2014年重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)*

黎七綺,牛司強(qiáng)

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科　400016)

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·論著·

2014年重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)*

黎七綺,牛司強(qiáng)△

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科400016)

摘要:目的了解重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床分離菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性。方法對(duì)該院2014年1～12月收集的臨床分離菌進(jìn)行細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)，結(jié)果按美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)2014年版標(biāo)準(zhǔn)判斷。結(jié)果臨床分離菌共7 740株,其中革蘭陽性菌占29.4%,革蘭陰性菌占70.6%。金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌中甲氧西林耐藥株分別為30.2%和77.2%。葡萄球菌屬中甲氧西林耐藥株對(duì)主要藥物的耐藥率顯著高于甲氧西林敏感株，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素及利奈唑胺耐藥的菌株。腸球菌屬中糞腸球菌對(duì)主要抗菌藥物的耐藥率低于屎腸球菌,屎腸球菌有少數(shù)萬古霉素耐藥株(2.3%)，出現(xiàn)少數(shù)耐利奈唑胺的糞腸球菌(0.9%)。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的陽性分別為59.5%和31.8%。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物仍高度敏感,總耐藥率小于2.0%。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為24.5%和17.9%,鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)兩者的耐藥率分別為71.9%和75.0%。多重耐藥肺炎克雷伯菌和鮑曼不動(dòng)桿菌增加明顯。結(jié)論細(xì)菌耐藥性嚴(yán)重，尤其是多重耐藥菌對(duì)臨床構(gòu)成嚴(yán)重威脅。合理選用抗菌藥物,加強(qiáng)感染控制措施是當(dāng)務(wù)之急。

關(guān)鍵詞:細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)；細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)；多重耐藥菌

近年來，隨著廣譜抗菌藥物大量應(yīng)用于臨床，細(xì)菌的耐藥性越來越嚴(yán)重，已經(jīng)發(fā)展成為公共衛(wèi)生領(lǐng)域的嚴(yán)重問題[1]。準(zhǔn)確掌握細(xì)菌耐藥性及其變遷，對(duì)指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物有重要意義?，F(xiàn)將本院的細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1菌株來源收集2014年1～12月臨床分離株，并去除重復(fù)菌株。

1.2儀器與試劑MH瓊脂、流感嗜血桿菌用的HTM瓊脂、鏈球菌用的血MH瓊脂、鑒定及藥敏試驗(yàn)卡均為法國梅里埃公司產(chǎn)品，抗菌藥物紙片為英國Oxoid公司產(chǎn)品。鑒定藥敏系統(tǒng)使用梅里埃VITEK2-compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀及梅里埃ATB半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)。

1.3細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)采用梅里埃VITEK2-compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀和ATB半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、流感嗜血桿菌ATCC49247、糞腸球菌ATCC29212、金黃色葡萄球菌ATCC29213和肺炎鏈球菌ATCC49619。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理藥敏數(shù)據(jù)參照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)2014年版標(biāo)準(zhǔn)判斷，采用WHONET5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1臨床分離菌株分布共計(jì)收到7 740株臨床非重復(fù)分離株，其中革蘭陰性菌5 465株(70.6%)，革蘭陽性菌2 275株(29.4%)，主要菌種分布見表1(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。18.1%(1 401株)的菌株分離自重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)患者，79.2%(6 129株)的菌株分離自住院非ICU患者，2.7%(210株)的菌株分離自門診和急診患者。7 740株臨床分離菌以痰液(32.2%)、尿液(25.6%)、分泌物(18.3%)為主，無菌體液占6.8%，血液占5.0%、膿占3.7%、組織占1.3%、導(dǎo)管占0.8%、其他占6.3%。

2.2革蘭陰性菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1腸桿菌科細(xì)菌大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的陽性率分別為59.5%和31.8%。對(duì)上述兩種細(xì)菌耐藥率低于20%的藥物有哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、阿米卡星、厄他培南和亞胺培南。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌都已出現(xiàn)少量對(duì)亞胺培南及厄他培南耐藥的菌株。奇異變形桿菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物均敏感，見表2(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。陰溝腸桿菌、黏質(zhì)沙雷菌和弗氏枸櫞酸桿菌耐藥率低于20%的藥物為哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、阿米卡星、厄他培南和亞胺培南。有16株陰溝腸桿菌對(duì)厄他培南和亞胺培南耐藥。有1株弗氏枸櫞酸桿菌對(duì)厄他培南和亞胺培南耐藥。未發(fā)現(xiàn)對(duì)厄他培南和亞胺培南耐藥的黏質(zhì)沙雷菌，見表3(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.2.2非發(fā)酵菌鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥很嚴(yán)重，其除對(duì)米諾環(huán)素耐藥率為13.7%外，對(duì)其他主要抗菌藥物的耐藥率均大于45.0%，其中多重耐藥株占47.0%。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為24.5%和17.9%。嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)主要抗菌藥物左旋氧氟沙星、復(fù)方磺胺甲噁唑及米諾環(huán)素耐藥率低于12.0%。見表4(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.2.3流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌除對(duì)氨芐西林、復(fù)方磺胺甲噁唑和四環(huán)素耐藥率為大于30%以外，對(duì)其他抗菌藥物耐藥率小于12%，見表5(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.3革蘭陽性球菌對(duì)抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1葡萄球菌屬細(xì)菌葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的檢出率分別為30.2%和77.2%。MRSA和MRCNS對(duì)氨基糖苷類、喹諾酮類和大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥率均明顯高于MSSA和MSCNS。除復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率MRCNS高于MRSA外(前者為53.5%，后者為22.1%)，MRSA對(duì)上述抗菌藥物耐藥率均高于MRCNS，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。見表6(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.3.2腸球菌屬細(xì)菌除克林霉素、奎奴普丁/達(dá)福普汀和四環(huán)素外，糞腸球菌對(duì)其他主要抗菌藥物的耐藥率均顯著低于屎腸球菌，糞腸球菌和屎腸球菌對(duì)氨芐西林的耐藥率分別為1.7%和89.5%。糞腸球菌對(duì)萬古霉素全部敏感，但本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)利奈唑胺耐藥菌株(耐藥率為0.9%)。屎腸球菌中出現(xiàn)少數(shù)對(duì)萬古霉素耐藥的菌株(耐藥率為2.3%)，而未發(fā)現(xiàn)對(duì)利奈唑胺耐藥菌株。見表7(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

2.3.3肺炎鏈球菌127株肺炎鏈球菌全部來自非腦脊液標(biāo)本。肺炎鏈球菌對(duì)青霉素耐藥率和敏感率分別是3.2%和76.0%，對(duì)紅霉素、克林霉素和復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率很高，分別是94.6%、86.2%和76.4%。氯霉素、左氧氟沙星和奎奴普丁/達(dá)福普汀較為敏感。未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素耐藥菌株。見表8(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

3討論

2014年本院分離的7 740株非重復(fù)臨床分離株，排在前10位的細(xì)菌依次為大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、表皮葡萄球菌、陰溝腸桿菌菌、屎腸球菌和流感嗜血桿菌，分別占20.5%、10.2%、9.7%、8.6%、7.5%、4.5%、3.7%、3.5%、3.4%和2.8%。分離菌標(biāo)本來源以痰液(32.2%)、尿液(25.6%)和分泌物(18.3%)為主。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs陽性率分別為59.5%和31.8%，與2011年中國CHINET耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)(52.3%和28.8%)相比[2]，大腸埃希菌所占比率較高。陰溝腸桿菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的細(xì)菌占6.0%，較為嚴(yán)重，應(yīng)當(dāng)引起注意。近年來國內(nèi)出現(xiàn)了對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的腸桿菌科細(xì)菌，此種細(xì)菌耐藥的主要機(jī)制是產(chǎn)碳青霉烯酶。碳青霉烯酶可水解碳青霉烯類抗菌藥物。目前，已發(fā)現(xiàn)碳青霉烯酶70多種，可以通過質(zhì)粒和染色體介導(dǎo)，引起耐藥性的傳播[3]。

不發(fā)酵糖的革蘭陰性菌中，鮑曼不動(dòng)桿菌所占比率低于銅綠假單胞菌，并呈現(xiàn)多重耐藥。本研究中鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為71.9%和75.0%，與2011年中國CHINET耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)(60.4%和61.4%)相比較高。鮑曼不動(dòng)桿菌泛耐株占14.2%，低于2011年中國CHINET耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)(21.7%)。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的的耐藥率(24.9% 和17.9%)與2011年中國CHINET耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)(29.1%和25.0%)相比較低。鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥機(jī)制主要是由質(zhì)粒、染色體介導(dǎo)等，包括耐藥酶的產(chǎn)生，藥物作用靶位的改變，藥物“外排泵”的形成，外膜蛋白的減少、缺失或突變，整合子等耐藥基因轉(zhuǎn)移元素的參與等5個(gè)方面[4]。

葡萄球菌屬及腸球菌屬細(xì)菌對(duì)萬古霉素和利奈唑胺依然保持高度敏感。2014年MRSA檢出率為30.2%，比2011年比例(42.6%)低[5]，也低于2011年中國CHINET監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)50.6%，可能與抗菌藥物專項(xiàng)整治活動(dòng)中本院醫(yī)務(wù)工作者注意手衛(wèi)生有關(guān)。本次監(jiān)測(cè)未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌(VRSA)及糞腸球菌。屎腸球菌對(duì)萬古霉素的耐藥率為2.3%，出現(xiàn)的6株萬古霉素耐藥屎腸球菌分布在神經(jīng)內(nèi)科(4株)和呼吸科(2株)。

肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌是社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌[6]。耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)越來越引起關(guān)注，與2011年中國CHINET成人耐藥監(jiān)測(cè)(2.1%)相比，本院的PRSP的分離率較高(3.2%)。肺炎鏈

球菌除對(duì)青霉素耐藥外，對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥率很高，但對(duì)左氧氟沙星和莫西沙星較為敏感。

多重耐藥細(xì)菌的出現(xiàn)和不斷增多已經(jīng)成為臨床面臨的一大挑戰(zhàn)。本研究發(fā)現(xiàn)鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥很嚴(yán)重，銅綠假單胞菌耐藥居高不下，陰溝腸桿菌耐藥快速增加，出現(xiàn)萬古霉素耐藥屎腸球菌，這與牛司強(qiáng)等[7]報(bào)道的重慶市耐藥監(jiān)測(cè)中的數(shù)據(jù)較為一致，這些耐藥菌株都應(yīng)當(dāng)引起臨床醫(yī)生及院感人員的高度重視。

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*基金項(xiàng)目：國家臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目[財(cái)社2010(305)號(hào)]。

作者簡(jiǎn)介：黎七綺，女，護(hù)師，主要從事流行病學(xué)研究。△通訊作者,E-mail:641723950@qq.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.003

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)13-1755-03

(收稿日期：2016-01-05修回日期：2016-03-18)

Bacterial drug resistance surveillance in First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University during 2014*

LIQiqi,NIUSiqiang△

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the resistance of clinically isolated bacteria to commonly used antibacterial drugs in the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University.MethodsThe bacterial susceptibility testing in clinically isolated bacteria collected during January to December 2014 was carried out.The detection results were judged according to the standards by CLSI in 2014.ResultsAmong 7 740 clinical isolated strains of bacteria collected during this period,Gram negative bacteria and Gram positive bacteria accounted for 70.6% and 29.4% respectively.Methicillin resistant(MR) strains in S.aureus and coagulase negative Staphylococcus accounted for 30.2% and 77.2% respectively.The resistance rates of MR strains to main antimicrobial agents were much higher than those of methicillin sensitive(MS) strains.No staphylococcal strain was resistant to vancomycin or linezolid.The resistance rates of E.faecalis strains to main antibacterial agents was much lower than those of E.faecium.Some strains(2.3%) of E.faecium were found resistant to vancomycin,while some strains(0.9%) of E.faecalis were found resistant to linezolid.The ESBLs producing strains were 59.5% in Escherichia coli and 31.8% in Klebsiella pneumoniae.Strains of Enterobacteriaceae were highly susceptible to imipenem and meropenem,the overall resistance rates being less than 2.0%.Resistance rates of P.aeruginosa to imipenem and meropenem were 24.5% and 17.9%,respectively.The resistance rates of A.baumanii to the two carbapenems were 71.9% and 75.0%,respectively.The multi-drug resistant K.pneumoniae and A.baumanii were increased markedly.ConclusionBacterial drug resistance is serious,especially the multi-drug resistant bacteria constitute a serious threat to clinic.Therefore it is urgent to strengthen the infection control measures.

Key words:bacterial resistance surveillance;bacterial drug susceptibility testing;multi-drug resistant bacteria