sFas和sFasL在乳腺癌新輔助化療過程中的表達及意義

宋洋，胡燕萍，王銳

(杭州市腫瘤醫(yī)院 外科，浙江 杭州 310000)

sFas和sFasL在乳腺癌新輔助化療過程中的表達及意義

宋洋Δ，胡燕萍，王銳

(杭州市腫瘤醫(yī)院 外科，浙江 杭州 310000)

目的 研究脂肪酸合成酶配體(sFas)和可溶性脂肪酸合成酶受體(sFasL)在乳腺癌新輔助化療過程中的表達及意義。方法 選取2015年1月～2016年1月在杭州市腫瘤醫(yī)院接受新輔助化療的乳腺癌患者84例，為乳腺癌組，取同期84例健康體檢者為對照組，分別檢測2組人員sFas、sFasL陽性率。同時，分別于新輔助化療前后檢測乳腺癌組患者血清sFas和sFasL水平。并根據(jù)臨床療效分為有效組及無效組，對比2組血清sFas、sFasL水平。結果 乳腺癌組sFas和sFasL陽性率分別為58.33%(49/84)和100.00%(84/84)，均顯著高于正常對照組的38.10%(32/84)和0.00%(0/84)；新輔助化療前患者sFas水平顯著低于新輔助化療后；新輔助化療有效組sFas水平顯著高于無效組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 在乳腺癌新輔助化療過程中，通過檢測患者血清sFas水平，可有效對新輔助化療療效進行早期預測，sFasL在乳腺癌新輔助化療過程中無顯著變化。

脂肪酸合成酶配體；可溶性脂肪酸合成酶受體；乳腺癌；新輔助化療

乳腺癌是臨床最為常見的女性腫瘤疾病之一，具有較高的病死率[1]。該病主要是惡性轉(zhuǎn)化乳腺細胞與其間質(zhì)之間多種復雜因素及多環(huán)節(jié)相互作用導致的結果，同時也是伴有局部明顯病灶的系統(tǒng)性疾病[2]。近年來，有研究表明，新輔助化療應用于局晚期可手術乳腺癌患者，可有效提升乳腺癌手術效果。其中尋找一種新的可直接反映治療療效的腫瘤凋亡標志物，可對新輔助化療進行有效監(jiān)測，進一步實時了解患者情況，有利于預后[3]。因此，本文通過選取84例乳腺癌患者，研究sFas和sFasL在乳腺癌新輔助化療過程中的表達及其意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月～2016年1月在杭州市腫瘤醫(yī)院接受新輔助化療的乳腺癌患者84例為乳腺癌組，年齡30～68歲，平均(47.5±3.5)歲；另選取同期84例健康體檢者為對照組，年齡31～70歲，平均(47.3±3.6)歲。2組基本資料比較差異無統(tǒng)計學意義。本研究患者均已簽署知情同意書，經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

乳腺癌組入選標準：患者為Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌患；浸潤性導管癌；體力狀況評分(KPS)>60分；能耐受化療，同時滿足白細胞(WBC)>3 000/mm3；符合前輔助化療適應癥。乳腺癌組排除標準：合并高血壓、糖尿病等慢性疾??；合并血液疾病病史或其他惡性腫瘤患者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：新輔助化療方案：采用多西他賽(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國藥準字：H20084188)75 mg/m2，1次/3 w；蒽環(huán)類藥物：吡柔阿霉素(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國藥準字：H20045983)50 mg/m2，1次/3 w，環(huán)磷酰胺(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國藥準字：H20093092)：600 mg/m2，1次/3 w。共化療6 w。

1.2.2 觀察指標：所有研究對象均取空腹肘靜脈血3 mL，3 000 r/min 離心10 min分離血清，并置于-70 ℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中sFas、sFasL水平，采用Multiskan MK 3板式酶標儀(上海雷博分析儀器有限公司)進行檢測，試劑盒均來自武漢博士德生物有限公司。此外，采用免疫組化法檢測2組患者組織中sFas、sFasL表達，并用抑制陽性結腸癌切片作陽性對照組。比較對照組與乳腺癌組sFas、sFasL陽性率，新輔助化療前后乳腺癌組患者sFas、sFasL水平變化情況。

1.2.3 療效判斷標準[4]：完全緩解(CR)指腫瘤完全消失，包括腋窩淋巴結；部分緩解(PR)指最長的腫瘤直徑減少30%；疾病進展(PD)指最長的腫瘤增長20%或新的腫瘤轉(zhuǎn)移灶的外觀直徑；無變化(NC)指所有情況無變化。其中有效組=CR+PR，無效組=PD+NC。比較治療有效與無效患者的sFas、sFasL水平。

2 結果

2.1 對照組與乳腺癌組sFas、sFasL表達陽性率比較 乳腺癌組sFas、sFasL陽性率均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組sFas、sFasL表達陽性率比較[n(%)]Tab.1 Comparison of sFas, sFasL positive expression rate between two groups[n(%)]

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 新輔助化療前后乳腺癌組sFas、sFasL水平比較 新輔助化療后，乳腺癌組患者sFas水平顯著高于新輔助化療前，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 新輔助化療前后患者sFas、sFasL水平比較Tab.2 Comparison of sFas,sFasL levels before and after neoadjuvant chemotherapy (±s,pg/mL)

*P<0.05，與同組治療前比較，comparedwiththesamegrouppre-treatment

2.3 新輔助化療有效組與無效組患者sFas、sFasL水平比較 新輔助化療有效組sFas水平顯著高于無效組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 新輔助化療有效組和無效組患者sFas、sFasL水平比較Tab.3 Comparison of sFas,sFasL levels before and after neoadjuvant chemotherapy in effective and ineffective group(±s，pg/mL)

*P<0.05，與無效組比較，comparedwithineffectivegroup

3 討論

新輔助化療是主要應用于局部晚期乳腺癌患者的一種新型治療手段，其主要作用機制是通過減少腫瘤的大小和降低腫瘤等級，達到提高腺癌患者手術治療的機會及長期生存率，并可提前了解腫瘤細胞對化療反應的相關信息[5]。反義lncRNA(AntisenseRNA)是一類基因序列與宿主基因mRNA互補，轉(zhuǎn)錄方向與其相反的lncRNA分子[6-8]。FAS-ASl是一個位于Fas基因1號內(nèi)，含子反義鏈上的反義lncRNA，其可在正常人類心臟、胎盤、肝臟、肌肉和胰腺等成體組織中表達，在腎臟中表達量極低，而在腦和肺組織中則不表達。細胞凋亡在腫瘤的發(fā)展中具有關鍵作用，而化療藥物可在一定程度上增加細胞凋亡率及腫瘤細胞的數(shù)量。目前臨床上所使用的抗腫瘤藥物主要是通過對腫瘤細胞的抑制，減少腫瘤生長分離與增殖，同時誘導腫瘤細胞死亡[9]。臨床上常規(guī)評估治療效果手段包括X線、超聲及鉬靶等，但上述檢查方法的陽性表現(xiàn)均出現(xiàn)較晚，無法對化療效果進行早期預測，也難以監(jiān)測腫瘤生物化學變化[10-11]。因此，尋找一種新的預測標志物提前有效提示腫瘤細胞的變化情況，有利于臨床上及時指導化療方案的改變及藥物治療劑量的調(diào)整，進一步避免藥物過度使用情況發(fā)生的不良反應。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組sFas、sFasL陽性率分別均顯著高于對照組，提示sFas、sFasL在乳腺癌患者血清表達異常，可能成為診斷的新指標。Fas/FasL系統(tǒng)會致使腫瘤細胞從免疫系統(tǒng)逃離，而sFas具有抑制Fas與FasL結合誘導的凋亡介導作用，主要機制是通過與FasL或抗Fas抗體進行結合，同時可與膜mFas形成不同組合的異源三聚體，從而使其無法介導細胞凋亡[12]。與此同時，新輔助化療后患者sFas水平顯著高于新輔助化療前，說明新輔助化療會對患者血清sFas水平造成影響，其可作為臨床上評估化療治療效果的指標之一。究其原因，筆者認為sFas在患者體內(nèi)的作用是通過和mFas形成異源三聚體，從而降低mFas表達，或是抑制功能性的mFas同源三聚體形成的方式，進一步減少細胞凋亡，最終導致腫瘤細胞逃離免疫監(jiān)控而出現(xiàn)異常增殖[13]。此外，新輔助化療有效組sFas水平顯著低于無效組，說明在化療過程中患者血清sFas水平會隨之變化，且化療臨床效果越好，sFas水平越高。其中造成sFas水平異常增高的原因主要包括FasmRNA以多種方式進行間接加工后翻譯和蛋白酶作用下脫落產(chǎn)生[14-15]。Sehgal等[16]研究證實在B淋巴細胞瘤中，F(xiàn)AS-ASl可與RBM5結合，與之相互作用，影響Fas基因6號外顯子的轉(zhuǎn)錄，進而抑制sFas表達。B細胞淋巴瘤中FAS-ASlmRNA的低表達與其宿主基因Fas的可溶性受體(sFas)mRNA表達呈負相關[15]。sFas的動態(tài)變化可能與乳腺癌細胞發(fā)生、發(fā)展的病理生理過程有關。通過與臨床病理特征進行相關性分析發(fā)現(xiàn)FAS-ASl的表達和腫瘤組織的大小和淋巴結顯著相關[13]。后續(xù)我們在細胞學水平通過構建過表達質(zhì)粒內(nèi)源性上調(diào)乳腺癌細胞系中FAS-ASl表達水平，檢測其對腫瘤細胞增殖能力的影響，發(fā)現(xiàn)過表達FAS-ASl可以顯著抑制乳腺癌細胞MCF-7的增殖能力，這進一步提示FAS-ASl是一個乳腺癌相關的重要調(diào)控因子。

綜上所述，在乳腺癌新輔助化療過程中，通過檢測患者血清sFas水平，可有效對新輔助化療療效進行早期預測，且血清sFas水平明顯增高意味著新輔助化療療效顯著，反之，血清sFas水平在新輔助化療前后差別不明顯則說明療效較差。

[1] 鄭瑩，吳春曉，張敏璐.乳腺癌在中國的流行狀況和疾病特征[J].中國癌癥雜志，2013，23(8)：561-569.

[2] 孟令新，丁兆軍，孟芹，等.AC聯(lián)合與FAC聯(lián)合在乳腺癌新輔助化療中的療效比較[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)，2016，10(11)：1645-1647.

[3]MitrofanovaI,ZavyalovaM,TeleginaN,etal.Tumor-associatedmacrophagesinhumanbreastcancerparenchymanegativelycorrelatewithlymphaticmetastasisafterneoadjuvantchemotherapy[J].Immunobiology,2016,2985(16)：30342-30344.

[4]CadooKA,TrainaTA,KingTA．Advancesinmolecularandclinicalsubtypingofbreastcancerandtheirimplicationsfortherapy[J].SurgicalOncologyClinicsofNorthAmerica,2013,1(22):823-840.

[5]RedanaS,SharpA,LoteH,etal.Ratesofmajorcomplicationsduringneoadjuvantandadjuvantchemotherapyforearlybreastcancer:Anoffstudypopulation[J].Breast,2016,30(1):13-18.

[6]LiangJC，BloomRJ．SmolkeCD．EngineeringbiologicalsystemswithsyntheticITtamolecules[J]．MolCell,2011,43(6):915-926.

[7]MercerTR,MattickJS,Structureandfunctionoflongnoncodingmilsinepigeneticregulation[J]．NatStructMolBiol,2013,20 (3):300-307.

[8]LiJT,WangLF,ZhaoYL,eta1．Nuclearfactorofactivatedtcells5maintainedbyhotairsuppressionofmir-568upregulatess100calciumbindingproteina4topromotebreastcancermetastasis[J]．BreastCancerRes,2014，16(5)：454.

[9] 楊曉婧，王法，娜迪熱·鐵列吾汗，等.超聲造影在乳腺癌新輔助化療療效評價中的價值[J].中華實用診斷與治療雜志，2016，30(4)：396-398.

[10] 朱坤兵，徐燦，李曉霞，等.乳腺癌分子分型與新輔助化療效果的關系[J].中華乳腺病雜志(電子版)，2016，10(3)：166-169.

[11]MaX,WangX,HuangJ,etal.BevacizumabadditioninneoadjuvanttreatmentincreasesthepathologicalcompleteresponseratesinpatientswithHER-2negativebreastcancerespeciallytriplenegativebreastcancer:AMeta-Analysis[J].PLoSOne,2016,11(8):148-149.

[12] 周豐，周光華，陳璇，等.Fas基因啟動子區(qū)多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病風險的相關性研究[J].湖南師范大學學報(醫(yī)學版)，2015，12(2)：4-7.

[13] 任憑，李煥斌，張琦，等.89Sr照射對乳腺癌MCF-7細胞分泌sFas、sFasL的影響[J].山東醫(yī)藥，2013，53(33)：15-16.

[14] 謝國強，肖華龍，邵耀明，等.乳腺癌患者手術前后血清IL-2、MMP-9、TK1和sFas測定的臨床價值[J].放射免疫學雜志，2013，26(4)：396-399.

[15] 周樹偉，蘇蓓蓓，周勇，等.FAS-AS1在乳腺癌組織中的表達及其對宿主基因sFas表達的影響[J].中華醫(yī)學雜志，2016，96(12)：949-953.

[16]SehgalL,MathurR,BraunFK,eta1．Fas—antisense1lncmaandproductionofsolubleversusmembranefasinb-celllymphoma[J].Leukemia,2014，28(12):2376-2387.

(編校：苗加會)

The significance of sFas and sFasL expression on neoadjuvant chemotherapy of breast cancer

SONG YangΔ, HU Yan-ping, WANG Rui

(Department of Surgery, Zhejiang Cancer Hospital, Hangzhou 310000, China)

ObjectiveTo study the expression and significance of fatty acid synthase ligand (sFas) and soluble fatty acid synthase receptor (sFasL) on the neoadjuvant chemotherapy of breast cancer.Methods84 cases of patients with breast cancer neoadjuvant chemotherapy were recorded from January 2015 to January 2016 in our hospital as breast cancer group,another 84 cases of healthy subjects as control group,the two groups were measured sFas,the positive rate of sFasL.At the same time,respectively before and after neoadjuvant chemotherapy, detection of patients serum sFas, sFasL levels and breast cancer.According to the clinical curative effect were divided into effective group and ineffective group, compared two groups of serum sFas, sFasL levels.ResultsBreast cancer group called sFas and sFasL positive rate was 58.33% (49/84) and 100.00%(84/84),were significantly higher than that of control group 38.10%(32/84) and 0.00% (0/84);The level of sFas in patients with neoadjuvant chemotherapy was significantly lower than that of neoadjuvant chemotherapy, and the level of sFas in neoadjuvant chemotherapy group was significantly higher than that in ineffective group, the difference was statistically significant (P<0.05).ConclusionIn the course of neoadjuvant chemotherapy for breast cancer,the efficacy of neoadjuvant chemotherapy can be effectively detected by detecting the level of serum sFas in patients with breast cancer, while sFasL has no significant change in the neoadjuvant chemotherapy of breast cancer.

fatty acid synthase ligand; soluble fatty acid synthase receptor;breast cancer;neoadjuvant chemotherapy

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.12.053

宋洋，通信作者，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：甲狀腺及肝膽胃腸外科，E-mail：yezhuxials@163.com。

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