羌?xì)w膝舒丸治療膝骨關(guān)節(jié)炎的效果及相關(guān)機(jī)制

王強(qiáng)，王東軍，田國峰，劉志強(qiáng)，張立波，崔斌

(大慶龍南醫(yī)院 骨科，黑龍江 大慶 163000)

羌?xì)w膝舒丸治療膝骨關(guān)節(jié)炎的效果及相關(guān)機(jī)制

王強(qiáng)Δ，王東軍，田國峰，劉志強(qiáng)，張立波，崔斌

(大慶龍南醫(yī)院 骨科，黑龍江 大慶 163000)

目的 研究羌?xì)w膝舒丸治療膝骨關(guān)節(jié)炎(knee Osteoarthritis，KOA)的效果及其對循環(huán)血miR和炎性因子指標(biāo)的影響。方法 選取2014年10月～2015年10月大慶龍南醫(yī)院骨科收治的KOA患者50例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組，各25例。對照組采用雙醋瑞因膠囊治療，觀察組給予羌?xì)w膝舒丸治療，比較2組患者WOMAC評分，臨床療效以及治療前后循環(huán)血miR、炎性因子的變化。結(jié)果 2組治療前WOMAC評分無差異；2組治療后疼痛、關(guān)節(jié)僵硬、日常活動以及綜合評分均有所降低(P<0.05)，且觀察組下降程度低于對照組(P<0.05)；2組治療前血miR-146a、miR-140、miR-21、IL-6、IL-1β、TNF-α含量無明顯差異，治療后2組miR-21、IL-6、IL-1β、TNF-α均低于治療前(P<0.05)，miR-140、miR-146a均高于治療前(P<0.05)，且觀察組上述指標(biāo)與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 羌?xì)w膝舒丸治療KOA效果顯著，其作用機(jī)制可能是通過調(diào)控miR以及炎性因子來實現(xiàn)的。

羌?xì)w膝舒丸；關(guān)節(jié)炎；炎性因子；膝骨；雙醋瑞因膠囊

膝骨關(guān)節(jié)炎(knee osteoarthritis，KOA)是退行性膝骨關(guān)節(jié)病，典型特征為膝關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞、軟骨變性及不同程度的骨質(zhì)增生，病變呈慢性進(jìn)行性進(jìn)展。臨床上KOA患者常以膝關(guān)節(jié)疼痛、僵硬以及活動受限就診，患病率呈上升趨勢。目前KOA的發(fā)病原因仍不明確，研究認(rèn)為炎性因子介導(dǎo)及非編碼小RNA(miR)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控在KOA發(fā)病中發(fā)揮重要的作用。傳統(tǒng)中藥制劑在治療KOA方面具有一定的臨床療效，羌?xì)w膝舒丸是由傳統(tǒng)中藥經(jīng)科學(xué)組方提取的復(fù)方制劑，本研究探討羌?xì)w膝舒丸治療KOA患者的效果，并從miR轉(zhuǎn)錄及炎性因子水平探討其作用機(jī)制，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年10月～2015年10月大慶龍南醫(yī)院骨科收治的KOA患者50例，按照隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為觀察組與對照組，各25例。其中對照組男13例，女12例；年齡40～65歲，平均(49.3±5.3)歲；病程1.5～10年，平均(5.2±1.4)年；Kellgren分級I級10例，Ⅱ級15例。觀察組男12例，女13例；年齡41～62歲，平均(48.2±5.5)歲；病程1～10年，平均(5.5±1.2)年；Kellgren分級I級12例，Ⅱ級13例。2組患者在性別、年齡、病程、Kellgren分級方面差異均無統(tǒng)計學(xué)意義?；颊咦栽竻⑴c研究，并簽署知情同意書，本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《骨關(guān)節(jié)炎診治指南》2007中關(guān)于膝骨關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]；②Kellgren分級為I級或者Ⅱ級。排除標(biāo)準(zhǔn)[2]：①近期服用過影響本次研究的其他相關(guān)藥物患者；②妊娠或哺乳期婦女；③過敏體質(zhì)；④合并有重要臟器如心、肝、腦等功能障礙；⑤無法按時用藥者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：2組患者均在指導(dǎo)下進(jìn)行飲食調(diào)節(jié)與功能鍛煉，對照組給予口服雙醋瑞固膠囊(昆明積大制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字J20100150)，每次50 mg，2次/d；觀察組給予口服羌?xì)w膝舒丸(組成成分包括羌活、獨(dú)活、牛膝、血竭、當(dāng)歸等，河南省洛正制藥廠，豫藥制字Z04030006)，每次6g，2次/d。2組患者治療1個月為1療程，共治療3個療程。

1.2.2 評價指標(biāo)

① WOMAC評分 WOMAC量表評分由麥克馬斯特大學(xué)編制[3]，共24個問題，涵蓋疼痛、關(guān)節(jié)僵硬、日常活動3個項目，分0～4分4級評分，得分越高，臨床癥狀越嚴(yán)重。

② 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 療效評價標(biāo)準(zhǔn)參照有關(guān)文獻(xiàn)[4]制定如下：臨床控制：患者關(guān)節(jié)疼痛等臨床癥狀消失，關(guān)節(jié)活動不受限，WOMAC評分降低≥95%，X線檢查無異常；顯效：患者關(guān)節(jié)疼痛等臨床癥狀顯著改善，關(guān)節(jié)活動不受限，WOMAC評分降低≥70%，X線檢查明顯改善；緩解：患者關(guān)節(jié)疼痛等臨床緩解，關(guān)節(jié)活動略受限，WOMAC評分降低≥30%，X線檢查略有改善；無效：患者關(guān)節(jié)疼痛及活動無緩解或加重，WOMAC評分降低<30%，X線檢查無變化。臨床有效率=(臨床控制+顯效)/總樣本數(shù)×100%。

③ 血miR和相關(guān)炎性因子的檢測 采用RT-PCR法檢測miR-146a、miR-21、miR-140的含量，引物設(shè)計合成以及試劑購自北京三博遠(yuǎn)志生物技術(shù)有限公司；ELISA法檢測IL-6、IL-1β、TNF-α的含量，試劑購自美國Sigma公司。

2 結(jié)果

2.1 2組患者治療前后WOMAC評分比較 2組治療前WOMAC評分無差異；治療后，2組疼痛、關(guān)節(jié)僵硬、日?；顒右约熬C合評分均有所降低(P<0.05)，觀察組下降程度低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 治療前后2組患者WOMAC評分比較

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 2組患者臨床療效及不良反應(yīng)比較 治療后，觀察組的臨床有效率高于對照組(P<0.05)。2組均未發(fā)生明顯的不良反應(yīng)，耐受良好。見表2。

表2 2組臨床有效率比較(n，%)

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.3 2組患者治療前后血miR和炎性因子比較 治療前，2組血miR-146a、miR-21、miR-140、IL-6、IL-1β、TNF-α含量無明顯差異，治療后，2組IL-6、IL-1β、TNF-α、miR-21均低于治療前(P<0.05)，miR-140、miR-146a均高于治療前(P<0.05)，且觀察組上述指標(biāo)與對照組相比，差異顯著(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者治療前后循環(huán)血miR及炎性因子含量比較

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

3 討論

流行病學(xué)研究顯示[5]，KOA患病率在老年人群中約為60%，隨著年齡的增加，患病率也隨之升高，KOA不僅患病率高，且致殘率高，未經(jīng)治療者致殘率可達(dá)50%以上，嚴(yán)重危害人類健康。KOA病因較復(fù)雜，可能是多種致病因子共同參與的結(jié)果，包括創(chuàng)傷、激素分泌紊亂、細(xì)胞因子、免疫反應(yīng)以及機(jī)體力學(xué)的變化等[6]，但其具體原因仍未明確。KOA治療分為物理治療、藥物治療以及手術(shù)治療。藥物治療包括非甾體類抗炎藥、延緩關(guān)節(jié)炎病程的藥物如硫酸軟骨素、四環(huán)素類抗生素、抗氧化劑、中藥以及細(xì)胞因子與基因治療等，雙醋瑞因膠囊是IL-1抑制劑，臨床上廣泛用于KOA的治療，并取得了一定效果[7]。本次研究采用傳統(tǒng)中藥羌?xì)w膝舒丸治療KOA，結(jié)果顯示，臨床有效率明顯高于雙醋瑞因膠囊組，并表現(xiàn)出較好的耐受性。

MicroRNA(miRNA)是近年來發(fā)現(xiàn)具有調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄后水平的單鏈小RNA，大量文獻(xiàn)報道，其與KOA的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，機(jī)制可能與調(diào)節(jié)炎性介質(zhì)的釋放以及細(xì)胞外基質(zhì)的降解有關(guān)。Yamasaki等[8]研究發(fā)現(xiàn)，KOA的嚴(yán)重程度與miR-146a表達(dá)量呈反比，與基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)的表達(dá)呈正比，疾病越嚴(yán)重，miR-146a的表達(dá)越低，MMP-13的表達(dá)越高。韓朝永[9]研究顯示，KOA患者關(guān)節(jié)液中miR-140表達(dá)水平明顯低于健康人，且miR-140的缺失可能是導(dǎo)致KOA發(fā)生發(fā)展的重要因素。miR-21是另一個已知調(diào)控KOA的miR，其通過激活RANKL通路，調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的分化[10]。另一類與KOA發(fā)病有關(guān)的是炎性細(xì)胞因子，主要包括IL-6、IL-1β、TNF-α，其與miRNA共同調(diào)控發(fā)揮作用。IL-6、IL-1β能夠介導(dǎo)MMPs促進(jìn)軟骨降解，誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞產(chǎn)生NO誘導(dǎo)其凋亡，并能抑制膠原蛋白合成，阻止膠原基質(zhì)網(wǎng)狀形成[7]。TNF-α能夠吸收已破壞的軟骨，抑制成骨細(xì)胞代謝，產(chǎn)生嚴(yán)重的骨關(guān)節(jié)破壞，其作用類似與白介素[11]。本研究結(jié)果顯示，2組在治療前IL-6、IL-1β、TNF-α、miR-21表達(dá)較高，miR-140、miR-146a表達(dá)較低，治療后IL-6、IL-1β、TNF-α、miR-21表達(dá)降低而miR-140、miR-146a升高，說明有效的治療是通過炎性因子和miR的調(diào)控來實現(xiàn)的。

綜上，羌?xì)w膝舒丸治療KOA效果顯著，其作用機(jī)制可能是通過調(diào)控miR以及炎性因子來實現(xiàn)的。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會骨科學(xué)分會.骨關(guān)節(jié)炎診治指南(2007版)[J].中國醫(yī)刊，2007，42(12)：30-32.

[2] 田濤濤，李無陰，杜志謙，等.羌?xì)w膝舒丸與筋骨痛消丸治療寒凝血瘀型膝骨關(guān)節(jié)炎臨床對照試驗[J].風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2013，2(4)：18-21.

[3] 李志明.小針刀松解結(jié)合玻璃酸鈉注射治療退行性膝關(guān)節(jié)炎療效觀察[J].河北中醫(yī)，2016，38(7)：1066-1069.

[4] 韓宗昌，李無陰，王戰(zhàn)朝，等.羌?xì)w膝舒丸聯(lián)合雙醋瑞因膠囊治療膝骨關(guān)節(jié)炎50例臨床觀察[J].湖南中醫(yī)雜志，2016，32(5)：103-105.

[5] Bennell K,Dobson F.Review：Exercise interventions improve painand function in people with knee osteoarthritis compared with no ex-ercise[J].Evid Based Nurs,2014,17(4):109.

[6] Iqbal MN,Haidri FR,Motiani B,et al.Frequency of factors associ-ated with knee osteoarthritis[J].J Pak Med Assoc,2011,61(8):786-789.

[7] 郭泰宣，雯霞，畢樹雄.膝骨關(guān)節(jié)炎的治療進(jìn)展[J].中國藥物與臨床，2014，14(3)：330-331.

[8] Yamasaki K,Nakasa T,Miyaki S,et al.Expression of MicroRNA-146a in osteoarthritis cartilage[J].Arthritis Rheum,2009,60(4):1035-1041.

[9] 韓朝永.膝骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中miR-140的表達(dá)及其臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，25(3)：1422-1424.

[10] 趙勇，王鋼.MicroRNA 基因調(diào)控在膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展作用中的研究進(jìn)展[J].中國骨傷，2016，29(4)：383-385.

[11] 江鋒，陳巍，馬川，等.膝骨性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)滑液腫瘤壞死因子α的表達(dá)及其臨床意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2010，26(2)：246-247.

(編校：苗加會)

Effect and mechanism of qiangguixishu pills in the treatment with knee osteoarthritis

WANG QiangΔ, WANG Dong-jun, TIAN Guo-feng, LIU Zhi-qiang, ZHANG Li-bo, CUI Bin

(Department of orthopedics, Daqing Longnan Hospital ,Daqing 163000, China)

ObjectiveTo study the effect of qiangguixishu pills in the treatment with knee osteoarthritis and influence in miR of circulating and inflammatory factor index.Methods50 patients with KOA from October 2014 to October 2015 were randomly divided into two groups,the observation group and the control group,with 25 cases in each group.The control group using Diacerein capsules for treatment,the observation group

the Qiangguixishu pills for treatment,compared the WOMAC score and clinical efficacy before and after treatment between two groups,and changes of miR and inflammatory factors circulating.ResultsThere was no difference in WOMAC score between the two groups before treatment;pain,joint stiffness,daily activities and comprehensive scores were decreased after treatment in two groups(P<0.05),and it was lower in the observation group than in the control group(P<0.05);There was no significant difference at blood miR-146a,miR-140,miR-21,IL-6,IL-1beta,TNF-alpha contents between the two groups,miR-21 beta,IL-6,IL-1 beta,TNF- alpha were lower than that before treatment in the two groups after treatment(P<0.05),miR-140,miR-146a were higher than before treatment(P<0.05),and compared with the control group,the above indicators at the observation group were had significant difference(P<0.05).ConclusionThere were the therapeutic effect in the treatment with KOA by Qiangguixishu pills and its mechanism maybe realized by regulating the miR and inflammatory factor.

Qiangguixishu pill;arthritis;inflammatory factor;knee;diacerein capsules

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.08.023

王強(qiáng)，通信作者，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：骨科疾病的診治，E-mail:wangxiaoya_226@163.com。

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