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    冠心病中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究進(jìn)展

    2016-08-01 07:47:44耿亞馬月香
    關(guān)鍵詞:中醫(yī)證候動(dòng)物模型綜述

    耿亞 馬月香

    摘要:冠心病(coronary artery heart disease,CHD)是心血管疾病常見(jiàn)病種。CHD動(dòng)物模型是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究疾病發(fā)展轉(zhuǎn)歸及評(píng)價(jià)藥物作用療效必不可少的工具,而針對(duì)于中醫(yī)證候的動(dòng)物模型是在中醫(yī)基本思想的指導(dǎo)下在動(dòng)物身上模擬出人類(lèi)疾病的某些特征,制備出與人類(lèi)疾病癥狀和病理變化相似或相同的動(dòng)物模型。目前,建立CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型的方法多種多樣,本文從痰瘀互結(jié)、心脾陽(yáng)虛、寒凝血瘀、痰濁血瘀、心氣虛、氣虛血瘀方面綜述了這幾類(lèi)模型的研究進(jìn)展,以期為冠心病的研究提供參考。

    關(guān)鍵詞:冠心??;中醫(yī)證候;動(dòng)物模型;綜述

    DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.035

    中圖分類(lèi)號(hào):R259.414 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1005-5304(2016)08-0129-04

    冠心?。╟oronary artery heart disease,CHD)是指冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使管腔狹窄或阻塞,或/和冠狀動(dòng)脈痙攣導(dǎo)致心肌缺血缺氧而引起的心臟病,又稱(chēng)缺血性心臟?。↖HD)。根據(jù)CHD臨床致病特點(diǎn),可歸屬中醫(yī)學(xué)“胸痹”“真心痛”等范疇。在CHD研究中,動(dòng)物模型的建立是主要研究方法之一,近年許多研究者在冠心病中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究中取得一定成效,但也存在諸多與中醫(yī)基本思想不協(xié)調(diào)的問(wèn)題。筆者通過(guò)檢索中國(guó)知識(shí)資源總庫(kù)2005-2015年文獻(xiàn),對(duì)有關(guān)CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型文獻(xiàn)做一梳理,現(xiàn)總結(jié)如下。

    1 痰瘀互結(jié)證小型豬模型

    林氏等[1]以高脂飼料(每100 kg飼料含膽固醇2 kg,膽鹽0.5 kg,豬油10 kg)每日每只900 g喂養(yǎng)

    小型豬2周,并以介入法對(duì)冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮進(jìn)行損傷,術(shù)后繼續(xù)以高脂飼料每日每只900 g喂養(yǎng)8周。觀察測(cè)量并分別記錄小型豬高脂2、6、10周的體質(zhì)指數(shù)、舌象、心電圖,以及無(wú)創(chuàng)血流動(dòng)力學(xué)參數(shù),包括心輸出量、每搏輸出量、外周血管阻力、左心做功。

    在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,因小型豬的生理解剖、血脂指標(biāo)和人類(lèi)非常相近[2]。生理生化方面,豬的血液學(xué)、血流動(dòng)力學(xué)、血液生化指標(biāo)方面已被證實(shí)與人類(lèi)相似,而且品種純正、體質(zhì)量較小、生長(zhǎng)緩慢,近年來(lái),在中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究中應(yīng)用越來(lái)越突出[3-4]。有學(xué)者以《中藥新藥治療冠心病心絞痛的臨床研究指導(dǎo)原則》為參照,對(duì)小型豬冠心病模型痰瘀互結(jié)證候進(jìn)行診斷與評(píng)分,制定了CHD痰瘀互結(jié)證小型豬模型的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),對(duì)主癥、兼癥、舌象、脈象進(jìn)行評(píng)分,根據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判斷CHD痰瘀互結(jié)證小型豬模型是否建立[1,5]。

    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意在模擬中醫(yī)過(guò)食肥甘厚味而引起脾運(yùn)失健,痰濕壅盛,進(jìn)而導(dǎo)致血脈痹阻的痰瘀互結(jié)的中醫(yī)證候,以高脂飲食和冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮損傷術(shù)復(fù)制出CHD痰瘀互結(jié)證動(dòng)物模型。

    2 心脾陽(yáng)虛證大鼠模型

    韋氏等[6]先適應(yīng)性飼養(yǎng)大鼠1周,然后對(duì)大鼠施行肩胛骨間棕色脂肪組織(brown adipose tissue,BAT)切除,術(shù)后在19 ℃環(huán)境下以高脂飼料(83%基本飼料,15%三酰甘油,2%膽固醇)飼養(yǎng)21 d,第22日皮下多點(diǎn)注射垂體后葉素(10 U/kg),第29日對(duì)大鼠施以中藥。觀察測(cè)量并分別記錄大鼠行為(活動(dòng)度、攝食行為、毛發(fā)改變、體質(zhì)量變化等)、肛溫、體溫、心電圖、心肌單相動(dòng)作電位,以及心率、動(dòng)作電位時(shí)程、動(dòng)作電位0相幅值、動(dòng)作電位50%復(fù)極化時(shí)程、90%復(fù)極化時(shí)程。因心脾陽(yáng)虛包括陽(yáng)虛癥狀(畏寒喜溫、形寒肢冷等)和脾虛癥狀(消瘦、乏力、納少、便溏及腹瀉、脘腹脹痛等)兩大癥狀群,可在實(shí)驗(yàn)中根據(jù)大鼠模型組行為、心電圖、心臟指數(shù)、肛溫,以及體質(zhì)量與對(duì)照組比較,對(duì)差異指標(biāo)進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)學(xué)分析[6],依差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,評(píng)價(jià)CHD心脾陽(yáng)虛證動(dòng)物模型是否建立。在CHD中醫(yī)證候中,單純心陽(yáng)虛證在臨床上較少見(jiàn),多為混合陽(yáng)虛證,如心脾陽(yáng)虛等[7]。中醫(yī)認(rèn)為,心脾陽(yáng)虛多因飲食不節(jié)、寒邪傷陽(yáng)等,致脾胃運(yùn)化失健,遂聚濕生痰,上犯心胸,阻遏心陽(yáng)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)BAT切除術(shù)、注射垂體后葉素、高脂飲食、寒冷刺激的方式,模擬“飲食不節(jié),寒邪傷陽(yáng)”,使CHD心脾陽(yáng)虛大鼠動(dòng)物模型在病因病機(jī)上更加符合心脾陽(yáng)虛證型。

    3 寒凝血瘀證大鼠模型

    王氏等[8]先用20%烏拉坦5 mL/kg對(duì)大鼠腹腔注射進(jìn)行麻醉,并將大鼠仰臥固定于鼠臺(tái),連接生理記錄儀并記錄大鼠標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖,然后經(jīng)口對(duì)大鼠氣管插管,連接動(dòng)物呼吸機(jī),解剖并分離出股靜脈進(jìn)行靜脈置管,5 s恒速注射注入垂體后葉素(6 U/kg,濃度為2 U/mL),造模30 min后進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)觀測(cè)。觀察測(cè)量并分別記錄大鼠體溫、體征(唇周、爪子、耳朵、尾巴的顏色,大便形態(tài))、心電圖、微靜脈管徑、紅細(xì)胞流速、6-酮-前列腺素F1α、血漿血栓素B2。將模型組與正常組檢測(cè)指標(biāo)比較,根據(jù)差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義判斷CHD寒凝血瘀證大鼠模型是否建立。

    中醫(yī)認(rèn)為,寒主收引,可抑遏陽(yáng)氣,使血行瘀滯?!端貑?wèn)·調(diào)經(jīng)論篇》曰:“厥氣上逆,寒氣積于胸中而不瀉,不瀉則溫氣去,寒獨(dú)留,則血凝泣,凝則脈不通?!毖芯勘砻?,造模大劑量注射垂體后葉素具有寒邪致病特點(diǎn),提示大鼠因寒邪內(nèi)侵而復(fù)制出的動(dòng)物模型為寒凝血瘀動(dòng)物模型[9]。

    4 痰濁血瘀證兔模型

    張氏等[10]首先對(duì)雄性家兔以高脂飼料(膽固醇1%、蛋黃粉15%、豬油15%、基礎(chǔ)飼料79%)飼養(yǎng)35 d,第36日采取冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù),以30 mg/kg戊巴比妥腹腔注射,剪毛,常規(guī)消毒,開(kāi)胸,對(duì)冠狀動(dòng)脈左前降支完全結(jié)扎,心電圖監(jiān)測(cè)。觀察測(cè)量并分別記錄實(shí)驗(yàn)前后全血黏度高切變率、全血黏度低切變率、血漿黏度、纖維蛋白原、血清白細(xì)胞介素-6。將模型組與正常組檢測(cè)指標(biāo)比較,根據(jù)差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義判斷CHD痰濁血瘀證兔模型是否建立。中醫(yī)認(rèn)為,過(guò)食肥甘厚味可使脾運(yùn)失健,津液不布,遂聚為痰,痰上擾心胸,致心脈痹阻。本實(shí)驗(yàn)中對(duì)家兔冠狀動(dòng)脈左前降支完全結(jié)扎及高脂喂養(yǎng),旨在模擬痰阻心胸,血行失暢,脈絡(luò)不利,心脈痹阻,以復(fù)制出痰濁血瘀證動(dòng)物模型。

    5 心氣虛證大鼠模型

    唐氏等[11]使用近交系Wistar大鼠采取游泳法建模,大鼠靜息狀態(tài)下喂養(yǎng)精飼料5 g/100 g,在水溫25~28 ℃條件下以強(qiáng)迫負(fù)重(大鼠自身質(zhì)量5%)方式游泳至力竭(頭沒(méi)入水下10 s不上?。?,進(jìn)行2次,前后間隔10 min,第18日起在游泳基礎(chǔ)上連續(xù)4 d灌服心得安溶液2.4 mg/100 g。觀察測(cè)量并分別記錄實(shí)驗(yàn)前后大鼠行為狀態(tài)、精神狀態(tài)、體征、左心室動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、心臟功能。將模型組與正常組檢測(cè)指標(biāo)比較,根據(jù)數(shù)據(jù)差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,判斷CHD心氣虛證大鼠模型是否建立。

    心氣虛證是心血管病系統(tǒng)中尤為常見(jiàn)的證型[12],而且在動(dòng)物模型的構(gòu)建中很難建立無(wú)兼證的心氣虛證模型[13]?!端貑?wèn)·刺志論篇》有“谷盛氣盛,谷虛氣虛”。 “氣為血之帥,血為氣之母”,“氣能行血”,血的正常運(yùn)行有賴(lài)于氣的推動(dòng)及谷氣的充盈,而心臟的正常搏動(dòng)在于氣血的正常運(yùn)行。本實(shí)驗(yàn)在飲食方面只給予大鼠每日基礎(chǔ)需要量,并增加其消耗量,意在模擬“谷虛氣虛”“勞則氣虛”;心得安溶液具有抑制心肌細(xì)胞鈣離子和鈉離子內(nèi)流的作用,也是非選擇性β受體阻斷劑,大劑量或長(zhǎng)期使用可引起心肌缺氧等,實(shí)驗(yàn)中在大鼠力竭運(yùn)動(dòng)后灌服心得安溶液,加重心氣耗損,以復(fù)制出CHD心氣虛證動(dòng)物模型。

    6 氣虛血瘀證小型豬模型

    在CHD中醫(yī)證候中,氣虛和血瘀證候最為常見(jiàn)[14-16]。該模型首先對(duì)小型豬進(jìn)行麻醉,無(wú)菌條件下肋間開(kāi)胸,于左回旋支冠狀動(dòng)脈放置Ameroid收縮環(huán),縫合,建立慢性心肌缺血模型[17]。郭氏等[18]在此基礎(chǔ)上觀察并采集術(shù)前正常狀態(tài)及術(shù)后4周的四診信息、心電圖、冠狀動(dòng)脈造影、頸部前腔靜脈血5 mL、超聲心動(dòng)圖,并以此評(píng)價(jià)小型豬血瘀證模型的建立情況。經(jīng)過(guò)觀察,該模型4~8周由血瘀證向氣虛血瘀證證型轉(zhuǎn)變,在8~12周該模型表現(xiàn)為氣虛血瘀證[18-19]。

    首先建立慢性心肌缺血小型豬模型,在造模第4周對(duì)小型豬進(jìn)行冠狀動(dòng)脈造影、毒理學(xué)、微球流量、病理組織學(xué)、磁共振掃描檢查,以檢查結(jié)果評(píng)價(jià)是否建立心肌缺血模型[17];然后參照血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)[20]進(jìn)行診斷,通過(guò)對(duì)比模型組與正常組的四診信息、冠狀動(dòng)脈造影、心電圖、血液流變學(xué)等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)[18],通過(guò)數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,判斷血瘀證模型是否建立;8~12周詳細(xì)記錄小型豬動(dòng)態(tài),采集詳細(xì)四診信息,借助心臟超聲、冠狀動(dòng)脈造影,根據(jù)血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)[20]、中醫(yī)虛證辨證參考標(biāo)準(zhǔn)[21]及中獸醫(yī)臨床診斷經(jīng)驗(yàn)[22]進(jìn)行評(píng)價(jià),根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義判斷CHD氣虛血瘀證小型豬模型是否建立。

    《難經(jīng)·二十二難》曰:“氣主煦之,血主濡之?!敝嗅t(yī)學(xué)有“氣為血之帥,血為氣之母”與“因?qū)嵵绿摗钡睦碚?,氣能生血、行血、攝血,血能養(yǎng)氣、載氣。本實(shí)驗(yàn)首先采用結(jié)扎左回旋支冠狀動(dòng)脈復(fù)制出血瘀證型,然后因脈絡(luò)瘀阻,血行凝滯,瘀血不去,新血不生,留瘀日久,遂心氣痹阻,以致心氣虛損,意在中醫(yī)因?qū)嵵绿摾碚撝笇?dǎo)下復(fù)制出CHD氣虛血瘀證動(dòng)物模型。此模型雖造模時(shí)間較長(zhǎng),但基本符合中醫(yī)理論中病的發(fā)展傳變規(guī)律,對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)研究具有指導(dǎo)意義。

    7 小結(jié)與展望

    《難經(jīng)·六十難》說(shuō):“心之病,有厥痛,有真痛,何謂也……其五臟氣相干,名厥心痛……其痛甚,但在心,手足青者,即名真心痛?!薄督饏T要略·胸痹心痛短氣病脈證治》:“胸痹,心中痞氣,氣結(jié)在胸,胸滿(mǎn),脅下逆搶心?!逼渲饕C(jī)為心脈痹阻,臨床主要表現(xiàn)為本虛標(biāo)實(shí),本虛責(zé)之氣虛、氣陰兩虛及陽(yáng)氣虛,標(biāo)實(shí)責(zé)之寒凝、氣滯、痰濁、血瘀,且可相兼為病。CHD中醫(yī)證候表現(xiàn)很多,在研究過(guò)程中需要根據(jù)不同要求建立不同的動(dòng)物模型。

    目前較為提倡病證結(jié)合動(dòng)物模型,一般先建立疾病模型,再根據(jù)所需的中醫(yī)證候施予干預(yù)因素,以獲得病證結(jié)合模型[23]。而在中醫(yī)臨床診療中,“證”隨“病”的發(fā)展轉(zhuǎn)歸不斷變化,很難確定所建立的模型是否為所需要的動(dòng)物模型。由于“證”是中醫(yī)特色,與“病”緊密聯(lián)系,因此,在建立中醫(yī)證候動(dòng)物模型過(guò)程中應(yīng)同時(shí)考慮病證結(jié)合,使動(dòng)物模型更加符合臨床實(shí)際。這樣才更符合臨床需要,實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性也才能得到保障。

    目前CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型建立尚存在一些問(wèn)題:①動(dòng)物與人及動(dòng)物間的生理機(jī)能方面均存在差異,且性別不同、品系不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)造模刺激因素的反應(yīng)不同,相同的處理手段對(duì)不同種類(lèi)、不同年齡的動(dòng)物產(chǎn)生的生理影響也不盡相同。因此,在造模的動(dòng)物選擇上,應(yīng)更注重選擇與人體病理生理特點(diǎn)相近的動(dòng)物,以增加實(shí)驗(yàn)在臨床應(yīng)用上的可靠性。②在中醫(yī)證候動(dòng)物的模型建立評(píng)價(jià)中,缺少符合中醫(yī)特色的評(píng)價(jià)體系,應(yīng)建立規(guī)范的冠心病中醫(yī)證候動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)體系,使CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型的建立更加統(tǒng)一化、規(guī)范化、合理化、穩(wěn)定化。③人和動(dòng)物之間必然存在著差異,動(dòng)物模型只是在一定程度上對(duì)人的病理現(xiàn)象進(jìn)行模擬,不能完全對(duì)等,具體的CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型與臨床實(shí)踐存在一定差距,今后應(yīng)當(dāng)對(duì)CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型做進(jìn)一步深入研究,使CHD中醫(yī)證候動(dòng)物模型更符合中醫(yī)病因病機(jī)要求,接近人體生理病理特點(diǎn),符合臨床需要,為臨床應(yīng)用打好基礎(chǔ)。

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