腦脊液培養(yǎng)常見細(xì)菌及耐藥狀況回顧性調(diào)查研究

魏峰

【摘要】 目的 研究腦脊液培養(yǎng)細(xì)菌的陽性結(jié)果， 并分析其耐藥狀況。方法 選取468份腦脊液標(biāo)本， 對其進行細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定， 并檢測其耐藥狀況， 統(tǒng)計細(xì)菌的陽性結(jié)果與藥敏情況。結(jié)果 468份腦脊液標(biāo)本中， 陽性檢出率為17.7%， 以革蘭陽性菌（65.1%）為主， 其次為革蘭陰性菌（33.7%）、真菌（1.20%）。革蘭陽性菌其對利奈唑烷、萬古霉素的敏感性高， 對頭孢唑啉、氨芐西林則表現(xiàn)為高耐藥性。革蘭陰性菌主要為鮑曼不動桿菌， 對替加環(huán)素、阿米卡星的敏感性較高， 對亞胺培南、頭孢菌素類的耐藥性高。結(jié)論 腦脊液培養(yǎng)菌群中以革蘭陽性菌為主， 常見的為凝固內(nèi)陰性葡萄球菌、革蘭陽性桿菌。監(jiān)測并探討腦脊液常見細(xì)菌及耐藥狀況， 為抗菌藥物的治療以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）感染疾病的預(yù)防做出了積極貢獻。

【關(guān)鍵詞】 中樞神經(jīng)系統(tǒng)；耐藥性；病原菌；細(xì)菌培養(yǎng)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.120

因顱內(nèi)感染發(fā)病迅速且具有高病死率， 顱內(nèi)感染的控制是CNS感染疾病的研究重點。臨床診斷治療顱內(nèi)感染的重要依據(jù)是腦脊液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)以及藥敏試驗， 同時， 也為抗菌藥物的合理使用與規(guī)劃、臨床療效的提高提供了指導(dǎo)性意見[1]。本文回顧性分析了本院采集的468份腦脊液標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果， 監(jiān)測討論腦脊液常見細(xì)菌及耐藥狀況， 取得了較為滿意的結(jié)果， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年2月～2015年5月采集的468份腦脊液標(biāo)本， 其中男252例， 女216例， 年齡1個月～75歲， 平均年齡（45.8±8.9）歲。通過腰椎穿刺方法采取腦脊液標(biāo)本， 送至微生物室進行培養(yǎng)。

1. 2 試劑與儀器 采用由法國生物梅里埃公司提供的全自動微生物鑒定儀（型號為VITEK-2 ）， 以及其配套試劑， 包括GPI、GNI+、GPS-110、GNS-143、YBC鑒定卡與藥敏卡。同時采用全自動培養(yǎng)儀以及配套厭氧瓶與需氧瓶。而培養(yǎng)基、觸酶試劑、氧化酶購自秦皇島正澤公司。

1. 3 方法 無菌采集3～5 ml腦脊液， 并置入培養(yǎng)瓶中， 放入全自動培養(yǎng)儀中恒溫35℃培養(yǎng)24 h， 觀察記錄結(jié)果。當(dāng)儀器警報系統(tǒng)顯示出現(xiàn)陽性瓶時， 用革蘭染色法涂片檢查菌群， 同時接種于血培養(yǎng)基， 在濃度為5%的CO2培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng)， 時間為18～24 h， 若菌群繼續(xù)生長則進行機鑒定與藥敏試驗；當(dāng)儀器警報系統(tǒng)顯示出現(xiàn)陰性瓶時， 接種于血培養(yǎng)基， 在濃度為5%的CO2培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng)， 時間為48 h， 仍為無菌生長， 則報告為無細(xì)菌生長。參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版操作。通過全自動微生物鑒定儀分離所得菌群對其鑒定， 同時進行藥敏試驗， 藥敏試驗結(jié)果以美國臨床與實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）制定的標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。對于同一患者的相同菌種在10 d內(nèi)記為一種， 藥敏試驗不需要重復(fù)。

2 結(jié)果

2. 1 病原菌陽性率與科室分布情況 468份腦脊液標(biāo)本中陽性檢出率為17.7%（83株病原菌）， 其中包括54株革蘭陽性菌（65.1%）， 以凝固內(nèi)陰性葡萄球菌為主， 其次為革蘭陽性桿菌、淺綠氣球菌、草綠色鏈球菌、副血鏈球菌等；28株革蘭陰性菌（33.7%）， 以鮑曼不動桿菌為主， 其次為陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等；1株真菌（1.2%）， 主要為新型隱球菌。病原菌的分布情況如下：分布在神經(jīng)外科（30株， 36.1%）， 其次為外科重癥加強護理病房（ICU）（26株， 31.3%）、內(nèi)科ICU（11株， 13.3%）、神經(jīng)內(nèi)科（10株， 12.0%）、兒科及其他科室（6株， 7.2%）。

2. 2 革蘭陽性菌藥敏率 革蘭陽性菌以凝固酶陰性葡萄球菌為主， 其對利奈唑烷、呋喃妥因以及萬古霉素的敏感性高， 分別為93.6%、85.1%、100.0%， 而對于頭孢唑啉、氨芐西林則表現(xiàn)為100.0%的耐藥性。

2. 3 革蘭陰性菌藥敏率 革蘭陰性菌主要為鮑曼不動桿菌， 其對替加環(huán)素、阿米卡星的敏感性較高， 分別為86.2%、72.5%， 而對于亞胺培南、哌拉西林、慶大霉素、左氧氟沙星、頭孢菌素類的耐藥性在71.4%～100.0%。其他革蘭陰性菌有陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌。陰溝腸桿菌對阿米卡星、頭孢他啶、碳青霉烯類、頭孢吡肟、左旋氧氟沙星、慶大霉素的敏感性較高， 均為100.0%， 而對頭孢唑啉以及氨芐西林的耐藥性達(dá)到了100.0%；大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對阿米卡星、碳青霉烯類、頭孢他啶、頭孢吡肟的敏感性較高， 而對氨芐西林的耐藥性達(dá)到了100.0%。

3 討論

CNS感染疾病因病死率高， 早期診斷治療對患者來說意義重大。腦脊液標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果是否呈陽性是CNS感染的重要診斷依據(jù)。在流行病學(xué)的分布上， 病原菌隨著地區(qū)、機構(gòu)的不同而不同[2]。近年來， 因濫用抗菌素導(dǎo)致病原菌的耐藥性普遍提高， 知曉本地區(qū)病原菌流行病學(xué)特征對臨床合理使用抗生素不可或缺。本次研究結(jié)果顯示， CNS感染的主要病原菌為大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌與凝固內(nèi)陰性葡萄球菌， 表明了分離菌主要是在醫(yī)院通過獲得性感染。在本次研究結(jié)果中， 腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的陽性率低， 但并不代表其感染率低， 可能與其體外培養(yǎng)條件嚴(yán)苛有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示， 病原菌的主要分布場所為神經(jīng)外科， 這可能與此區(qū)患者手術(shù)操作較多， 更容易感染病原菌有關(guān)。外科ICU的病原菌多為耐藥性較強， 可能與此區(qū)患者長期應(yīng)用抗生素治療有關(guān)。革蘭陽性菌中主要的凝固酶陰性葡萄球菌對多種抗生素的耐藥性嚴(yán)重， 應(yīng)在臨床應(yīng)用中控制其使用， 并正確選擇抗生素。而陰性菌中以鮑曼不動桿菌為主， 其次為陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌， 表現(xiàn)為多重耐藥性， 機制復(fù)雜。其中陰溝腸桿菌可產(chǎn)生Ⅰ類頭菌素酶與超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）[3]， 可通過轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)化的方式引起ESBLs類細(xì)菌的泛濫。

綜上所述， 腦脊液培養(yǎng)菌群中以革蘭陽性菌為主， 常見的為凝固內(nèi)陰性葡萄球菌、革蘭陽性桿菌。監(jiān)測并探討腦脊液常見細(xì)菌及耐藥狀況， 為抗菌藥物的治療以及CNS感染疾病的預(yù)防做出了積極貢獻。

參考文獻

[1] 林曉， 黃東煜， 張昕， 等. 2008-2010年住院患者不發(fā)酵糖菌分布及耐藥性分析.國際呼吸雜志， 2013， 33（8）：583-586.

[2] 楊秀芬， 王彥霞， 張征， 等. 2005-2010年我院感染細(xì)菌分布特點及變遷分析.臨床薈萃， 2011， 26（19）：1704-1706.

[3] 安寶清， 王金俠， 唱麗敏. 320株鮑曼不動桿菌的臨床分布及耐藥性分析.臨床薈萃， 2011， 26（17）：1534-1536.

[收稿日期：2015-12-30]