冀產遠志與卵葉遠志的含量測定研究

王永艷

河北省邯鄲市第一醫(yī)院藥劑科，河北邯鄲　056002

冀產遠志與卵葉遠志的含量測定研究

王永艷

河北省邯鄲市第一醫(yī)院藥劑科，河北邯鄲056002

目的探討冀產遠志與卵葉遠志的種間差異，以指導臨床合理用藥。方法采用高效液相色譜法測定冀產遠志與卵葉遠志在不同采集期、不同用藥部位中有效活性成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮?。 色譜柱為Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測波長為230 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫30℃。結果各組分分離度良好，遠志口山酮Ⅲ在0.46003～4.6003 mg/mL濃度范圍內與峰面積線性關系良好（r=0.999）；3，6二芥子?；崽窃?.41587～4.15872 mg/mL濃度范圍內與峰面積線性關系良好（r= 0.999），平均回收率分別為98.10%（RSD=1.80%）和98.13%（RSD=1.63%），7批樣品中遠志山酮Ⅲ的含量分別為0.113、0.078、0.121、0.105、0.082、0.054、-0.003 g/g，3，6二芥子?；崽堑暮繛?.665、0.392、0.390、0.453、0.394、0.586、0.411 g/g。結論該方法簡便、快速，為冀產遠志的品種開發(fā)提供科學數(shù)據(jù)。

遠志；卵葉遠志；含量測定；高效液相色譜法

［Abstract］Objective To discuss the difference between Polygala tenuifolia Wi11d.and Polygala sibirica L.for guiding c1inica1 rationa1 drug use.Methods Effective active ingredient Po1yga1axanthone and 3，6'-Disinapoy1sucrose content of different co11ection period and parts of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d and Po1yga1a sibirica L were measured by HPLC method.The determination was performed on Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）co1umn with methano1-0.05%phosphate acid（70∶30）as mobi1e phase at detection wave1ength of 230 nm，the f1ow rate was 1.0 mL/min，the co1umn temperature was set at 30℃.Results The components were separated comp1ete1y.The good 1inear re1ationship of Po1yga1axanthoneⅢoccurred in the range of 0.460 03～4.6003 mg/mL（r=0.999），the good 1inear re1ationship of 3，6'-Disinapoy1sucrose in the range of 0.415 87～4.158 72 mg/mL（r=0.999）.The average recoveries were 98.10%（RSD=1.80%）and 98.13%（RSD=1.63%）.In the 7 groups，the content of Po1yga1axanthoneⅢwas 0.113，0.078，0.121，0.105，0.082，0.054，-0.003 g/g，3，6'-Disinapoy1sucrose was 0.665，0.392，0.390，0.453，0.394，0.586，0.411 g/g.Conclusion The method is simp1e and quick，which can be used for rationa1 deve1opment of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d.

［Key words］Polygala tenuifolia Wi11d.；Polygala sibirica L.；Content determination；HPLC method

遠志為遠志科植物遠志（Polygala tenuifolia Wi11d.）或卵葉遠志（Polygala sibirica L.）的干燥根。春秋兩季采挖。性苦、辛、溫，歸心、腎、肺經。有益智安神、交通心腎、消腫祛痰的功效［1］。臨床用于抗焦慮、鎮(zhèn)靜催眠，祛痰鎮(zhèn)咳、抗衰老、抗抑郁、消腫利尿等［2-7］?！吨袊幍洹?015年版一部的標準中沒有區(qū)分遠志與卵葉遠志的種間區(qū)別，有關藥用遠志的研究主要集中在細葉遠志的化學成分、含量測定、藥理作用、制劑質量控制、栽培技術等方面［8-15］。

近年來，卵葉遠志的研究也逐漸展開，滕紅梅等［16］對卵葉遠志的生藥學研究，宋月林等［17-18］對卵葉遠志的地上部分進行了化學成分研究，周雨虹等［19］對卵葉遠志根的化學成分研究，卵葉遠志的含量測定僅限于遠志皂苷成分［20］等。遠志與卵葉遠志的對比研究還有待開展，本研究針對冀產遠志與卵葉遠志中有效成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子酰基蔗糖的含量進行比對研究，比較兩種間的差別，為開發(fā)冀產遠志資源提供技術參考。

1　儀器與材料

GC2010AT高效液相色譜儀（日本島津），Labso1ution工作站，紫外檢測器，AUW120D型電子天平（日本島津）。甲醇、磷酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水，遠志山酮Ⅲ對照品（中國食品藥品檢定研究院；批號：116050-201203）；3，6二芥子?；崽菍φ掌罚ㄖ袊称匪幤窓z定研究院；批號：11848-201303）；6批藥材均由邯鄲市藥品檢驗中心孔增科主任藥師鑒定（產地：涉縣固鎮(zhèn)、涉縣九峰山、涉縣固鎮(zhèn)、武安、涉縣九峰山、涉縣小井）。

2　方法與結果

2.1色譜條件及系統(tǒng)性試驗

色譜柱：Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為固定相，流動相：甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測波長為320 nm，柱溫為室溫，進樣量為10 μL。在以上色譜條件下，各組分分離度良好。見圖1。

圖1　HPLC色譜圖

2.2對照品溶液的制備

精密稱取遠志山酮Ⅲ對照品12.03 mg與3，6二芥子酰基蔗糖對照品10.83 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.3供試品溶液的制備

取樣品遠志（卵葉遠志）細粉（過四號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入70%甲醇25 mL，精密稱定，加熱回流1.5 h，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。

2.4線性關系的考察

取對照品溶液，分別精密量取1、2.5、5、10 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別進樣10 μL于高效液相色譜儀中，按上述色譜條件進行峰面積測定，以質量濃度X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，進行線性回歸，遠志山酮Ⅲ回歸方程：Y= 2×106X+137 647，r=0.999，結果表明遠志山酮Ⅲ質量濃度在0.460 03～4.6003 mg/mL范圍內呈良好線性關系；3，6二芥子酰基蔗糖回歸方程：Y=2×106X+ 106 030，r=0.999，結果表明，3，6二芥子酰基蔗糖質量濃度在0.415 87～4.158 72 mg/mL范圍內呈良好線性關系。

2.5精密度試驗

精密吸取混合對照品溶液 10 μL，連續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑腞SD分別為0.37%、0.41%，結果表明儀器精密度良好。

2.6重復性試驗

按“2.2.3”項下方法平行制備5份供試品溶液按“2.2.1”項下色譜條件進行測定，測得遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%，表明重復性良好。

2.7穩(wěn)定性試驗

取供試品溶液10 μL，分別在0、2、4、6、8、12 h進樣，共測定6次，其RSD=1.5%，表明該溶液12 h內基本穩(wěn)定。

2.8加樣回收率試驗

取已知含量的供試品細粉（遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%）約0.5 g，精密稱定6份，再分別精密加混合對照品儲備液1 mL，按“2.2.3”項下供試品溶液的制備方法，進樣測定，遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽?，平均回收率為98.10%、98.13%，RSD分別為1.80%、1.63%。結果見表1。

表1 回收率測定結果

2.9樣品含量測定

取樣品，按上述供試品溶液制備方法制備，精密量取供試品溶液和對照品溶液10 μL，注入液相色譜儀測定。結果見表2。

表2　樣品測定結果（n=6）

3　討論

通過采用液相色譜法對遠志和卵葉遠志的不同采摘期及不同部位中有效活性成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子酰基蔗糖的含量進行比對研究發(fā)現(xiàn)，冀產卵葉遠志根中兩種成分的含量高于與冀產遠志根，建議可將卵葉遠志作為遠志的開發(fā)品種之一；地上部分（遠志小草）幾乎不含遠志山酮Ⅲ，3，6二芥子?；崽堑暮窟€較高，并且二者根中兩種成分的含量均高于其全草，說明這與傳統(tǒng)習慣把根作為主要藥用部位是一致的；二者3，6二芥子酰基蔗糖的含量遠大于遠志山酮Ⅲ，且秋季采摘的3，6二芥子?；崽呛扛哂诖杭荆h志山酮Ⅲ含量春季采摘的大大高于秋季，原因北方日照時間長，陽光充足，糖分含量高，酮成分含量較低，可根據(jù)藥理作用選擇合理的采摘期。

經方法學考證，該方法簡便快捷、準確，通過測定兩種成分的含量指標，可用于有效區(qū)別冀產遠志及卵葉遠志的種間差異，為冀產遠志的品種開發(fā)提供科學依據(jù)。

［1］國家藥典委員會.中國藥典2015年［S］.一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：156-157.

［2］馬驍，王建，黃聰，等.厚樸炙遠志炮制品的安神和祛痰作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2013，29（1）：90-93.

［3］張耀春，王立為.遠志提取物對小鼠學習記憶的影響［J］.中國新藥雜志，2015，15（15）：1254-1257.

［4］閆明，李萍.抗衰老作用研究［J］.實用藥物與臨床，2006，9（1）：22-23.

［5］黃曉舞，謝婷婷，王東曉，等.遠志醇提物的抗抑郁作用［J］.中國藥物應用與監(jiān)測，2007，4：22-25

［6］馬洪偉，付文亮，鐘美蓉，等.遠志藥理活性研究進展［J］.承德醫(yī)學院學報，2010，27（2）：196-198.

［7］劉大偉，康麗平，馬百平.遠志化學及藥理作用研究進展［J］.國際藥學研究雜志，2012，39（1）：32-36.

［8］姜艷艷，段以以，劉洋，等.遠志化學成分分離與結構鑒定［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，2011，34（2）：122-125.

［9］宋月林，姜勇，畢丹，等.卵葉遠志地上部分正丁醇萃取物的化學成分研究［J］.中國中藥雜志，2012，37（4）：471-474.

［10］趙建國，曲偉紅.遠志化學成分分析方法研究進展［J］.時珍國醫(yī)國藥，2009，20（12）：3114-3115.

［11］裴瑾，萬德光，楊林.苯酚硫酸比色法測定遠志及地上部分多糖的含量［J］.華西藥學雜志，2005，20（4）：337-339.

［12］曲偉紅，趙建國.現(xiàn)代分析方法在遠志及其制劑質量控制中的應用［J］.九江醫(yī)學，2009，24（2）：83-85.

［13］馮向東，高光偉，黃海欣.遠志炮制前后質量變化的比較研究［J］.中藥材，2008，31（6）：818-820.

［14］傅晶，張東明，陳若蕓.遠志屬植物的皂苷類成分及其藥理作用研究進展［J］.中草藥，2006，37（1）：144-146.

［15］劉漢珍，張樹杰.遠志的人工栽培技術［J］.世界中西醫(yī)結合雜志，2010，5（11），995-996.

［16］滕紅梅，李金亭，胡正海.遠志根的發(fā)育解剖學研究［J］.西北植物學報，2008，28（1）：90-96.

［17］宋月林，姜勇，周思祥.卵葉遠志地上部分酮類成分研究［J］.中國中藥雜志，2009，34（5）：574-576.

［18］宋月林，姜勇，周思祥.卵葉遠志地上部分化學成分研究［J］.中草藥，2010，41（1）：27-29.

［19］Zhou YH，Jang Y，Wei J，et a1.Chemica1 constituents from the roots of Po1yga1a Sibirica L［J］.Joura1 of Chinese Pharmaceutica1 Sciences，2008，17：148-152.

［20］劉友平，萬德光，劉濤，等.分光光度法測定不同產地遠志總皂甙的含量［J］.成都中醫(yī)藥大學學報，2000，23（2）46-47.

Determination research of Polygala tenuifolia Willd.and Polygala sibirica L.

WANG Yongyan
Department of Pharmacy，the First Hospita1 of Handan，Hebei Province，Handan056002，China

R927.2

A

1673-7210（2016）04（c）-0132-04

河北省中醫(yī)藥管理局科研計劃項目（2010184）。

王永艷（1974-），女，碩士，副主任藥師；研究方向：藥物的臨床應用及藥物分析。

2016-01-22本文編輯：趙魯楓）