4種誘食劑對雜交鱧生長和血清生化指標的影響

鄭　晶　蔣　余　吳曉清　楊林英　陳效儒　林仕梅*

(1.西南大學動物科技學院，淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點實驗室，水產(chǎn)科學重慶市市級重點實驗室，重慶400715；2.重慶市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，重慶401147；3.通威股份有限公司，成都610041)

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4種誘食劑對雜交鱧生長和血清生化指標的影響

鄭晶1蔣余1吳曉清2楊林英1陳效儒3林仕梅1*

(1.西南大學動物科技學院，淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點實驗室，水產(chǎn)科學重慶市市級重點實驗室，重慶400715；2.重慶市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，重慶401147；3.通威股份有限公司，成都610041)

為評價魚溶漿、酵母膏、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)和復合誘食劑對雜交鱧的誘食效果，配制了1種基礎飼料(對照組)，以及在基礎飼料中分別添加2.0%魚溶漿、2.0%酵母膏、0.1%DMPT和0.1%復合誘食劑的4種試驗飼料，飼喂初始均重(17.30±0.03) g的雜交鱧8周。5種飼料等氮等能(粗蛋白質(zhì)42%，總能18 MJ/kg)。結(jié)果顯示：添加誘食劑組雜交鱧的終末均重(FABW)、增重率(WGR)和特定生長率(SGR)顯著高于對照組(P<0.05)，而酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的FABW、WGR、SGR和攝食率(FI)顯著高于魚溶漿組和DMPT組(P<0.05)。各組蛋白質(zhì)效率(PER)和飼料系數(shù)(FCR)無顯著差異(P>0.05)。同對照組相比，魚溶漿組、酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的肝體比(HSI)顯著降低(P<0.05)，脾體比(SSI)顯著升高(P<0.05)。而復合誘食劑組雜交鱧的臟體比(VSI)顯著低于其他各組(P<0.05)。與對照組相比，魚溶漿組、酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的血清膽固醇(CHO)、丙二醛(MDA)含量顯著降低(P<0.05)，血清總蛋白(TP)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性顯著升高(P<0.05)。各組血清甘油三酯(TG)、球蛋白(GLOB)含量及堿性磷酸酶(ALP)活性無顯著差異(P>0.05)。由此可見，飼料中添加誘食劑可以提高雜交鱧的攝食量，降低血脂水平，同時提高魚體免疫力和抗氧化能力，進而促進其生長，以酵母膏和復合誘食劑的效果較佳。

誘食劑；雜交鱧；生長；抗氧化能力；血清生化指標

雜交鱧(Channaspp.)因其生長速度快、經(jīng)濟價值高而成為世界上快速發(fā)展的重要淡水水產(chǎn)養(yǎng)殖品種[1]。近年來，我國雜交鱧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，年產(chǎn)量在20萬t左右。由于雜交鱧缺乏可靠的營養(yǎng)與飼料參數(shù)，加之魚粉資源短缺，養(yǎng)殖效益下滑，致使植物蛋白質(zhì)的大量使用，導致雜交鱧飼料適口性差，在養(yǎng)殖實踐中出現(xiàn)吐料現(xiàn)象。飼料中植物蛋白質(zhì)的大量使用會降低飼料的適口性，進而影響魚類的攝食量，從而影響其正常的生長[2]。如何提高水產(chǎn)動物對飼料的攝食量是動物營養(yǎng)學家長期面臨的難題，也是提高動物對植物蛋白質(zhì)利用的一個重要途徑[2]。目前，飼料生產(chǎn)企業(yè)通常采用添加外源性誘食劑來提高水產(chǎn)動物的攝食量。研究證實，飼料中添加誘食劑可以改善飼料的適口性[2]。氨基酸[2]、甜菜堿[2]、核苷酸[2]、魚溶漿[3]、酵母膏[4]、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)[5]和?；撬醄6]等通常被認為是行之有效的魚蝦類誘食劑。但也有研究認為，單一誘食劑的誘食效果不如復合誘食劑[7-8]。有關(guān)改善雜交鱧飼料適口性的研究較少[9]，而現(xiàn)實生產(chǎn)中又急需解決雜交鱧攝食量的問題。因此，本試驗在對單一誘食劑進行迷宮誘食篩選試驗的基礎上，進一步對4種作用效果較好的誘食劑進行雜交鱧的生長試驗，以期為雜交鱧的養(yǎng)殖生產(chǎn)和飼料配制提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗飼料

以魚粉、豆粕、棉籽蛋白和菜籽粕作為蛋白質(zhì)源配制基礎飼料(表1)，然后在基礎飼料中分別添加2.0%魚溶漿、2.0%酵母膏、0.1%DMPT和0.1%復合誘食劑配制成4種試驗飼料，其中復合誘食劑由酵母核苷酸、牛磺酸、甜菜堿和氨基酸按3∶1∶2∶1的質(zhì)量比配合而成。5種飼料等氮等能(粗蛋白質(zhì)42%，總能18 MJ/kg)。所有飼料原料粉碎后過245 μm篩，采取逐級擴大法混合均勻，用洋工TSE65S型雙螺桿濕法膨化機(北京現(xiàn)代洋工機械科技發(fā)展有限公司)制成粒徑為3.0 mm的膨化顆粒飼料，自然干燥，4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2試驗動物與飼養(yǎng)管理

試驗用雜交鱧(雜交鱧×斑鱧)購自重慶永川區(qū)魚種場，馴食適應環(huán)境10 d后，取健康、規(guī)格整齊、初始均重為(17.30±0.03) g的雜交鱧450尾，隨機分成5個組，每個組設3個重復，每個重復30尾魚。對照組飼喂基礎飼料，其他4組隨機飼喂1種添加了誘食劑的試驗飼料。雜交鱧在室內(nèi)淡水循環(huán)水族缸(有效容積為300 L)中飼養(yǎng)8周，日投餌量為魚體重的3%～5%，每天08:30、13:30和18:30各投喂1次。試驗期間水溫為26～29 ℃，溶解氧濃度7～8 mg/L，氨氮濃度<0.48 mg/L，亞硝酸鹽氮濃度<0.07 mg/L，pH為7.2～7.6。

1.3樣品采集與指標測定

飼養(yǎng)試驗結(jié)束，禁食24 h后以重復為單位稱重計數(shù)。每個重復隨機取4尾魚，用MS-222麻醉后，稱重后分離出內(nèi)臟、肝臟、脾臟，并分別稱重；每個重復另隨機取4尾魚于尾靜脈取血，于4 ℃條件下3 000×g離心10 min，收集血清，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

雜交鱧的攝食、生長和形態(tài)學指標參照以下公式計算：

增重率(WGR,%)=100×(W末-W始)/W始；

特定生長率(SGR,%/d)=100×(lnW末-lnW始)/t；

攝食率(FI,g/d)=Wf×2/[(N末+N始)×t]；

蛋白質(zhì)效率(PER,%)=(W末-W始)/(Wf×Wp)；

飼料系數(shù)(FCR)=Wf/(W末-W始)；

成活率(SR,%)=100×N末/N始;

臟體比(VSI,%)=100×W內(nèi)/W；

肝體比(HSI,%)=100×W肝/W；

脾體比(SSI,%)=100×W脾/W。

式中：t為飼養(yǎng)天數(shù)(d)；N始為初始尾數(shù)(尾)；N末為終末尾數(shù)(尾)；Wp為飼料的粗蛋白質(zhì)含量(%)；Wf為總攝食飼料的干重(g)；W末為終末均重(g)；W始為初始均重(g)；W內(nèi)為內(nèi)臟重(g)；W肝為肝臟重(g)；W脾為脾臟重(g)；W為體重(g)。

表1　基礎飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎)

1)維生素預混料為每千克飼料提供Vitamin premix provided the following per kg of the diet:VA 18 mg,VD35 mg,VE 150 mg,VC(35%)500 mg,VB116 mg,VB620 mg,VB126 mg,VK318 mg,核黃素 riboflavin 40 mg,肌醇 inositol 320 mg,泛酸鈣calcium pantothenate 60 mg,煙酰胺niacinamide 80 mg,葉酸 folic acid 5 mg,生物素 biotin 2 mg,乙氧基喹啉 ethoxyquin 100 mg。

2)礦物質(zhì)預混料為每千克飼料提供Mineral premix provided the following per kg of the diet:Na 30 mg,K 50 mg,Mg 100 mg,Cu 4 mg,Fe 25 mg,Zn 35 mg,Mn 12 mg,I 1.6 mg,Se 0.2 mg,Co 0.8 mg.

采用全自動生化分析儀(日立7100)測定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、堿性磷酸酶(ALP)活性以及膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)、球蛋白(GLOB)、丙二醛(MDA)含量。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

采用SPSS 23.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，若差異顯著(P<0.05)，再進行Tukey’s多重比較。除成活率外，數(shù)據(jù)均以平均值±標準誤表示。

2　結(jié)　果

2.1雜交鱧的攝食和生長性能指標

由表2可知，飼料中添加誘食劑的雜交鱧的終末均重、WGR、SGR顯著高于對照組(P<0.05)，

而酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的終末均重、WGR、SGR和FI顯著高于魚溶漿組和DMPT組(P<0.05)。各組PER和FCR無顯著差異(P>0.05)。試驗期間，各組雜交鱧的成活率均為100%。

2.2雜交鱧的形態(tài)學指標

由表3可知，與對照組相比，魚溶漿組、酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的HSI顯著降低(P<0.05)，SSI顯著升高(P<0.05)，而DMPT組雜交鱧的VSI和SSI與對照組無顯著差異(P>0.05)。復合誘食劑組雜交鱧的VSI最低，顯著低于其他各組(P<0.05)。

表2　雜交鱧的攝食和生長性能指標

同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

表3　雜交鱧的形態(tài)學指標

2.3雜交鱧的血清生化指標

由表4可知，與對照組相比，魚溶漿組、酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的血清CHO含量顯著降低(P<0.05)，血清TP含量顯著升高(P<0.05)。魚溶漿組、酵母膏組和復合誘食劑組雜交鱧的血清MDA含量顯著低于對照組(P<0.05)，而血清SOD、CAT活性則顯著高于對照組(P<0.05)。各組雜交鱧血清TG、GLOB含量和ALP活性無顯著差異(P>0.05)。

3　討　論

本試驗結(jié)果表明，飼料中添加外源性誘食劑能夠促進雜交鱧的生長，這與在其他魚[8-10]、蝦[11-12]上的研究結(jié)果一致。從本試驗結(jié)果來看，酵母膏和復合誘食劑的作用效果最佳。已有的研究也證明，酵母膏對異育銀鯽[4]、凡納濱對蝦[12]有較好的誘食效果。不同的動物對不同的促攝食物質(zhì)的反應敏感程度不同。同樣是甜菜堿，被證明對多佛鰨魚[13]有顯著的誘食效果，而牙鲆[6]和大口黑鱸[14]對其不敏感。同一濃度的不同氨基酸，對黃鱔的促攝引誘作用不同[15]。甚至同一類魚對同樣來源的誘食物質(zhì)反應有相同性也有差異性，如紅大馬哈魚(Oncorhynchusnerka)對脯氨酸的味覺、電生理反應都很強烈，但對丙氨酸的反應強度就有所不同[16]。另外，紅大馬哈魚還對苯丙氨酸、亮氨酸和甜菜堿反應強烈，而其他幾種魚卻沒有反應[16]。此外，在研究中發(fā)現(xiàn)，魚蝦類對于大多數(shù)動物提取物的反應是基于多種小分子物質(zhì)的復合反應，而很少只對其中的1種或2種物質(zhì)敏感[7]。這可能是目前生產(chǎn)中使用單一誘食劑的效果不及復合誘食劑的原因，因為單一誘食劑往往只對魚類形成單一的刺激，而未形成強烈的綜合誘食刺激[8]。本試驗結(jié)果也支持這一說法。在牙鲆[8]、條紋鱸[10]和黃鱔[15]上同樣發(fā)現(xiàn)，復合誘食劑各組分可以協(xié)同增效，彌補單一誘食劑成分的缺陷。研究指出，氨基酸可以增強肌苷-5′-單磷酸鹽(IMP)對黃獅魚稚魚的促攝食作用[17]。這些研究結(jié)果表明，不同魚類具有不同的攝食習性，對誘食劑種類和誘食活性成分含量的需求不同，甚至同種魚也有可能對不同的化合物感興趣。

采食量通常是評價飼料適口性好壞的一個有效指標。通過長期攝食生長試驗來評定促攝食物質(zhì)的效果是一種更為有效的研究方法。本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加酵母膏和復合誘食劑能夠顯著促進雜交鱧的攝食，且不影響飼料效率，并能促進生長，這表明促進攝食是促進雜交鱧生長的有效途徑。在牙鲆[6]、條紋鱸[10]、黃鱔[15]和異育銀鯽[18]上同樣證實，飼料中添加誘食劑可以提高魚類的攝食量，進而促進其生長。魚類攝食行為及其對飼料(包括天然餌料)的嗜好性是一個相當復雜的問題，它有著各種內(nèi)、外因素的相互深刻的關(guān)聯(lián)，因此，要探明魚類的攝食機制并非易事。

本試驗結(jié)果表明，飼料中添加外源性誘食劑能降低雜交鱧血清CHO含量，其中以酵母膏和復合誘食劑的作用效果最為顯著。而在凡納濱對蝦[11]的研究中發(fā)現(xiàn)，誘食劑可以增加血清CHO和TG含量，且肝臟機能良好。這些研究結(jié)果的差異可能與動物的種類或試驗目的不同有關(guān)。通常底層魚類在體腔或內(nèi)臟組織中儲存脂肪，而上層魚類把脂肪儲存在肌肉中[19]。本試驗中除DMPT外，其余誘食劑均可顯著降低雜交鱧的HSI，且復合誘食劑還可以顯著降低雜交鱧的VSI。這表明誘食劑可以改善脂肪在雜交鱧內(nèi)臟組織中的附著和沉積，有利于提高魚體機能，與以前在雜交鱧[9]上的研究結(jié)果一致。

血液中的許多生化指標可反映動物機體的生理狀況[20]。血清TP含量的高低能反映動物的免疫應激狀態(tài)，脅迫和疾病等應激因素均可以導致魚類血清TP含量降低[21-22]。脾臟在機體的免疫中也發(fā)揮重要作用，通常SSI可直觀地反映魚體的免疫機能[23]。本試驗結(jié)果表明，飼料中添加誘食劑能夠顯著提高雜交鱧血清TP含量和SSI，酵母膏的作用效果最為顯著，表明外源性誘食劑可以增強雜交鱧機體的免疫能力。這種免疫能力的提高可能與酵母膏中含有的β-葡聚糖和甘露寡糖有關(guān)。研究證實，在飼料中添加β-葡聚糖和甘露寡糖可以增強水產(chǎn)動物的抗病力和免疫力[24-25]。

血清中酶絕大部分來自動物的各種組織器官，其活性高低能夠反映機體代謝和物質(zhì)轉(zhuǎn)化的狀況[26]。SOD能清除生物氧化過程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基，在清除超氧陰離子自由基的同時生成的過氧化氫(H2O2)又可被CAT清除生成水(H2O)和氧氣(O2)[27]。MDA是脂肪酸過氧化產(chǎn)物之一，其含量的多寡可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度[28]。本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加外源性誘食劑能提高雜交鱧血清中SOD和CAT活性，降低MDA含量，表明誘食劑可以顯著改善機體的抗氧化能力。有關(guān)誘食劑對魚體抗氧化能力影響方面的研究資料較為匱乏，其作用機制還有待深入研究。

4　結(jié)　論

飼料中添加誘食劑可以提高雜交鱧的攝食量，降低血脂水平，同時提高機體的免疫力和抗氧化能力，進而促進其生長，以酵母膏和復合誘食劑的效果較佳。

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(責任編輯菅景穎)

, associate professor, E-mail: linsm198@163.com

Effects of Four Feeding Attractants on Growth and Serum Biochemical Indices of Hybrid Snakehead

ZHENG Jing1JIANG Yu1WU Xiaoqing2YANG Linying1CHEN Xiaoru3LIN Shimei1*

(1. Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development, Ministry of Education, Key Laboratory of Aquatic Science of Chongqing, College of Animal Science and Technology, Southwest University,Chongqing 400715， China; 2. Fisheries Technology Extension Station of Chongqing,Chongqing 401147, China; 3. Tongwei Co., Ltd., Chengdu 610041, China)

To evaluate the attractant effect of fish soluble, yeast extract, dimethyl-β-propiothetin (DMPT) and compound feeding attractant on hybrid snakehead, five isonitrogenous and isoenergetic diets (crude protein 42%, gross energy 18 MJ/kg) were formulated based on a basal diet (control group) by adding 2.0% fish soluble, 2.0% yeast extract, 0.1% DMPT and 0.1% compound feeding attractant, respectively, to feed the fish with the initial average body weight of (17.30±0.03) g for eight weeks. The results showed that fish fed diets with attractants presented significantly higher final average body weight (FABW), weight gain rate (WGR) and specific growth rate (SGR) than those of the control group (P<0.05). Fish of yeast extract and compound feeding attractant groups showed higher FABW, WGR, SGR and feed intake (FI) than those of fish soluble and DMPT groups (P<0.05). No significant differences in protein efficiency ratio (PER) and feed conversion ratio (FCR) were observed among all groups (P>0.05). Compared with the control group, fish of fish soluble, yeast extract and compound feeding attractant groups exhibited significantly lower hepatosomatic index (HSI) and significantly higher spleensomatic index (SSI) (P<0.05). Viscerasomatic (VSI) of compound feeding attractant group was significantly lower than that of other groups (P<0.05). No significant differences in serum triglyceride (TG), globulin (GLOB) contents and alkaline phosphatase (ALP) activity were observed among all groups (P>0.05). The results suggest that diets with feeding attractants can improve the feed intake decrease the serum lipid level, and enhance the immunity and antioxidant ability of hybrid snakehead, thus promote the growth.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(8)：2497-2503]

feeding attractants; hybrid snakehead; growth; antioxidant ability; serum biochemical indices

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.021

2016-05-05

重慶市現(xiàn)代特色效益農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(2015-91)；重慶市特色效益水產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)集成示范項目(40808513)；通威股份產(chǎn)學研項目(2014099)

鄭晶(1995—)，女，黑龍江佳木斯人，本科生，水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)。E-mail: 2319123983@qq.com

林仕梅，副教授，碩士生導師，E-mail: linsm198@163.com

S963

A

1006-267X(2016)08-2497-07