湖南省湘西州部分規(guī)模場(chǎng)牦牛流產(chǎn)衣原體流行情況及風(fēng)險(xiǎn)因素調(diào)查

湯國(guó)祥，李　暉（. 湖南省益陽(yáng)市赫山區(qū)畜禽良種繁育場(chǎng)，湖南益陽(yáng)　4003；. 湘西民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南吉首　46000）

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湖南省湘西州部分規(guī)模場(chǎng)牦牛流產(chǎn)衣原體流行情況及風(fēng)險(xiǎn)因素調(diào)查

湯國(guó)祥1，李暉2
（1. 湖南省益陽(yáng)市赫山區(qū)畜禽良種繁育場(chǎng)，湖南益陽(yáng)410013；2. 湘西民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南吉首416000）

摘要：本研究旨在查明湖南省湘西州牦牛流產(chǎn)衣原體感染情況并探討其可能的風(fēng)險(xiǎn)因素。應(yīng)用間接血凝試驗(yàn)（IHA）方法檢測(cè)了該地區(qū)的825份牦牛血清，并應(yīng)用流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)牦牛衣原體風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行了評(píng)估分析。結(jié)果顯示，牦牛流產(chǎn)衣原體抗體陽(yáng)性率為17.2%，季節(jié)和性別是牦牛流產(chǎn)衣原體感染的主要風(fēng)險(xiǎn)因素（P＜0.05）。本研究表明湖南省湘西州牦牛流產(chǎn)衣原體感染率較高，應(yīng)當(dāng)對(duì)本地區(qū)的流產(chǎn)衣原體病采取適當(dāng)?shù)目刂拼胧?，以確保人類和動(dòng)物的健康安全。

關(guān)鍵詞：衣原體；流行病學(xué)；牦牛；風(fēng)險(xiǎn)因素；評(píng)估

衣原體（Chlamydiae）為革蘭氏陰性病原體，是一類能通過(guò)細(xì)菌濾器、在細(xì)胞內(nèi)寄生、有獨(dú)特發(fā)育周期的原核細(xì)胞性微生物。其在自然界中分布廣泛，可感染人類和多種動(dòng)物［1］。感染人類的衣原體有許多種，比如沙眼衣原體（Chlamydia trachomatis）、肺炎衣原體（C. pneumoniae）和鸚鵡熱衣原體（C. psittaci），常常引起重大的公共衛(wèi)生問題［2］。馬、牛、羊、豬等哺乳動(dòng)物以及家禽、野禽等禽類均能感染衣原體，引發(fā)多種疾病。近年來(lái)，家畜衣原體的感染在我國(guó)養(yǎng)殖場(chǎng)十分普遍，可引起母畜流產(chǎn)和產(chǎn)死胎等多種疾患，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失［3-6］。

我國(guó)是一個(gè)牦牛養(yǎng)殖大國(guó)，牦?？倲?shù)約占世界總數(shù)的90%［7-8］。感染牦牛的衣原體有三種：流產(chǎn)嗜性衣原體（C. abortus）、鸚鵡熱衣原體（C. psittaci）和反芻動(dòng)物衣原體（C. pecorum）［9］。感染衣原體的牦牛可發(fā)生流產(chǎn)和繁殖障礙，也可發(fā)生肺炎、鼻炎、結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎、尿道炎等癥狀［1，9-11］。許多研究表明，印度和我國(guó)青海地區(qū)牦牛衣原體感染較為嚴(yán)重［12-15］，然而未見對(duì)湖南省牦牛衣原體感染情況調(diào)查的報(bào)道。湘西州位于湖南省西部，是湖南省牦牛的主要產(chǎn)區(qū)之一。本研究在湖南省湘西州的8個(gè)規(guī)模牦牛場(chǎng)進(jìn)行抽樣調(diào)查，估計(jì)牦牛衣原體的個(gè)體流行率，并對(duì)個(gè)體感染的風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行了分析，以期為更好地防治該病提供依據(jù)。

1　材料和方法

1.1牦牛血清樣品

在2015年春季（n=181）、夏季（n=228）、秋季（n=185）、冬季（n=231）采集湖南省湘西州牦牛血清共825份。每頭牦牛采血10 mL。血清樣品經(jīng)4 000×g離心10 min后轉(zhuǎn)移到新的離心管中，存放于-20 ℃待用。牦牛的性別、年齡信息在詢問畜主后做了詳細(xì)記錄。采樣范圍為湘西州7個(gè)縣（瀘溪、鳳凰、花垣、保靖、古丈、永順、龍山）的8個(gè)規(guī)?；笈?chǎng)，養(yǎng)殖規(guī)模都在500～1 500頭之間。按照1/10的比例隨機(jī)采樣（每場(chǎng)50～150份）。采樣前，對(duì)每頭牦牛都進(jìn)行臨床檢查，以確保牦牛處于健康狀態(tài)。

1.2間接血凝試驗(yàn)（IHA）檢測(cè)抗體

衣原體IHA抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清、稀釋液，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所。按中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所提供的檢測(cè)方法和先前的文獻(xiàn)描述進(jìn)行試驗(yàn)［16-17］。首先在反應(yīng)板中每孔滴加0.075 mL血清用以鋪板，然后取0.025 mL樣品滴加于第一孔，再以4倍遞呈稀釋3孔。最后一孔棄去0.025 mL。加0.025 mL抗原于各孔后，將反應(yīng)板蓋玻璃板后置微型振蕩器振蕩2 min，于37 ℃下作用2 h后判定結(jié)果。每板設(shè)陰、陽(yáng)性及空白對(duì)照各兩孔。被檢血清1：16稀釋孔內(nèi)呈現(xiàn)“澄清”以上凝集者判為陽(yáng)性。若有可疑孔，則需復(fù)檢。

1.3數(shù)據(jù)分析

對(duì)所有數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件PASW Statistics 18.0 （SPSS Inc、IBM Corporation、Somers、NY）進(jìn)行分析。采用二元logistic回歸分析，研究性別、年齡和季節(jié)三個(gè)與衣原體感染有關(guān)的潛在影響因素，當(dāng)P＜0.05時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在二元logistic回歸模型中，使用向前條件方法進(jìn)行分析，結(jié)果年齡因素在二元logistic回歸分析中沒有顯著差異（P＞0.05）而被剔除出方程。

2　結(jié)果

在本次檢測(cè)的825份牦牛血清樣品中，流產(chǎn)衣原體抗體陽(yáng)性有142份，陽(yáng)性率為17.2%。其中母牦牛感染率為19.3%，高于公牦牛感染率（14.6%）。不同的季節(jié)分組中，夏季的陽(yáng)性率最高（24.5%），其次為春季（20.6%）和秋季（12.6%），冬季的陽(yáng)性率最低（11.4%）。不同年齡分組的衣原體陽(yáng)性率在9.2%～24.5%之間，其中y≥3的分組陽(yáng)性率最高（表1）。

表1　湖南省湘西州牦牛衣原體感染的血清陽(yáng)性率（IHA）

雌性牦牛感染流產(chǎn)衣原體的風(fēng)險(xiǎn)約是雄性牦牛的2.5倍（OR = 2.55，P＜0.01）。牦牛在秋季感染流產(chǎn)衣原體的風(fēng)險(xiǎn)約是冬季的1.5倍（OR = 1.57，P＜0.01），而夏季感染的風(fēng)險(xiǎn)約是冬季的8.7倍（OR = 8.76，P = 0）。冬季感染的風(fēng)險(xiǎn)與秋季感染風(fēng)險(xiǎn)沒有顯著差異（P＞0.05）（表2）。性別和季節(jié)是影響牦牛流產(chǎn)衣原體感染的兩個(gè)重要風(fēng)險(xiǎn)因素。

表2　牦牛衣原體感染風(fēng)險(xiǎn)因素（性別和季節(jié)）的優(yōu)勢(shì)比

3　討論

IHA因其在靈敏度方面強(qiáng)于CFT，而價(jià)格又比ELISA便宜，成為現(xiàn)在衣原體檢測(cè)的最佳選擇［13］。因此，本研究選擇IHA法對(duì)湖南省湘西州牦牛流產(chǎn)衣原體感染情況進(jìn)行研究。本研究表明，湖南省湘西州牦牛流產(chǎn)衣原體的總感染率為17.2%，與青海省的調(diào)查結(jié)果（17.66%陽(yáng)性率）基本一致，而此前青海省其他地區(qū)的牦牛衣原體感染陽(yáng)性率在0.75%～27.7%之間［14-15］。

性別因素是牦牛感染流產(chǎn)衣原體的主要風(fēng)險(xiǎn)因素，其原因可能與牧場(chǎng)內(nèi)牦牛性別結(jié)構(gòu)有關(guān)。牦牛的飼養(yǎng)較為粗放，多采用自由交配，一般牧場(chǎng)內(nèi)的母牦牛的數(shù)量多而公牦牛的數(shù)量少，加之衣原體可以通過(guò)交配感染［13］，因此一頭感染的公牦牛可以導(dǎo)致較多的母牦牛感染此病。但是，此前的報(bào)道則認(rèn)為性別因素不是牦牛感染衣原體的風(fēng)險(xiǎn)因素［12-13］，其原因仍需進(jìn)一步探究。

動(dòng)物和人類都可通過(guò)直接接觸帶有病原的排泄物，如陰道分泌物、尿液和糞便等感染衣原體［18］。牦牛吸入或者攝取了被污染了的物質(zhì)也可以發(fā)生感染［13］。

衣原體在5～10 ℃的低溫干燥的環(huán)境下可以存活長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月，而在室溫下則可以存活10～15天［19］。牦牛是放牧動(dòng)物，在草原上采食的同時(shí)也將糞便排泄在了草場(chǎng)上，帶有衣原體病原的糞便可以污染草場(chǎng)。春末和夏季，草場(chǎng)茂盛，牦牛的采食量和采食范圍加大，同時(shí)其感染衣原體的機(jī)會(huì)也在增加，所以春季和夏季牦牛感染衣原體的陽(yáng)性率也相對(duì)較高。本次調(diào)查結(jié)果與Chen等［13］調(diào)查結(jié)果基本一致。

本研究調(diào)查結(jié)果顯示，牦牛在各年齡段均可感染衣原體，陽(yáng)性率在9.36%～25.08%之間。陽(yáng)性率最高的為年齡大于3歲的分組，而陽(yáng)性率最低的則發(fā)生在年齡小于1歲的分組。這可能是因?yàn)殡S著牦牛年齡的增加，接觸病原的機(jī)會(huì)隨之增加而造成的。雖然各年齡分組的陽(yáng)性率有變化，但是差異不明顯（P＞0.05），這與先前的Chen等［13］的結(jié)果一致。

人獸共患病的流產(chǎn)衣原體在湖南省湘西州已經(jīng)相當(dāng)普遍，可能還將長(zhǎng)期存在。因此，有必要深入研究牦牛流產(chǎn)衣原體的分子流行病學(xué)特點(diǎn)和致病機(jī)理，定期監(jiān)測(cè)牦牛群流產(chǎn)衣原體抗體變化。這對(duì)于保障公共衛(wèi)生安全，有效預(yù)防和控制豬流產(chǎn)衣原體病有極其重要的意義。

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（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

Research of Sero-prevalence and Risk factors of Chlamydophilaabortus Infection in Some Scaled Yak Breeding Farms in Xiangxi Autonomous Prefecture of Hunan Province

Tang Guoxiang1，Li Hui2
（1. Livestock and Poultry Breeding of Farm Heshan District，Yiyang，Hunan 410013；2.Xiangxi Vocational and Technical College for Nationalities，Jishou，Hunan 416000）

Abstract：The sero-prevalence of Chlamydophilaabortus infection in yaks was investigated in some scaled breeding farms of Hunan province from January 2015 to January 2016. A total of 812 animal serum samples were collected from Xiangxi autonomous prefecture of Hunan province. All the serum samples were evaluated by indirect hemagglutination test（IHA）. The overall sero-prevalence of C.abortus was estimated at 17.2%. The risk factors associated with seroprevalence were determined by multivariate logistic regression analysis. Season and gender of yaks were considered as main risk factors associated with C.abortus infection（P＜0.05）. The results revealed a widespread and high prevalence of C.abortus infection in yaks in Hunan province. The suggestions of taking control measures of zoonotic C.abortus infection were put forward ，in order to ensure the safety of human and animal health.

Key words：seroprevalence；Chlamydial；yaks；risk factors；evaluation

中圖分類號(hào)：S851.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1005-944X（2016）06-0001-04

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.06.001

基金項(xiàng)目：湖南省科技廳一般項(xiàng)目（2011NK3085）