，從而降低機(jī)體和雞蛋的沙門氏菌感染。

蛋雞；復(fù)合酸化劑；微生態(tài)制劑；沙門氏菌

雞蛋是廉價(jià)的動物性蛋白質(zhì)來源。我國雞蛋總產(chǎn)量和人均占有量都達(dá)到了世界第一[1]。但與此同時(shí)，雞蛋也成為人感染沙門氏菌最重要的媒介之一。自1985年至1999年，美國371例已知感染源的沙門氏菌病爆發(fā)中就有298起與雞蛋相關(guān)[2]。加之，近年來全球雞蛋沙門氏菌感染事件頻發(fā)，如何有效控制雞蛋沙門氏菌感染至關(guān)重要。

已有研究表明微生態(tài)制劑和酸化劑能夠改善雞體健康和生產(chǎn)性能。胡順珍等[3]用復(fù)合微生態(tài)制劑飼喂肉雞顯著提高了肉雞生產(chǎn)性能、盲腸乳酸桿菌數(shù)以及血漿總抗氧化能力。Machado等[4]對15日齡科寶肉雞進(jìn)行沙門氏菌攻毒，發(fā)現(xiàn)在飲水中添加有機(jī)酸可顯著降低22、42日齡肉雞盲腸、嗉囊沙門氏菌陽性率。Higgins等[5]用乳酸桿菌飼喂沙門氏菌攻毒后的蛋雞，顯著降低了沙門氏菌陽性率(24 h后對照組85%、試驗(yàn)組15%)。徐剛[6]研究發(fā)現(xiàn)0.3%酸化劑和0.2%益生菌聯(lián)合使用能顯著降低肉雞全期料重比，降低率達(dá)8.57%，且表現(xiàn)出顯著的互作效應(yīng)。因此，合理應(yīng)用酸化劑和微生態(tài)制劑有望成為改善蛋雞健康和控制雞蛋沙門氏菌感染的重要方法。

由于酸化劑和微生態(tài)制劑的組成和配伍不同，效果不盡一致。因此，本試驗(yàn)通過探討復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑以及兩者聯(lián)用對蛋雞健康以及雞蛋沙門氏菌感染的影響，旨在為其在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供更多理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用的復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑由重慶優(yōu)寶生物技術(shù)股份有限公司提供。復(fù)合酸化劑含甲酸、乳酸、丙酸、丁酸、乳酸和緩沖體系；微生態(tài)制劑含乳酸桿菌、芽孢桿菌以及酵母細(xì)胞壁多糖。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，設(shè)4個(gè)處理，分別為對照組、微生態(tài)制劑組、復(fù)合酸化劑組以及微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組。對照組為基礎(chǔ)飼糧，微生態(tài)制劑組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑，復(fù)合酸化劑組隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑，微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑并隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑。每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞，共600只蛋雞。飼養(yǎng)試驗(yàn)期為16周，然后再進(jìn)行為期13 d的沙門氏菌攻毒試驗(yàn)，試雞為對照組蛋雞。

1.3基礎(chǔ)飼糧

試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型，參照我國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 33—2004中蛋雞營養(yǎng)成分推薦值配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，飼糧為粉料。

1.4試驗(yàn)動物及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選取600只50周齡健康羅曼粉殼蛋雞，采用3層籠養(yǎng)，每籠3只雞，連續(xù)5籠為1個(gè)重復(fù)。以產(chǎn)蛋率為基礎(chǔ)進(jìn)行隨機(jī)分配。光照16 h，自由飲水和采食。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)復(fù)合多維為每千克飼糧提供Multi-vitamin provided the following per kilogram of the diet:VA 8 000 IU，VD31 600 IU，VE 5 IU，VB10.8 mg，VB22.5 mg，VB61.5 mg，VB120.004 mg，D-泛酸D-pantothenic acid 2.2 mg，葉酸 folic acid 0.25 mg，煙酸 nicotinic acid 20 mg，生物素 biotin 0.1 mg。

2)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼糧提供Mineral premix provided the following per kilogram of the diet:Fe (FeSO4·7H2O) 60 mg，Cu (CuSO4·5H2O) 8 mg，Mn (MnSO4·H2O) 60 mg，Zn (ZnSO4·7H2O) 80 mg，Se (Na2SeO3) 0.3 mg，I (KI) 0.35 mg。

3)計(jì)算值Calculated values。

1.5測定指標(biāo)

1.5.1生產(chǎn)性能

產(chǎn)蛋率：每日以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋枚數(shù)、破蛋數(shù)、臟蛋數(shù)，并準(zhǔn)確稱重，計(jì)算產(chǎn)蛋率、入舍雞產(chǎn)蛋率、破蛋率、臟蛋率和平均蛋重。

采食量和料蛋比：每周記錄飼糧消耗情況，計(jì)算每個(gè)重復(fù)的平均日采食量和料蛋比。

死亡率：每天以重復(fù)為單位記錄死亡只數(shù)，計(jì)算死亡率。

死亡率=死亡雞只數(shù)/試驗(yàn)初始時(shí)的總雞只數(shù)。

1.5.2血液生化指標(biāo)

在試驗(yàn)第12周時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑選1只健康蛋雞從翅靜脈抽取血液，測定血常規(guī)指標(biāo)(白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞數(shù)等)及免疫球蛋白G(IgG)含量。血常規(guī)指標(biāo)送至雅安第四軍醫(yī)院測定；IgG含量采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測定，試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.5.3生殖器官抗氧化指標(biāo)

雞只采血后屠宰，采集雞輸卵管膨大部、狹部、卵巢，保存于-20 ℃冰箱，備測抗氧化指標(biāo)，包括總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性，分別采用還原法、硫代巴比妥酸(TBA)法、黃嘌呤氧化酶法測定，試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.5.4蛋雞及雞蛋沙門氏菌陽性率

1.5.4.1試驗(yàn)第12周的陽性率

每組隨機(jī)選擇4只雞進(jìn)行解剖采樣，取5個(gè)器官(肝臟、脾臟、盲腸、輸卵管、膽囊)；每組隨機(jī)取雞蛋7枚。樣品送四川大學(xué)動物疾病防控與食品安全四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢測沙門氏菌，方法包括傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)、緩沖蛋白胨水-大豆肉湯(BPW-RVS)增菌PCR和優(yōu)化選擇性增菌液(SEM)PCR等4種檢測方法。

1.5.4.2沙門氏菌攻毒后的輸卵管及雞蛋沙門氏菌陽性率

在飼養(yǎng)試驗(yàn)16周結(jié)束后，從對照組中選擇56只健康蛋雞，分為4個(gè)處理(每個(gè)處理14只雞)，分別為：對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，微生態(tài)制劑組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑，復(fù)合酸化劑組隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑，微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組在基礎(chǔ)飼糧中添加300 g/t微生態(tài)制劑并隔日在飲水中添加0.1%復(fù)合酸化劑；另選5只雞在試驗(yàn)開始時(shí)采樣作為空白對照。雞只采用單籠飼養(yǎng)。在試驗(yàn)開始前3 d，每天水服慶大霉素以清除原有沙門氏菌的干擾，然后口腔接種腸炎沙門氏菌1 mL，含量為1.3×108CFU。腸炎沙門氏菌由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院黃勇教授惠贈，分離自當(dāng)?shù)氐半u場糞便。

于試驗(yàn)第7天和第14天早上每個(gè)處理屠宰7只雞，取輸卵管檢測沙門氏菌陽性率，同時(shí)每個(gè)處理收集第10～13天雞蛋各7枚，檢測沙門氏菌陽性率。檢測由四川大學(xué)動物疫病防控與食品安全四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成，方法為傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法。

1.6統(tǒng)計(jì)分析

結(jié)果采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，Duncan氏法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。P<0.05作為差異顯著性評判標(biāo)準(zhǔn)，0.05≤P<0.10表示具有差異顯著趨勢。沙門氏菌陽性率采用SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。

2　結(jié)果與分析

2.1復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

從表2可見，各組蛋雞的生產(chǎn)性能均無顯著差異(P>0.05)，但平均日采食量的差異趨于顯著(P=0.089)?？傮w上，以微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組蛋雞的生產(chǎn)性能較好。

從表3可見，復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑的添加對平均蛋重和破蛋率無顯著影響(P>0.05)，但顯著影響臟蛋率(P<0.05)，3個(gè)試驗(yàn)組的臟蛋率均顯著低于對照組(P<0.05)。

2.2復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

從表4可見，不同試驗(yàn)組的蛋雞血液白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞數(shù)和IgG含量差異不顯著(P>0.05)，但與對照組相比，微生態(tài)制劑組的蛋雞白細(xì)胞數(shù)顯著降低(P<0.05)，IgG含量有提高的趨勢(P=0.061)。

2.3復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生殖器官抗氧化指標(biāo)的影響

從表5可見，不同試驗(yàn)組對蛋雞輸卵管膨大部、峽部和卵巢的SOD活性和T-AOC均無顯著影響(P>0.05)；在輸卵管膨大部，微生態(tài)制劑組MDA含量顯著高于其他3組(P<0.05)；而在輸卵管峽部，復(fù)合酸化劑組、微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組MDA含量均顯著低于對照組(P<0.05)；試驗(yàn)各處理對卵巢MDA含量影響趨于顯著(P=0.096)。

2.4復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞和雞蛋沙門氏菌感染的影響

從表6可見，在試驗(yàn)的第12周，僅有對照組的1只雞的盲腸用BPW-RVS增菌PCR檢測出了沙門氏菌，其余均未檢測出沙門氏菌。

表2　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same column, values with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

表3　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對平均蛋重、臟蛋率和破蛋率的影響

表4　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

從表7可見，在沙門氏菌攻毒后第7天，與對照組相比，3個(gè)試驗(yàn)組均降低了蛋雞輸卵管沙門氏菌陽性率，其中復(fù)合酸化劑組達(dá)到顯著水平(P<0.05)；在攻毒后第14天，僅復(fù)合酸化劑組蛋雞輸卵管沙門氏菌陽性率極顯著降低(P<0.01)；各組間雞蛋樣品中沙門氏菌陽性率差異不顯著(P>0.05)，其中微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組未檢出沙門氏菌。

表5　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生殖器官抗氧化指標(biāo)的影響

表6　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞和雞蛋沙門氏菌陽性率的影響

續(xù)表6項(xiàng)目Items雞只編號No.ofhens接種器官Inoculationorgans檢測結(jié)果Detectionresults環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)LAMP傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法Traditionalseparationculturemethod緩沖蛋白胨水-大豆肉湯增菌PCRBPW-RVSenrichmentPCR優(yōu)化選擇性增菌液PCRSEMPCR微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組Probioticsandcompoundacidifiercombinationgroup13～16同上所有部位----雞蛋樣品Eggsamples蛋清蛋黃混合液----

“-”代表沙門氏菌陰性，“+”代表沙門氏菌陽性。

‘-’ representedSalmonellanegative, and ‘+’ representedSalmonellapositive.

表7　復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對沙門氏菌攻毒后蛋雞輸卵管和雞蛋沙門氏菌陽性率的影響

3　討　論

3.1復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑主要是通過改善機(jī)體健康以及抑制有害菌的生長而促進(jìn)生產(chǎn)性能的改善。Yesilbag等[7]用添加0.5%、1.0%和1.5%有機(jī)酸復(fù)合制劑的飼糧飼喂20～37周齡羅曼蛋雞，結(jié)果顯示有機(jī)酸復(fù)合制劑對體增重和采食量無影響，部分周齡產(chǎn)蛋率顯著上升，本試驗(yàn)與其研究結(jié)果相似。臟蛋率的高低反映蛋雞腸道健康程度。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)復(fù)合酸化劑能夠顯著降低臟蛋率，可能是由于其降低了腸道pH，提高了酶活，抑制了諸如大腸桿菌、沙門氏菌之類有害菌的生長，改變了消化道微生物結(jié)構(gòu)[8]，從而改善了腸道健康。本試驗(yàn)條件下，微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能無顯著影響，顯著降低了臟蛋率，原因可能是嗜酸性乳酸桿菌能夠通過激活促細(xì)胞分裂蛋白激酶，從腸上皮細(xì)胞抗炎癥和細(xì)胞凋亡效應(yīng)2個(gè)方面有效地保護(hù)腸上皮[10-11]，從而提高蛋雞腸道健康，減少臟蛋率。

復(fù)合酸化劑會使機(jī)體腸道pH降低，抑制有害菌的生長，幫助微生態(tài)制劑中的益生菌建立優(yōu)勢菌群。微生態(tài)制劑由多種耐酸菌組成，適當(dāng)?shù)乃嵝杂兄谄湓鲋?，且其產(chǎn)酸作用也有助于穩(wěn)定和增加復(fù)合酸化劑在消化道內(nèi)的酸化效果[6,12]。由于受到雞品種、周齡、酸化劑和益生菌的配伍以及酸化劑與益生菌組合的不同，復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑的使用效果也不盡一致。孫冰鋒[12]用不同比例組合的酸化劑與微生態(tài)制劑飼喂1日齡艾維茵肉雞，結(jié)果顯示0.1%酸化劑與0.4%益生菌聯(lián)用效果最好，顯著提高了體增重和采食量，顯著降低了料重比和死亡率。本試驗(yàn)中，微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組雖然對產(chǎn)蛋率的提高程度未達(dá)到顯著水平，但高于其他各組，且平均日采食量也高于其他各組，而且臟蛋率較低，這表明微生態(tài)制劑和復(fù)合酸化劑聯(lián)用對蛋雞生產(chǎn)性能提高效果更好。

3.2復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

血細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其數(shù)量的變化情況可以在一定程度上反映機(jī)體的免疫狀態(tài)[13]。IgG抗體是血液中非常重要的抗體，它能夠中和病毒，且與抗原結(jié)合使其更利于吞噬細(xì)胞。IgG含量多少很大程度上反映了機(jī)體免疫能力的大小。靳二輝等[13]用以芽孢桿菌為主的復(fù)合益生菌飼喂1～42日齡愛拔益加肉雞，發(fā)現(xiàn)400 mg/kg復(fù)合益生菌能顯著降低21、42日齡肉雞血液紅細(xì)胞數(shù)以及42日齡白細(xì)胞數(shù)，但對其他血細(xì)胞數(shù)沒有影響；同時(shí)，該研究認(rèn)為適當(dāng)補(bǔ)充芽孢桿菌可降低白細(xì)胞數(shù)，抑制炎癥反應(yīng)。趙德建[14]用中草藥制劑飼喂鼠傷寒沙門氏菌攻毒肉雞，發(fā)現(xiàn)對照組肉雞紅細(xì)胞數(shù)顯著高于試驗(yàn)組，并認(rèn)為沙門氏菌會攻擊紅細(xì)胞，導(dǎo)致紅細(xì)胞數(shù)的減少，使用添加劑后，可以減少有害菌的危害，使紅細(xì)胞數(shù)維持在較正常水平。本試驗(yàn)微生態(tài)制劑組的血液白細(xì)胞數(shù)顯著低于對照組，表明微生態(tài)制劑可以抑制炎癥反應(yīng)；同時(shí)微生態(tài)制劑組的血液IgG含量有高于對照組的趨勢，說明了微生態(tài)制劑可以提高蛋雞免疫力。

3.3復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞生殖器官抗氧化指標(biāo)的影響

抗氧化能力的大小與機(jī)體的健康程度有著密切的關(guān)系。脂質(zhì)過氧化物MDA含量、T-AOC以及SOD活性是反映機(jī)體抗氧化能力及健康程度的重要指標(biāo)。陳家祥等[15]用地衣芽孢桿菌飼喂1～28日齡的麻羽肉雞，發(fā)現(xiàn)在28日齡時(shí)50 mg/kg地衣芽孢桿菌能顯著提高肉雞血清SOD和谷胱甘肽過氧化物酶活性，顯著降低血清MDA含量，但隨著添加量的提升，其改善效果反而沒有那么明顯。本試驗(yàn)中，微生態(tài)制劑的添加顯著提高了輸卵管膨大部MDA含量，可能與微生態(tài)制劑的添加量有一定關(guān)系，具體原因需要更深層次的研究。本試驗(yàn)進(jìn)行時(shí)正處于夏天，氣溫偏高。在熱應(yīng)激條件下，脂質(zhì)過氧化容易發(fā)生，機(jī)體的T-AOC會顯著降低[16]，酸化劑可以通過調(diào)節(jié)酸堿平衡，緩解熱應(yīng)激[17]。本試驗(yàn)中微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組均能夠顯著降低輸卵管峽部MDA含量，表明可緩解因過熱造成的蛋雞脂質(zhì)過氧化。

3.4復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對蛋雞和雞蛋沙門氏菌感染的影響

沙門氏菌感染蛋雞，會導(dǎo)致雞白痢、傷寒、副傷寒的發(fā)生，輕則引起生產(chǎn)性能下降，重則死亡。當(dāng)沙門氏菌進(jìn)入蛋雞體內(nèi)，其會攻擊腸道上皮細(xì)胞并觸發(fā)和滲透進(jìn)免疫細(xì)胞中，主要是巨噬細(xì)胞，而沙門氏菌具有在免疫細(xì)胞中生存和復(fù)制的能力，隨巨噬細(xì)胞一起在宿主體內(nèi)傳播，從而到達(dá)生殖器官，可能隨著雞蛋的形成過程相應(yīng)進(jìn)入雞蛋的相應(yīng)部位[2]。所以，蛋雞生殖系統(tǒng)附植沙門氏菌的陽性率很大程度上可以決定雞蛋的沙門氏菌陽性率。用酸化劑和微生態(tài)制劑抑制有害菌的生長前人有過很多報(bào)道，由于各個(gè)復(fù)合制劑的組成與配伍不同，其對有害菌的抑制效果也參差不齊，但大部分都有改善效果[5，18-19]。

本試驗(yàn)通過飼喂微生態(tài)制劑、復(fù)合酸化劑或兩者聯(lián)用后12周，經(jīng)過4種方法檢測蛋雞生殖道和雞蛋，僅其中1種方法在對照組中的1個(gè)樣品檢出沙門氏菌，表明本試驗(yàn)雞群基本上為沙門氏菌陰性雞群。通過人工接種沙門氏菌攻毒發(fā)現(xiàn)，攻毒后第7天復(fù)合酸化劑組的輸卵管沙門氏菌陽性率顯著低于對照組，同時(shí)在第14天極顯著低于對照組，說明復(fù)合酸化劑對沙門氏菌有顯著的抑制作用；但與微生態(tài)劑聯(lián)用使用沒有產(chǎn)生顯著的效果，具體原因尚有待進(jìn)一步研究。

雞蛋沙門氏菌陽性率方面，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上各組雞蛋沙門氏菌陽性率差異不顯著。參照前人的研究，人工接種沙門氏菌雞蛋的陽性率不會很高，一般就在10%左右[20-23]。本試驗(yàn)雞蛋的陽性率與前人的研究相一致，且相較于其他3個(gè)組14.3%的陽性率，微生態(tài)制劑與復(fù)合酸化劑聯(lián)用組的陽性率為0，降低效果十分明顯。家禽腸道任何部位的感染都可能引起沙門氏菌系統(tǒng)性地傳播，繼而通過生殖系統(tǒng)感染雞蛋[2]。而復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑的聯(lián)用更有利于全腸道的沙門氏菌凈化，從而減少雞蛋沙門氏菌陽性率。

4　結(jié)　論

① 復(fù)合酸化劑能顯著降低雞蛋臟蛋率，降低輸卵管MDA的產(chǎn)生，緩解脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，且能顯著抑制輸卵管沙門氏菌的生長。

② 微生態(tài)制劑能降低雞蛋臟蛋率，有提高血液IgG含量的趨勢，能顯著降低血液白細(xì)胞數(shù)，抑制炎癥反應(yīng)。

③ 復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑聯(lián)用可顯著降低攻毒后雞蛋沙門氏菌陽性率。

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(責(zé)任編輯田艷明)

, professor, E-mail: zkeying@sicau.edu.cn

Effects of Compound Acidifier and Probiotics on Performance,Blood Biochemical Indices, Antioxidant Indices andSalmonellaInfection of Laying Hens

ZHOU Ling1DING Xuemei1LUO Yuheng1WANG Jianping1BAI Shiping1MENG Huaiwang2ZHANG Keying1*

(1. Animal Nutrition Institute, Key Laboratory for Animal Disease-Resistance Nutrition of China Ministry of Education, Sichuan Agriculture University, Ya’an 625014, China; 2. Chongqing Unibio Biotechnology Co., Ltd.,Chongqing 400711, China)

This study evaluated the effects of compound acidifier and probiotics on performance, blood biochemical indices, antioxidant indices andSalmonellainfection of laying hens. A total of 600 50-week-old healthy laying hens with similar laying rate were randomly assigned to 4 groups that included 10 pens of 15 birds each. The hens in control group were fed a basal diet, and in the other 3 experimental groups were fed basal diets supplemented with 300 g/t probiotics, 0.1% compound acidifier in the drinking water every other day, and 300 g/t probiotics+0.1% compound acidifier in the drinking water every other day. After the feeding of 16 weeks, a total of 60 hens from control group were selected to 4 treatments as the same above for a 13-day longSalmonellachallenge (1.3×108CFU) trial. The results showed as follows: no significant effects were observed on performance, hemoglobin content, the superoxide dismutase activity and total antioxidant capacity of reproductive organ by compound acidifier and probiotics (P>0.05). Dirty egg percent was significantly decreased by compound acidifier, probiotics and combination of both (P<0.05). Compared with the control group, white blood cell count in probiotics group was significantly decreased (P<0.05), and the immunoglobulin G content in probiotics group tended to be increased (P=0.061). The malondialdehyde (MDA) content in oviduct isthmus of hens in compound acidifier group and combination group was significantly decreased compared with the control group (P<0.05). TheSalmonellapositive ratio in oviduct of hens in compound acidifier group was significantly decreased at the 7thand 14thday (P<0.05), but that in probiotics group and combination group was not significantly different compared with control group (P>0.05). In conclusion, compound acidifier and probiotics can improve health status of laying hens through decreasing the dirty egg percent and increasing antioxidant capacity and immunity of them, thus reducing theSalmonellainfection of body and eggs.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(8)：2571-2580]

laying hens; compound acidifier; probiotics;Salmonella

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.030

2016-02-06

科技部及四川省科技廳科技支撐項(xiàng)目(2014BAD13B04，2014NZ0002)

周嶺(1991—)，男，四川宜賓人，農(nóng)業(yè)推廣碩士，養(yǎng)殖專業(yè)。E-mail: 421093408@qq.com

張克英，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: zkeying@sicau.edu.cn

S816.7

A

1006-267X(2016)08-2571-10