益氣舒心丸治療病毒性心肌炎的效果及可能機制

王吉佳，趙悅，李晶瑤，徐華

(大慶油田總醫(yī)院 心內(nèi)科，黑龍江 大慶 163000)

益氣舒心丸治療病毒性心肌炎的效果及可能機制

王吉佳Δ，趙悅，李晶瑤，徐華

(大慶油田總醫(yī)院 心內(nèi)科，黑龍江 大慶 163000)

目的 探討益氣舒心丸治療病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)的效果及可能機制。方法 選取大慶油田總醫(yī)院收治的56例VMC患者，按照隨機數(shù)字表法分為試驗組和對照組，各28例。對照組采用常規(guī)治療，試驗組在對照組的基礎(chǔ)上加用益氣舒心丸，比較2組患者臨床療效，以及治療前后循環(huán)血miR、心肌酶譜以及免疫功能的變化。結(jié)果 試驗組治療總有效率為92.86%，對照組為72.57%，2組比較差異顯著(P<0.05)；治療前，2組血清miR-1、miR-133、miR-21、CK-MB、cTnI、LDH、CD3+、CD4+、CD8+、NK無明顯差異，治療后2組miR-1、miR-133、CD3+、CD4+、CD8+、NK均高于治療前(P<0.05)，miR-21、CK-MB、cTnI、LDH均低于治療前(P<0.05)；2組比較，差異均顯著(P<0.05)。結(jié)論 益氣舒心丸能夠提高VMC患者的治療效果，其機制可能與改善循環(huán)血miR及增強細胞免疫功能有關(guān)。

益氣舒心丸；病毒性心肌炎；細胞免疫；miR

病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是心血管內(nèi)科常見疾病之一，患者往往有腸道感染或呼吸道感染病史，病毒感染主要以腺病毒、薩奇病毒B為主，后者最為常見[1]。若VMC治療不徹底，可引發(fā)嚴重的并發(fā)癥，包括心力衰竭、心肌肥厚以及心律失常[2]。因此早期有效的治療對于VMC患者具有十分重大的臨床意義。雖然VMC的發(fā)病機制未完全明確，但在病程的進展過程中機體的免疫反應(yīng)和MicroRNAs(miRs)的調(diào)控發(fā)揮重要的作用[3]。益氣舒心丸主要由黨參、三七、女貞子、白術(shù)、丹參組成，具有益氣、活血、通脈的功效，本研究采用益氣舒心丸治療VMC患者，取得顯著的臨床效果，并初步探討其作用機制，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月～2016年1月我院心內(nèi)科收治的56例VMC患者，按照隨機數(shù)字表法將患者分為試驗組與對照組，各28例。其中對照組男16例，女12例；年齡21～60歲，平均(39.1±3.2)歲；急性期20例，非急性期8例；疾病分型:輕型15例，中型8例，重型5例。試驗組男15例，女13例；年齡21～62歲，平均(40.1±3.5)歲；急性期18例，非急性期10例；疾病分型:輕型13例，中型10例，重型5例。2組患者在性別、年齡、疾病分期分型等方面差異無統(tǒng)計學(xué)意。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準同意。

納入標準：①診斷標準符合1987年召開的全國心肌炎心肌病專題座談會制訂的VMC診斷標準[4]；②初發(fā)病例；③患者自愿參加，并簽署知情同意書。

排除標準[5]：①甲狀腺功能亢進、風(fēng)濕性心肌炎、神經(jīng)功能紊亂以及其他代謝疾病影響心肌疾病患者；②妊娠或哺乳期婦女；③對已知的藥物成分過敏；④合并有其他重要臟器如肝、腦、腎以及造血系統(tǒng)疾??；⑤無法完成治療容易失訪者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：2組患者均給予基礎(chǔ)治療，包括臥床休息、營養(yǎng)支持、抗病毒等，并監(jiān)測心電圖以及臨床體征；試驗組在此基礎(chǔ)上口服益氣舒心丸(佛山市中醫(yī)院，粵藥準字Z20070408)，每次10 g，2次/天，7 d為1療程，共治療3個療程。

1.2.2 檢測指標及臨床療效

血清相關(guān)因子檢測：分別于治療前后采集4 ml前臂靜脈血，實時定量PCR法(引物以及試劑購自中國北京博奧生物科技有限公司)檢測miR-21、miR-1、miR-133的含量；膠體金免疫層析法(試劑購自美國Sigma)檢測肌酸激酶(CK-MB)、心肌肌鈣蛋白I(cTnI)、乳酸脫氫酶(LDH)的含量；ELISA法(試劑購自中國上海碧云天生物科技有限公司)檢測CD3+、CD4+、CD8+、NK。

臨床療效：參考內(nèi)科學(xué)[6]標準制定如下：顯效:患者癥狀以及體征基本消失，心電圖無異常，心肌酶譜恢復(fù)正常，心臟擴大消失；有效:患者臨床癥狀以及體征明顯改善、心電圖無異常，心肌酶譜指標明顯降低，心臟擴大明顯縮??；無效:患者臨床癥狀以及體征無變化，心電圖異常，心肌酶譜指標無變化或升高，心臟明顯擴大?？傆行?(顯效+有效)/總樣本數(shù)×100%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPPS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料的比較采用X2檢驗，計量資料的比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者治療前后循環(huán)血miR以及細胞免疫功能的變化 2組治療前血清miR-1、miR-133、miR-21、CK-MB、cTnI、LDH無明顯差異。治療后2組miR-1、miR-133均高于治療前(P<0.05)，miR-21、CK-MB、cTnI、LDH均低于治療前(P<0.05)；與對照組比較，試驗組上述指標差異顯著(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者治療前后循環(huán)血miR及細胞免疫功能比較

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 2組患者治療前后細胞免疫功能比較 2組治療前血清CD3+、CD4+、CD8+、NK無明顯差異。治療后，2組CD3+、CD4+、CD8+、NK均高于治療前(P<0.05)，與對照組相比，試驗組上述指標差異顯著(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者治療前后細胞免疫功能比較

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.3 2組患者治療效果比較 對照組顯效12例，有效10例，無效6例，總有效率為78.57%；試驗組顯效18例，有效8例，無效2例，總有效率92.86%；試驗組治療有效率明顯高于對照組(P<0.05)。

3 討論

目前，VMC的發(fā)病機制仍未完全明確，公認的學(xué)說包括：①病毒感染后直接損傷心肌細胞。病毒進入人體后能與心肌細胞膜上的多種受體結(jié)合，如柯薩奇-腺病毒受體，Toll樣受體等，在結(jié)合后迅速進入胞質(zhì)并大量釋放RNA進行復(fù)制，在此過程中各種補體激活，介導(dǎo)細胞毒性作用，損傷心肌細胞，致使心功能受損。②免疫損傷，可以通過細胞免疫和體液免疫使心肌細胞受損。細胞免疫是指T淋巴細胞、B細胞和巨噬細胞的表達過度，激活多種細胞因子包括能殺傷心肌細胞的特異性因子[7]；另一方面，病毒進入機體后，體液免疫功能產(chǎn)生紊亂，細胞釋放多種炎性因子，介導(dǎo)發(fā)生免疫反應(yīng)，對心肌細胞造成持久損傷[8]。③自身免疫，心肌細胞感染病毒后，產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，如抗心肌肌凝蛋白抗體、抗心肌蛋白偶聯(lián)受體等心肌抗體等，心肌產(chǎn)生炎性反應(yīng)，最終導(dǎo)致心肌擴張。④生化機制，心肌代謝可生成自由基，由正常心肌細胞產(chǎn)生的抗氧化物質(zhì)清除，但病毒感染后，其自由基清除受限，從而損傷心肌細胞。此外，在轉(zhuǎn)錄水平上，miRs同樣發(fā)揮重要的作用，miRs屬非編碼小分子RNA，其中的miR-1、miR-133、miR-21在心肌細胞表達較高，參與心肌的病理過程。據(jù)報道，miR-1、miR-133能夠抑制血清反應(yīng)因子[3]，miR-21在VMC小鼠心肌組織中表達上調(diào)[9]，上述miRs均是治療VMC的潛在靶點。本次研究即從細胞免疫以及miRs轉(zhuǎn)錄方面進行研究，結(jié)果顯示，采用益氣舒心丸治療后，免疫功能得到提高，并從轉(zhuǎn)錄水平發(fā)揮作用。

目前對VMC的治療主要包括一般治療、抗病毒治療、改善心肌代謝、中藥治療以及干細胞治療與心臟移植，適應(yīng)不同階段的VMC患者。近年來中藥治療發(fā)揮了重要作用，其包括如下作用：增強機體免疫力；清除、防止病毒感染；減輕病毒損害；治療并發(fā)癥等[10]。益氣舒心丸由黨參、三七、女貞子、白術(shù)、丹參科學(xué)組成，其在改善心衰以及冠脈血流量中具有良好效果[5,11]。本次研究首次將益氣舒心丸應(yīng)用治療VMC，結(jié)果顯示，其能顯著提高VMC患者的臨床治愈率，為防止進一步產(chǎn)生不可逆的心臟擴大以及纖維化產(chǎn)生積極影響。此外，我們還對其機制進行了初步研究，發(fā)現(xiàn)其能夠提高患者的免疫功能，但不過度；在轉(zhuǎn)錄水平上，通過增強miR-1、miR-133的表達及抑制miR-21的表達保護心肌免受損傷。

綜上所述，益氣舒心丸能夠提高VMC患者的治療效果，其機制可能與改善循環(huán)血miR及增強細胞免疫功能有關(guān)。本次研究為臨床上治療VMC提供了新的思路，其更多通路的研究仍需進一步試驗證實。

[1] Mackman N，Antoniak S.Roles of PAR1 and PAR2 in viral myo-carditis[J].Thromb Res,2014,133(1)：S18-20.

[2] Gidl?f O,Andersson P,van der Pals J,et al.Cardiospecific microRNA plasma levels correlate with troponin and cardiac function in patients with ST elevation myocardial infarction,are selectively dependent on renal elimination,and can be detected in urine samples[J].Cardiology,2011,118(4):217-226.

[3] Luo X,Lin H,Pan Z,et al.Down-regulation of miR-1/miR-133 contributes to re-expression of pacemaker channel genes HCN2 and HCN4 in hypertrophic heart[J].J Biol Chem,2008,283(29):20045-20052.

[4] 蔣鵬，趙明，谷騰飛，等.參麥注射液預(yù)先給藥對心肌缺血-再灌注損傷大鼠心肌HMGB-1表達的作用[J].臨床麻醉學(xué)雜志，2012，28(11)：1102-1104.

[5] 趙華云，王文會，陳偉強，等.益氣舒心丸對急性冠脈綜合征患者冠狀動脈造影術(shù)中冠脈血流儲備的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2016，23(5)：33-36.

[6] 葉任高.內(nèi)科學(xué)(6版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2004：341-343.

[7] Tse G,Yeo JM,Chan YW,et al.What Is the Arrhythmic Substrate in Viral Myocarditis? Insights from Clinical and Animal Studies[J].Front Physiol,2016,7:308.

[8] Sin J,Mangale V,Thienphrapa W,et al.Recent progress in understanding coxsackievirus replication,dissemination,and pathogenesis[J].Virology,2015,484:288-304.

[9] 劉艷麗，伍偉鋒.microRNA -21和146b 在病毒性心肌炎小鼠中的表達和意義[J].臨床心血管病雜志，2014，30(2)：114-116.

[10] 倪榮，李麗麗.病毒性心肌炎的發(fā)病機制和治療進展[J].中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2016，19(6)：936-938.

[11] 陳偉強，趙華云，王文會，等.益氣舒心丸對慢性心衰療效的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2011，31(6)：1-4.

(編校：苗加會)

Clinical effect and possible mechanism of Yiqi Shuxin pills in the treatment with viral myocarditis

WANG Ji-jiaΔ, ZHAO Yue, LI Jing-yao, XU Hua

(Department of Cardiology, General Hospital of Daqing Oil Field, Daqing 163000, China)

ObjectiveTo investigate the effect and mechanism of Yiqi Shuxin pills in the treatment with viral myocarditis(VMC).Methods56 cases of VMC in our hospital were randomly divided into the experimental group and the control group,28 cases in each group.The patients in the control group were with routine treatment,and these in the experimental group were treated with Yiqi Shuxin pills based on the control group.The clinical effects between the two groups were compared,and the changes of miR,myocardial enzyme spectrum and immunity were compared before and after treatment.ResultsThe total effective rate was 92.86% in the experimental group and was 72.57% in the control group,there was statistical significance between the two groups(P<0.05);There was no significant difference between the two groups before treatment at miR-1,miR-133,miR-21,CK-MB,cTnI,LDH,CD3+,CD4+,CD8+,NK in serum;The content of miR-1,miR-133,CD3+,CD4+,CD8+,NK after treatment in the two groups were higher than before treatment(P<0.05),miR-21,CK-MB,cTnI and LDH were lower than before(P<0.05);The improvement of these indicators in the experimental group was superior to that in the control group(P<0.05).ConclusionYiqi Shuxin pills could improve the therapeutic effect of VMC,the mechanism maybe related to improving the circulation of blood miR and enhance cellular immune function.

Yiqi Shuxin pills;Viral myocarditis;Cellular immunity;MiR

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.08.024

王吉佳，通信作者，女，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：心內(nèi)科疾病治療，E-mail:wangjijia979@sina.com。

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