高效液相色譜法測定食品中10種合成著色劑的含量

□ 高 云 廣東省食品檢驗所

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高效液相色譜法測定食品中10種合成著色劑的含量

□ 高 云 廣東省食品檢驗所

本文建立了一種使用高效液相色譜儀檢測10種合成著色劑的方法。前處理使用乙醇和氨水的提取液，樣品處理時間極大縮短。利用C18色譜柱，使用高效液相色譜紫外檢測器進行檢測，10種合成著色劑色譜分為兩個波長段480 nm和629 nm，實現(xiàn)10種目標物完全分離。方法簡便，具有較高的準確度和靈敏度。

著色劑又被稱為食品色素，以食品著色為主要目的，是賦予和改善食品色澤的物質(zhì)?？墒怯行┎涣忌a(chǎn)企業(yè)違禁添加著色劑，長期食用此類產(chǎn)品將嚴重危害人體健康。尤其近幾年發(fā)生的染色饅頭、染色魚的食品事故，更讓消費者產(chǎn)生擔憂。

為了保障消費者安全，維護我國食品行業(yè)健康發(fā)展，本文研究了食品中10種合成著色劑的檢測方法，更加簡便、快速、易操作，為相關人員快速準確檢測著色劑提供了參考。

實驗條件

儀器

本實驗使用島津高效液相色譜儀LC- 20AT。具體配置為在線脫氣機，SIL-20A自動進樣器，CTO-20A柱溫箱，CBM-20A系統(tǒng)控制器，LabSolutions Ver.5.53色譜工作站。

表1 梯度洗脫時間程序

分析條件

1 液相色譜條件

色譜柱流動相：A-0.02 mol/L乙酸銨；B-甲醇

流速：1.0 mL/min

進樣體積：10 μL

柱溫：40℃

洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為10%，時間程序見表1。

樣品制備

標準溶液制備：用超純水將標準儲備液稀釋成1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL不同濃度的10種混合合成著色劑標準曲線工作液。

樣品前處理方法：取5 g食品，加入提取液（乙醇+氨水）30 mL，超聲30 min后，過濾到雞心瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用超純水定容到5 mL，0.45 μm濾膜過濾后，上機待測。

實驗結(jié)果

標準樣品色譜圖

10種混合著色劑色譜圖分為兩個波長段480 nm和629 nm，如圖1和圖2所示，每個標準物質(zhì)的分離時間為1 min以上，分離程度較好。

線性關系

將6個不同濃度的標準工作液（包括空白標準工作液），在上文分析條件下進行監(jiān)測分析，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，外標法制作校準曲線，線性回歸方程為Y=8.48 7259e- 005X-5.335223e- 002，線性范圍為1～50 μg/mL，相關系數(shù)r=0.9999832，各標準物質(zhì)的線性關系良好。

檢出限和定量限

1 μg/mL的10種混合標準品色譜圖如圖1和圖2所示，根據(jù)ASTM計算信噪比，信噪比、儀器檢出限和定量限如表3所示，都滿足實驗要求。

重現(xiàn)性實驗

取三個不同濃度標準工作液1 μ g/ mL、5 μg/mL、10 μg/mL，分別平行進樣6次，目標化合物的保留時間和峰面積的相對標準偏差分別為0.04%～0.12% 和0.06%～0.88%，檢測方法重現(xiàn)性良好。

基質(zhì)加標實驗

按照上文樣品制備方法，在空白食品樣品中加入標樣，加標含量為5 μg/mL。10種混合著色劑的加標回收率為87.6%～92.4%。

圖1 混合樣品色譜圖波長

圖2 混合樣品色譜圖波長

表2 信噪比與檢出限和定量限關系

實驗總結(jié)和討論

本方法參考《GB/T5009.35-2003》，以乙醇和氨水作為提取液進行簡單提取，極大縮短了前處理時間，而且重現(xiàn)性和穩(wěn)定性都滿足實驗要求，可用于食品中合成著色劑的測定。