胃癌患者血漿microRNA-155的表達(dá)及其臨床意義

王　競　楊川杰

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院消化內(nèi)科，河北　石家莊　050000)

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胃癌患者血漿microRNA-155的表達(dá)及其臨床意義

王競楊川杰1

(河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院消化內(nèi)科，河北石家莊050000)

胃癌；微小RNA；miR-155；血漿；腫瘤標(biāo)記物

早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是提高胃癌生存率的重要措施。探索經(jīng)濟(jì)有效、安全簡便的篩查方法和特異性及敏感性均較好的腫瘤標(biāo)記物對提高胃癌的檢出率具有重要意義。microRNA-155(miR-155)為癌基因B細(xì)胞整合集簇(BIC)的表達(dá)產(chǎn)物，有研究發(fā)現(xiàn)其在結(jié)直腸癌、胰腺癌、肝癌等腫瘤中表達(dá)增加，其可能參與了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。本文擬通過檢測胃癌及胃炎患者血漿miR-155水平，研究胃癌患者血漿miR-155表達(dá)與患者臨床病理學(xué)特征間的關(guān)系，初步探討miR-155在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1　材料與方法

1.1研究對象2011年1～12月在我院住院治療的胃癌及胃炎患者及期間的健康體檢者，分為胃癌組71例，男43例，女28例，平均年齡(63.30±5.62)歲；胃炎組69例，男44例，女25例，平均年齡(62.35±4.64)歲；健康對照組68例，男42例，女26例，平均年齡(62.12±3.53)歲。見表 1。所有病例納入者均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)在2008年出版的腫瘤病理學(xué)與遺傳學(xué)分類中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并由病理醫(yī)師再次應(yīng)用HE切片確診。

1.2試劑與方法Trizol試劑購自深圳晶美生物工程有限公司，逆轉(zhuǎn)錄(RT)試劑盒、qRT-PCR試劑盒、RT引物、內(nèi)參U6均購自廣州銳博公司，SYBY Green 試劑，購自康為世紀(jì)公司。確定研究對象后，用依地酸二鈉(EDTA)抗凝管收取受試者外周靜脈血約2 ml，讓血液與管壁的抗凝劑充分接觸，4℃條件下，1 600 r/min離心10 min，離心2次獲得血漿，將上層血漿分裝至無酶EP管中，置入-80℃冰箱儲存待用。實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3血漿miR-155表達(dá)量的計(jì)算在目的基因與內(nèi)參照基因擴(kuò)增效率相同的情況下，以U6為內(nèi)參照，測定循環(huán)閾值(Ct值)，計(jì)算△Ct值，△Ct=miR-155的平均Ct值-U6平均Ct值，以2-△△Ct表示miR-155的表達(dá)量水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件行方差分析。

2　結(jié)　果

2.1各組血漿miR-155表達(dá)量比較胃癌組、胃炎組及健康對照組血漿miR-155表達(dá)量分別為2.06±1.03、1.36±0.08、1.32±1.03，胃癌患者血漿miR-155表達(dá)量明顯高于其他兩組(P<0.05)。胃炎患者與健康成年人無明顯差異(P>0.05)。

2.2胃癌患者血漿miR-155表達(dá)量與臨床特征的關(guān)系胃癌患者血漿miR-155的表達(dá)量與患者性別、年齡、不同臨床分期關(guān)系、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否有遠(yuǎn)處臟器的轉(zhuǎn)移、病理分型間的表達(dá)量無明顯相關(guān)性(P>0.05)，見表1。

表1　血漿miR-155表達(dá)量在不同臨床病理特征間的比較±s)

3　討　論

胃癌多無特異性的臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)時(shí)往往已進(jìn)展到中晚期。因此提高胃癌的早期檢出率，是減少病死率、改善患者預(yù)后的關(guān)鍵。微小RNA(miRNA)廣泛存在于真核生物細(xì)胞中，是非編碼的單鏈小分子RNA，長19～24 nt，是一類基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子〔1〕，其通過與靶mRNA的3′UTR的堿基互補(bǔ)結(jié)合，促進(jìn)靶mRNA的降解或抑制翻譯，參與了細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及干細(xì)胞自我更新等多種生理過程〔1，2〕。目前研究認(rèn)為，一些microRNA與腫瘤關(guān)系密切，在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著一定作用〔1～4〕，研究表明miRNA在腫瘤中與在正常組織中有不同的表達(dá)譜，因此其不但可以作為腫瘤的診斷指標(biāo)，還可以幫助判斷預(yù)后〔5〕，發(fā)揮著原癌基因或抑癌基因的作用〔6〕。

miR-155是新近發(fā)現(xiàn)的與腫瘤密切相關(guān)的miRNA，是癌基因BIC的表達(dá)產(chǎn)物在多種人類實(shí)體惡性腫瘤組織中表達(dá)升高。本研究中發(fā)現(xiàn)，血漿miR-155在胃癌患者中表達(dá)量較高，而在慢性非萎縮性胃炎、健康成人中表達(dá)量較低，說明血漿miR-155可能參與胃癌的發(fā)生。正如Lee等〔7〕應(yīng)用miRNA基因芯片技術(shù)研究胰腺導(dǎo)管癌、配對的胰腺良性組織、正常胰腺組織及胰腺癌細(xì)胞株，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-155在胰腺癌、增生組織中表達(dá)明顯異常，Ryu等〔8〕應(yīng)用RT-PCR檢測了31例胰腺上皮內(nèi)瘤變組織，miR-155的表達(dá)水平較正常組織明顯增加的結(jié)論一樣，miR-155從轉(zhuǎn)錄后水平上廣泛參與基因表達(dá)的調(diào)控，其表達(dá)的改變可以導(dǎo)致遺傳信息表達(dá)的改變，從而導(dǎo)致一定的病理狀態(tài)，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。本研究結(jié)果說明miR-155可能與胃癌的進(jìn)展情況無關(guān)。

1Dirks PB.microRNA and parallel stem cell lives〔J〕.Cell，2009；138(2)：424-5.

2Yohei S，Maider Z，Robert WC，etal.Down regulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cell〔J〕.Cell，2009；138(2)：592-603.

3Zhang X，Ladd A，Dragoescu E，etal.MicriRNA-17-3p is a prostate tumor suppressor in vitro and in vivo，and is decreased in high grade prostate tumors analyzed by laser capture micro-dissection〔J〕.Clin Exp Metastasis，2009；26(8)：965-79.

4Bhatti I，Lee A，Lund J，etal.Small RNA：a large contributor to carcinogenesis〔J〕?2009；13(7)：1379-88.

5黃偉，孫巖，韓瑞發(fā).MicroRNA與癌癥的研究進(jìn)展〔J〕.天津醫(yī)藥，2009；37(3)：238-40.

6Esquela-Kerscher A，Slack FJ.Nokomis-microRNAs with a role in cancer〔J〕.Nat Rev Cancer，2006；6(4)：259-69.

7Lee EJ,Gusev Y,Jiang J,etal.Expression profiling identifies microRNA signature in pancreatic cancer〔J〕.Int J Cancer,2007;120:1046-54.

8Ryu JK，Hong SM，Karikarri CA，etal.Aberrant miR-155 expression is an early event in the multistep progression of pancreatic adenocarcinoma〔J〕.Pancreatology，2010；10(1)：66-73.

〔2014-12-03修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.113

楊川杰(1972-)，女，博士，副主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，主要從事消化道肺瘤研究。

王競(1978-)，女，主治醫(yī)師，主要從事消化道肺瘤研究。

R73

A

1005-9202(2016)14-3590-02；

1河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院消化內(nèi)科