不同產(chǎn)地倒地鈴揮發(fā)油化學(xué)成分GC-MS分析

吳　玲　蒙秋艷　莫惠雯　韋建華

廣西中醫(yī)藥大學(xué)　530001　南寧市明秀東路179號

·中藥方劑·

不同產(chǎn)地倒地鈴揮發(fā)油化學(xué)成分GC-MS分析

吳玲蒙秋艷莫惠雯韋建華*

廣西中醫(yī)藥大學(xué)530001南寧市明秀東路179號

摘要目的：研究不同產(chǎn)地倒地鈴揮發(fā)油的化學(xué)成分。方法：采用超臨界CO2萃取法提取揮發(fā)油，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析鑒定其化學(xué)成分，用面積歸一化法確定其相對含量。結(jié)果：南寧產(chǎn)倒地鈴揮發(fā)油共鑒定出21個化合物，占總揮發(fā)油的90.82%，主要成分為棕櫚酸（27.50%）、亞麻酸（11.19%）、甲氧基肉桂酸乙酯（6.96%）、亞油酸（5.05%），烷烴類化合物占的比重為23.74%；柳州產(chǎn)倒地鈴揮發(fā)油共鑒定出25個化合物，占總揮發(fā)油的89.4%，主要成分為1-二十六（碳）烯（12.71%）、甲氧基肉桂酸乙酯（8.53%）、棕櫚酸甲酯（6.17%）、葉綠醇（5.90%）、棕櫚酸乙酯（5.79%），烷烴類占的比重為37.92%。結(jié)論：超臨界CO2萃取法提取得到的南寧產(chǎn)地倒地鈴主要成分以棕櫚酸、亞麻酸、甲氧基肉桂酸乙酯和亞油酸為主，柳州產(chǎn)地倒地鈴主要成分以1-二十六（碳）烯、甲氧基肉桂酸乙酯、棕櫚酸甲酯、葉綠醇和棕櫚酸乙酯為主，兩種不同產(chǎn)地倒地鈴的揮發(fā)性成分及含量有較大的差異。

關(guān)鍵詞倒地鈴；揮發(fā)油；超臨界CO2萃取法；GC-MS

倒地鈴（Cardiospermum halicacabum L.）為無患子科植物，是廣西壯族民間特色藥材，具有清熱、利尿、涼血、去瘀、解毒之效，多用于治療糖尿病、肺炎、黃疸、淋病、疔瘡、濕疹等［1-2］。近年來，倒地鈴的研究在國內(nèi)外引起廣泛關(guān)注。多項研究表明倒地鈴具有良好的抗氧化、抗瘧疾、抗炎作用［3-7］。本課題組對其化學(xué)成分進(jìn)行初步研究，從中分離了18個化合物［8-10］。但目前對倒地鈴揮發(fā)油化學(xué)成分的分析尚未見有文獻(xiàn)報道，因此，本實驗對

1　實驗材料

1.1儀器HL-（5+1）/50MPa-IIAQ超臨界流體（CO2）萃取裝置（杭州華黎泵業(yè)有限公司）；Agilent 6890N-5973N型氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫科技有限公司）。

1.2藥村倒地鈴藥材于2014年分別采自廣西柳州、南寧，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室廖月葵高級實驗師鑒定為無患子科植物倒地鈴（Candiospermum halicacabum L.）的全草。

基金項目：廣西自然科學(xué)基金項目（編號：2014GXNSFAA118213）；廣西高校科學(xué)技術(shù)

研究項目（編號：ZD2014071）

*通信作者，副教授，主要從事中藥、民族藥化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究；E-mail:weijianhua607@tom.com

2　方法與結(jié)果

2.1揮發(fā)油的提取倒地鈴陰干、切碎、粉碎，過10目篩，分別稱取柳州產(chǎn)樣品40 g和南寧產(chǎn)樣品60 g，用CO2超臨界萃取裝置提取。提取條件：萃取釜25 MPa，41℃；分離釜Ⅰ4 MPa，35℃；分離釜Ⅱ5 MPa，25℃；萃取1 h。柳州產(chǎn)倒地鈴得透明粘稠油狀物0.87 g，收率為2.18%；南寧產(chǎn)倒地鈴得透明粘稠油狀物1.78 g，收率為2.97%。

2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件

2.2.1氣相色譜條件

2.2.1.1柳州產(chǎn)倒地鈴氣相色譜條件 色譜柱為HP-5MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），載氣為氮氣，流速為1.0 ml/min，進(jìn)樣量為0.4 μl，倍增器電壓1 294 V，接口溫度為280℃；柱溫：初始溫度80℃，保持1 min；以10℃/min升至180℃，保持2 min；以15℃/min升至230℃，保持3 min；以15℃/min升至280℃，保持2 min；再以20℃/min升至280℃，保持2 min。

2.2.1.2南寧產(chǎn)倒地鈴氣相色譜條件色譜柱為HP-5MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣為氮氣，流速為1.0 ml/min，進(jìn)樣量為0.4 μl，倍增器電壓1 294 V，接口溫度為280℃；柱溫：初始溫度90℃，保持1 min；以8℃/min升至180℃，保持2 min；以3℃/min升至200℃，保持4 min；以4℃/min升至220℃，保持2min；再以20℃/min升至280℃，保持2 min。

2.2.2質(zhì)譜條件質(zhì)譜接口溫度280℃，電離方式EI，電子能量70 eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，加速電壓2 019 V，掃描范圍45～450 amu，掃描間歇為每秒2.94次，溶劑延時3 min。

2.3結(jié)果與成分分析按上述測定條件對兩種樣品進(jìn)行GC-MS分析鑒定，所得色譜信息和質(zhì)譜信息經(jīng)計算機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行自動檢索和人工檢索，并進(jìn)行對照和解析，其中柳州產(chǎn)倒地鈴共鑒定出25個化合物，占總揮發(fā)油的89.4%，主要成分（相對峰面積大于5%）為1-二十六（碳）烯（12.71%）、甲氧基肉桂酸乙酯（8.53%）、棕櫚酸甲酯（6.17%）、葉綠醇（5.90%）、棕櫚酸乙酯（5.79%），烷烴類占的比重為37.92%，結(jié)果見表1。南寧產(chǎn)倒地鈴揮發(fā)油鑒定出21個成分，占總揮發(fā)油的90.82%，主要成分（相對峰面積大于5%）為棕櫚酸（27.50%）、亞麻酸（11.19%）、甲氧基肉桂酸乙酯（6.96%）、亞油酸（5.05%），烷烴類化合物占的比重為23.74%。結(jié)果見表2。

表1　柳州產(chǎn)倒地鈴揮發(fā)油的化學(xué)成分分析結(jié)果

（續(xù)表1）

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3　討論

研究結(jié)果表明，兩種不同產(chǎn)地倒地鈴揮發(fā)油的化學(xué)成分有較大差別，其中柳州產(chǎn)倒地鈴共鑒定出25個化合物，占總揮發(fā)油的89.4%，烷烴類占37.92%；南寧產(chǎn)倒地鈴共鑒定出21個化合物，占總揮發(fā)油的90.82%，烷烴類占23.74%；其中兩個產(chǎn)地的倒地鈴共有化合物只有12種，并且含量相差較大，提示植物揮發(fā)油的化學(xué)成分以及含量高低與其生長環(huán)境有著密切關(guān)系。

表2　南寧產(chǎn)倒地鈴揮發(fā)油化學(xué)成分分析結(jié)果

甲氧基肉桂酸乙酯的含量在兩個產(chǎn)地的倒地鈴中差不多，其中柳州產(chǎn)地為8.53%、南寧產(chǎn)地為6.96%；藥理實驗證明，甲氧基肉桂酸乙酯具有抗促癌活性，可在腫瘤發(fā)生的啟始階段和促進(jìn)階段分別發(fā)揮阻抑作用，具有化學(xué)防癌的功效，是一種安全性強、防癌效果好的天然化合物［11］。

葉綠醇的含量在兩個產(chǎn)地的倒地鈴中分別為5.90%（柳州）、4.16%（南寧），葉綠醇簡稱“葉醇”，亦稱“植物醇”，是植物葉綠素分子上一個支鏈，屬于鏈狀雙萜類物質(zhì)，是一種含有多支鏈的脂肪醇。葉綠醇及其代謝產(chǎn)物在調(diào)控機體糖脂代謝和脂肪細(xì)胞分化聚酯方面具有重要作用，可通過上調(diào)肝臟中脂肪酸氧化的基因表達(dá)水平，從而減少肝臟中的脂肪累積，對肝臟糖脂代謝有一定調(diào)節(jié)作用［12-13］。

本研究結(jié)果可為倒地鈴的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定及進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)，對該植物資源的綜合開發(fā)利用具有參考價值。

參考文獻(xiàn)

［1］中華本草編委會.中華本草［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：108.

［2］廣西科學(xué)院.廣西植物志［M］.廣西：廣西科學(xué)技術(shù)出版社，1991：182.

［3］Thabrewa I，Munasinghe J b，Chackrewarthia S，et al.The effects of Cassia auriculata and Cardiospermum halicacabumteas teas on the steady state blood level and toxicity of carbamazepine［J］.Journal of Ethnopharmacology，2004，90（1）：145-150.

［4］Thomas T D，Maseena E A.Callus inductionandplantregenerationin Cardiospermum halicacabum Linn.an important medicinal plant［J］.Scientia Horticulturae，2006，108（8）：332-336.

［5］Sheeba M S，Asha V V.Cardiospermum halicacabum ethanol extract inhibits LPS induced COX-2，TNF-α and iNOS expression，which is mediatedbyNF-kBregulationin RAW264.7cells［J］.Journalof Ethnopharmacology，2009，124（1）：39-44.

［6］Waako P J，Gumede B，Smith P，et al. The in vitro and in vivo antimalarial activityofCardiospermumhalicacabumL.andMomordicafoetida Schumch.EtThonn［J］.Journalof Ethnopharmacology，2005，99（1）：137-143.

［7］ Kumar R，Murugananthan G，Nandakumar K，et al.Isolation of anxiolytic principle from ethanolic root extract of Cardiospermum halicacabum［J］. Phytomedicine，2011，18（2-3）：219-223.

［8］韋建華，陳君，蔡少芳，等.倒地鈴化學(xué)成分研究（Ⅰ）［J］.中草藥，2011，42（8）：1509-1511.

［9］陳君，韋建華，蔡少芳，等.倒地鈴有效部位化學(xué)成分研究［J］.中藥材，2013，36（2）：228-230.

［10］陳君，韋建華，李兵，等.UV測定廣西不同產(chǎn)地倒地鈴中總黃酮的含量［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（13）：105-107.

［11］Huanga M H，Shyun H S，Wang B S，et al.Antioxidant and anti-inflammatorypropertiesofCardiospermum halicacabum and its reference compounds ex vivo and in vivo［J］. JournalofEthnopharmacology，2011，133（2）：743-750.

［12］林廈，菁朱曉，彤江青，等.葉綠醇對脂肪細(xì)胞分化及糖脂代謝的調(diào)節(jié)作用［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報，2012，24 （10）：1866-1870.

［13］Huanga M H，Huang S S，Wang B S，et al.Antioxidant and anti-inflam matorypropertiesofCardiospermum halicacabum and its reference compounds ex vivo and in vivo［J］. JournalofEthnopharmacology，2011，133（2）：743-750.

（2016-04-22收稿/編輯陳明偉）

中圖分類號：R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1003-0719（2016）03-0073-04倒地鈴的揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行研究，旨為進(jìn)一步研究與開發(fā)倒地鈴提供科學(xué)依據(jù)。